微生物免疫學(xué)實驗報告

1、WORD格式授課進(jìn)度第周，第次課2 學(xué)時授課日期年月日授課題目(教學(xué)章、 節(jié)細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查一或主題 )專業(yè)資料整理WORD格式教學(xué)目標(biāo)教學(xué)重點教學(xué)難點教學(xué)方法教學(xué)手段討論、思考題、作業(yè)學(xué)會顯微鏡的使用，重點掌握油鏡的使用與保護。進(jìn)一步認(rèn)識細(xì)菌的形態(tài)，明確細(xì)菌的大小與測量單位。熟悉細(xì)菌的特殊構(gòu)造。油鏡的觀察和使用油鏡的觀察和使用請選擇你授課時所采用的教學(xué)方法在括號中畫“：講授法，討論法，演示法，案例法，發(fā)現(xiàn)法，探究法，談話法，實驗法 ，參觀法，考察法，自學(xué)輔導(dǎo)法，練習(xí)法習(xí)題或操作課，讀書指導(dǎo)法，聽說法，寫生法，視唱法，工序法技能課，實習(xí)作業(yè)法，其他請選擇你授課時所采用的教學(xué)手段在括號中畫“：實

2、物，多媒體， 投影，影像， CAI 課件， PPT，標(biāo)本，掛圖，模型，其他實驗報告專業(yè)資料整理WORD格式參考(1) 楊致邦，葉彬 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗【M】 . .科學(xué) .2021年 .(2) 潘麗紅 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗及學(xué)習(xí)指導(dǎo)【M 】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)，文獻(xiàn)2021年 .專業(yè)資料整理WORD格式1 實驗內(nèi)容：2 顯微鏡油鏡的使用與保護。3 細(xì)菌的形態(tài)與構(gòu)造的觀察。4 實驗?zāi)康模? 學(xué)會顯微鏡的使用，重點掌握油鏡的使用與保護。6 進(jìn)一步認(rèn)識細(xì)菌的形態(tài)，明確細(xì)菌的大小與測量單位。7 熟悉細(xì)菌的特殊構(gòu)造。8 實驗材料：顯微鏡、擦鏡紙、液體石蠟、消毒液、細(xì)菌的根本形態(tài)標(biāo)本、細(xì)菌的特

3、殊構(gòu)造標(biāo)本。4 實驗方法：(1) 顯微鏡油鏡的使用與保護顯微鏡是一種貴重的光學(xué)儀器，而油鏡又是顯微鏡的最精細(xì)局部，是觀察細(xì)菌最重要的工具。因此，要求大家必須熟練地掌握顯微鏡的使用和保護，尤其是油鏡，防止損壞。1 識別油鏡： 95、 100、 HI、 OeL。2 對光：自然光用平面反光鏡， 人工光用凹面反光鏡； 先用低倍鏡對光， 次用高倍鏡。對好光源后，染色標(biāo)本將聚光器升高，光圈放開。3、調(diào)節(jié)焦距：選一X細(xì)菌染色標(biāo)本置于載物臺上，用推進(jìn)器固定，用低倍鏡先找準(zhǔn)物象，再用高倍鏡看清物體，于標(biāo)本上加鏡油一滴。用眼從側(cè)面觀察，轉(zhuǎn)動粗螺旋調(diào)節(jié)器，將油鏡頭徐徐下降浸入其中，切不可用力過猛，以免損壞油鏡。用左

4、眼從接目鏡觀察，徐徐向上轉(zhuǎn)動粗螺旋調(diào)節(jié)器，見模糊物象后，再用細(xì)螺旋調(diào)節(jié)器，直到物象完全清晰為止。4、顯微鏡的保護：所有的光學(xué)局部構(gòu)造都不能用手指、普通布擦拭， 用過的油鏡頭應(yīng)立即先用擦鏡紙蘸少許二甲苯擦拭，再用干擦鏡紙擦去二甲苯，以防二甲苯鏡頭上的固定膠，致使鏡片脫落。顯微鏡的光學(xué)局部應(yīng)防止日光直射。防止接觸強酸、強鹼、氯仿、酒精。顯微鏡用畢， 將物鏡轉(zhuǎn)成品字形并下降集光器和鏡筒，用軟布擦拭各部件后覆蓋于接目鏡上，雙手端平送入鏡箱內(nèi)。置于枯燥處，以防受潮。(二 )細(xì)菌形態(tài)觀察1、細(xì)菌的根本形態(tài)；球菌：肺炎球菌、腦膜炎球菌、葡萄球菌、鏈球菌桿菌：大腸桿菌、專業(yè)資料整理WORD格式炭疽桿菌、結(jié)核桿

