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1、,培養(yǎng)基的pH因外植調(diào)節(jié)pH,大多數(shù)植物的pH要求內(nèi)。2.可以通、等措施預(yù)防褐變的發(fā)生。時(shí),外植體可以o4.應(yīng)用微尖嫁接f0*是發(fā)生,另*是植物組織培養(yǎng)試卷一、名詞解釋:(每小題3分,共15分)1 .初代培養(yǎng)基:是指用來(lái)第一次接種外植體的培養(yǎng)基。2 .脫分化:一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài),并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài),并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。3 .液體培養(yǎng):指在進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中不加瓊脂等凝固劑,一般需要通過(guò)振蕩等方法解決培養(yǎng)基的通氣情況。4 .細(xì)胞全能性:一個(gè)細(xì)胞能廣生一個(gè)完整植株的固有能力,或植物細(xì)胞具有全部的遺傳信息,不論是性細(xì)胞
2、還是體細(xì)胞,在特定環(huán)境下,能進(jìn)行表達(dá)而產(chǎn)生一個(gè)獨(dú)立完整的個(gè)體。5 .再分化:愈傷組織形成不定芽或不定根或胚狀體。二、填空(每空1分,共40分)1.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,最常用的培養(yǎng)基是體的來(lái)源不同而異,常用和調(diào)節(jié)在范圍過(guò)、3.植物組織培養(yǎng)是、技術(shù)進(jìn)行脫毒培養(yǎng)無(wú)病毒苗,主要程序?yàn)?.組織培養(yǎng)植株的再生途徑有兩條:發(fā)生。6.在配制培養(yǎng)基時(shí),可以在培養(yǎng)基中添加,利用其吸附能力,可以降低褐變的發(fā)生,但它對(duì)物質(zhì)的吸附。7.培養(yǎng)基的滅菌要求壓力為、溫度為、維持時(shí)間為。8.組織培養(yǎng)中常用的生長(zhǎng)素有口引哆乙酸(IAA),2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),引哆丁酸(舊A),蔡乙酸(NAA,它們的作用強(qiáng)弱順序?yàn)閛
3、9.莖尖微繁殖過(guò)程一般包括五個(gè)階段,即、。10.莖尖分生組織培養(yǎng)的目的主要是,其莖尖一般取毫米。為了使脫毒效果更好,可以將莖尖分生組織培養(yǎng)與結(jié)合起來(lái)。脫毒處理的試管苗,在用于生產(chǎn)之前,必須進(jìn)行。11.污染的原因從病源菌上分析主要有兩大類、。三、判斷正誤,并改錯(cuò)。(每小題2分,共20分)1.一般將微量元素母液均配制成10倍,在配制培養(yǎng)基時(shí),使用量為10ml/Lo細(xì)胞分裂素/生長(zhǎng)素的比值較高時(shí),有利于愈傷組織的誘導(dǎo)。2.對(duì)于金邊虎尾蘭等遺傳學(xué)上的嵌合體植物,要是組織培養(yǎng)繁殖的植株保持原有的園藝價(jià)值,只能通過(guò)葉培養(yǎng)。3.植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí),材料也容易褐變,生長(zhǎng)素有刺激多酚氧化酶活性提高的作用
4、。4 .利用莖尖分生組織進(jìn)行脫毒培養(yǎng)時(shí),莖尖外植體大小與脫毒效果成正比。5 .某些植物通過(guò)愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無(wú)病毒苗。6 .無(wú)病毒植株不具有抗病毒的能力,而且在清除病毒之后,體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)和生理狀況發(fā)生改變,因而對(duì)其他病毒和病原體的侵染更為敏感,因此在種植脫毒苗的一定要隔離種植。7 .微繁不定芽的產(chǎn)生有兩個(gè)途徑,一是不定芽不通過(guò)愈傷組織由外植體直接產(chǎn)生,二是外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織,由愈傷組織上產(chǎn)生不定芽。后一途徑相對(duì)較為優(yōu)越,因?yàn)橥ㄟ^(guò)愈傷組織不會(huì)出現(xiàn)一些突變。8 .細(xì)胞的全能性,可以通過(guò)分裂細(xì)胞的脫分化和再分化過(guò)程得以體現(xiàn)。9 .培養(yǎng)基中的鐵鹽,常用不易分解的乙二胺四乙酸鐵螯合物,以防在pH較高時(shí)
