紅芪中多糖提取工藝的研究

1、蘭州理工大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院畢業(yè)論文紅芪中多糖提取工藝的研究專業(yè)： 姓名： 學(xué)號：指導(dǎo)老師： 職稱：摘要紅芪作為傳統(tǒng)的補(bǔ)益類中藥，含有多糖、葡萄糖醒酸、粘液質(zhì)、多種氨基酸、苦味素、膽堿、甜萊堿、葉酸、熊竹素等多種成分，并具有強(qiáng)心利尿、降壓及增強(qiáng)人體免疫機(jī)能的作用。本試驗(yàn)分別采用水提法、微波提取法、超聲波提取法和微波-超聲波提取法對紅芪中的多糖進(jìn)行提取，比較這四種提取法在操作工程中的差異，并對最后的提取結(jié)果進(jìn)行比較，選出多糖提取率最高的方法。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用微波-超聲波提取法的多糖提取率最高，得率為7.051%。在對其進(jìn)行進(jìn)一步的工藝研究之后，確定超聲溫度、超聲時間和液料比為影響試驗(yàn)最終結(jié)果

2、的三個主要因素，通過對其進(jìn)行正交試驗(yàn)及方差分析之后，得出在A2B2C2，即超聲溫度50、超聲時間40min、液料比為200:1的條件下提取工藝最佳，測得多糖的最終提取率為7.026%。試驗(yàn)結(jié)果最終證明，采用微波-超聲波提取紅芪多糖具有較大的優(yōu)勢：提取時間大大縮短，可避免紅芪多糖的分解，所用儀器簡單，操作方便。關(guān)鍵詞：紅芪；多糖；提??；優(yōu)化；正交試驗(yàn)AbstractAs a traditional Chinese medical herb, Radix Hedysari contains polysaccharide, glucose acid, phlegm, kinds of amino a

3、cid, bitter principle, bilineurine, betaine, folic acid, kumatakenin and many other kinds of ingredient. It has the effect of Cardiotonics, Diuretic, Hypotensive, and strengthening the Immune function of human body. In this experiment, the polysaccharide of Radix Hedysari will be extracted by respec

4、tively using the methods of aqueous extraction, microwave assisted extraction, ultrasonic extraction and microwave-ultrasonic extraction. Compare the four extraction methods by differences in operation, and compare the result of extraction, the method whose extraction ratio is highest were chosen. T

5、hrough the experiment, it was discovered that the extraction ratio of polysaccharide is highest by the microwave-ultrasonic extraction method, which is 7.051%. Then through the more intensive study of technology, it is sure that the ultrasonic-temperature, ultrasonic-time and C/N ratio are the main

6、factors which can impact the experiment result. After the Orthogonal Experiment and analysis of variance, it shows that on the condition A2B2C2 (ultrasonic-temperature is 50, ultrasonic-time is 40min and C/N ratio is 200:1) that the extraction technology is best, and the extraction rate of polysacch

7、aride is 7.026%. The result of the experiment proved that the microwave-ultrasonic extraction method has advantages: shorten the extraction period, avoid the resolving of Radix Hedysari, the employed instruments are simple, and operate easily.Keywords: Radix Hedysar; Polysaccharide; Extraction; Opti

8、mization; Orthogonal test目錄一、引言- 4 -（一）紅芪的生物學(xué)特性及生態(tài)特征- 4 -1形態(tài)特征- 4 -2生長習(xí)性- 4 -3生態(tài)特征- 5 -4藥材鑒別- 5 -5化學(xué)成分- 7 -（二）紅芪的研究現(xiàn)狀- 7 -（三）多糖的提取與分離純化- 8 -1多糖的提取工藝- 8 -2多糖的分離和純化- 8 -（四）微波提取的原理及特點(diǎn)- 9 -1微波提取的原理- 9 -2微波提取的特點(diǎn)- 9 -3微波提取在中草藥成份提取中的應(yīng)用- 10 -（五）超聲波提取的原理及特點(diǎn)- 10 -1超聲波提取的原理- 10 -2超聲波提取的特點(diǎn)- 11 -3超聲波提取在中草藥成份提取中的

9、應(yīng)用- 11 -二、材料與方法- 11 -（一）試驗(yàn)材料- 11 -1藥材- 11 -2試劑- 11 -3儀器- 12 -（二）試驗(yàn)方法- 12 -1工藝流程- 12 -2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制- 12 -3紅芪的預(yù)處理- 13 -4多糖的提取- 13 -5多糖的分離純化- 14 -6換算因子的測定- 14 -三、結(jié)果與分析- 15 -（一）單因素試驗(yàn)- 15 -1超聲溫度對提取率的影響- 15 -2超聲時間對提取率的影響- 16 -3液料比對提取率的影響- 17 -（二）正交試驗(yàn)- 18 -（三）驗(yàn)證試驗(yàn)- 18 -四、討論- 19 -五、結(jié)論- 19 -參考文獻(xiàn)- 20 -致謝- 21 -外文翻譯

10、- 22 -一、引言紅芪（Radix Hedysari），別名巖黃芪、黑芪、獨(dú)根，為豆科巖黃芪屬植物多序巖黃芪的干燥根 1，因其皮色紅潤，故稱紅芪。自古與黃芪通用，但其原植物與黃芪同科，不同屬。梁代陶弘景在論述黃芪時曾說:“又有赤色者可作膏貼，俗方多用，道家不須”2，這里所指黃芪赤色者即指紅芪而言。古代本草學(xué)家對二者并不是不知分辨，只是未從品種名稱上加以區(qū)別，將紅芪統(tǒng)稱為黃芪而已。中華人民共和國藥典1985 年版始將兩者分列。作為傳統(tǒng)的補(bǔ)益類中藥，紅芪性溫、味甘。具有補(bǔ)氣升陽、止汗、斂瘡生肌、利尿消腫之功效3，生用治自汗、盜汗、血痹、浮腫，痛癥不潰或潰久不斂。炙用補(bǔ)中益氣，治內(nèi)傷、勞倦、脾虛泄