5、菌、白喉桿菌弧菌：霍亂弧菌2、細(xì)菌的特殊構(gòu)造：莢膜：肺炎球菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌鞭毛：水弧菌周毛菌芽胞：破傷風(fēng)桿菌芽胞位于菌體頂端，呈鼓槌狀專業(yè)資料整理WORD格式授課進(jìn)度第周，第次課2學(xué)時授課日期年月日授課題目細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查二(教學(xué)章、 節(jié)或主題 )進(jìn)一步了解細(xì)菌特殊構(gòu)造在鑒別細(xì)菌過程中的實用意義。教學(xué)掌握革蘭染色的操作法，充分認(rèn)識革蘭染色的臨床意義。目標(biāo)革蘭染色的操作法教學(xué)重點革蘭染色的操作法教學(xué)難點請選擇你授課時所采用的教學(xué)方法在括號中畫“：講授法，討論法，演示法，案例法，發(fā)現(xiàn)法，探究法，教學(xué)談話法，實驗法 ，參觀法，考察法，自學(xué)輔導(dǎo)法，練習(xí)方法法習(xí)題或操作課，讀書指導(dǎo)法，聽說法，寫生法，視

6、唱法，工序法技能課，實習(xí)作業(yè)法，其他請選擇你授課時所采用的教學(xué)手段在括號中畫“：教學(xué)實物， 多媒體， 投影， 影像， CAI 課件， PPT，標(biāo)本，手段掛圖，模型，其他實驗報告討論、思考題、作業(yè)參考(1) 楊致邦，葉彬 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗【M】 . .科學(xué) .2021年 .(2) 潘麗紅 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗及學(xué)習(xí)指導(dǎo)【M 】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)，文獻(xiàn)2021年 .專業(yè)資料整理WORD格式一、實驗內(nèi)容：3 細(xì)菌標(biāo)本片的制備操作4 革蘭染色法操作二、實驗?zāi)康模? 進(jìn)一步了解細(xì)菌特殊構(gòu)造在鑒別細(xì)菌過程中的實用意義。2 掌握革蘭染色的操作法，充分認(rèn)識革蘭染色的臨床意義。三、實驗材料：革蘭

7、染色液全套、擦鏡紙、二甲苯、大腸桿菌培養(yǎng)物、葡萄球菌培養(yǎng)物、生理鹽水、玻片、接種環(huán)、酒精燈。四、實驗方法：細(xì)菌標(biāo)本片的制備操作1、涂片：點燃酒精燈；取干凈玻片一X，右手持接種環(huán)一酒精燈火焰中消毒，稍冷后取12環(huán)生理鹽水置于玻片中央；再次消毒后，用接種環(huán)取菌落中的細(xì)菌或菌液或標(biāo)本少許，在生理鹽水中涂勻制成約1cm左右的薄膜，并將接種環(huán)再次消毒后，置于試管架中。2、枯燥：在室溫中自然枯燥；天冷時可在酒精燈火焰上方略加溫，不可高溫加熱，否那么，細(xì)菌被破壞后染色效果差。3、固定：右手持玻片一端，標(biāo)本面向上，在酒精燈火焰上方快速地來回通過三次，約2妙種。固定的目的是殺死細(xì)菌，使細(xì)菌與玻片粘附較嚴(yán)密。革蘭

8、染色法操作1、初染：滴加結(jié)晶紫染液于標(biāo)本上，以覆蓋滿為度，染1分鐘后水洗，灑去積水。2、媒染：加魯格碘液，媒染1分鐘后水洗，灑去積水。7 脫色：加 95酒精脫色邊加酒精邊搖晃玻片，使酒精流去再加酒精，如此反復(fù)23次約 30妙鐘后水洗，灑去積水。12 復(fù)染：加復(fù)紅染液染 30妙鐘后水洗， 灑去積水，待干或用吸水紙吸干后鏡檢。先低倍鏡觀察效果，再用高倍鏡看清物象，滴加鏡油后用油鏡觀察。結(jié)果 ： G菌呈紫色， G菌呈紅色。專業(yè)資料整理WORD格式授課進(jìn)度第周，第次課2學(xué)時授課日期年月日授課題目細(xì)菌的培養(yǎng)及代謝產(chǎn)物的檢查(教學(xué)章、 節(jié)或主題 )熟悉細(xì)菌的培養(yǎng)方法，進(jìn)一步掌握人工培養(yǎng)細(xì)菌的臨床意義。教學(xué)