5、鐵被氧化為不溶的氫氧化鐵。四、簡(jiǎn)答題:(每小題5分,共15分)1 .植物生長(zhǎng)物質(zhì)如何調(diào)控外植體形態(tài)發(fā)生答案要點(diǎn):在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,常用的植物激素有生長(zhǎng)素類和細(xì)胞分裂素類,在高生長(zhǎng)素(如使用高濃度2,4-D)時(shí)能促進(jìn)外植體的脫分化,在生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值較高時(shí),促進(jìn)不定根的發(fā)生,比值較低時(shí)促進(jìn)不定芽的發(fā)生。2 .為什么要對(duì)脫毒苗進(jìn)行多次檢定答案要點(diǎn):由莖尖分生組織培養(yǎng)獲得的試管苗,經(jīng)第一次擴(kuò)繁后要對(duì)試管苗進(jìn)行病毒檢測(cè),以確定材料的脫毒情況。因?yàn)閯內(nèi)∏o尖的大小直接關(guān)系到脫毒效果,一船剝?nèi)〉那o尖愈小成苗率愈低,但脫毒率高,而培養(yǎng)的莖尖愈大,成苗率愈高,但脫毒率低。脫毒苗中病毒有可能再次出現(xiàn),病
6、毒的再現(xiàn)可能有三方面的原因,一是脫毒不徹底,脫毒后試管苗血清檢測(cè)沒(méi)有病毒反映,是因?yàn)橹仓牦w內(nèi)病毒含量非常少,以致檢測(cè)不到,試管苗多次繼代后,病毒逐漸積累,從而再次出現(xiàn)病毒侵染;二是一些弱系病毒或一些暫時(shí)沒(méi)有條件檢測(cè)到的病毒,在強(qiáng)系病毒脫掉后快速繁殖造成危害,三是由于操作及其它一些原因造成的病毒再次侵染。3 .莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)的目的和取材大小可分為哪幾種類型各有何特點(diǎn)答案要點(diǎn):莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為莖尖分生組織培養(yǎng)和普通莖尖培養(yǎng)兩種類型。莖尖分生組織培養(yǎng)主要是指對(duì)莖尖長(zhǎng)度不超過(guò)mm最小只有幾十微米的莖尖進(jìn)行培養(yǎng),這種培養(yǎng)可獲得無(wú)病毒植株。但這樣小的莖點(diǎn)分離實(shí)際上是很困難的,而且成苗
7、時(shí)間也很長(zhǎng),需要一年乃至更長(zhǎng)的時(shí)間。因此在莖尖分生組織培養(yǎng)中往往采用帶有l(wèi)2個(gè)葉原基的生長(zhǎng)錐進(jìn)行培養(yǎng)。普通莖尖培養(yǎng)是指對(duì)幾毫米乃至幾十毫米長(zhǎng)的莖尖、芽尖及側(cè)芽的培養(yǎng),這類莖尖的培養(yǎng)技術(shù)簡(jiǎn)單,操作方便,莖尖容易成活,成苗所需要的時(shí)間短,能加快繁殖速度。五、綜述題(每小題10分,共10分)試管苗移栽時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)1.保持試管苗的水分平衡2.要選擇合適的基質(zhì)3.要防止雜菌滋生4.要注意光、溫的管理。二、填空(每空1分,共40分)1.MS、HCLNaOH2.適宜外植體、最佳的培養(yǎng)基、連續(xù)轉(zhuǎn)接、加抗氧化劑、加活性炭。3.器官、組織、細(xì)胞、去掉細(xì)胞壁的原生質(zhì)體4.無(wú)菌砧木、莖尖準(zhǔn)備、嫁接、嫁接苗培養(yǎng)、移
