《疫上崗培訓(xùn)》PPT課件

1、1 1免疫檢驗(yàn)上崗培訓(xùn)免疫檢驗(yàn)上崗培訓(xùn)2 2一、免疫（一、免疫（ImmuneImmune）的定義）的定義n免疫的最初概念：免除瘟疫免疫的最初概念：免除瘟疫n免疫的傳統(tǒng)概念：抗感染免疫免疫的傳統(tǒng)概念：抗感染免疫n現(xiàn)代免疫的概念：是機(jī)體識(shí)別現(xiàn)代免疫的概念：是機(jī)體識(shí)別“自身自身”與與“非己非己”抗原，對(duì)抗原，對(duì)“非己非己”抗原產(chǎn)生排斥作抗原產(chǎn)生排斥作用，對(duì)自身抗原形成天然耐受的一種生理功用，對(duì)自身抗原形成天然耐受的一種生理功能。能。n 免疫的基本概念免疫的基本概念3 3 正常情況下，這種生理功能對(duì)機(jī)體有益，正常情況下，這種生理功能對(duì)機(jī)體有益，可產(chǎn)生抗感染、抗腫瘤和維持機(jī)體生理平衡可產(chǎn)生抗感染、抗腫瘤

2、和維持機(jī)體生理平衡及穩(wěn)定的保護(hù)作用。及穩(wěn)定的保護(hù)作用。 當(dāng)免疫功能失調(diào)時(shí)，在一定條件下，也當(dāng)免疫功能失調(diào)時(shí)，在一定條件下，也會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生不利的影響，如：超敏反應(yīng)、會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生不利的影響，如：超敏反應(yīng)、自身免疫病和腫瘤等。自身免疫病和腫瘤等。4 4二、免二、免 疫疫 的的 功功 能能 免疫功能是免疫系統(tǒng)在識(shí)別和清除免疫功能是免疫系統(tǒng)在識(shí)別和清除“非己非己”抗原的抗原的過程中所產(chǎn)生的各種生物學(xué)作用的總稱。主要包括：過程中所產(chǎn)生的各種生物學(xué)作用的總稱。主要包括： 1. 1.免疫防御（免疫防御（Immunologic defence)Immunologic defence)： 是機(jī)體針對(duì)外來病原體的抗

3、感染功能。正常時(shí)是機(jī)體針對(duì)外來病原體的抗感染功能。正常時(shí)可防御病原體的感染；防御功能過強(qiáng)可產(chǎn)生超敏反可防御病原體的感染；防御功能過強(qiáng)可產(chǎn)生超敏反應(yīng)，過弱則表現(xiàn)為免疫缺陷。應(yīng)，過弱則表現(xiàn)為免疫缺陷。5 52.2.免疫自穩(wěn)免疫自穩(wěn)(immunologic homeostasis)(immunologic homeostasis)： 免疫系統(tǒng)維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定的免疫系統(tǒng)維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定的生理機(jī)能。生理機(jī)能。 正常：可及時(shí)清除體內(nèi)損傷、衰老、變性的細(xì)正常：可及時(shí)清除體內(nèi)損傷、衰老、變性的細(xì)胞和抗原抗體復(fù)合物，而對(duì)自身成胞和抗原抗體復(fù)合物，而對(duì)自身成份保持免疫耐受；份保持免疫耐受； 異常：可發(fā)

4、生生理功能紊亂、自身免疫病等。異常：可發(fā)生生理功能紊亂、自身免疫病等。6 63.3.免疫監(jiān)視免疫監(jiān)視(immunologic surveillance)(immunologic surveillance)： 是機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別、清除體內(nèi)突變、畸是機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別、清除體內(nèi)突變、畸變細(xì)胞以及被病毒感染細(xì)胞的生理性保護(hù)作用。變細(xì)胞以及被病毒感染細(xì)胞的生理性保護(hù)作用。 喪失：機(jī)體突變細(xì)胞失控，可能導(dǎo)致腫瘤喪失：機(jī)體突變細(xì)胞失控，可能導(dǎo)致腫瘤發(fā)生或出現(xiàn)病毒的持續(xù)感染。發(fā)生或出現(xiàn)病毒的持續(xù)感染。7 78 8三、免疫的類型及其特征三、免疫的類型及其特征一、固有免疫：一、固有免疫：概念：出生時(shí)即有的天然免疫