9、了解細(xì)菌代謝產(chǎn)物在鑒別細(xì)菌中的意義。目標(biāo)培養(yǎng)基的制備教學(xué)重點細(xì)菌代謝產(chǎn)物教學(xué)難點請選擇你授課時所采用的教學(xué)方法在括號中畫“：講授法，討論法，演示法，案例法，發(fā)現(xiàn)法，探究法，教學(xué)談話法，實驗法 ，參觀法，考察法，自學(xué)輔導(dǎo)法，練習(xí)方法法習(xí)題或操作課，讀書指導(dǎo)法，聽說法，寫生法，視唱法，工序法技能課，實習(xí)作業(yè)法，其他請選擇你授課時所采用的教學(xué)手段在括號中畫“：教學(xué)實物， 多媒體， 投影， 影像， CAI 課件， PPT，標(biāo)本，手段掛圖，模型，其他實驗報告討論、思考題、作業(yè)參考(1) 楊致邦，葉彬 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗【M】 . .科學(xué) .2021年 .(2) 潘麗紅 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗

10、及學(xué)習(xí)指導(dǎo)【M 】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)，文獻(xiàn)2021年 .專業(yè)資料整理WORD格式一、實驗內(nèi)容1、培養(yǎng)基的制備操作2、細(xì)菌的人工培養(yǎng)法操作3、細(xì)菌代謝產(chǎn)物觀察示教4、藥敏試驗示教二、實驗?zāi)康?、熟悉細(xì)菌的培養(yǎng)方法，進(jìn)一步掌握人工培養(yǎng)細(xì)菌的臨床意義。2、了解細(xì)菌代謝產(chǎn)物在鑒別細(xì)菌中的意義。三、實驗材料牛肉膏、 蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、 SS瓊脂、蒸餾水、 1molNaOH、0.1 molNaOH、粗天平、 0.02%酚紅指示劑、 pH比色器、無菌培養(yǎng)皿、無菌試管、接種環(huán)、酒精燈、各種鑒別培養(yǎng)基、高壓消毒滅菌器、量筒、三角燒瓶、吸管、剪刀、繩索、葡萄球菌菌液、大腸桿菌菌液、傷寒桿菌菌液、乙型副傷寒桿菌

11、菌液等。四、實驗方法培養(yǎng)基的制備操作1、培養(yǎng)基的制備程序稱量溶化pH測定與矯正分裝滅菌檢定保存。2、液體培養(yǎng)基的制備1稱量：稱取牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、氯化鈉 5g，置于 1000ml三角燒瓶中， 參加蒸餾水 1000ml 。2混合溶解：加熱溶化，待冷至40" 50oC時，測定并矯正pH為 77.6 。3 pH測定與矯正方法：準(zhǔn)備工作：取pH7.4 、 7.6 酚紅標(biāo)準(zhǔn)比色管及蒸餾水管各1支，按圖示裝好；取口徑與比色管一樣的試管3支，各加待測液體基5ml，分別編上、號，按圖示裝好。 比色：將比色架對光目視比色，比較二排管的顏色是否一樣，假設(shè)基為酸性一般呈酸性 ，那么向號管中加0

12、.02%酚紅指示劑 0.25ml 搖勻，取 1ml吸管一支吸取 0.1 molNaOH1ml，緩慢滴入號管內(nèi)，邊加邊搖勻，直至與標(biāo)準(zhǔn)管其中一側(cè)顏色一樣，準(zhǔn)確記錄NaOH的用量。計算：5ml 基矯正至 pH7.6 用去 0.1 molNaOH0.2ml，剩余的培養(yǎng)基那么需參加1 molNaOH為Xml。用比例公式計算。N1： V1 N2：V25： 975 0.2 ： XX 0.2*975/5=39(ml)專業(yè)資料整理WORD格式0.1 molNaOH 需要 39ml，而加 1 molNaOH只需 3.9ml 。4分裝： 分裝十適當(dāng)容器內(nèi)試管，包裝好，高壓蒸氣滅菌后備用。細(xì)菌的人工培養(yǎng)法操作1、平

13、板劃線接種法：1點燃酒精燈，右手以握筆式持接種環(huán)，在火焰上滅菌后稍冷，挑取葡萄球菌、大腸桿菌混合菌液一環(huán)。2用左手掌持瓊脂平板，以左手拇指將平板蓋啟開，右手將取了菌液的接種環(huán)伸入平板，呈45O角，用分段劃線法別離細(xì)菌如下列圖，蓋好平板。3于平板底部貼上標(biāo)簽，寫明班、組、菌名、日期，底向上，置于37OC溫箱中培養(yǎng) 24h后，觀察結(jié)果。2、液體培養(yǎng)基接種法：左手持液體培養(yǎng)基， 按照平板劃線取葡萄球菌少許，用右手小指拔開棉塞， 夾于指間示教，并將管口在火焰上滅菌，將細(xì)菌接種于液體培養(yǎng)基內(nèi)。再次滅菌管口， 塞好棉塞。貼上標(biāo)簽，置于 37OC溫箱中培養(yǎng) 24h后，觀察結(jié)果。細(xì)菌代謝產(chǎn)物觀察示教1、糖發(fā)酵