8、植5.器官、胚胎6.活性炭、無(wú)選擇性。7.10005000Lx、16h、252C8.2,4-D、NAA舊A、IAA9.無(wú)菌外植體的建立、芽的增殖、中間繁殖體的增殖、誘導(dǎo)生根、試管苗的移栽。10.脫毒、熱處理、病毒檢定11.細(xì)菌、真菌三、判斷正誤,并改錯(cuò)。1.X一般將微量元素母液均配制成100倍,在配制培養(yǎng)基時(shí),使用量為10ml/Lo2.X細(xì)胞分裂素/生長(zhǎng)素的比值較高時(shí),有利于愈傷組織芽的誘導(dǎo)。3.X對(duì)于金邊虎尾蘭等遺傳學(xué)上的嵌合體植物,要是組織培養(yǎng)繁殖的植株保持原有的園藝價(jià)值,只能通過(guò)莖尖和側(cè)芽培養(yǎng)。4.X植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí),材料也容易褐變,細(xì)胞分裂有刺激多酚氧化酶活性提高的作用5.X
9、利用莖尖分生組織進(jìn)行脫毒培養(yǎng)時(shí),莖尖外植體大小與脫毒效果成反比。6.,某些植物通過(guò)愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無(wú)病毒苗。7.,無(wú)病毒植株不具有抗病毒的能力,而且在清除病毒之后,體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)和生理狀況發(fā)生改變,因而對(duì)其他病毒和病原體的侵染更為敏感,因此在種植脫毒苗的一定要隔離種植。8.X微繁不定芽的產(chǎn)生有兩個(gè)途徑,一是不定芽不通過(guò)愈傷組織由外植體直接產(chǎn)生,二是外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織,由愈傷組織上產(chǎn)生不定芽。前一途徑相對(duì)較為優(yōu)越,因?yàn)橥ㄟ^(guò)愈傷組織會(huì)出現(xiàn)一些突變。9.,細(xì)胞的全能性,可以通過(guò)成熟細(xì)胞的脫分化和再分化過(guò)程得以體現(xiàn)。10.,培養(yǎng)基中的鐵鹽,常用不易分解的乙二胺四乙酸鐵螯合物,以防在pH較高時(shí)鐵被氧化
10、為不溶的氫氧化鐵。一、填空:(10個(gè)小題,每小題2分,共20分)1、組織培養(yǎng)植株再生的途徑主要有兩條:一是,另一個(gè)是o2、試管苗的生態(tài)環(huán)境與外界環(huán)境條件相比有四大差異:即。3、B5培養(yǎng)基特點(diǎn)是;MS培養(yǎng)基的特點(diǎn)是o4、使用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)時(shí)要注意:、o5、莖尖分生組織培養(yǎng)主要是對(duì)莖尖進(jìn)行培養(yǎng),目的是o6、由胚乳培養(yǎng)得到的植株,除少數(shù)是一倍體外,多數(shù)是由細(xì)胞組成的嵌合體。7、受精胚珠培養(yǎng)的目的:一是,二是。8、是檢測(cè)花粉發(fā)育時(shí)期的簡(jiǎn)便有效方法,常用染色劑是o9、離體培養(yǎng)的花粉粒成苗途徑與花藥培養(yǎng)相同,即有和兩條途徑。10、鑒定雜種植株的方法有、和0二、名詞解釋:(10個(gè)小題,每小題2分,共20分
11、)植物組織培養(yǎng):將植物的離體器官、組織、細(xì)胞放在離體無(wú)菌條件下,在人工控制的環(huán)境條件下,培養(yǎng)在人工配置培養(yǎng)基上,使其生長(zhǎng)、分化成植株的過(guò)程。外植體:由活體植物體上提取下來(lái)的,接種在培養(yǎng)基上的無(wú)菌細(xì)胞、組織或器官等。微尖嫁接技術(shù):指在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)實(shí)生砧木,嫁接無(wú)病毒莖尖以培養(yǎng)脫毒苗的技術(shù)。脫分化:將已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體的抑制性影響下解脫出來(lái),恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性?;ㄋ幣囵B(yǎng):是將花粉發(fā)育至一定階段的花藥接種到人工培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),以形成花粉胚或愈傷組織進(jìn)而分化成植株的技術(shù)?;ǚ叟囵B(yǎng):是將花粉從花藥中分離出來(lái)進(jìn)行離體培養(yǎng)的過(guò)程。平板培養(yǎng)法:把單個(gè)細(xì)胞與融化的瓊脂培養(yǎng)基均勻混合,并平
