立克次體柯克斯體東方體巴通體

1、第20章 立克次體、柯克斯體、東方體、巴通體立克次體(Rickettsia)、東方體(Orientia)、柯克斯體(Coxiella)、埃立克體 (Ehrlichia )和|巴通體(BartoneliOT是一類與節(jié)肢動物有密切關(guān)系的嚴格細胞內(nèi)寄 生的細菌，是引起斑疹傷寒、恙蟲病、Q熱等傳染病的病原體。這類病原體的分類、 所致疾病和流行環(huán)節(jié)見表20-1。表20-1常見立克次體的分類、所致疾病和流行環(huán)節(jié)群種所致疾病傳播媒介立克次體屬斑疹傷寒群普氏立克次體(R.prowaxekii)流行性斑疹傷寒人虱人斑疹傷寒立克次體(R.typhii)地方性斑疹傷寒鼠蚤鼠加拿大立克次體(R.Canada)加拿大斑

2、疹傷寒婢兔斑點熱群立氏立克次體(R.rickettsii)洛杉磯斑點熱婢狗和野鼠等西伯利亞立克次體(R.sibirica )北亞婢傳染斑疹 傷寒婢野獸和鳥東方體屬恙蟲病群恙蟲病東方體(O.tsutsugamushi)恙蟲病恙螭野鼠等柯克斯體屬貝納柯克斯體(C.burnetii)Q熱婢野生小動物、 牛和羊等埃立克體屬犬埃立克體 群查非埃立克體(E.chaffeensis)人單核細胞埃立 克體病婢嚙齒類腺熱埃立克 體群腺熱埃立克體(E.sennetsu)腺熱埃立克體病婢嚙齒類嗜吞噬細胞 埃立克體群人粒細胞埃立克體(HGE)人粒細胞埃立克 體病婢人、馬和狗巴通體屬五日熱巴通體(B.quintana)

3、戰(zhàn)壕熱、桿菌性血 管瘤人虱人漢賽巴通體(B.henselae)一貓和狗立克次體、東方體、柯克斯體、埃立克體和巴通體屬的共同特點是：大多數(shù) 是人畜共患病的病原體；以節(jié)肢動物為宿主和傳播媒介，引起人類發(fā)熱出疹性疾 ??；體積介于細菌與病毒之間，用光學顯微鏡可見，形態(tài)以球桿狀或桿狀為主， 革蘭染色陰性；專性細胞內(nèi)寄生，因酶系統(tǒng)不夠完善又缺乏細胞器，故不能獨立 生活；以二分裂方式繁殖；含有DNA和RNA兩種核酸；對多種抗生素敏感這類病原所致疾病絕大多數(shù)為自然疫源性疾病，動物受染后一般不出現(xiàn)癥狀。 人類因生產(chǎn)勞動、資源開發(fā)等偶然遭到嗜血節(jié)肢動物的侵襲而受染。流行性斑疹傷 寒、地方性斑疹傷寒和Q熱在世界各地

4、均有發(fā)生；斑點熱主要流行于北美和西伯利 亞等地區(qū)；人粒細胞埃立克體病流行于北美；恙蟲病主要流行于東南亞和西南太平 洋等地區(qū)。我國較常見的立克次體病有流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、恙蟲病 和Q熱等。常見立克次體的主要生物學性狀見表 20-2。表20-2 常見立克次體的主要生物學性狀立克次體種類培養(yǎng)特性二分裂生長分布的位置滅活溫度(C) 外斐反應(yīng)與時間（分鐘）活細胞內(nèi)增殖分散細胞質(zhì)內(nèi)5630OX19OX? OX k斑疹傷寒立克次體活細胞內(nèi)增殖十分散細胞內(nèi)外5630OXgH1O 0X2+ OX k立氏立克次體活細胞內(nèi)增殖十細胞質(zhì)和核質(zhì)區(qū)5630OXgH10 0X2+ OX k恙蟲病東方體活細胞內(nèi)增

