PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的要求

1、PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的要求1.目的：規(guī)定在各區(qū)內(nèi)所進(jìn)行的工作及其操作。2.適用范圍：所有在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行的工作。3.負(fù)責(zé)人：謝秋華操作人：謝秋華胡錦輝何小雪4.程序：實(shí)驗(yàn)室分四區(qū)：試劑貯存區(qū)、準(zhǔn)備區(qū)；標(biāo)本接收、制備區(qū)；擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)。進(jìn)入各區(qū)嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，即試劑貯存、準(zhǔn)備區(qū)-標(biāo)本接收、制備區(qū)-擴(kuò)增區(qū)-產(chǎn)物分析區(qū)。各區(qū)及其設(shè)備、物品必須有明確的標(biāo)記，嚴(yán)禁混用。進(jìn)入PCR實(shí)驗(yàn)室的工作人員（含衛(wèi)生員），都必須遵守實(shí)驗(yàn)室的規(guī)則，尤其嚴(yán)格遵守進(jìn)入PCR實(shí)驗(yàn)室的唯一流向。不可進(jìn)入PCR擴(kuò)增后區(qū)打掃衛(wèi)生，再返回?cái)U(kuò)增前區(qū)工作。防止非本室工作人員串崗，進(jìn)入本室。尤其不得為找人，而逆向誤入PCR實(shí)驗(yàn)室。總

2、則(1) PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)具備醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、微生物檢驗(yàn)基本知識，大專以上學(xué)歷，并受過PCR實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識和技能培訓(xùn)。(2) PCR實(shí)驗(yàn)室分試劑準(zhǔn)備，樣本準(zhǔn)備，PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物分析四個(gè)室，各室的實(shí)驗(yàn)物品(含加樣器，試管架，吸頭，記錄紙，筆等)，不得混用，須貼上標(biāo)簽予以區(qū)別。(3) 實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員必須嚴(yán)格按照PCR實(shí)驗(yàn)室操作程序進(jìn)行，包括實(shí)驗(yàn)室擦洗。臺(tái)面消毒，離心管，吸頭的無菌滅活準(zhǔn)備，儀器使用和廢棄物處理等。(4) 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須更換各室不同的工作服(含帽和鞋)，勤換洗工作服，以及遵守實(shí)驗(yàn)室的唯一流向的規(guī)定，嚴(yán)禁反向流動(dòng)。(5) 進(jìn)入PCR實(shí)驗(yàn)室后區(qū)的物品不許帶進(jìn)PCR實(shí)驗(yàn)室前區(qū)。每

3、天實(shí)驗(yàn)開始前，必須清潔地面和消毒實(shí)驗(yàn)室前區(qū)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束應(yīng)紫外線消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，產(chǎn)物分析室紫外燈最好徹夜開啟，排風(fēng)扇應(yīng)晝夜工作。每天下班前處理好廢物，應(yīng)關(guān)好水、電、煤氣和門窗。（6）定期校準(zhǔn)和維修PCR儀、酶標(biāo)儀及離心機(jī)、水浴箱等儀器設(shè)備。（7）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得飲食、吸煙。4.1標(biāo)本接收區(qū)（標(biāo)本的接收在檢驗(yàn)科標(biāo)本接收處進(jìn)行）對送檢的標(biāo)本實(shí)行雙簽制度，并仔細(xì)檢查是否符合檢測要求，對有不符合要求的標(biāo)本及時(shí)通知相關(guān)科室重新采樣，并作記錄，每份標(biāo)本需給出唯一性編號。本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封好，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，將垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室。4.2試劑貯存、準(zhǔn)備區(qū)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)工作服，須戴一次性手套

4、。記錄實(shí)驗(yàn)室干、濕度，記錄冰箱溫度。使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項(xiàng)記錄，書寫工整詳細(xì)。準(zhǔn)備好的試劑送入下一區(qū)，還原實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，將本區(qū)垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室424本區(qū)工作服留在本區(qū)緩沖間425本區(qū)維持相對正壓狀態(tài)（開啟緩沖區(qū)的排氣扇）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)及地面打開紫外燈消毒大于120分鐘。4.3標(biāo)本制備區(qū)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須在緩沖區(qū)更換專用工作服及拖鞋。實(shí)驗(yàn)中須使用一次性帽子，戴手套，手套在實(shí)驗(yàn)過程中疑有污染應(yīng)立即更換。432將傳入本區(qū)的試劑放入冰箱冷凍室試劑存放專區(qū)暫存。記錄實(shí)驗(yàn)室干、濕度，記錄冰箱溫度。將冰箱內(nèi)二周前的標(biāo)本密封丟

5、入垃圾筐，然后記錄標(biāo)本的保存情況。使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項(xiàng)記錄，書寫工整詳細(xì)。按試劑盒說明書對標(biāo)本進(jìn)行處理，將處理好的標(biāo)本在超凈工作臺(tái)內(nèi)加樣，記錄標(biāo)本的處理過程。將加樣后的試劑傳送下一區(qū)，還原實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，關(guān)閉所有儀器，記錄儀器使用時(shí)間和運(yùn)行狀態(tài)437使用過的離心管、吸頭須置于盛有2000mg/L有效氯消毒液的廢液缸中，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后方丟入垃圾袋，患者樣品應(yīng)按有生物傳染性危險(xiǎn)品對待。將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，將垃圾帶出本區(qū)。將工作服留在本區(qū)緩沖間。本區(qū)應(yīng)避免不必要的走動(dòng)，同時(shí)維持相對正壓狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)及地面打開紫外燈消毒大于120分鐘。

6、4.4擴(kuò)增區(qū)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須在緩沖區(qū)更換本區(qū)專用工作服及拖鞋。記錄實(shí)驗(yàn)室干、濕度，記錄冰箱溫度。使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項(xiàng)記錄，書寫工整詳細(xì)。將傳入本區(qū)加樣后的試劑上機(jī)擴(kuò)增。擴(kuò)增完成后，記錄檢測結(jié)果，及時(shí)發(fā)放報(bào)告單，記錄儀器使用時(shí)間和運(yùn)行狀態(tài)。將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，然后將垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室。將本區(qū)工作服留在本室再離開實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)禁本區(qū)物品帶至其他區(qū)，本區(qū)應(yīng)避免不必要的走動(dòng)，同時(shí)維持相對正壓狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)及地面打開紫外燈消毒大于120分鐘。4.5擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須在緩沖區(qū)更換本區(qū)專用工作服及拖鞋。記錄實(shí)驗(yàn)室干、濕度。使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項(xiàng)記錄，書寫工整詳細(xì)。將傳入本區(qū)的擴(kuò)增產(chǎn)物上機(jī)分析。記錄檢測結(jié)果，及時(shí)發(fā)放報(bào)告單，記錄儀器使用時(shí)間和運(yùn)行狀態(tài)。將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，然后將垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室將本區(qū)工作服留在本室再離開實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)禁本區(qū)物品帶至其他區(qū)，該區(qū)需維持負(fù)壓狀態(tài)，