14、試驗：細(xì)菌分解糖后產(chǎn)酸產(chǎn)氣，產(chǎn)酸后使批示劑顯色，產(chǎn)氣后可見到氣泡。產(chǎn)酸產(chǎn)氣以 “表示，只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣以“ 表示，不分解以“ 表示。大腸桿菌和傷寒桿菌分解糖的結(jié)果如下：菌種葡萄糖乳糖大腸桿菌傷寒桿菌2、硫化氫試驗：某些細(xì)菌能分解培養(yǎng)基中的含硫氨基酸，產(chǎn)生硫化氫氣體。硫化氫與培養(yǎng)基中的鐵鹽或鉛鹽反響，形成黑色的硫化鐵或硫化鉛沉淀，為陽性，無黑色沉淀為陰性。大腸桿菌硫化氫試驗為陰性，乙型副傷寒桿菌為陽性。藥敏試驗示教1、平板劃線：1用密集劃線法將細(xì)菌布滿平板，方法同平板劃線接種法。2在無菌接種箱內(nèi)，用左手啟開平板蓋，用無菌鑷子夾取抗菌素紙片，間隔 5cm放置平板培養(yǎng)基外表，蓋好平板，貼上標(biāo)簽，置于37

15、OC溫箱中培養(yǎng) 24h后，觀察結(jié)果。3結(jié)果：觀察抑菌區(qū)有無，測量抑菌區(qū)的直徑。直徑<5mm為陰性 ( 不敏感 ) 、直徑 5" 10mm專業(yè)資料整理WORD格式為輕度敏感、直徑10" 15mm為中度敏感、直徑>15mm為高度敏感。專業(yè)資料整理WORD格式授課進(jìn)度第周，第次課2 學(xué)時授課日期年月日專業(yè)資料整理WORD格式授課題目專業(yè)資料整理WORD格式(教學(xué)章、 節(jié)細(xì)菌的分布與消毒滅菌檢查專業(yè)資料整理WORD格式或主題 )專業(yè)資料整理WORD格式證明在自然界和正常人體體表有許多細(xì)菌存在，以樹立嚴(yán)格的消毒及無菌觀念。教學(xué)了解常用消毒滅菌器械的使用方法，初步掌握紫外線

16、的滅菌方法護本卷須知。目標(biāo)細(xì)菌的檢查及消毒滅菌器械的使用方法教學(xué)重點滅菌方法使用時的本卷須知教學(xué)難點請選擇你授課時所采用的教學(xué)方法在括號中畫“：講授法，討論法，演示法，案例法，發(fā)現(xiàn)法，探究法，教學(xué)談話法，實驗法 ，參觀法，考察法，自學(xué)輔導(dǎo)法，練習(xí)方法法習(xí)題或操作課，讀書指導(dǎo)法，聽說法，寫生法，視唱法，工序法技能課，實習(xí)作業(yè)法，其他請選擇你授課時所采用的教學(xué)手段在括號中畫“：教學(xué)實物， 多媒體， 投影， 影像， CAI 課件， PPT，標(biāo)本，手段掛圖，模型，其他實驗報告討論、思考題、作業(yè)參考(1) 楊致邦，葉彬 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗【M】 . .科學(xué) .2021年 .(2) 潘麗紅 . 病

17、原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗及學(xué)習(xí)指導(dǎo)【M 】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)，文獻(xiàn)2021年 .專業(yè)資料整理WORD格式一、實驗內(nèi)容1、空氣中細(xì)菌的檢查操作2、皮膚消毒試驗操作3、咽喉部細(xì)菌的檢查操作4、常用消毒滅菌器械的使用示教二、實驗?zāi)康?、證明在自然界和正常人體體表有許多細(xì)菌存在，以樹立嚴(yán)格的消毒及無菌觀念。2、了解常用消毒滅菌器械的使用方法，初步掌握紫外線的滅菌方法護本卷須知。三、實驗材料普通瓊脂平板、 SS瓊脂平板、 血平板、接種環(huán)、 酒精燈、 高壓消毒滅菌器、干烤箱、 紫外線、大腸桿菌培養(yǎng)液、1龍膽紫、 2.5 碘酒， 75乙醇、無菌棉簽、鑷子等。四、實驗方法空氣中細(xì)菌的檢查操作1、取普通瓊脂平板4個