11、瀉肚、氣虛、血脫、崩帶及一切氣虛血衰之癥。紅芪含有多糖、葡萄糖醒酸、粘液質(zhì)、多種氨基酸、苦味素、膽堿、甜萊堿、葉酸、熊竹素等多種成分。藥理試驗(yàn)表明，紅芪具有強(qiáng)心利尿、降壓及增強(qiáng)人體免疫機(jī)能作用46；對病疾桿菌、鏈球茵、葡萄球菌等多種草蘭氏陽性菌有抗菌作用。多糖是由單糖連接而成的多聚物，人們對多糖的研究已經(jīng)有很長時間的歷史，對多糖的初始研究可追溯到1936年Shear對多糖抗腫瘤活性的發(fā)現(xiàn)，至20世紀(jì)50年代，陸續(xù)發(fā)現(xiàn)一些真菌多糖和高等植物多糖具有明顯的抑瘤活性。最近又發(fā)現(xiàn)許多中藥多糖還具有降血糖作用。70年代以來，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)多糖及糖復(fù)合物在生物體內(nèi)不僅是作為能量資源和構(gòu)成材料，重要的是它存在

12、于一切細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)中，參與生命現(xiàn)象中細(xì)胞的各種活動。多糖類物質(zhì)是所有生命有機(jī)體的重要組成部分，廣泛存在于動物、植物、和微生物細(xì)胞壁中，是生物體內(nèi)除核酸和蛋白質(zhì)以外的又一類重要的生物分子?？茖W(xué)研究已經(jīng)確認(rèn)糖類物質(zhì)具有許多生物活性，包括抗腫瘤、免疫、降血糖和抗病毒等，而且對機(jī)體幾乎無毒副作用。中藥多糖因具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能及抗腫瘤降血糖等藥理作用，而且?guī)缀鯖]有毒性與副作用，因此引起國內(nèi)外藥理學(xué)家、生物學(xué)家和化學(xué)家們的關(guān)注。多糖廣泛地存在于動物細(xì)胞膜、植物和微生物細(xì)胞壁中，植物中更是廣泛的含有多糖，而中藥大部分都是植物藥，有不少中藥中的多糖成分的藥理作用都是其重要的主要功效之一。很早以前，人們就采用一

13、些含多糖豐富的植物治療各種疾病。近二十多年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，人們逐漸認(rèn)識到糖及其復(fù)合物分子具有極其重要的生物功能。因此，多糖的提取和分離技術(shù)的研究和發(fā)展就顯得尤為重要。（一）紅芪的生物學(xué)特性及生態(tài)特征1形態(tài)特征紅芪基原植物多序巖黃芪 (HedySarum polybotrys Hand-Mazz)系多年生直立草本，高達(dá)1.5米。根呈長圓柱形，少分枝，長1050厘米，直徑0.52厘米，表面紅棕色，皮孔橫長，黃色或暗黃色，略凸出。莖有細(xì)瘦分枝。單數(shù)羽狀復(fù)葉互生，長達(dá)15厘米；小葉725厘米，長圓狀卵形，長13.5厘米，寬59毫米，先端近平截或微凹，有小刺尖，基部寬模形，全緣，下宙中脈被長柔

14、毛，小葉柄甚短?？偁罨ㄐ蚰z生，長達(dá)15厘米，有花20余朵，花梗纖細(xì)，長23毫米，有長柔毛，花等斜鐘形，被短毛，下尊齒較長大；花冠淡黃色，長約1厘米，旗瓣長圓狀倒卵形，龍骨瓣較旗瓣長。芙果有子房柄，具35英節(jié)，有窄翅，表面有稀疏網(wǎng)紋及短柔毛，每節(jié)有圓形種子1粒。2生長習(xí)性紅芪為深根植物，性喜涼爽，有較強(qiáng)的抗旱、耐寒能力，怕熱怕澇，氣溫過高就會抑制地上部植株生長。土壤濕度大，會引起根部腐爛。適宜生長在土層深厚、肥沃、疏松、排水良好的砂質(zhì)土壤。土質(zhì)粘重則主根短，側(cè)根多，生長緩慢，產(chǎn)量低。花期6月下旬至7月上旬，果期79月。紅芪種皮較堅(jiān)硬，吸水力差，發(fā)芽率為6070%。種子萌發(fā)不喜高溫。地溫78，濕度

15、適宜時，1015天即可出苗。土壤干旱則不易萌發(fā)出苗。播種兩年后開花結(jié)實(shí)。3生態(tài)特征紅芪在自然狀態(tài)下，生長在海拔18002500米的高原山脊，臺地及溝谷邊緣。土壤為棕壤、褐土及淋溶褐土，土層深厚。生長區(qū)年平均氣溫612。10的積溫為17003500。年平均降水430470毫米，49月相對干旱，植被以灌叢草原為主。4藥材鑒別（1）性狀鑒別本品（見圖1）呈圓柱形，條直，少有分枝，上端稍粗。長1050厘米，粗端直徑0.82厘米。表面灰紅棕色至紅褐色，具有明顯的縱皺紋及少數(shù)支根痕，外皮易剝落而露出淡黃色的皮部及纖維；皮孔橫長，稍淺，略凸出，質(zhì)硬而韌，不易折斷，斷面纖維性，并富粉性，切斷面（見圖2）外皮紅

16、棕色，皮部黃白色，約占半徑的1/31/2，內(nèi)側(cè)可見一棕色環(huán)，木質(zhì)部淡黃色，中央色較淺，可見放射紋理。氣微，味微甜，嚼之有豆腥味。圖1 紅芪圖2 紅芪切斷面（2）顯微鑒別本品（見圖3）橫切面：木栓層為數(shù)列切向延長的木栓細(xì)胞。木栓層為24列木栓細(xì)胞。皮層狹窄，外側(cè)24列厚角細(xì)胞。韌皮部較寬，外側(cè)有裂隙，纖維成束散在，纖維壁厚，微木化；韌皮射線外側(cè)常彎曲。形成層成環(huán)。木質(zhì)部導(dǎo)管單個散在或23個相聚，其周圍有木纖維。纖維束周圍的薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶。粉末黃棕色。纖維成束，直徑522m，壁厚，微木化，周圍細(xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維，含晶細(xì)胞壁不均勻增厚。草酸鈣方晶直徑714m，長約至22m。具緣紋孔導(dǎo)