12、鋪一薄層在培養(yǎng)皿底上的培養(yǎng)方法。無(wú)病毒苗:指不含該種植物的主要危害病毒,即經(jīng)檢測(cè)主要病毒在植物體內(nèi)的存在表現(xiàn)陰性反應(yīng)的苗木無(wú)土栽培:也稱水培,就是不用土壤,而用無(wú)機(jī)化肥溶液,即營(yíng)養(yǎng)液來(lái)栽培植物的技術(shù)。連續(xù)培養(yǎng):指在培養(yǎng)過(guò)程中,以不斷抽取懸浮培養(yǎng)物并注入等量新鮮培養(yǎng)基,使培養(yǎng)物不斷得到養(yǎng)分補(bǔ)充,保持其恒定體積的培養(yǎng)基。胚狀體:指在組織培養(yǎng)中,由一個(gè)非合子細(xì)胞(體細(xì)胞),經(jīng)過(guò)胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)育過(guò)程形成的具有雙極性的胚狀結(jié)構(gòu)。三、選擇題:(單項(xiàng)選擇題,10個(gè)小題,每小題分,共15分)1、將細(xì)胞分裂素類物質(zhì)配制成ml的母液時(shí),可先用少量的()溶解,再定容到所需的體積。A、95%酒精B、NaOHC、85
13、%酒精D、HCl2、外植體接種時(shí),刀、剪、鑲子等用具一般在使用前浸泡在()中,用時(shí)在火焰上灼燒滅菌,冷卻后使用。A、70%酒精B、85%酒精C、95%酒精D、%升汞3、KNO3和(NH4)2SO4含量高,不含鋁的培養(yǎng)基是()。A、White培養(yǎng)基B、N6培養(yǎng)基C、MS培養(yǎng)基D、B5培養(yǎng)基4、培養(yǎng)室的濕度一般保持在()。A、50%-60%B、60%-70%C、70%-80%D、80%-90%5、培養(yǎng)基進(jìn)行高壓滅菌時(shí),當(dāng)壓力升到108kPa時(shí)維持15-20min,即可達(dá)到滅菌目的。此時(shí)滅菌鍋內(nèi)的溫度可達(dá)()。A、101CB、110CC、121CD、120C6、瓊脂在固體培養(yǎng)基中的用量一般為()g/
14、L。A、6-10B、C、2-6D、7、進(jìn)行莖尖培養(yǎng)脫毒時(shí),通常以帶1-3個(gè)幼葉原基的莖尖作外植體較合適。則莖尖的長(zhǎng)度約為()。A、B、C、D、8、適合水稻、小麥、玉米等禾谷類作物花藥培養(yǎng)的培養(yǎng)基是()。A、MS培養(yǎng)基B、B5培養(yǎng)基C、N6培養(yǎng)基D、White培養(yǎng)基9、在細(xì)胞懸浮液成批培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞數(shù)目會(huì)不斷發(fā)生變化,其中細(xì)胞數(shù)目迅速增加,增長(zhǎng)速率保持不變的是()。A、減慢期B、延遲期C、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期D、靜止期10、在組織培養(yǎng)中,可通過(guò)()獲得單倍體植株。A、受精胚珠的培養(yǎng)B、胚培養(yǎng)C、未授粉子房的培養(yǎng)D、胚乳培養(yǎng)四、簡(jiǎn)答題:(5個(gè)小題,每小題5分,共25分)1、什么是植板率小細(xì)胞團(tuán)的計(jì)數(shù)方法有
15、幾種植板率是指已形成細(xì)胞團(tuán)的單細(xì)胞與接種總細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)。小細(xì)胞團(tuán)的計(jì)數(shù)方法:在低倍顯微鏡直接計(jì)算視野中的小細(xì)胞團(tuán)數(shù)。細(xì)胞團(tuán)顯影法。在暗室中,在平板下放一張印相紙,打開(kāi)平板上方的光源,平板上的細(xì)胞團(tuán)就印到相紙上,然后沖洗相紙即得細(xì)胞團(tuán)呈白色、培養(yǎng)基呈淡黑色的照片,再計(jì)算白點(diǎn)的數(shù)目,即為形成細(xì)胞團(tuán)的數(shù)目。2、試管苗與常規(guī)苗相比有哪些特點(diǎn)生長(zhǎng)細(xì)弱;(2)光合作用差(3)葉片氣孔數(shù)目少,活性差(4)根的吸收功能弱(5)對(duì)逆境的適應(yīng)和抵抗能力差3、闡述外植體的成苗途徑。1)外植體先形成愈傷組織,再形成完整植株(1)同時(shí)長(zhǎng)芽和根(2)先長(zhǎng)芽,再長(zhǎng)根(3)先長(zhǎng)根,再長(zhǎng)芽2)形成胚狀體,再發(fā)育成完整植株3)
