單克隆抗體制備導學案

1、 導學案班級 姓名 小組 星期 月 日課題單克隆抗體的制備編制人 復習目標1.理解和掌握單克隆抗體制備的過程和應用。2.列表比較單克隆抗體制備與植物體細胞雜交技術(shù)的異同。重點單克隆抗體制備的原理、過程、應用。難點單克隆抗體制備的原理、過程、應用?；A(chǔ)自主梳理基礎(chǔ)梳理四單克隆抗體制備（一）.傳統(tǒng)抗體的產(chǎn)生1.抗原：能夠引起機體產(chǎn)生特異性免疫反應的物質(zhì)； 抗體：能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的_。能產(chǎn)生抗體的細胞是_。2.體液免疫過程 直接刺激 記憶B細胞（ ）（ ）B細胞吞噬細胞抗原抗體抗原與抗體結(jié)合，抗原失去活性，最終被吞噬細胞清除。（二）單克隆抗體的制備1.概念：由單個B淋巴細胞經(jīng)過克隆形成的細胞

2、群所產(chǎn)生的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體。2.常規(guī)制備抗體的方法所面臨的困境：反復注射某種抗原，從血清中分離提取抗體的缺點：產(chǎn)量低、純度低、 、 。一個B細胞只能分泌一種 ，而且體外培養(yǎng)時不能 。3.實驗原理： B細胞能分泌 ，骨髓瘤細胞體外培養(yǎng)時能 ，如果這兩種細胞能融合在一起，則形成的雜交瘤細胞就具有了雙親的遺傳特性，既能 又能 。4.制備過程：注射抗原、細胞融合、兩次篩選、大量培養(yǎng)并提純5.優(yōu)點： 、 、 。6.用途：最廣泛的用途是作為體外 ：由于單克隆抗體純度高、特異性強，所以能準確識別各種抗原物質(zhì)的細微差異，并和一定的抗原發(fā)生 ，因此，單克隆抗體在診斷的應用上，具有 的優(yōu)點。用于治療疾

3、病和運載藥物：將抗癌細胞的單克隆抗體跟放射性同位素、化學藥物或細胞毒素相結(jié)合，制成 ，注入體內(nèi)?！吧飳棥奔饶軐⑺幬锒ㄏ驇У?所在位置，在原位殺死癌細胞，又減少了用藥量，且不損傷 。因此，作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物“生物導彈”將有廣闊的應用前景。基礎(chǔ)自測制備單克隆抗體，需要用某種細胞與骨髓瘤細胞進行融合，“某種細胞”指的是下列選項中的（ ）A經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 B經(jīng)過免疫的T淋巴細胞C不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 D不經(jīng)過免疫的T淋巴細胞要點歸納探究要點一：單克隆抗體制備的過程問題仔細閱讀教材相關(guān)內(nèi)容并結(jié)合教材P53圖解，探討以下問題：（1） 流程圖展示單克隆抗體制備的過程：（2）羊的

4、紅細胞、B淋巴細胞、骨髓瘤細胞的作用分別是什么？（3）誘導動物細胞融合的特有方法是什么？此時，培養(yǎng)液中兩兩融合的細胞會有哪幾種細胞？（4）融合后的雜交瘤細胞具有什么特點？出現(xiàn)這種特點的根本原因是什么？（5）兩次篩選的目的分別是什么？（6）單克隆抗體制備過程中，應用了細胞工程中 和 兩大技術(shù)。針對訓練用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是（ ） A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞 B用纖維素酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞 C用聚乙二醇作誘導劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合 D篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體

5、要點二：單克隆抗體的制備與植物體細胞雜交技術(shù)比較問題植物體細胞雜交技術(shù)單克隆抗體的制備技術(shù)原理融合前處理細胞膜的流動性 酶解法除去細胞壁： 酶 注射 免疫處理正常小鼠促融方法物理法： 化學法： 物化法：與植物相同 目的（結(jié)果）獲得 制備 過程第一步原生質(zhì)體的制備（ 法）注射相應抗原第二步原生質(zhì)體的融合（ 法）誘導細胞融合第三步雜種細胞的形成（標志： ）篩選雜交瘤細胞第四步植物組織培養(yǎng)（ 和 ）體外（內(nèi)）培養(yǎng)并提純意義及用途克服遠緣雜交不親和的障礙，培育新品種診斷疾病、運載藥物相同點具有雙親的遺傳物質(zhì)和遺傳特性課后提升訓練1.單純皰疹病毒I型(HSV-I)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出

6、抗HSV-1的單克隆抗體可快速檢測HSV-1。 回答下列問題：(1)在制備抗HSV-I的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的HSV-1蛋白，一段時間后，若小鼠血清中抗_的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了_反應，再從小鼠的_中獲取B淋巴細胞。將該B淋巴細胞與小鼠的_細胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞，該細胞具有的特點是_。 (2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細胞注射到小鼠的_中使其增殖，再從_中提取、純化獲得。 (3)通過上述方法得到的單克隆抗體可準確地識別這種HSV-I蛋白，其原因是該抗體具有_和_等特性。2如圖表示單克隆抗體的制備過程，請回答下列

7、問題：（1）細胞A具有產(chǎn)生        的功能。細胞B的突出特點是        。誘導細胞A和B融合的誘導劑通常是  或聚乙二醇。（2）若細胞A的基因型為AA，細胞B的基因型為BB，生產(chǎn)的目標應該是基因型為的細胞?？赏ㄟ^特定的選擇培養(yǎng)基將所需的融合細胞篩選出來。（3）動物細胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素等，與植物細胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有    。細胞培養(yǎng)應在含5CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是       。（4）單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，具有              等特點。單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合制成“生物導彈”，可明顯減少用藥量和副作用，原因是