17、管直徑至145m。淀粉粒單粒類圓形或卵圓形，直徑219m；復(fù)粒由28分粒組成。圖3 紅芪橫切面（3）理化鑒別取本品粉末3g，加水30ml，浸漬過夜，濾過，取濾液1ml，加0.2%茚三酮溶液2滴，在沸水中加熱5min，冷后呈紫紅色。(檢查氨基酸、多肽)取上述水溶液1ml，于60水浴中加熱10min，加5%-萘酚乙醇溶液5滴，搖勻，沿管壁緩緩加入濃硫酸0.5ml，在試液與硫酸交界處出現(xiàn)紫紅色環(huán)。(檢查糖、多糖)取本品粉末2g，加甲醇10ml，放置過夜，濾過。取濾液1ml ，在水浴上蒸干，用少量冰醋酸溶解殘?jiān)?。加醋酸?濃硫酸試劑(19:1) 0.5ml，顏色由黃轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色青色污綠色。(檢查甾醇)取

18、本品粉末2g，加酸性乙醇10ml，溫浸2小時，濾過。濾液調(diào)至中性，蒸干，加3%鹽酸1ml溶解殘?jiān)?。各取濾液0.5ml，分別滴碘化鉍鉀及碘化汞鉀試劑各1滴，前者產(chǎn)生橙紅色沉淀。后者產(chǎn)生灰白色沉淀。(檢查生物堿)薄層層析氨基酸的檢查樣品制備：取本品粉末(40目)3g，加水15ml冷浸過夜，濾過，濾液適當(dāng)濃縮，供點(diǎn)樣用。吸附劑：硅膠G濕法鋪板，105活化40min。展開劑：乙醇-氨水-水(7:1:2)。展距20厘米。顯色劑：吲哚醌試劑噴霧，105烤10min，斑點(diǎn)顯不同顏色。在以上展開系統(tǒng)中脯氨酸與-氨基丁酸Rf值接近，可以采用紙層析，以乙醇-氨水(9:1)為展開劑，將二者分開，茚三酮顯色，結(jié)果如圖

19、4(圖左、中)。胡蘿卜甙、谷甾醇的檢查樣品制備：取本品粉末(40目)2g ，加甲醇10ml冷浸，放置過夜，濾過。濾液中加石油醚(6090)5ml提取，分取石油醚液，濃縮至1 ml，供點(diǎn)樣用。吸附劑：同上。展開劑：氯仿-無水乙醇(8:2)。展距20厘米。顯色劑：10%磷鉬酸試劑噴霧，105烤10min，顯藍(lán)色斑點(diǎn)(圖右)。 圖4 紅芪紙層析圖譜5化學(xué)成分含有抗微生物活性的成分(一)-3-羥基-9甲氧基紫檀烷，以及降壓的有效成分-氨基丁酸（-aminobutyric acid），含量為0.094%。薄層層析結(jié)果，有與D-天冬素 、脯氨酸（Proline）、精氨酸（Arginine）、-氨基丁酸、蘇

20、氨酸相對應(yīng)的斑點(diǎn)7，8。（二）紅芪的研究現(xiàn)狀我國學(xué)者在上世紀(jì)60年代開始對紅芪進(jìn)行研究，并首次確定商品中紅芪的主要原植物為多序巖黃芪9，并對黃芪與紅芪的形態(tài)和組織做了區(qū)別研究，80年代報(bào)道了紅芪的生藥學(xué)研究，闡述了紅芪的藥用品種和分布，隨之也報(bào)道了紅芪的化學(xué)成分研究，1995版中國藥典將紅芪與黃芪分列，成為單列的一種中藥。近20年來有關(guān)紅芪的化學(xué)成分研究表明紅芪中含有多種生物活性物質(zhì)如氨基酸、-谷甾醇、黃酮類、多糖、刺芒柄花素、毛蕊異黃苷、甘草甜素、3-羥基-9-甲基紫檀烷等10，11。紅芪的藥理研究有一定的發(fā)展，取得了許多研究成果12，表明紅芪對心腦等重要器官缺氧缺血有明顯的保護(hù)作用，對心率

21、，血壓有調(diào)節(jié)作用，對肺功能有保護(hù)作用，有多種免疫功能，減毒增效的抗腫瘤作用，有多種形式的抗炎，抗病毒，保肝及調(diào)節(jié)血糖，血酯的作用13，14。但是其研究對象多為紅芪的水煎劑或粗提物，對紅芪中含量最多的重要有效成分紅芪多糖的分離純化和深入研究則很少，對紅芪的抗腫瘤作用研究主要集中在對免疫功能的影響，而從誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的角度研究其抗腫瘤作用則未見報(bào)道。（三）多糖的提取與分離純化1多糖的提取工藝（1）水提法用水作溶劑來提取多糖是最常用的方法之一，可以用熱水浸煮提取，也可以用冷水浸提。水提取的多糖多數(shù)是中性多糖。一般植物多糖提取多數(shù)采用熱水浸提法，該法所得多糖提取液可直接或離心除去不溶物；或者利用多糖

22、不溶于高濃度乙醇的性質(zhì)，用高濃度乙醇沉淀提純多糖；但由于不同性質(zhì)或不同相對分子質(zhì)量的多糖沉淀所需乙醇濃度不同，它也可以用于樣品中不同多糖組分的分級分離；還可按多糖不同性質(zhì)在粗分階段利用混合溶劑提取法對植物中不同的多糖進(jìn)行分離；其中，以乙醇沉淀最為普遍。（2）酸提法有些多糖適合用稀酸提取，并且能得到更高的提取率。將熱水浸提過的阿魏側(cè)耳子實(shí)體殘?jiān)?倍量的3%的三氯乙酸浸提，15過夜，過濾，離心，將提取液用20%的NaOH中和至pH為7，濃縮、醇析沉淀、丙酮洗滌、真空冷凍干燥得酸提水溶性粗多糖PFA。從對海蒿子多糖的提取方法研究發(fā)現(xiàn)，從硫酸根含量及粗多糖產(chǎn)率看，酸提方法優(yōu)于水提方法。（3）堿提法與