18、，啟開皿蓋，培養(yǎng)基面向上，分別放在實驗室、寢室、室外及無菌操作臺等處，暴露10" 20min 后加蓋。2、于平板底部貼上標(biāo)簽，寫明班、組、菌名、日期，底向上，置于37OC溫箱中培養(yǎng) 24h后，觀察結(jié)果。3、結(jié)果：如實填寫。皮膚消毒試驗操作1、取普通瓊脂平板1個，在底部用玻璃蠟筆劃線分區(qū)并標(biāo)號，啟開皿蓋，用右手食指輕輕涂抹培養(yǎng)基外表。2、用 2.5 碘酒消毒右手食指后，再用消毒后的手食指輕輕涂抹培養(yǎng)基外表，加蓋。3、于平板底部貼上標(biāo)簽，寫明班、組、菌名、日期，底向上，置于37OC溫箱中培養(yǎng) 24h后，觀察結(jié)果。4、結(jié)果：如實填寫。咽喉部細(xì)菌的檢查操作1、取血平板 1個，啟開皿蓋，口對培

19、養(yǎng)基外表距離約10cm，深咳嗽三次不可吹痰，加蓋。2、于平板底部貼上標(biāo)簽，寫明班、組、菌名、日期，底向上，置于O后，37 C溫箱中培養(yǎng) 24h觀察結(jié)果。專業(yè)資料整理WORD格式3、結(jié)果：如實填寫。常用消毒滅菌器械的使用示教、介紹1、紫外線殺菌試驗點燃酒精燈，取普通瓊脂平板1個，在底部用玻璃蠟筆劃線分出二個區(qū)并標(biāo)號，啟開皿蓋，右手持接種環(huán)在火焰上滅菌后，稍冷，取大腸桿菌培養(yǎng)液一環(huán)，密集劃線，加蓋。將培養(yǎng)基置于無菌接種箱內(nèi)， 啟開皿蓋，將蓋子蓋于培養(yǎng)基上的一半， 翻開紫外線燈開頭，照射 30min后，加蓋。于平板底部貼上標(biāo)簽，寫明班、組、菌名、日期，底向上，置于37OC溫箱中培養(yǎng) 24h后，觀察結(jié)

20、果。結(jié)果：如實填寫。2、手提式高壓蒸氣滅菌器介紹構(gòu)造：略用法：加水至規(guī)定的水平面、放入滅菌物品，加蓋、旋緊，翻開排氣閥；通電加熱、溫度逐漸上升時，器內(nèi)冷空氣由排氣閥排出，待有大量蒸氣逸出時，關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，直到壓力表的指針指在所需的位置后，調(diào)節(jié)電源，控制溫度，維持20" 30min 后，翻開排氣閥排氣，待壓力表指針指向“0時，再開蓋取物。本卷須知：滅菌開場時必須排盡冷空氣；滅菌完畢，切不可突然翻開蓋子排氣減壓，以免瓶內(nèi)液體等沖出外溢；放置物品不應(yīng)太擠。用途：用于耐高溫和不怕潮濕的物品滅菌。專業(yè)資料整理WORD格式授課進(jìn)度第周，第次課2 學(xué)時授課日期年月日授課題目(教學(xué)章、 節(jié)病

21、原性球菌的檢查或主題 )通過實驗讓學(xué)生掌握病原性球菌的形態(tài)、染色特性。了解膿汁標(biāo)本的病原性球菌教學(xué)的別離鑒定的程序。了解抗“O試驗的原理、方法及臨床意義。目標(biāo)1、病原性球菌標(biāo)本的觀察。專業(yè)資料整理WORD格式教學(xué)重點教學(xué)難點教學(xué)方法教學(xué)手段討論、思考題、作業(yè)2、膿汁標(biāo)本中病原性球菌的別離鑒定的程序。3、抗“O試驗抗“O試驗的原理請選擇你授課時所采用的教學(xué)方法在括號中畫“：講授法，討論法，演示法，案例法，發(fā)現(xiàn)法，探究法，談話法，實驗法 ，參觀法，考察法，自學(xué)輔導(dǎo)法，練習(xí)法習(xí)題或操作課，讀書指導(dǎo)法，聽說法，寫生法，視唱法，工序法技能課，實習(xí)作業(yè)法，其他請選擇你授課時所采用的教學(xué)手段在括號中畫“：實