5、，經(jīng)遺傳獲得，非特概念：出生時(shí)即有的天然免疫，經(jīng)遺傳獲得，非特 異性，也稱非特異性異性，也稱非特異性/先天性免疫。先天性免疫。組成：屏障結(jié)構(gòu)、吞噬細(xì)胞、某些體液因子。組成：屏障結(jié)構(gòu)、吞噬細(xì)胞、某些體液因子。二、適應(yīng)性免疫：二、適應(yīng)性免疫：概念：出生后接觸特定抗原獲得的針對(duì)該物質(zhì)概念：出生后接觸特定抗原獲得的針對(duì)該物質(zhì) 的免疫，也稱獲得性的免疫，也稱獲得性/特異性免疫。特異性免疫。包括包括 體液免疫、細(xì)胞免疫。體液免疫、細(xì)胞免疫。9 9 抗原基礎(chǔ)知識(shí)抗原基礎(chǔ)知識(shí) 一、抗原概念（一、抗原概念（antigenantigen，AgAg） 是能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特是能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答

6、、并能與相應(yīng)的應(yīng)答異性免疫應(yīng)答、并能與相應(yīng)的應(yīng)答產(chǎn)物（抗體和產(chǎn)物（抗體和/ /或效應(yīng)淋巴細(xì)胞）或效應(yīng)淋巴細(xì)胞）在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性結(jié)合的物在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。質(zhì)。 1010二、抗原的特性二、抗原的特性 1 1 免疫原性：免疫原性： 抗原能刺激特異性免疫抗原能刺激特異性免疫細(xì)胞，使之活化、增生、分化，最終產(chǎn)細(xì)胞，使之活化、增生、分化，最終產(chǎn)生抗體和效應(yīng)淋巴細(xì)胞的特性。生抗體和效應(yīng)淋巴細(xì)胞的特性。2 2 免疫反應(yīng)性免疫反應(yīng)性: : 抗原可在體內(nèi)、外與抗原可在體內(nèi)、外與 相應(yīng)的抗體相應(yīng)的抗體/ /效應(yīng)淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)效應(yīng)淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合，產(chǎn)生免疫反應(yīng)的特性。合，產(chǎn)生免疫反應(yīng)

7、的特性。 1111三、完全抗原、半抗原、載體三、完全抗原、半抗原、載體1 1、完全抗原、完全抗原 （complete antigen): complete antigen): 既有免疫原性又有抗原性的物質(zhì)，如既有免疫原性又有抗原性的物質(zhì)，如多數(shù)蛋白質(zhì)分子。多數(shù)蛋白質(zhì)分子。2 2、半抗原（、半抗原（Hapten):Hapten):又稱不完全抗又稱不完全抗原，單獨(dú)存在時(shí)只具有免疫反應(yīng)性而原，單獨(dú)存在時(shí)只具有免疫反應(yīng)性而無免疫原性的物質(zhì)，如二硝基酚、青無免疫原性的物質(zhì)，如二硝基酚、青霉素。霉素。 1212 3 3、載體、載體 與半抗原結(jié)合后使其具有免疫原與半抗原結(jié)合后使其具有免疫原性的物質(zhì)，即半抗原

8、性的物質(zhì)，即半抗原+ +載體載體= =完全抗原。完全抗原。 四、四、 耐受原與變應(yīng)原耐受原與變應(yīng)原 1 1 耐受原耐受原 (tolerogen): (tolerogen):引起機(jī)體引起機(jī)體產(chǎn)生免疫耐受的抗原。產(chǎn)生免疫耐受的抗原。 2 2 變應(yīng)原變應(yīng)原 (allergen): (allergen): 引起機(jī)體引起機(jī)體產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)的抗原。產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)的抗原。 1313五、五、 抗原的特異性與交叉反應(yīng)抗原的特異性與交叉反應(yīng) 免疫原性的特異性：某種抗原只能刺激機(jī)免疫原性的特異性：某種抗原只能刺激機(jī)體產(chǎn)生某種特定的應(yīng)答產(chǎn)物。體產(chǎn)生某種特定的應(yīng)答產(chǎn)物。如：傷寒桿菌免疫動(dòng)物產(chǎn)生抗傷寒桿菌抗體如：傷寒桿菌免疫