5、殖十近核處成堆5630OX19一 OX2- OX k-II-貝納柯克斯體活細胞內(nèi)增殖十吞噬溶酶體內(nèi)10010OX19 OX2 OX k 第一節(jié)普氏立克次體普氏立克次體（R. prowazekii）是流行性斑疹傷寒（虱傳斑疹傷寒或稱典型斑疹 傷寒）的病原體，用為研究斑疹傷寒而獻身的捷克科學家 Von prowazek的姓氏命名。 流行性斑疹傷寒在世界各地均可發(fā)生流行。一、生物學性狀（一）形態(tài)結(jié)構(gòu)與染色普氏立克次體呈多形態(tài)性，以短桿形為主，大小為長0.62.0Nm,寬0.30.8Rm, 在胞質(zhì)內(nèi)呈單個或短鏈狀存在（圖20-1）。革蘭染色陰性，著色較淡。常用 Gimenez 法染色呈鮮紅色，效果好；

6、姬姆薩法染色呈紫色或藍色； Macchiavello法染色呈紅圖20-1普氏立克次體（二）結(jié)構(gòu)與抗原構(gòu)造普氏立克次體與其它立克次體的結(jié)構(gòu)均與革蘭陰性菌相似，有細胞壁和細胞膜。細胞壁由肽聚糖、蛋白脂質(zhì)多糖和外膜組成，其脂質(zhì)含量高于一般細菌。細胞壁外 有脂多糖，外表有多糖組成的微莢膜樣粘液層，微莢膜樣粘液層具有粘附宿主細胞 和抗吞噬的作用，與致病性有關(guān)。細胞膜由脂質(zhì)雙層構(gòu)成，含有大量的磷脂。細胞 質(zhì)中的核糖體由50S和30S大小兩種亞基組成，雙鏈DNA構(gòu)成的核質(zhì)區(qū)位于中央。立克次體細胞壁有兩類抗原，一類為群特異性的可溶性抗原，可能是細胞壁的脂多糖成分，耐熱；另一類為種特異性抗原，為細胞壁外膜蛋白，

7、不耐熱。立克次 體的脂多糖成分與變形桿菌某些X株菌體抗原有共同成分（有相同或相似的抗原決 定簇），可引起交叉反應(yīng)。根據(jù)這一原理，用易于制備的變形桿菌 O抗原代替相應(yīng)立克次體抗原建立一種 非特異性直接凝集實驗，稱|外斐反應(yīng)（Weil-Felix reaction ）|,用于檢測患者體內(nèi)是否 有抗立克次體抗體，以輔助診斷斑疹傷寒、斑點熱和恙蟲病。（三）培養(yǎng)特性普氏立克次體和絕大多數(shù)立克次體為專性活細胞內(nèi)寄生，只有在活的細胞內(nèi)才 能生長，以二分裂方式繁殖，繁殖一代需要 610小時，生長緩慢。培養(yǎng)立克次體 的方法有動物接種、雞胚接種和細胞培養(yǎng)。動物接種是最常用的方法，可采用豚鼠 和小鼠，多種病原性立克

8、次體在豚鼠和小鼠體內(nèi)生長繁殖良好。雞胚卵黃囊接種常 用于立克次體的傳代培養(yǎng)。目前采用雞胚成纖維細胞、L929細胞和Vero單層細胞進行分離、鑒定、傳代和培養(yǎng)，最適溫度為 37Co（四）抵抗力普氏立克次體對理化因素的抵抗力較弱，對熱敏感，56c 30分鐘可殺死（表20-2）,在水溶液中4c24小時失去活性；耐低溫和干燥，在干虱糞中能保持活性兩 個月左右。0.5%石碳酸和來蘇5分鐘可滅活。對四環(huán)素類和氯霉素類抗生素敏感。 磺胺可刺激其增殖。二、致病性與免疫性（一）感染途徑普氏立克次體的儲存宿主是病人，傳播媒介是人虱，病人是惟一的傳染源。感 染方式是虱-人-虱一人。人虱叮咬病人，立克次體進人人虱體內(nèi)

