蒲公英多糖抗疲勞作用研究

1、蒲公英多糖抗疲勞作用研究                    作者：楊曉杰 付學(xué)鵬 劉澤東【摘要】  目的就蒲公英多糖對(duì)小鼠抗疲勞作用效果及有效劑量進(jìn)行研究。方法將蒲公英多糖分3個(gè)劑量組即0.2，0.5，0.8 g/kg 給小鼠灌胃,對(duì)照組為蒸餾水。21 d 后小鼠游泳造成疲勞，測(cè)定小鼠力竭游泳時(shí)間、血清尿素氮及肝糖原等指標(biāo)。結(jié)果小鼠負(fù)重游泳時(shí)間明顯延長(zhǎng)，血尿素氮顯著下降，肝糖原的含量明顯升高。結(jié)論 蒲公

2、英多糖的各個(gè)劑量組能有效提高小鼠的抗疲勞能力，其中多糖濃度0.5 g/kg劑量組效果最好。 【關(guān)鍵詞】  蒲公英多糖 小鼠 抗疲勞蒲公英為蒲公英屬Taraxacum植物的統(tǒng)稱，是常用的抗菌中草藥，在動(dòng)物醫(yī)學(xué)和人類醫(yī)療保健等方面的應(yīng)用源遠(yuǎn)流長(zhǎng)。蒲公英適應(yīng)性廣，抗逆性強(qiáng)，抗寒又耐熱，對(duì)光照要求不嚴(yán)，抗旱、抗?jié)衬芰^強(qiáng)，可在各種類型的土壤條件下生長(zhǎng)，有較強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)能力1。蒲公英屬植物均可以藥用，有清熱解毒、消癰散結(jié)之功能，具有抗病原微生物、提高免疫力、利膽保肝、抗自由基延緩皮膚衰老等功效2。近年，隨著對(duì)其開發(fā)利用價(jià)值的深入研究，特別是其醫(yī)療保健功能的被確認(rèn)，引起了醫(yī)學(xué)專家和營(yíng)養(yǎng)學(xué)專家的關(guān)

3、注。我國(guó)對(duì)多糖的研究，始于20世紀(jì)70年代，雖然起步較晚，但發(fā)展很快，到目前為止，人們發(fā)現(xiàn)多糖在抗腫瘤、抗病毒、防治心血管疾病、抗衰老以及增加免疫性等方面有獨(dú)特的生物活性。但到目前為止，只有一些真菌多糖和為數(shù)不多的種子植物多糖被用于臨床3。   關(guān)于蒲公英多糖提取及抗腫瘤、抗突變、抗氧化等生物活性的研究?jī)H見作者的幾篇報(bào)道4，5。本實(shí)驗(yàn)就蒲公英多糖的抗疲勞作用特性進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，以期對(duì)蒲公英活性多糖資源的開發(fā)利用提供有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。   1  材料和方法   1.1   材料實(shí)驗(yàn)用蒲公英為采自齊齊哈爾市區(qū)

4、的東北蒲公英。   1.2  多糖的提取按照文獻(xiàn)4的方法制得。   1.3  動(dòng)物23月齡，昆明種雄性健康小鼠，共48只，體重（25±3）g，由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。動(dòng)物飼料，由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。   1.4  方法   力竭游泳時(shí)間：末次給小鼠受試劑30 min后，采用負(fù)重方式于鼠尾系一質(zhì)量為小鼠體重5%的鉛塊，將小鼠置于水深30 cm的游泳箱中，水的溫度控制在30左右。強(qiáng)迫游泳至力竭（沉入水底8 s不動(dòng)為止），記錄游泳時(shí)間。   血

5、清尿素氮的測(cè)定：血清的制備：末次給小鼠受試劑30 min后，將小鼠不負(fù)重置于水深30 cm的游泳箱中，水的溫度控制在30左右，游泳90 min，休息30 min后立刻尾部采血，采血大約0.5 ml（不加抗凝劑）。置4冰箱約3 h，血凝固后2 500 r/min離心15 min，取血清并測(cè)定血清尿素氮值。尿素氮測(cè)定方法：按文獻(xiàn)6方法測(cè)定。   肝糖原的測(cè)定：肝糖原的提?。耗┐谓o小鼠受試劑30 min后，立刻脫頸處死，取肝臟，迅速以濾紙吸去附著的血液。稱取約1 g，置乳缽中，加洗凈細(xì)砂少許及10%三氯乙酸1 ml，研磨。再加5%三氯乙酸2  ml，繼續(xù)研磨，至肝臟組織