9、動(dòng)物產(chǎn)生抗傷寒桿菌抗體 抗原性的特異性：抗原只能與其相應(yīng)的抗抗原性的特異性：抗原只能與其相應(yīng)的抗體或致敏淋巴細(xì)胞結(jié)合。體或致敏淋巴細(xì)胞結(jié)合。如：傷寒桿菌只能與抗傷寒桿菌抗體結(jié)合如：傷寒桿菌只能與抗傷寒桿菌抗體結(jié)合 1414 1 1 、 表位與抗原決定簇表位與抗原決定簇 抗原決定簇（抗原決定簇（antigenic antigenic determinant,ADdeterminant,AD）: : 又稱表位（又稱表位（epitopeepitope），指抗原分子中決定），指抗原分子中決定 抗原特異性的特殊的化學(xué)基團(tuán)，是抗原分子與抗原特異性的特殊的化學(xué)基團(tuán)，是抗原分子與抗體及抗體及TCR/BCRTC

10、R/BCR受體特異結(jié)合的部位，也是被受體特異結(jié)合的部位，也是被免疫細(xì)胞識(shí)別的標(biāo)志及免疫反應(yīng)具有特異性的免疫細(xì)胞識(shí)別的標(biāo)志及免疫反應(yīng)具有特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)。物質(zhì)基礎(chǔ)。 表位的性質(zhì)、數(shù)目和空間構(gòu)象決定了抗原表位的性質(zhì)、數(shù)目和空間構(gòu)象決定了抗原 的特異性。的特異性。 15152 2、抗原抗體反應(yīng)的特異性、抗原抗體反應(yīng)的特異性 抗原的特異性是相對(duì)的，因?yàn)樘烊坏目乖挚乖奶禺愋允窍鄬?duì)的，因?yàn)樘烊坏目乖肿颖砻婵纱嬖谥喾N表位，不同的抗原分子表面子表面可存在著多種表位，不同的抗原分子表面存在相同或相似的表位，可引起交叉反應(yīng)。存在相同或相似的表位，可引起交叉反應(yīng)。3 3、抗原結(jié)合價(jià)：、抗原結(jié)合價(jià)： 能和相應(yīng)

11、抗體結(jié)合的功能性表位的數(shù)目能和相應(yīng)抗體結(jié)合的功能性表位的數(shù)目 半抗原半抗原 單價(jià)單價(jià) 天然抗原天然抗原 多價(jià)多價(jià) 多價(jià)抗原可同時(shí)與多種多價(jià)抗原可同時(shí)與多種/ /多個(gè)抗體結(jié)合多個(gè)抗體結(jié)合16164 4、 共同抗原和交叉反應(yīng)共同抗原和交叉反應(yīng) （1 1）共同抗原：兩種或兩種以上抗原）共同抗原：兩種或兩種以上抗原具有的相同或相似的表位。具有的相同或相似的表位。 表位表位1 表位表位2表位表位3表位表位1 A抗原B抗原1717 （2）交叉反應(yīng)：抗體與具有相同或相似的表位的）交叉反應(yīng)：抗體與具有相同或相似的表位的抗原之間出現(xiàn)的反應(yīng)。抗原之間出現(xiàn)的反應(yīng)。 血血 清清(Ab1、Ab2) + AgA 特異性反