9、，在腸管上皮細 胞內(nèi)生長繁殖，破壞腸管上皮細胞，并隨糞便排出體外，感染710天后死亡。當感染的人虱叮咬健康人時，立克次體隨糞便排泄于人的皮膚上，由于瘙癢而抓傷， 立克次體便可侵入人體內(nèi)致?。▓D 20-2）。由于立克次體的感染性在干燥的虱糞中 能保持兩個月左右，亦有可能通過呼吸道或球結(jié)膜發(fā)生感染。人虱圖20-2流行性斑疹傷寒的傳播方式（二）致病物質(zhì)普氏立克次體的致病物質(zhì)主要有內(nèi)毒素和磷脂酶 A兩類。內(nèi)毒素的化學成分為 脂多糖，具有與腸道桿菌內(nèi)毒素相似的多種生物學活性?？纱碳魏?巨噬細胞產(chǎn) 生IL-1和TNF-ct。IL-1具有致熱性，引起發(fā)熱；TNF-s引起血管內(nèi)皮細胞損傷、微 循環(huán)障礙、中毒

10、性休克和DIC等。磷脂酶A能溶解宿主細胞膜或吞噬體膜， 有利于 立克次體穿入宿主細胞內(nèi)生長繁殖。止匕外，微莢膜樣粘液層有利于粘附于宿主細胞， 并具有抗吞噬作用。（三）所致疾病普氏立克次體所致疾病為流行性斑疹傷寒。當普氏立克次體侵入皮膚后，與局 部淋巴組織或小血管內(nèi)皮細胞表面特異性受體結(jié)合而被吞入胞內(nèi)，依靠磷脂酶A溶解吞噬體膜的甘油磷脂進入細胞質(zhì)內(nèi)大量增殖，導致細胞中毒破裂，釋放出立克次 體，引起第一次立克次體血癥。立克次體經(jīng)血流擴散至全身組織器官的小血管內(nèi)皮 細胞，在其中大量增殖釋放入血，導致第二次立克次體血癥。普氏立克次體通過磷 脂酶A和微莢膜樣粘液層對抗宿主的免疫作用，大量增殖破壞宿主細胞

11、。立克次體 崩解釋放內(nèi)毒素等毒性物質(zhì)，形成毒血癥。損害血管內(nèi)皮細胞，造成月中脹和壞死， 通透性增強，血漿滲出，有效循環(huán)血量下降。其主要病理改變?yōu)檠軆?nèi)皮細胞增生， 血管壁壞死，血栓形成。造成皮膚、心、肺和腦等血管周圍的廣泛性病變。流行性斑疹傷寒的潛伏期為1014天，發(fā)病急、高熱、劇烈頭痛和周身疼痛， 47天出現(xiàn)皮疹。嬰幼兒發(fā)病率低，多見成年人感染，50歲以上的人發(fā)病率高，60 歲以上的患者死亡率高。（四）免疫性普氏立克次體嚴格細胞內(nèi)寄生，抗感染以細胞免疫為主，體液免疫為輔。CTL細胞溶解殺傷感染立克次體的血管內(nèi)皮細胞，ThI細胞釋放細胞因子IFN-V增強MO 的吞噬和殺傷功能；B細胞產(chǎn)生的群和

12、種抗體有促進吞噬細胞的吞噬作用，中和立 克次體的感染性和毒性物質(zhì)。同時，免疫作用也增加了對機體的病理性損害。由于 二次立克次體血癥，病后獲得牢固的免疫力，與斑疹傷寒立克次體的感染有交叉免 疫力。三、微生物學檢查法普氏立克次體的微生物學檢查法主要為分離和鑒定，對臨床確診和流行病學調(diào) 查有意義。（一）標本采集一般在發(fā)病期或急性期尚未用抗生素之前無菌采血以提高陽性分離率。流行病 學調(diào)查則采取野生小動物、家畜臟器或節(jié)肢動物的組織懸液。（二）分離培養(yǎng)由于標本中立克次體含量較低，直接鏡檢意義不大?？蓪吮颈M快接種在雄性 豚鼠的腹腔內(nèi)，接種后若體溫40C或陰囊有紅月中，表示已發(fā)生感染；若無陰囊紅 月中而體溫