22、物， 多媒體， 投影， 影像， CAI 課件， PPT，標(biāo)本，掛圖，模型，其他 實驗報告專業(yè)資料整理WORD格式參考(1) 楊致邦，葉彬 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗【M】 . .科學(xué) .2021年 .(2) 潘麗紅 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗及學(xué)習(xí)指導(dǎo)【M 】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)，文獻(xiàn)2021年 .專業(yè)資料整理WORD格式病原性球菌的檢查實驗?zāi)康模? 掌握病原性球菌的形態(tài)、染色特性。2 了解膿汁標(biāo)本的病原性球菌的別離鑒定的程序。3 了解抗“O試驗的原理、方法及臨床意義。實驗內(nèi)容：1、病原性球菌標(biāo)本的觀察。2、膿汁標(biāo)本中病原性球菌的別離鑒定的程序。3、抗“O試驗實驗材料：顯微鏡、細(xì)菌標(biāo)本、玻片、試

23、管、試管架、吸管、水浴箱、注射器、2.5%碘酒、棉簽、生理鹽水、血平板、兔血漿、抗“O試劑、血平板。實驗方法：(2) 病原性球菌標(biāo)本的觀察1、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌、腦膜炎球菌、淋球菌的形態(tài)觀察操作。2、葡萄球菌、鏈球菌溶血現(xiàn)象觀察示教。(4) 膿汁標(biāo)本中病原性球菌的別離鑒定的程序直接涂片革蘭染色鏡檢膿汁標(biāo)本觀察菌特征及溶液血情況接種血平板 24h 培養(yǎng)后觀察取菌落涂片革蘭染色鏡檢取菌落作生化反響、致病力試驗(5) 抗“O試驗原理：乙型溶血性鏈球菌能產(chǎn)生溶血素“O，能溶液解人和兔紅細(xì)胞并有很強的抗原性，能刺激機體產(chǎn)生抗溶血素“O抗體?？谷苎?“O能中和溶血素“O的溶血作用。 本法是將病人

24、血清與溶血素“O抗原先混合，作用一段時間后，再參加紅細(xì)胞懸液。假設(shè)紅細(xì)胞不被溶解為陽性，溶解為陰性。方法：1、取小試管 6支，分別編號，分兩排置于試管架上1-3為第一排， 4-6為第二排。2、第一排試管加待檢血清(0.25ml) 分別稀釋為 200、 400、 800倍；第二排試管加待檢血專業(yè)資料整理WORD格式清 (0.25ml) 分別稀釋 300、 600、 1200倍。3、分別加鏈球菌溶血素“O抗原 0.25ml ，充分混勻，置于37oC水浴箱中 10min 。7 分別加 5%紅細(xì)胞懸液 0.25ml ，充分混勻，置 37oC水浴箱中 30min 后觀察結(jié)果。結(jié)果：以完全不溶液血的血清最

25、高稀釋度為抗“O抗體的效價。正常值為 500單位以下。用途：600單位及以上有診斷意義，用于輔助診斷活動性風(fēng)濕。(四 ) 血漿凝固酶試驗3 取玻片一X，加生理鹽水一環(huán)。用接種環(huán)取葡萄球菌少許，混勻。4 加血漿一滴、混勻，數(shù)分鐘后觀察結(jié)果。出現(xiàn)顆粒狀凝集的為陽性、反之為陰性。專業(yè)資料整理WORD格式授課進(jìn)度第周，第次課2 學(xué)時授課日期年月日授課題目腸道桿菌的檢查(教學(xué)章、 節(jié)或主題 )通過實驗讓學(xué)生掌握腸道桿菌的形態(tài)、染色特性。了解腸道桿菌的別離鑒定的程教學(xué)序。了解肥達(dá)試驗的原理、方法及臨床意義。目標(biāo)1、腸道桿菌形態(tài)標(biāo)本的觀察。專業(yè)資料整理WORD格式教學(xué)重點教學(xué)難點教學(xué)方法教學(xué)手段討論、思考題

26、、作業(yè)2、腸道桿菌的別離鑒定程序。3、肥達(dá)試驗。肥達(dá)試驗的原理方法及結(jié)果分析請選擇你授課時所采用的教學(xué)方法在括號中畫“：講授法，討論法，演示法，案例法，發(fā)現(xiàn)法，探究法，談話法，實驗法 ，參觀法，考察法，自學(xué)輔導(dǎo)法，練習(xí)法習(xí)題或操作課，讀書指導(dǎo)法，聽說法，寫生法，視唱法，工序法技能課，實習(xí)作業(yè)法，其他請選擇你授課時所采用的教學(xué)手段在括號中畫“：實物， 多媒體， 投影， 影像， CAI 課件， PPT，標(biāo)本，掛圖，模型，其他 實驗報告專業(yè)資料整理WORD格式參考(1) 楊致邦，葉彬 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗【M】 . .科學(xué) .2021年 .(2) 潘麗紅 . 病原生物學(xué)與免疫學(xué)實驗及學(xué)習(xí)指導(dǎo)【