23、酸提類似，有些多糖在堿液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。采用稀堿提取，多為0.1mol/L氫氧化鈉、氫氧化鉀，為防止多糖降解，常通以氮?dú)饣蚣尤肱饸浠c或硼氫化鉀。HayashiKatsuhiko發(fā)明了從綠色藻類中提取酸性多糖的方法，而這種多糖用常規(guī)的熱水法是無法得到的。（4）微波提取法對微波技術(shù)的應(yīng)用，近年來得到很大發(fā)展。微波是頻率介于300MHz和300GHz之間的電磁波，微波提取的原理是微射線輻射于溶劑并透過細(xì)胞壁到達(dá)細(xì)胞內(nèi)部，由于溶劑及細(xì)胞液吸收微波能，細(xì)胞內(nèi)部溫度升高，壓力增大，當(dāng)壓力超過細(xì)胞壁的承受能力時，細(xì)胞壁破裂，位于細(xì)胞內(nèi)部的有效成份從細(xì)胞中釋放出來，傳

24、遞轉(zhuǎn)移到溶劑周圍被溶劑溶解。微波具有穿透力強(qiáng)、選擇性高、加熱效率高等特點(diǎn)。微波輻射（MWI）可以大大加快反應(yīng)速度，縮短反應(yīng)時間。微波技術(shù)應(yīng)用于植物細(xì)胞破壁，有效地提高了收率。微波提取法具有提取時間短，提取率高，是強(qiáng)化固液提取過程頗具發(fā)展?jié)摿Φ男滦洼o助提取技術(shù)。（5）超聲波提取法超聲波作為一種先進(jìn)的提取方法，具有提取時間短、能耗低、效率高等特點(diǎn)，在生產(chǎn)中得到了廣泛的應(yīng)用。其主要原理就是超聲波產(chǎn)生“空化作用”，這種空化作用能夠產(chǎn)生局部的高溫高壓，并形成強(qiáng)大的沖擊波或高速射流，這種強(qiáng)大的高速射流能夠有效地減小、消除與水相之間的阻滯層，加大了傳質(zhì)效率。同時，高速射流對植物細(xì)胞組織產(chǎn)生一種物理剪切力，使

25、之變形、破裂并釋放出內(nèi)含物，這就大大加速了提取過程。另外，超聲波的許多次級效應(yīng)如熱效應(yīng)、溶化、擴(kuò)散、擊碎、化學(xué)效應(yīng)、生物效應(yīng)、凝聚效應(yīng)等也能加速植物有效成分在溶劑中的擴(kuò)散釋放，促進(jìn)植物有效成分與溶劑混合，有利于提取。（6）超濾法膜分離技術(shù)被公認(rèn)為現(xiàn)代分離技術(shù)領(lǐng)域中最先進(jìn)的技術(shù)之一，已廣泛應(yīng)用于化工、電子、環(huán)保、醫(yī)藥等領(lǐng)域。超濾（Ultrafiltration，UF）是膜分離科學(xué)的重要分支，其原理是以選擇性透過膜為分離介質(zhì)，在外界壓力作用下，原料組分選擇性地透過膜，以達(dá)到分離、提純的目的。將超濾膜用于多糖這種生物活性物質(zhì)的分離，不損害活性、分離效率高、能耗低、設(shè)備簡單、可連續(xù)生產(chǎn)、無污染等。2多

26、糖的分離和純化 （1）分級沉淀法 分步沉淀法是根據(jù)不同多糖在不同濃度低級醇、酮中具有不同溶解度的性質(zhì)，從小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮進(jìn)行分步沉淀。鹽析法是根據(jù)不同多糖在不同鹽濃度中溶解度不同而將其分離的一種方法。常用的鹽析劑有氯化鈉、氯化鉀、硫酸銨等，以硫酸銨最佳。金屬絡(luò)合物法是利用多糖能與銅、鋇、鈣、鉛離子形成絡(luò)合物而沉淀。常用的絡(luò)合劑有斐林試劑、氯化銅、氫氧化鋇和醋酸鉛等。季胺氫氧化物是一類乳化劑，與酸性多糖形成不溶性化合物，常用于分離酸性多糖。一般地說，酸性強(qiáng)或相對分子質(zhì)量大的多糖首先沉淀出來，所以控制季胺鹽的濃度能分離各種不同的酸性多糖。安絡(luò)小皮傘粗多糖的純化方法，在多糖溶液中加入

27、不同濃度乙醇溶液，得到多個多糖；天門冬冷水浸提物采用丙酮分級沉淀法得到3種多糖。（2）柱層析法 凝膠柱層析法常用的凝膠有葡聚糖凝膠（Sephadex）和瓊脂糖凝膠（Sepharose），以不同濃度的鹽溶液和緩沖溶液作為洗脫劑，從而使不同大小的多糖分子得到分離純化，但不適宜粘多糖的分離。一般生藥提取物得以分離多用Sepharose、DEAE-Toyopearl、Sephacryl、Sepha2dex精致得到各種多糖。如靈芝多糖、附子多糖、白術(shù)多糖、山藥多糖等。纖維素陰離子交換劑柱層析法常用的交換劑為DEAE-纖維素和ECTEOLA-纖維素，分類硼砂型和堿型兩種，洗脫劑可用不同濃度堿溶液、硼砂溶液

28、、鹽溶液，其優(yōu)點(diǎn)可吸附雜質(zhì)、純化多糖，并適用于分離各種酸性、中性多糖和粘多糖。如百合多糖、北沙參多糖、太子參多糖等。 （四）微波提取的原理及特點(diǎn)微波提取技術(shù)是利用微波的熱效應(yīng)對樣品及其有機(jī)溶劑進(jìn)行加熱，從而將目標(biāo)組分從樣品基體中分離出來的一種新型高效分離技術(shù)。與傳統(tǒng)提取技術(shù)相比，微波提取技術(shù)具有許多獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，被譽(yù)為“綠色提取技術(shù)”，并已成為實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。1微波提取的原理微波提取主要是利用微波強(qiáng)烈的熱效應(yīng)，但微波加熱方式不同于傳統(tǒng)的加熱方式。在傳統(tǒng)的加熱方式中，容器壁大多由熱的不良導(dǎo)體制成，熱由器壁傳導(dǎo)至溶液內(nèi)部需要一定的時間。此外，液體表面氣化而引起的對流傳熱將形成自內(nèi)而