13、超過40C,可取脾組織接種雞胚卵黃囊，35c孵育數(shù)日，如卵黃囊膜涂片 查見立克次體可能即為普氏立克次體，并根據(jù)形態(tài)、細胞內(nèi)部位及免疫熒光法等進行鑒定（三）血清學檢測常用外斐反應(yīng)和補體結(jié)合試驗。外斐反應(yīng)（變形桿菌 0X19抗原）的滴度1 ： 160或恢復期抗體滴度比早期增高4倍者可診斷為斑疹傷寒。但要結(jié)合臨床癥狀， 以排除外斐反應(yīng)假陽性。用普氏立克次體可溶性（群特異）抗原進行的補體結(jié)合試 驗可區(qū)別斑疹傷寒和其他群的立克次體感染，而要區(qū)別普氏與斑疹傷寒立克次體還 需用種特異性抗原。（四）分子生物學檢測可應(yīng)用PCR檢測或核酸探針檢測。四、防治原則（一）預防原則流行性斑疹傷寒的預防主要應(yīng)改善生活條件，

14、講究個人衛(wèi)生，消滅體虱，加強 個人防護。特異性預防采用由丫射線輻射或甲醛處理的滅活鼠肺疫苗和雞胚疫苗等，可使 發(fā)病率降低70%90%,免疫力可持續(xù)一年。（二）治療原則氯霉素和四環(huán)素類抗生素對普氏立克次體和其它立克次體均有效，可縮短病程,降低死亡率。但是，抗生素的作用是有限的，增強機體免疫力，提高細胞免疫功能 是治療的關(guān)鍵。禁用磺胺類藥物治療。第二節(jié)斑疹傷寒立克次體斑疹傷寒立克次體（R. typhi） 或稱|莫氏立克次體（R. mooseri） 是地方性斑疹傷 寒（亦稱鼠型斑疹傷寒）的病原體。1931年，Mooser等分別從該疾病流行的墨西 哥的鼠腦和美國的鼠虱中分離出來。地方性斑疹傷寒可在世界

15、各地散發(fā)，而主要發(fā) 生在非洲和南美洲。一、生物學性狀斑疹傷寒立克次體大小形態(tài)同普氏立克次體，但鏈狀排列少見。染色性、結(jié)構(gòu)、 抗原構(gòu)造、培養(yǎng)特性、抵抗力以及易感細胞、易感動物方面與普氏立克次體相同， 只是斑疹傷寒立克次體所致的豚鼠陰囊反應(yīng)比普氏立克次體引起的更強。二、致病性和免疫性（一）感染途徑斑疹傷寒立克次體的主要儲存宿主是鼠，主要傳播媒介是鼠蚤和鼠虱，感染的 自然周期是鼠一蚤一鼠。立克次體長期寄生于隱性感染鼠體，鼠蚤吸疫鼠血后，立 克次體進入其消化道并在腸上皮細胞內(nèi)繁殖，細胞破裂后將立克次體釋出，混入蚤20-3）。糞中，在鼠群間傳播。鼠蚤只在鼠死亡后才離開鼠轉(zhuǎn)向叮吮人血，而使人受感染 此外，

16、帶有立克次體的干燥蚤糞還可經(jīng)口、鼻及眼結(jié)膜進入人體而致病（圖圖20-3斑疹傷寒立克次體的傳播方式（二）所致疾病致病物質(zhì)同普氏立克次體，所致疾病為地方性斑疹傷寒，其臨床癥狀與流行性 斑疹傷寒相似，但發(fā)病緩慢，常經(jīng)過 812天的潛伏期后出現(xiàn)發(fā)熱和皮疹，病情較 輕，很少累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)和心肌，病死率低于 1%。（三）免疫性斑疹傷寒立克次體嚴格細胞內(nèi)寄生，以細胞免疫為主，體液免疫為輔?？沙霈F(xiàn) 二次立克次體血癥，病愈后能獲得牢固的免疫力，與普氏立克次體的感染有交叉免 疫力。三、微生物學檢查法接種雄性豚鼠腹腔，若有斑疹傷寒立克次體的感染可出現(xiàn)發(fā)熱，同時伴有明顯 的陰囊紅月中和鞘膜反應(yīng)（Neill-Moos