27、M 】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)，文獻(xiàn)2021年 .專業(yè)資料整理WORD格式腸道桿菌的檢查實驗?zāi)康模?、 掌握腸道桿菌的形態(tài)、染色特性。2、 了解腸道桿菌的別離鑒定的程序。3、 了解肥達(dá)試驗的原理、方法及臨床意義。實驗內(nèi)容：1、腸道桿菌形態(tài)標(biāo)本的觀察。2、腸道桿菌的別離鑒定程序。3、肥達(dá)試驗。實驗材料：顯微鏡、細(xì)菌標(biāo)本、玻片、試管、試管架、吸管、水浴箱、注射器、2.5%碘酒、棉簽、生理鹽水、 SS 培養(yǎng)基、患者血清1： 10 稀釋、傷寒桿菌O 菌液、 H 菌液、甲、乙型副傷寒H 菌液。實驗方法：一、腸道桿菌的形態(tài)觀察【材料】大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌革蘭染色示教片。【方法】注意上述腸道桿菌

28、形態(tài)、排列、 染色的共同點， 故腸道桿菌的染色鏡檢不能做為腸道桿菌之間的鑒別依據(jù)。專業(yè)資料整理WORD格式二、腸道桿菌培養(yǎng)物與生化反響觀察【材料】大腸桿菌、 變形桿菌、 痢疾桿菌、 傷寒桿菌及乙型副傷寒桿菌在尿素及蛋白胨水培養(yǎng)基上24小時培養(yǎng)物?！痉椒ā?、觀察大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌及乙型副傷寒桿菌在SS培養(yǎng)基、雙糖鐵、EMB培養(yǎng)基上生長情專業(yè)資料整理WORD格式?jīng)r，注意菌落的形態(tài)、大小、顏色及透明度。表 1 五種腸道桿菌在 SS培養(yǎng)基上的菌落特征菌種傷 寒 沙乙型副傷寒大腸桿菌變形桿菌痢疾桿菌門菌沙門菌培養(yǎng)基菌落紅色菌落無色半菌 落 無同傷寒桿菌同傷寒桿S.S或呈紅色透明，有

29、時帶色，半透菌落，菌落菌菌落。專業(yè)資料整理WORD格式瓊脂平板之中心， 不黑心，直徑明，直徑可帶黑心。透明， 直徑2mm左右，有2mm 左2-3mm左右時呈膜狀生右。長。小 至 中無色或半菌落扁平，圓形菌落，扁等 透 明透明，光滑EMB紫黑色， 具平，無色或半或 半 透不發(fā)酵乳有金屬光透明，似沙門明，不發(fā)糖，中等大澤菌酵乳糖小2、觀察大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌及乙型副傷寒桿菌在雙糖鐵、尿素及蛋白胨水培養(yǎng)基上生長情況，注意生化反響與動力的鑒別。表2五種腸道桿菌生化反響與動力鑒別表生化反應(yīng)菌 名動力葡萄糖乳糖H2S尿素靛基質(zhì)大腸桿菌-+變形桿菌-+/-+/-+副傷寒乙桿菌-+-+傷寒桿

30、菌+-/+-+痢疾桿菌+-+/-三、糞便標(biāo)本中腸道桿菌的別離鑒定一標(biāo)本采集盡可能在發(fā)病早期或治療前采集新鮮糞便， 選取膿血或粘液局部， 取材后應(yīng)立即送檢。 如不能立即送檢，可將標(biāo)本保存于 30%甘油緩沖鹽水中。二檢驗程序?qū)I(yè)資料整理WORD格式腸道桿菌檢驗程序三檢驗方法：1、別離培養(yǎng)【材料】新鮮糞便標(biāo)本、SS瓊脂平板?！痉椒ā堪瓷鲜鰴z驗程序進(jìn)展第一日的檢驗步驟，即用接種環(huán)挑取新鮮糞便標(biāo)本，劃線接種于EMB或SS平板上， 37培養(yǎng) 24小時?！窘Y(jié)果】觀察平板上菌落， 依據(jù)其大小、 顏色、透明度等特點， 初步識別可疑病原菌菌落， 進(jìn)展鑒定。在EMB平板上非致病菌菌落較大、 紫黑色、 有金屬光澤，