16、外植體直接形成芽和根。4、目前鑒定脫毒苗的方法有哪些直接檢測(cè)法;指示植物法;抗血清鑒定法;分子生物學(xué)鑒定法:1、雙鏈RNA法(dsRNA):2、互補(bǔ)DNA(cDNA)檢測(cè)法:電鏡檢查法5、試管苗的生根培養(yǎng)時(shí)應(yīng)注意哪些方面1)用無(wú)機(jī)鹽濃度低的White及1/2,1/3或1/4MS、B5培養(yǎng)基2)適當(dāng)加大生長(zhǎng)素-NAA的濃度,不用或少用細(xì)胞分裂素。也可在無(wú)激素的培養(yǎng)基上生根。3)降低蔗糖的濃度到,以增強(qiáng)植株的自養(yǎng)能力。4)加入1%左右的活性碳;以免培養(yǎng)基過(guò)硬5)將光強(qiáng)度增加到3000-10000lux,以提高小植株的光合能力6)光周期可用24小時(shí)光照或16小時(shí),8小時(shí)黑暗以利于形態(tài)建成。五、論述題
17、:(3個(gè)小題,任選2個(gè),每小題10分,共20分)1、無(wú)菌操作接種外植體時(shí),應(yīng)注意哪些方面在接種4h前用甲醛熏蒸接種室;(2)在接種前15-20min,打開(kāi)超凈工作臺(tái)的風(fēng)機(jī)以及臺(tái)上的紫外燈;(3)接種員先洗凈雙手,在緩沖間換好專用實(shí)驗(yàn)服,并換穿拖鞋等;(4)上工作臺(tái)后,用酒精棉球擦拭雙手,特別是指甲處。然后70%酉精噴霧降塵,并擦拭工作臺(tái)面;(5)接種工具蘸95%酉精,灼燒;(6)接種時(shí)將試管斜著,使試管口在酒精燈火焰上轉(zhuǎn)動(dòng),灼燒數(shù)秒鐘。接完種后,將管口在火焰上再灼燒數(shù)秒鐘。(7)接種時(shí),接種員雙手不能離開(kāi)工作臺(tái),不能說(shuō)話、走動(dòng)和咳嗽等;(8)接種完畢后要清理干凈并用酒精擦工作臺(tái)。2、如何純化分
18、離的植物原生質(zhì)體并鑒定其活力原生質(zhì)體的純化:1)離心沉淀法:應(yīng)用原生質(zhì)體的比重大于溶液的性質(zhì),將原生質(zhì)體沉于底部。2)漂浮法:應(yīng)用滲透劑含量較高的洗滌液使原生質(zhì)體漂浮于液體表面。3)界面法:選用兩種不同滲透濃度的溶液,使原生質(zhì)體介于兩種溶液之間。原生質(zhì)體活力的測(cè)定:1)、形態(tài)識(shí)別:形態(tài)上完整,呈圓形,含有飽滿的細(xì)胞質(zhì),顏色鮮艷的即為存活的原生質(zhì)體。2)、染色識(shí)別:1、酚蕃紅或Evans藍(lán)染色,有活力的不被染色,死亡的被染上色。2、雙醋酸鹽熒光素(FDA)染色法:熒光顯微鏡下有熒光的即為有活性的原生質(zhì)體。3、無(wú)土栽培過(guò)程中應(yīng)注意哪些問(wèn)題(1)、配制營(yíng)養(yǎng)液時(shí),忌用金屬容器,更不能用它來(lái)存放營(yíng)養(yǎng)液,
19、最好使用玻璃、搪瓷、陶瓷器皿。(2)、配制營(yíng)養(yǎng)液時(shí)如使用自來(lái)水,應(yīng)加入少量的乙二胺四乙酸鈉或腐殖酸鹽化合物來(lái)處理水中氯化物和硫化物。(3)基質(zhì)應(yīng)選用具有保水性、排水性和一定強(qiáng)度及穩(wěn)定性,而且無(wú)害的物質(zhì)。(4)在栽培中,需經(jīng)常測(cè)營(yíng)養(yǎng)液中的pH,使其保持恒定。(5)在水培中,植物需從營(yíng)養(yǎng)液中吸氧,注意增加營(yíng)養(yǎng)液中氧的含量。一、填空:(10個(gè)小題,每小題2分,共20分)1、體細(xì)胞胚胎發(fā)生,器官發(fā)生2、高溫、高濕、弱光和無(wú)菌3、含較低的鏤鹽,較高的硝酸鹽和鹽酸硫胺素;無(wú)機(jī)鹽的濃度高4、種類和濃度、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值5莖尖長(zhǎng)度不超過(guò),最小只有幾十微米的,獲得無(wú)病毒植株。6、三,各種倍性7、用來(lái)打破