17、er reaction）。余同普氏立克次體。四、防治原則預防措施主要是要改善居住條件，提高民族素質(zhì)，講究個人衛(wèi)生，滅虱、滅蚤 和滅鼠。接種疫苗。治療原則同流行性斑疹傷寒。第三節(jié)恙蟲病東方體恙蟲病東方體（O.tsutsugamushj）是恙蟲病的病原體。國外最早系日本人于1810 年首先描述本病。1927年日本學者緒方規(guī)雄等用病人血液注射家兔睪丸內(nèi)，經(jīng)56次傳代后，陰囊紅月中，取其涂片染色發(fā)現(xiàn)。1948年我國國內(nèi)（廣州）分離出恙蟲病 東方體。該病主要流行于東南亞、西南太平洋島嶼、日本和我國的東南與西南地區(qū)。、生物學性狀（一）形態(tài)、染色與結(jié)構(gòu)呈雙球或短桿狀，多成對排列，平均長度為 1.2Rm,很少

18、超過1.5Nm。Gimenez 法染色呈暗紅色；革蘭染色法、姬姆薩染色法和Macchiavello染色法其染色特性與普氏立克次體相同。細胞壁的結(jié)構(gòu)和抗原成分不同于其它立克次體，無粘液層，無 微莢膜，無肽聚糖和脂多糖，與變形桿菌 OXk有交叉抗原。故恙蟲病立克次體現(xiàn)另 立為東方體屬。（二）培養(yǎng)特性小鼠易感，可在雞胚卵黃囊和細胞培養(yǎng)中生長。 常用的原代細胞有地鼠腎細胞、 睪丸細胞等，傳代細胞有HeLa、L929等。（三）抵抗力在外環(huán)境中的抵抗力較其它立克次體為低， 低溫可長期保存，-20C能存活5周， 56c 10分鐘即被殺滅；37c23小時后，其活力大為下降；對一般消毒劑極為敏感。二、致病性與免

19、疫性（一）感染途徑恙蟲病是一種自然疫源性疾病，主要流行于嚙齒動物之間。野鼠和家鼠感染后 多無癥狀，但體內(nèi)長期保留病原體，故為主要傳染源。止匕外，兔類、鳥類等也能感 染或攜帶恙蛾而成為傳染源。恙蛾是恙蟲病東方體的寄生宿主、儲存宿主和傳播媒 介，立克次體寄居在恙蛾體內(nèi)，可經(jīng)卵傳代，并借助于恙蛾的叮咬在鼠問傳播。（二）所致疾病所致疾病為恙蟲病。人若被恙蛾叮咬后，經(jīng) 710天或更長的潛伏期，突然發(fā) 病，高熱，劇烈頭痛，可出現(xiàn)耳聾。于叮咬處出現(xiàn)紅斑樣皮疹，形成水皰，破裂后 發(fā)生潰瘍，周圍紅潤，上覆黑色痂皮（稱為焦痂），是恙蟲病的特征之一。病原體在宿主細胞內(nèi)繁殖，多在細胞質(zhì)近核處成堆排列，然后通過出芽方式

20、釋 放，經(jīng)淋巴系統(tǒng)入血循環(huán)，產(chǎn)生東方體血癥。病原體釋出的毒素，可引起發(fā)熱、皮 疹、全身淋巴結(jié)月中大及各內(nèi)臟器官的病變。（三）免疫性以細胞免疫為主，病后獲得較持久的免疫力。三、微生物學檢查法（一）病原體分離取急性期病人血液接于小鼠腹腔，瀕死時取腹膜或脾臟作涂片，經(jīng)姬姆薩染色 或熒光抗體染色鏡檢。（二）血清學檢查1 .外斐反應(yīng) 病人單份血清對變形桿菌 OXk凝集效價在1 ： 160以上或早晚 期雙份血清效價呈4倍增長者有診斷意義。最早第4天出現(xiàn)陽性，34周達高峰， 5周后下降。2 .補體結(jié)合試驗應(yīng)用當?shù)卮碇昊蚨鄡r抗原，特異性高，抗體持續(xù)時間長， 可達5年左右。效價1 ： 10為陽性。3 .間接免