12、應(yīng)特異性反應(yīng) Ab1+AgB 交叉反應(yīng)交叉反應(yīng) 意義意義 與疾病發(fā)生有關(guān)：如急性腎小球腎炎與疾病發(fā)生有關(guān)：如急性腎小球腎炎 用于疾病診斷：如外斐反應(yīng)用于疾病診斷：如外斐反應(yīng)表位表位1表位表位3表位表位1A抗原 B抗原表位表位218181 1、病原微生物及其代謝產(chǎn)物、病原微生物及其代謝產(chǎn)物（1 1）病原微生物）病原微生物 如細(xì)菌、病毒、螺旋體，如細(xì)菌、病毒、螺旋體，對(duì)機(jī)體有較強(qiáng)的免疫原性。對(duì)機(jī)體有較強(qiáng)的免疫原性。（2 2）細(xì)菌的代謝產(chǎn)物）細(xì)菌的代謝產(chǎn)物 外毒素：外毒素： 類毒素類毒素: :外毒素經(jīng)外毒素經(jīng)0.3%-0.4%0.3%-0.4%的甲醛處理的甲醛處理后后, ,使其失去毒性而保留免疫原性

13、的物質(zhì)。使其失去毒性而保留免疫原性的物質(zhì)。六、六、 醫(yī)學(xué)上重要的抗原醫(yī)學(xué)上重要的抗原19192 2、動(dòng)物免疫血清、動(dòng)物免疫血清 用類毒素免疫動(dòng)物后，動(dòng)物的血清中可含有用類毒素免疫動(dòng)物后，動(dòng)物的血清中可含有大量的抗毒素，即動(dòng)物的免疫血清。這種抗血清大量的抗毒素，即動(dòng)物的免疫血清。這種抗血清對(duì)人體而言既提供特異性抗體，又是異種蛋白。對(duì)人體而言既提供特異性抗體，又是異種蛋白。3 3、異嗜性抗原、異嗜性抗原 又稱又稱ForssmanForssman抗原，指一類與種屬無關(guān)，存抗原，指一類與種屬無關(guān)，存在于人、動(dòng)物、植物和微生物之間的共同抗原。在于人、動(dòng)物、植物和微生物之間的共同抗原。如：溶血性鏈球菌如：

14、溶血性鏈球菌/ /人腎小球基底膜之間的共同人腎小球基底膜之間的共同抗原?？乖?。20204 4、同種異型抗原、同種異型抗原 同一種屬不同個(gè)體之間的不同抗原。同一種屬不同個(gè)體之間的不同抗原。如人類的如人類的ABOABO、RhRh血型抗原、血型抗原、HLAHLA等。等。5 5、自身抗原、自身抗原 隱蔽的自身抗原與自身免疫系統(tǒng)隔絕隱蔽的自身抗原與自身免疫系統(tǒng)隔絕的組織受到外傷等因素而暴露，如：腦組的組織受到外傷等因素而暴露，如：腦組織、精子外傷暴露。被修飾的自身抗原自織、精子外傷暴露。被修飾的自身抗原自身組織在理化、生物等作用下結(jié)構(gòu)發(fā)生改身組織在理化、生物等作用下結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，如：變性的變，如：變性的

15、IgGIgG。 21216 6、腫瘤抗原、腫瘤抗原 腫瘤特異性抗原（腫瘤特異性抗原（Tumor Specific Tumor Specific AntigenAntigen，TSATSA）腫瘤相關(guān)抗原（）腫瘤相關(guān)抗原（Tumor Tumor Associated AntigenAssociated Antigen，TAATAA）7 7、超抗原、超抗原(super antigen,SAg)(super antigen,SAg) 只需極低濃度即可激活只需極低濃度即可激活5%-20%T5%-20%T細(xì)胞克隆，細(xì)胞克隆，產(chǎn)生極強(qiáng)的免疫應(yīng)答的抗原。產(chǎn)生極強(qiáng)的免疫應(yīng)答的抗原。2222 8、其他、其他 有絲