20、種子的休眠,挽救胚的發(fā)育,以獲得雜交種8、壓片染色法,醋酸洋紅9、胚狀體成苗,愈傷組織再分化成苗10、形態(tài)學(xué)鑒定、細(xì)胞學(xué)觀察、DNA內(nèi)切圖譜分析、同工酶分析三、選擇題一、填空:(10個(gè)小題,每小題2分,共20分)1、原生質(zhì)體的分離方法有和o2、胚胎培養(yǎng)包括03、White培養(yǎng)基特點(diǎn)是;N6培養(yǎng)基的特點(diǎn)是。4、進(jìn)行紙橋培養(yǎng)的最大優(yōu)點(diǎn)是;缺點(diǎn)是o5、組織培養(yǎng)時(shí),應(yīng)選擇具有外植體。6、花藥和花粉培養(yǎng)時(shí),適宜的花粉發(fā)育時(shí)期是o7、在細(xì)胞培養(yǎng)中,常由分散性較好的來(lái)制備單細(xì)胞,也可以用從植物不同組織直接制備單細(xì)胞。8、原生質(zhì)體培養(yǎng)時(shí)常用的三個(gè)指標(biāo):、和。9、原生質(zhì)體融合的方法有、和。10、細(xì)胞全能性學(xué)說(shuō)的
21、內(nèi)容為:0二、名詞解釋:(每小題2分,共20分)1、外植體:是指植物組織培養(yǎng)中的各種接種材料。包括植物體的各種器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等。2、愈傷組織培養(yǎng):是指將母體植株上的各個(gè)部分切下,形成外植體,接種到無(wú)菌的培養(yǎng)基上,進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)、生長(zhǎng)和發(fā)育的一門(mén)技術(shù)。3、胚培養(yǎng):是指將胚從種子、子房或胚珠中分離出來(lái),在進(jìn)行組織培養(yǎng),使其生長(zhǎng)發(fā)育形成幼苗的過(guò)程。4、看護(hù)培養(yǎng)法:指用一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織來(lái)看護(hù)單個(gè)細(xì)胞,并使其生長(zhǎng)和增殖的方法。5、體細(xì)胞雜交:即原生質(zhì)體融合,就是使分離下來(lái)的不同親本的原生質(zhì)體,在人工控制的條件下,像性細(xì)胞受精作用那樣互相融合成一體。6、快速繁殖(微繁殖):用組織培養(yǎng)的
22、方法,使植物的部分器官、組織在人工控制的適宜條件下,迅速擴(kuò)大培養(yǎng),并移植到溫室或農(nóng)田繁殖出大量幼苗的繁殖方法。7、紙橋培養(yǎng)法:用酒杯狀的濾紙代替瓊脂,使杯底朝上塞入試管中,與液體培養(yǎng)基接觸,將離體莖尖置于濾紙上方進(jìn)行培養(yǎng)。8、體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑:由外植體形成胚狀體,經(jīng)類似合子胚發(fā)育過(guò)程形成新植株的過(guò)程。9、無(wú)病毒苗:是指不含該種植物的主要危害病毒,即經(jīng)檢測(cè)主要病毒在植物內(nèi)的存在表現(xiàn)陰性反應(yīng)的苗木。10、胚狀體:指在組織培養(yǎng)中,由一個(gè)非合子細(xì)胞(體細(xì)胞),經(jīng)過(guò)胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)育過(guò)程形成的具有雙極性的胚狀結(jié)構(gòu)。三、選擇題:(單項(xiàng)選擇題,10個(gè)小題,每小題分,共15分)1、無(wú)菌操作接種時(shí),在操作前和