21、疫熒光試驗測定血清抗體，于起病第1周末出現(xiàn)抗體，第2周末達高峰，陽性率高于外斐反應(yīng)，抗體可持續(xù) 10年，對流行病學調(diào)查意義較大。四、防治原則在流行區(qū)要加強個人防護，防止恙蛾幼蟲叮咬，滅鼠除草，加快疫苗研制。治 療同普氏立克次體。第四節(jié)貝納柯克斯體貝納柯克斯體（C.burnetii）亦稱Q熱柯克斯體，是Q熱（query fever）的病原 體。Q熱即疑問熱，指原因不明的發(fā)熱。1937年，Burnet等證明其病原體是一種立 克次體，命名為貝納柯克斯體。Q熱流行于世界各地。一、生物學性狀（一）形態(tài)與染色4 納柯克斯體呈高度多形性，球桿形或短桿形，甚至球形。大小為長0.25 .0Nm ,寬0.20.4

22、Nm,是目前發(fā)現(xiàn)的最小的立克次體。革蘭染色多為陰性，其他 染色特性同普氏立克次體。雞胚卵黃囊中生長旺盛，能在多種細胞中繁殖。（二）基因組特征貝納柯克斯體基因組分子量為1.04 X09,含1.6 M06bp,約為大腸埃希菌的1/3。 近年來已分離其基因達13個之多，分別與編碼立克次體代謝酶有關(guān)（如PyrB、gitA、 sdhCDAB基因），或與編碼表面抗原有關(guān)（chtpA、tpB、ComI基因），或與編碼毒力 因子有關(guān)（Sod Mucz、CbbE、Cbmip、dnaJ、qrsA基因）。止匕外，還發(fā)現(xiàn)貝納柯克 斯體帶有4種不同的質(zhì)粒，分別為 36kb QpHI、39kb QpRS、33.5kb Q

23、pDV和51kb QPDG,其功能尚未闡明。（三）抗原結(jié)構(gòu)貝納柯克斯體有抗原相的變異，發(fā)生變異的主要成分為脂多糖。新分離的病原 體為I相，毒力強，含有完整的抗原組份；經(jīng)人工傳代后失去I相中的表面抗原而 成為毒力弱的n相。n相又可通過動物接種回復至I相。（四）抵抗力貝納柯克斯體抵抗力較強。耐熱，牛乳需煮沸10分鐘以上才能殺死。耐干燥，在婢干糞中可存活一年以上。1%甲醛需48小時才能將其滅活。二、致病性與免疫性貝納柯克斯體在婢體內(nèi)能長期存活，并可經(jīng)卵傳代。隨糞便排出，糞便中含有 大量病原體。婢既是寄生宿主和儲存宿主，又是動物間的傳播媒介。婢叮咬野生嚙 齒動物和家畜使其感染成為中間儲存宿主。受感染家

24、畜多數(shù)無癥狀，卻是主要傳染 原，乳汁、尿、糞中可長期帶有病原體，由消化道或呼吸道接觸感染人。Q熱的潛伏期一般為1428天，癥狀類似流感或原發(fā)性非典型肺炎，發(fā)病突然， 高熱寒戰(zhàn)，常有劇烈頭痛、肌肉疼痛和食欲減退，很少出現(xiàn)皮疹。輕者可自愈，重 癥病例如并發(fā)肝炎、心內(nèi)膜炎。病后可獲得一定免疫力，且以細胞免疫為主。三、微生物學檢查法分離病原體可采血進行豚鼠腹腔接種，發(fā)熱后取脾臟作涂片染色檢查。還可選 用雞胚卵黃囊或細胞培養(yǎng)。如外斐試驗陰性，可用補體結(jié)合試驗或凝集試驗檢查血 中有無特異性抗體以協(xié)助診斷。一般急性病人只產(chǎn)生R相抗體。若I相抗體持續(xù)較 高水平，說明感染仍然存在，為慢性或隱性感染。四、防治原則預防重點在于消除家畜的感染，對可疑乳制品嚴格消毒。對易感人群可接種用 I相菌株制成的滅活或減毒疫苗，