29、外的溫度梯度，因而僅一小部分液體與外界溫度相當(dāng)。而微波加熱是一個內(nèi)部加熱過程，它不同于普通的外加熱方式將熱量由外向內(nèi)傳遞，而是同時直接作用于內(nèi)部和外部的介質(zhì)分子，使整個物料被同時加熱，即為“體加熱”過程，從而可克服傳統(tǒng)的傳導(dǎo)式加熱方式所存在的溫度上升較慢的缺陷。微波提取離不開合適的溶劑，因此微波提取可作為溶劑提取的輔助措施。溶劑提取法是根據(jù)中草藥中各種成分在溶劑中的溶解性能差異，選用對有效成分溶解度大，而對無效成分溶解度小的溶劑，將有效成分從藥材組織內(nèi)提取出來。采用微波協(xié)助提取，可以使溶劑提取過程更為有效。當(dāng)被提取物和溶劑共處于快速振動的微波電磁場中時，目標(biāo)組分的分子在高頻電磁波的作用下，以每

30、秒數(shù)十億次的高速振動產(chǎn)生熱能，使分子本身獲得巨大的能量而得以擺脫四周環(huán)境的束縛。當(dāng)環(huán)境存在一定的濃度差時，即可在非常短的時間內(nèi)實(shí)現(xiàn)分子自內(nèi)向外的遷移，這就是微波可在短時間內(nèi)達(dá)到提取目的的原因。微波能是一種能量形式，它在傳輸過程中可對許多由極性分子組成的物質(zhì)產(chǎn)生作用，并使其中的極性分子產(chǎn)生瞬時極化，并迅速生成大量的熱能，導(dǎo)致細(xì)胞破裂，其中的細(xì)胞液溢出并擴(kuò)散至溶劑中。從原理上說，傳統(tǒng)的溶劑提取法如浸漬法、滲漉法、回流提取法、連續(xù)回流提取法等均可加入微波進(jìn)行輔助提取，從而成為高效的提取方法。2微波提取的特點(diǎn)（1）試劑用量少、節(jié)能、污染小。（2）加熱均勻，且熱效率較高。傳統(tǒng)熱提取是以熱傳導(dǎo)、熱輻射等方

31、式自外向內(nèi)傳遞熱量，而微波提取是一種“體加熱”過程，即內(nèi)外同時加熱，因而加熱均勻，熱效率較高。微波提取時沒有高溫?zé)嵩?，因而可消除溫度梯度，且加熱速度快，物料的受熱時間短，因而有利于熱敏性物質(zhì)的提取。（3）微波提取不存在熱慣性，因而過程易于控制。（4）微波提取無需干燥等預(yù)處理，簡化了工藝，減少了投資。（5）微波提取的處理批量較大，提取效率高、省時。與傳統(tǒng)的溶劑提取法相比，可節(jié)省5090的時間。（6）微波提取的選擇性較好。由于微波可對提取物質(zhì)中的不同組分進(jìn)行選擇性加熱，因而可使目標(biāo)組分與基體直接分離開來，從而可提高提取效率和產(chǎn)品純度。（7）微波提取的結(jié)果不受物質(zhì)含水量的影響，回收率較高。3微波提取

32、在中草藥成份提取中的應(yīng)用（1）黃酮類物質(zhì)的提取黃酮類成分具有降壓、降血脂和抑制血小板聚集等功能，在大部分中藥中均存在。黃酮類化合物的傳統(tǒng)提取方法主要有水煎煮法、浸提法或索氏提取法，但費(fèi)時費(fèi)力且收率較低。微波提取在黃酮類物質(zhì)的提取上具有良好的效果，在提取過程中具有反應(yīng)高效性和強(qiáng)選擇性等特點(diǎn)。（2）生物堿的提取生物堿是生物體內(nèi)一類含氮有機(jī)物的總稱，多數(shù)生物堿具有較復(fù)雜的含氮雜環(huán)結(jié)構(gòu)和非凡而顯著的生理作用，是中草藥中的重要成分之一。（3）苷類物質(zhì)的提取微波對某些化合物具有一定的降解作用，且在短時間內(nèi)可使藥材中的酶滅活，因而用于提取苷類等成分時具有更突出的優(yōu)點(diǎn)。（4）萜類和揮發(fā)油的提取萜類化合物是一類

33、具有廣泛生物活性的天然藥物有效成分，植物中的揮發(fā)油大多富含單萜和倍半萜類化合物。揮發(fā)油的沸點(diǎn)較低，傳統(tǒng)提取工藝具有提取溫度高、提取時間長、易破壞有效成分的缺陷，致提取收率低。而微波提取可瞬間產(chǎn)生高溫，具有提取時間短、提取效率高等優(yōu)點(diǎn)。（5）多糖類物質(zhì)的提取中藥多糖是一類具有顯著生物活性的生物大分子物質(zhì)，許多多糖具有抗腫瘤、增強(qiáng)免疫力、抗衰老和抗病毒等作用，因而受到國內(nèi)外研究者的重視。與常規(guī)提取法相比，微波提取法在選擇性與提取時間上都表現(xiàn)出無可比擬的優(yōu)越性。（五）超聲波提取的原理及特點(diǎn)超聲波指頻率高于20kHz，人的聽覺閾以外的聲波。超聲波提取是利用超聲波具有的機(jī)械效應(yīng)，空化效應(yīng)和熱效應(yīng)，通過增

34、大介質(zhì)分子的運(yùn)動速度、增大介質(zhì)的穿透力以提取生物有效成分。近年來，超聲波技術(shù)在中藥制劑提取工藝中的應(yīng)用越來越受到關(guān)注。超聲波技術(shù)用于天然產(chǎn)物有效成分的提取是一種非常有效的方法和手段。作為中藥制劑取工藝的一種新技術(shù)，超聲波提取具有廣闊的前景。1超聲波提取的原理（1）機(jī)械效應(yīng)超聲波在介質(zhì)中的傳播可以使介質(zhì)質(zhì)點(diǎn)在其傳播空間內(nèi)產(chǎn)生振動，從而強(qiáng)化介質(zhì)的擴(kuò)散、傳播，這就是超聲波的機(jī)械效應(yīng)。超聲波在傳播過程中產(chǎn)生一種輻射壓強(qiáng)，沿聲波方向傳播，對物料有很強(qiáng)的破壞作用，可使細(xì)胞組織變形，植物蛋白質(zhì)變性；同時，它還可以給予介質(zhì)和懸浮體以不同的加速度，且介質(zhì)分子的運(yùn)動速度遠(yuǎn)大于懸浮體分子的運(yùn)動速度。從而在兩者間產(chǎn)生