23、操作期間要經(jīng)常用()擦拭雙手和臺(tái)面。A、70%酒精B、85%酒精C、95%酒精D、%升汞2、在組織培養(yǎng)中,一般用蔗糖作為碳源,其濃度為()。A、1%-3%B、3%-5%C、5%-10%D、1%-5%3、在進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)時(shí),最適宜的花粉發(fā)育時(shí)期是()。A、成熟花粉粒B、單核花粉期C、二核花粉期D、三核花粉期4、無(wú)機(jī)鹽的濃度高,尤其硝酸鹽的用量大,還含有一定數(shù)量鏤鹽的培養(yǎng)基是()A、White培養(yǎng)基B、N6培養(yǎng)基C、MS培養(yǎng)基D、B5培養(yǎng)基5、進(jìn)行莖尖培養(yǎng)脫毒時(shí),通常以帶1-3個(gè)幼葉原基的莖尖作外植體較合適;則莖尖的長(zhǎng)度約為()。A、B、C、D、6、培養(yǎng)室溫度一般要求常年保持在()左右。A、2
24、5CB、22CC、28CD、24C7、在組織培養(yǎng)中,可通過(guò)()獲得單倍體植株。A、受精胚珠的培養(yǎng)B、胚培養(yǎng)C、胚乳培養(yǎng)D、未授粉子房的培養(yǎng)8、大多數(shù)植物在進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí),要求培養(yǎng)基的pH為()。A、B、C、D、9、適合雙子葉植物花藥培養(yǎng)的培養(yǎng)基是()。A、MS培養(yǎng)基B、B5培養(yǎng)基C、N6培養(yǎng)基D、White培養(yǎng)基10、將生長(zhǎng)素類物質(zhì)配制成ml的母液時(shí),可先用少量的()溶解,再定容到所需的體積。A、100%酒精B、NaOHC、85%酒精D、HCl四、簡(jiǎn)答題:(5個(gè)小題,每小題5分,共25分)1、簡(jiǎn)述莖尖微繁技術(shù)的過(guò)程(1)無(wú)菌培養(yǎng)體系的建立(2)芽的增殖(3)中間繁殖體的增殖(4)誘導(dǎo)生根(5)
25、試管苗的移植2、無(wú)土栽培與常規(guī)土壤栽培相比有哪些優(yōu)點(diǎn)3、單倍體植株染色體加倍的方法有哪些1)自然加倍2)人工加倍:用秋水仙素溶液浸苗、處理愈傷組織和用含秋水仙素的羊毛脂涂抹單倍體植株的頂芽、腋芽,可得到能結(jié)實(shí)的二倍體植株。3)愈傷組織反復(fù)繼代培養(yǎng)后,經(jīng)分化培養(yǎng)可得到二倍體植株。4、組織培養(yǎng)一般進(jìn)行哪幾道工序1)、培養(yǎng)器皿的清洗;2)、培養(yǎng)基的配制、分裝和高壓滅菌;3)、無(wú)菌操作一一材料的表面滅菌和接種;4)、將培養(yǎng)物放到培養(yǎng)室培養(yǎng);5)、試管苗的馴化、移栽和初期管理5、愈傷組織的器官發(fā)生有哪4種情況(1)愈傷組織僅有根或芽器官的分別形成,即無(wú)根的芽或無(wú)芽的根;(2)先形成芽,再在芽伸長(zhǎng)后,在其
26、莖的基部長(zhǎng)出根而形成小植株,多數(shù)植物屬這種情況;(3)先產(chǎn)生根,再?gòu)母幕糠只鲅慷纬尚≈仓?。這種情況較難誘導(dǎo)芽的形成,尤其對(duì)于單子葉植物;(4)先在愈傷組織的鄰近不同部位分別形成芽和根,然后兩者結(jié)合起來(lái)形成一株小植株。少見(jiàn)五、論述題:(3個(gè)小題,任選2個(gè),每小題10分,共20分)1、什么是細(xì)胞懸浮培養(yǎng)簡(jiǎn)述成批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)的的特點(diǎn)。細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是使離體的植物細(xì)胞懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行的無(wú)菌培養(yǎng)。1)成批培養(yǎng)的特點(diǎn):(1)細(xì)胞生長(zhǎng)在固定體積的培養(yǎng)基上,直至養(yǎng)分耗盡(2)用攪拌的方法使細(xì)胞團(tuán)和細(xì)胞均勻分布(3)細(xì)胞數(shù)目呈現(xiàn)慢一快一慢一停止生長(zhǎng)的變化(4)必須更換新鮮培養(yǎng)基才能進(jìn)行下一批培養(yǎng)。2)連續(xù)培養(yǎng)的特點(diǎn):(1)由于不斷加入新鮮培養(yǎng)基,保證了養(yǎng)分的充分
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