16、分裂原：有絲分裂原： 植物血凝素、刀豆蛋白植物血凝素、刀豆蛋白A T細(xì)胞細(xì)胞 細(xì)菌脂多糖、葡萄球菌細(xì)菌脂多糖、葡萄球菌A蛋白蛋白 B細(xì)胞細(xì)胞2323 七七 佐劑佐劑 概念：概念： 一類與抗原一起或預(yù)一類與抗原一起或預(yù)先注入機(jī)體，能增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原先注入機(jī)體，能增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型的免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型的非特異性免疫增強(qiáng)劑。如：羊的非特異性免疫增強(qiáng)劑。如：羊毛脂，石蠟油，內(nèi)毒素。常見為毛脂，石蠟油，內(nèi)毒素。常見為福氏佐劑。福氏佐劑。2424AbAb：是由抗原刺激：是由抗原刺激B B 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞后所產(chǎn)生，并能與相應(yīng)抗原特異細(xì)胞后所產(chǎn)生，并能與相應(yīng)

17、抗原特異性結(jié)合、具有免疫功能的球蛋白，也性結(jié)合、具有免疫功能的球蛋白，也稱為抗體（稱為抗體（antibody,Abantibody,Ab）。）。Ig：把具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相：把具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白。似的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白。2525Ig與與Ab的關(guān)系的關(guān)系Ig與與Ab的區(qū)別：的區(qū)別：Ig是化學(xué)結(jié)構(gòu)的概念，是化學(xué)結(jié)構(gòu)的概念，Ab 是是生物學(xué)功能的概念。所有的生物學(xué)功能的概念。所有的Ab都是都是Ig，但，但I(xiàn)g并并非都有抗體活性。非都有抗體活性。IgAb2626 二、二、IgIg的基本結(jié)構(gòu)的基本結(jié)構(gòu)1 1、基本結(jié)構(gòu)：由兩條相同的重鏈和兩、基本結(jié)構(gòu)：由

18、兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈通過二硫鍵連接而成的條相同的輕鏈通過二硫鍵連接而成的四肽鏈結(jié)構(gòu)。四肽鏈結(jié)構(gòu)。2727抗體的立體模型 2828Ig的基本結(jié)構(gòu)的基本結(jié)構(gòu)29292 2、免疫球蛋白的功能區(qū)、免疫球蛋白的功能區(qū)VHVH和和VLVL：與抗原特異性結(jié)合的部位；：與抗原特異性結(jié)合的部位；CLCL和和CH1CH1：某些同種異型：某些同種異型IgIg遺傳標(biāo)記；遺傳標(biāo)記；IgGIgG的的CH2CH2、IgMIgM的的CH3CH3： 補(bǔ)體補(bǔ)體C1qC1q結(jié)合點(diǎn)結(jié)合點(diǎn) 激活補(bǔ)體經(jīng)激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑；典途徑；CH3/CH4CH3/CH4 結(jié)合不同細(xì)胞表面結(jié)合不同細(xì)胞表面FcR FcR 不同生不同生物學(xué)效應(yīng)。

19、物學(xué)效應(yīng)。30301 1、IgGIgG血清含量最多；半衰期最長(zhǎng)；血清含量最多；半衰期最長(zhǎng)；出生后出生后3 3個(gè)月開始合成，個(gè)月開始合成，3-53-5歲接近成人水平；歲接近成人水平；是唯一能通過胎盤的是唯一能通過胎盤的IgIg，發(fā)揮自然被動(dòng)免疫功，發(fā)揮自然被動(dòng)免疫功能；能；具 有 活 化 補(bǔ) 體 經(jīng) 典 途 徑 的 能 力具 有 活 化 補(bǔ) 體 經(jīng) 典 途 徑 的 能 力（IgG3IgG1IgG2IgG3IgG1IgG2）；）；具有調(diào)理作用、具有調(diào)理作用、ADCCADCC作用。作用。是主要的抗感染抗體，具有抗菌、中和病毒和是主要的抗感染抗體，具有抗菌、中和病毒和中和毒素的作用；中和毒素的作用；三