6、已經(jīng)充分磨成肉糜狀為止。然后以2 500 r/min離心10 min。將上清液轉(zhuǎn)入另一離心管并量取體積，加入同體積的95%乙醇，混合后，靜置10 min。此時(shí)糖原成絮狀沉淀析出。沉淀溶液以2 500 r/min離心10 min。棄去上清液，并將離心管倒置于濾紙上2 min。沉淀內(nèi)加入蒸餾水1 ml，用玻璃棒攪拌沉淀至溶解。肝糖原的測(cè)定：按文獻(xiàn)7方法蒽酮-濃硫酸法測(cè)定肝糖原含量，每組重復(fù)3次，取平均值。            2  結(jié)果   2.1  力竭游

7、泳時(shí)間末次給小鼠受試劑30 min后，采用負(fù)重方式于鼠尾系一質(zhì)量為小鼠體重5%的鉛塊，將每組小鼠強(qiáng)迫游泳至力竭（沉入水底8 s不動(dòng)為止），記錄游泳時(shí)間。見表1。   表1  力竭游泳時(shí)間   與對(duì)照組比較，*P0.05   表1為小鼠負(fù)重力竭游泳時(shí)間，3個(gè)劑量組與對(duì)照組比較，均能明顯延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，其中中劑量組明顯增加小鼠的游泳時(shí)間，高劑量組與對(duì)照組比較，也能明顯增加小鼠的游泳時(shí)間。表明蒲公英多糖能增加小鼠抗疲勞的能力。   2.2  血清尿素氮的含量末次給小鼠受試劑30 min后，將小鼠

8、置于水深30 cm的水桶中，游泳90 min，休息30 min后立刻尾部采血，離心,得到血清，取血清并測(cè)定血清尿素氮含量見表2。   表2  不同劑量組的血清尿素氮含量   與對(duì)照組比較，*P0.05   表2可以看出,用藥各組別的小鼠血清尿素氮含量均低于對(duì)照組,其中中劑量組與對(duì)照組的差異具有顯著性意義,延緩疲勞效果最佳，表明蒲公英多糖能減少或在一定程度上抑制疲勞小鼠血清尿素氮產(chǎn)生。   2.3  肝糖原的含量  實(shí)驗(yàn)測(cè)得小鼠肝糖原含量見表3。   表3 

9、 不同劑量組的肝糖原含量   與對(duì)照組比較，*P0.05；與對(duì)照組比較，*P0.01   表3可以看出，各受試劑組小鼠的肝糖原含量均高于對(duì)照組，且與對(duì)照組差異均有顯著性意義，中劑量組與對(duì)照組有極顯著差異（P0.01），表明蒲公英多糖具有促進(jìn)肝糖原儲(chǔ)備的作用。   3  討論   疲勞是極其復(fù)雜的生理狀態(tài)，一般指機(jī)體生理過程不能持續(xù)其功能在特定水平上，或不能維持預(yù)定的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度致使身體和精神狀態(tài)的下降，從而導(dǎo)致工作能力和工作效率的衰退。能源物質(zhì)的消耗、代謝物質(zhì)的堆積是產(chǎn)生疲勞的重要原因。運(yùn)動(dòng)耐力的提高是抗疲勞

10、能力加強(qiáng)最有力的宏觀表現(xiàn)，游泳時(shí)間的長(zhǎng)短可以反應(yīng)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)疲勞的程度。本實(shí)驗(yàn)直接觀察到了蒲公英多糖能延長(zhǎng)負(fù)重小鼠的游泳時(shí)間。3個(gè)受測(cè)試劑量組與對(duì)照組進(jìn)行比較，均能明顯延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，其中中劑量組（0.5 g/kg）效果最好。尿素氮是體內(nèi)氨基酸分解代謝的最終產(chǎn)物之一，血中尿素氮來(lái)源于肝臟，通過腎臟隨尿液排出體外。3個(gè)受測(cè)試劑量組的小鼠血清尿素氮含量均低于對(duì)照組,其中中劑量組(0.5 g/kg)與對(duì)照組的差異顯著,表明蒲公英多糖能減少疲勞小鼠血清尿素氮產(chǎn)生。糖原的儲(chǔ)存量可直接影響機(jī)體的運(yùn)動(dòng)能力。3個(gè)受測(cè)試劑量組小鼠的肝糖原含量均高于對(duì)照組，中劑量組與對(duì)照組比較差異極顯著，表明蒲公英多糖能夠通過增加能量物質(zhì)的儲(chǔ)備，為機(jī)體提供  1 葛學(xué)軍，林有潤(rùn)，翟大彤.中國(guó)蒲公英屬植物的初步整理J.植物研究，1998,18(4):377.2 陳 華，李銀心.藥蒲公英再生體系的建立和優(yōu)化J.生物工程學(xué)報(bào)，2005,21(2)：244.3 張惟杰.糖復(fù)合物生化研究技術(shù)，第2版M.杭州：浙江大學(xué)出版社，2003：32.4 付學(xué)鵬，楊曉杰.蒲公英多糖的