35、摩擦，這種摩擦力可使生物分子解聚，使細(xì)胞壁上的有效成分更快地溶解于溶劑之中。（2）空化效應(yīng)通常情況下，介質(zhì)內(nèi)部或多或少地溶解了一些微氣泡，這些氣泡在超聲波的作用下產(chǎn)生振動，當(dāng)聲壓達(dá)到一定值時，氣泡由于定向擴(kuò)散（rectieddiffvsion）而增大，形成共振腔，然后突然閉合，這就是超聲波的空化效應(yīng)。這種氣泡在閉合時會在其周圍產(chǎn)生幾千個大氣壓的壓力，形成微激波，它可造成植物細(xì)胞壁及整個生物體破裂，而且整個破裂過程在瞬間完成，有利于有效成分的溶出。（3）熱效應(yīng)和其它物理波一樣，超聲波在介質(zhì)中的傳播過程也是一個能量的傳播和擴(kuò)散過程，即超聲波在介質(zhì)的傳播過程中，其聲能不斷被介質(zhì)的質(zhì)點(diǎn)吸收，介質(zhì)將所吸

36、收的能量全部或大部分轉(zhuǎn)變成熱能，從而導(dǎo)致介質(zhì)本身和藥材組織溫度的升高，增大了藥物有效成分的溶解速度。由于這種吸收聲能引起的藥物組織內(nèi)部溫度的升高是瞬間的，因此可以使被提取的成分的生物活性保持不變。2超聲波提取的特點(diǎn)（1）超聲波提取時不需加熱，避免了中藥常規(guī)煎煮法、回流法長時間加熱對有效成分的不良影響，適用于對熱敏物質(zhì)的提??；同時，由于其不需加熱，因而也節(jié)省了能源。（2）超聲波提取提高了藥物有效成分的提取率，節(jié)省了原料藥材，有利于中藥資源的充分利用，提高了經(jīng)濟(jì)效益。（3）溶劑用量少，節(jié)約了溶劑。（4）超聲波提取是一個物理過程，在整個浸提過程中無化學(xué)反應(yīng)發(fā)生，不影響大多數(shù)藥物有效成分的生理活性。（

37、5）提取物有效成分含量高，有利于進(jìn)一步精制。3超聲波提取在中草藥成份提取中的應(yīng)用中草藥原料所含成份相當(dāng)復(fù)雜，不僅有有效成份，還含有無效成份，原料提取的好壞直接關(guān)系到成品藥的治療效果。目前，中草藥有效成份提取的常見方法有浸漬（常溫浸漬、溫浸，煎煮）提取法、滲浸提取法、回流提取法等，提取時間長，提出率也低；多年實(shí)驗(yàn)研究證明，使用超聲波提取技術(shù)所需設(shè)備簡單，操作方便，提取時間短，提取率高，節(jié)能、節(jié)約藥材，無需加熱，具有很多常規(guī)提取方法無法比擬的優(yōu)點(diǎn)。研究表明，超聲波作用可激活某些酶與細(xì)胞參與的生理生化過程，從而提高酶的活性，加速細(xì)胞新陳代謝；超聲波用于降解殼多糖，速度快，成本低，氨基酸含量不變；用于

38、提取真菌多糖（如蟲草多糖、香菇多糖、猴頭多糖等）與傳統(tǒng)工藝相比，提出率高，反而過程無物料損失和副作用；超聲波還可以降解提取多葡萄糖等，靈芝多糖是一種實(shí)體木質(zhì)化的真菌多糖，通過超聲波處理，可使其相對結(jié)晶度從23.4降為0，使表面積增加85.5%，水解速度顯著增加。二、材料與方法（一）試驗(yàn)材料1藥材紅芪：于2008年9月采自甘肅隴西首陽山，取自甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)中草藥栽培與鑒定實(shí)驗(yàn)室。2試劑無水乙醇 天津市百世化工有限公司95%乙醇 萊陽市雙雙化工有限公司濃硫酸 分析純 白銀良友化學(xué)試劑有限公司苯酚 分析純 天津市凱通化學(xué)試劑有限公司三氯乙酸 分析純 上海三愛思試劑有限公司丙酮 分析純 天津福晨化學(xué)試劑

39、廠乙醚 分析純 天津市風(fēng)船化學(xué)試劑有限公司3儀器G2X-9240 MBE數(shù)顯鼓風(fēng)干燥機(jī) 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；電子分析天平AB104-N 梅特勒-托利多儀器有限公訴；格蘭仕WP750型微波爐 順德市格蘭仕微波爐電器有限公司；KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司；SHB-A循環(huán)水式多用真空泵 鄭州長城科工貿(mào)有限公司；數(shù)顯恒溫水浴鍋HH-4 國華電器有限公司；紫外可見分光光度計(jì)HV-9200 北京瑞利分析儀器公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-5286A 上海雅榮生化設(shè)備儀器有限公司；臺式離心機(jī)TDL-5-A 上海安亭科學(xué)儀器廠。（二）試驗(yàn)方法1工藝流程（由于采用微波-超聲波提取

40、法的多糖產(chǎn)率較高，故選用此法做進(jìn)一步的研究）2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制（1）葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取105至恒重的無水葡萄糖50mg，置于500ml的容量瓶中，加蒸餾水溶解定容至刻度，得濃度為0.1mg/ml的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。（2）苯酚溶液的配制苯酚為針狀無色結(jié)晶，水浴加熱，使其融化成液體后，量取25ml，移入500ml的容量瓶中，加蒸餾水定容，得到5%的苯酚溶液，移入棕色玻璃瓶中備用。（3）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制用移液槍吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2ml置于10ml的試管當(dāng)中，分別加蒸餾水至2.0ml。另取一10ml的試管，加蒸餾水2.0ml，作空白對照試驗(yàn)。再分別加入5%的