31、不透明， 而可疑菌落略小， 半透明。2、初步鑒定【材料】雙糖鐵培養(yǎng)基【方法】用接種針從可疑病原菌菌落中心點取細(xì)菌， 穿刺接種雙糖鐵培養(yǎng)基 Kligler 培養(yǎng)基，37培養(yǎng) 18-24 小時后，觀察結(jié)果，并據(jù)此判定細(xì)菌屬性?！窘Y(jié)果】上層下層動力H2S+-+-非致病菌-+-痢疾桿菌-+傷寒桿菌-+副傷寒桿菌【用途】初步鑒別腸道致病菌用，可以觀察葡萄糖、乳糖的發(fā)酵，并可觀察有無H2S產(chǎn)生及細(xì)菌有無動力。【原理】克氏雙糖鐵培養(yǎng)基中含有葡萄糖、乳糖、 硫酸亞鐵及酚紅指示劑等成分。經(jīng)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸時， 使培養(yǎng)基的下層由紅變黃，斜面培養(yǎng)基中雖然也含有葡萄糖但量小，且分解產(chǎn)生的酸為揮發(fā)性酸并且可被氧化， 所

32、以只發(fā)酵葡萄糖的細(xì)菌斜面仍為紅色；產(chǎn)酸并產(chǎn)氣時， 培養(yǎng)基專業(yè)資料整理WORD格式中有氣泡或裂隙出現(xiàn)。培養(yǎng)基中乳糖含量大，被分解后產(chǎn)酸多，因此不僅培養(yǎng)基下層變黃，而且斜面處也由紅變黃，基于上述現(xiàn)象， 通常將培養(yǎng)基的斜面局部代表乳糖，下層局部代表葡萄糖。培養(yǎng)基中含有硫酸亞鐵，如有硫化氫產(chǎn)生，那么生成黑色硫化亞鐵，使培養(yǎng)基中出現(xiàn)黑色。硫代硫酸鈉是一種復(fù)原劑，防止培養(yǎng)基中氧化物與H2S作用而影響 FeS的生成。3、血清學(xué)鑒定【材料】沙門菌屬、志賀菌屬多價診斷血清，生理鹽水，載玻片等。【方法】1根據(jù)初步鑒定結(jié)果，選用相應(yīng)診斷血清做玻片凝集試驗。用接種環(huán)自雙糖鐵培養(yǎng)基上挑取少許菌苔，分別磨勻于生理鹽水與相

33、應(yīng)診斷血清中，搖動玻片1-2 分鐘，觀察結(jié)果生理鹽水診斷血清+細(xì)菌細(xì)菌（ 2凝集試驗陽性者，報告結(jié)果；凝集試驗陰性者應(yīng)保存菌種進(jìn)一步鑒定?！舅伎碱}】1、腸道桿菌有何共同特征？2、大腸、變形、痢疾、傷寒桿菌及乙型副傷寒桿菌的鑒別要點是什么？3、如果大腸桿菌、傷寒桿菌、乙型副傷寒桿菌和痢疾桿菌混雜在肉湯培養(yǎng)基中，你怎樣把它們別離出來，使各自成為純培養(yǎng)物"【附注】痢疾桿菌熒光菌球試驗【原理】將相應(yīng)抗體加在痢疾桿菌的培養(yǎng)液中，雖相互結(jié)合， 但細(xì)菌不被殺死，在適宜溫度下仍能生長，形成痢疾桿菌微小菌團。如在抗體上標(biāo)記熒光，那么形成痢疾桿菌熒光菌球?！静牧吓c方法】1. 將痢疾桿菌接種于含有一定量的

34、熒光抗體的蛋白胨水中，37培養(yǎng) 10小時。2. 蘸取上述培養(yǎng)物接種環(huán)于清法玻片上，放上蓋玻片，在熒光顯微鏡下觀察?！窘Y(jié)果】熒光球大而發(fā)亮呈圓球狀， 構(gòu)造較疏松， 周圍近似卷發(fā)狀。 隨孵育時間增長， 菌球構(gòu)造致密，周圍較圓，整齊，菌球周圍有刺毛，孵育時間短時，菌球往往呈多形性。肥達(dá)反響專業(yè)資料整理WORD格式【方法】1. 取清潔小試管 32支，分成 4排，每排 8支，依次編號。2. 于小試管內(nèi)各注入 0.5ml 生理鹽水。3. 于每一排第一管內(nèi)參加 1：10稀釋的患者血清 0.5ml ，用 1ml 吸管吹吸三次， 混勻，吸出 0.5ml專業(yè)資料整理WORD格式注入第二管作對倍稀釋，, 依次稀釋至第7管，棄去0.5ml，第 8管為對照。專業(yè)