41、苯酚溶液1.0ml，搖勻，然后快速滴加濃硫酸5.0ml，再次搖勻后靜置5min，以使其充分顯色，然后放入水浴鍋中，沸水加熱15min，取出后冷卻至室溫。在490nm處，以蒸餾水的反應(yīng)液做空白，然后對六種樣品進(jìn)行吸光度的測定（見表1）。以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，用最小二乘法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得線性方程A = 0.667C - 0.077，線性相關(guān)系數(shù)R = 0.996（見圖5）15。 表1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定葡萄糖體積/ml00.20.40.60.81.01.2吸光度A00.0480.2120.3150.4530.5760.737圖5 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線3紅芪的預(yù)處理取紅芪干燥根，洗凈后，剪成3

42、厘米左右的小段，放入干燥箱中，溫度設(shè)定為60，干燥12小時后，取出粉碎，然后用40目過篩，得到實(shí)驗(yàn)所需的紅芪粉末。4多糖的提?。?）水提法稱取紅芪粉末1.000g，用濾紙包裹置于索氏提取器中，加入200ml無水乙醇溶液在80 的水浴中回流4小時；過濾后，將濾渣用100ml蒸餾水在80的水浴中提取4小時；合并兩次提取液，移至500ml容量瓶中，將殘?jiān)盟礈?次，洗滌液并入容量瓶中，定容作為供試液；精密吸取0.2ml供試液，向其中加入蒸餾水1.8ml，5苯酚溶液1.0ml，迅速滴加濃硫酸5.0ml，搖勻后靜置5min，置沸水浴中加熱15min，取出冷卻至室溫，在490nm處，通過紫外分光光度計(jì)測

43、定吸光度16。（2）微波提取法稱取紅芪粉末1.000g，用200ml無水乙醇溶液浸泡，微波中火加熱5min；過濾后，在濾渣中加入100ml蒸餾水，微波中火加熱5min；合并兩次提取液，移至500ml容量瓶中，將殘?jiān)盟礈?次，洗滌液并人容量瓶中，定容作為供試液；精密吸取0.2ml供試液，向其中加入蒸餾水1.8ml，5苯酚溶液1.0m1，迅速滴加濃硫酸5.0ml，搖勻后靜置5min，置沸水浴中加熱15min，取出后冷卻至室溫，在490nm處，通過紫外分光光度計(jì)測定吸光度17。（3）超聲波提取法稱取紅芪粉末1.000g，用200ml無水乙醇溶液浸泡，超聲提取40min，溫度設(shè)為50；過濾后，在濾

44、渣中加入100ml蒸餾水，超聲40min，溫度50；合并兩次提取液，移至500ml容量瓶中，將殘?jiān)盟礈?次，洗滌液并人容量瓶中，定容作為供試液；精密吸取0.2ml供試液，向其中加入蒸餾水1.8ml，5苯酚溶液1.0m1，迅速滴加濃硫酸5.0ml，搖勻后靜置5min，置沸水浴中加熱15min，取出后冷卻至室溫，在490nm處，通過紫外分光光度計(jì)測定吸光度17。（4）微波-超聲波提取法為了更好的提高多糖提取的產(chǎn)率，在超聲波提取之前，先對樣品進(jìn)行短暫的微波處理，利用微波的能量形式，達(dá)到輔助提取的作用，從而形成更高效的提取方法。稱取紅芪粉末1.000g，用200ml無水乙醇溶液浸泡，微波中火加熱2

45、min，超聲提取40min溫度設(shè)為50；過濾后，在濾渣中加入100ml蒸餾水，微波中火加熱2min，超聲40min，溫度50；合并兩次提取液，移至500ml容量瓶中，將殘?jiān)盟礈?次，洗滌液并人容量瓶中，定容作為供試液；精密吸取0.2ml供試液，向其中加入蒸餾水1.8ml，5苯酚溶液1.0m1，迅速滴加濃硫酸5.0ml，搖勻后靜置5min，置沸水浴中加熱15min，取出后冷卻至室溫，在490nm處，通過紫外分光光度計(jì)測定吸光度1820。5多糖的分離純化（1）三氯乙酸法去除蛋白質(zhì)在多糖水溶液中加入10%三氯乙酸，調(diào)pH:3，在10條件下放置過夜，離心（3000r/min，30min），棄去沉淀

46、，即得無蛋白質(zhì)的多糖溶液21 。（2）多糖的分離向除去蛋白質(zhì)的多糖溶液中加入4倍體積的95%乙醇沉淀，靜置24h，離心（3000r/min，30min)，棄去上清夜，固態(tài)物用95%乙醇，無水乙醇，丙酮，乙醚依次進(jìn)行洗滌，顏色分別由黃色洗至近無色，于60恒溫干燥24小時，即為紅芪多糖粗品。（3）多糖的純化將紅芪多糖粗品溶于熱水中使其完全溶解，過濾棄去沉淀，濃縮溶液，向多糖溶液中加入4倍體積的95%乙醇沉淀，靜置24h。離心（3000r/min，30min)，棄去上清液，固態(tài)物用95%乙醇，無水乙醇，丙酮，乙醚依次進(jìn)行洗滌，顏色洗至近無色，于60恒溫干燥24小時，即為紅芪多糖。最后稱量得70mg。

47、6換算因子的測定（1）標(biāo)準(zhǔn)多糖溶液的配制稱取紅芪多糖20mg，置于100ml容量瓶中，用蒸餾水溶解并定容。（2）換算因素的吸光度測定吸取0.2ml配制好的多糖溶液，向其中加入蒸餾水1.8ml，5苯酚溶液1.0 ml，迅速滴加濃硫酸5.0ml，搖勻后靜置5min，置沸水浴中加熱15min，取出后冷卻至室溫，在490nm處，通過紫外分光光度計(jì)測定吸光度（見表2），測得平均吸光度A=0.452（n=3）。 表2 換算因素吸光度測定結(jié)果重復(fù)重復(fù)重復(fù)重復(fù)吸光度A0.4190.4640.473平均吸光度A0.452（3）計(jì)算換算因素按下式計(jì)算換算因素，F(xiàn)=CDW式中W為多糖重量（mg），C為多糖中葡萄糖的

48、濃度（mgml），D為多糖的稀釋倍數(shù)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，最后算得F=1.106。 三、結(jié)果與分析實(shí)驗(yàn)分別采用水提法、微波提取法、超聲波提取法和微波-超聲波提取法來提取紅芪多糖，并用硫酸-苯酚法進(jìn)行吸光度的測定，按下式計(jì)算樣品溶液中多糖的含量, 多糖含量%=CDFW100%式中，C為供試溶液中葡萄糖的濃度（mg/ml）；D為供試溶液的稀釋倍數(shù)；F為換算因子；W為供試樣品重量（mg）。表3 四種多糖提取方法的比較結(jié)果提取方法重復(fù)重復(fù)重復(fù)平均吸光度A多糖提取率/%水提法0.4250.3760.3930.3983.151微波提取法0.7310.7770.7330.7475.465超聲波提取法0.813

49、0.8370.7890.8135.903微波-超聲波提取法0.9750.9711.0120.9867.051由表3可以看出，在水提法、微波提取法、超聲波提取法和微波-超聲波提取法這四種提取方法中，水提法得到的多糖含量最小，僅為3.151%，微波-超聲波提取法的多糖含量最高，為7.051%。由此可見，用微波-超聲波提取多糖的方法最佳，而造成提取效率差異的主要原因，是由于在微波的能量形式影響下，細(xì)胞破裂，使細(xì)胞內(nèi)的多糖成份在超聲波的強(qiáng)烈振動下能夠更容易更充分的溶解并擴(kuò)散在溶劑之中。所以，我們將主要針對微波-超聲波提取法進(jìn)行提取工藝的研究22。由于在微波-超聲波提取法的過程中，微波僅僅是起到一種輔助

50、作用，是為了在傳輸過程中使其中的極性分子產(chǎn)生瞬時極化，并迅速生成大量的熱能，導(dǎo)致細(xì)胞破裂，使其中的細(xì)胞液溢出并擴(kuò)散至溶劑中，從而達(dá)到提高多糖提取產(chǎn)率的目的。所以，我們將主要針對之后的超聲波過程進(jìn)行單因素試驗(yàn)。（一）單因素試驗(yàn)1超聲溫度對提取率的影響稱取6份1.000g的紅芪粉末，按上述的試驗(yàn)方法，將超聲溫度分別設(shè)為20、30、40、50、60、70，在490nm處，通過紫外分光光度計(jì)測定吸光度（見表4），并計(jì)算得率。以超聲溫度為橫坐標(biāo)，提取率為縱坐標(biāo)，繪制超聲溫度提取率曲線。表4 不同超聲溫度下的提取率測定處理（溫度/）提取率/%平均值/%字母標(biāo)記重復(fù)重復(fù)重復(fù)5%水平1%水平202.3392.

51、2672.2792.295eE304.6244.5574.5684.583dD406.2916.2176.2576.255cC507.1016.9357.0967.044aA607.0836.9817.0087.024aA706.6586.5226.5996.593bB由圖6可見,在50 之前,隨著溫度的升高,多糖的提取率也隨之升高,但在50 之后,提取率有所下降。這是由于溫度升高,加速了紅芪多糖的水解,因而影響了紅芪多糖的得率。所以在紅芪多糖的提取過程中,適宜的溫度對提取率有很大的影響,以溫度50 較好。圖 6 超聲溫度提取率曲線2超聲時間對提取率的影響稱取6份1.000g的紅芪粉末，按上述

52、的試驗(yàn)方法，將超聲時間分別定為10min、20min、30min、40min、50min、60min，在490nm處，通過紫外分光光度計(jì)測定吸光度，并計(jì)算得率（見表5）。以超聲時間為橫坐標(biāo)，提取率為縱坐標(biāo)，繪制超聲時間提取率曲線。表5 不同超聲時間下的提取率測定處理（時間/min）提取率/%平均值/%字母標(biāo)記重復(fù)重復(fù)重復(fù)5%水平1%水平102.0862.2012.1602.149eD204.6134.5204.5774.570dC306.1966.0776.1326.135cB407.1887.0827.2017.157abA507.2517.1797.1587.196aA607.1157.0

53、037.0747.064bA由圖7可見，隨著提取時間的延長,吸光度逐漸增大,即多糖的提取率逐漸增大。但40min 之后,增加幅度比較小,40min時的提取率為7.157%,50min時的提取率為7.196%,從40min增加到50min,提取率只增加了0.039%。而在60min時的提取率為7.064%,反而有所降低。原因可能是由于超聲波具有較強(qiáng)的機(jī)械剪切作用,長時間的作用會使大分子的多糖斷裂,從而在后處理的過程中的損失增大而影響多糖的提出率。另外,考慮到提取時間過長,會延長生產(chǎn)周期,增加生產(chǎn)成本,所以超聲時間以40min為宜。圖 7 超聲時間吸光度曲線3液料比對提取率的影響稱取6份1.000

54、g的紅芪粉末，分別用50ml、100ml、150ml、200ml、250ml、300ml無水乙醇溶液浸泡，按上述的試驗(yàn)方法，在490nm處，通過紫外分光光度計(jì)測定吸光度，并計(jì)算得率（見表6）。以液料比為橫坐標(biāo)，提取率為縱坐標(biāo)，繪制液料比提取率曲線。表6 不同液料比下的提取率測定處理（液料比）提取率/%平均值/%字母標(biāo)記重復(fù)重復(fù)重復(fù)5%水平1%水平50:12.3952.2762.3132.328dD100:14.3894.2914.3134.331cC150:15.8005.6885.7235.737bB200:17.3157.2347.2587.269aA250:17.4487.3117.3497.376aA300:17.4607.3217.3867.389aA由圖8可見，隨著液料比的增加提取率逐漸增大。但當(dāng)液料比達(dá)到200:1以后,提取率增加幅度比較小。從200到300只增加了0.119。考慮到加水量增加,會延長后緒工作時間,增加生產(chǎn)成本,浪費(fèi)水資源,所以液料比定為200:123。圖 8 液料比吸光度曲線（二）正交試驗(yàn)根據(jù)單因素試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，