20、三五類五類IgIg的特性和功能的特性和功能31312 2、IgMIgM為五聚體，分子量最大，稱為巨球蛋白；為五聚體，分子量最大，稱為巨球蛋白；個(gè)體發(fā)育中最先出現(xiàn)的個(gè)體發(fā)育中最先出現(xiàn)的IgIg，胚胎晚期即，胚胎晚期即能產(chǎn)生，臍帶血能產(chǎn)生，臍帶血IgMIgM增高提示胎內(nèi)感染增高提示胎內(nèi)感染（如風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒感染等）；（如風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒感染等）；抗原刺激機(jī)體時(shí)，是體內(nèi)最先產(chǎn)生的抗原刺激機(jī)體時(shí)，是體內(nèi)最先產(chǎn)生的IgIg；血清血清IgMIgM升高說明有近期感染；升高說明有近期感染；有強(qiáng)大激活補(bǔ)體能力，在機(jī)體免疫防御有強(qiáng)大激活補(bǔ)體能力，在機(jī)體免疫防御的早期中具有重要作用。的早期中具有重要作用。

21、32323 3、IgAIgA有單體的血清型和分泌型有單體的血清型和分泌型IgAIgA；分泌型分泌型IgAIgA是機(jī)體粘膜局部抗感染免疫的重是機(jī)體粘膜局部抗感染免疫的重要因素（呼吸道和消化道）；要因素（呼吸道和消化道）；初乳中的初乳中的sIgAsIgA可對(duì)嬰幼兒發(fā)揮自然被動(dòng)免可對(duì)嬰幼兒發(fā)揮自然被動(dòng)免疫作用。疫作用。 4 4、IgEIgE屬親細(xì)胞抗體，可與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒屬親細(xì)胞抗體，可與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞表面細(xì)胞表面FcRFcR結(jié)合，介導(dǎo)結(jié)合，介導(dǎo)I I型超敏反應(yīng)；型超敏反應(yīng)；是血清中含量最低的是血清中含量最低的IgIg；主要由呼吸道、胃腸道粘膜固有層的漿細(xì)主要由呼吸道、胃腸道粘膜固有層的

22、漿細(xì)胞產(chǎn)生。胞產(chǎn)生。33335 5、IgDIgD血清中含量低，其生物學(xué)作用尚不清血清中含量低，其生物學(xué)作用尚不清楚；楚；SmIgDSmIgD可作為可作為B B細(xì)胞分化成熟標(biāo)記，成細(xì)胞分化成熟標(biāo)記，成熟熟B B細(xì)胞同時(shí)表達(dá)細(xì)胞同時(shí)表達(dá)SmIgMSmIgM和和SmIgDSmIgD。34344 4免疫球蛋白的生物學(xué)活性免疫球蛋白的生物學(xué)活性(1)(1)特異性結(jié)合抗原特異性結(jié)合抗原(2)(2)激活補(bǔ)體激活補(bǔ)體 (3)(3)通過與細(xì)胞通過與細(xì)胞FcRFcR結(jié)合發(fā)揮生物效應(yīng)：結(jié)合發(fā)揮生物效應(yīng)：(4)(4)選擇性傳遞選擇性傳遞 IgG IgG通過胎盤；通過胎盤；sIgAsIgA穿過粘膜的功能穿過粘膜的功能(

23、5)(5)具有免疫原性具有免疫原性3535免免疫疫球球蛋蛋白白的的功功能能3636抗原或抗體的檢測(cè)抗原抗原- -抗體反應(yīng)包括沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、抗體反應(yīng)包括沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、溶解反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)等。溶解反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)等。 抗原抗原- -抗體反應(yīng)可用已知的特異性抗體檢測(cè)抗體反應(yīng)可用已知的特異性抗體檢測(cè)未知的抗原；也可用已知的抗原檢測(cè)未知未知的抗原；也可用已知的抗原檢測(cè)未知的抗體。的抗體。免疫熒光技術(shù)、免疫酶技術(shù)、同位素標(biāo)記免疫熒光技術(shù)、免疫酶技術(shù)、同位素標(biāo)記技術(shù)、發(fā)光免疫分析等免疫標(biāo)記技術(shù)提高技術(shù)、發(fā)光免疫分析等免疫標(biāo)記技術(shù)提高了抗原抗體反應(yīng)的敏感性。了抗原抗體反應(yīng)的

24、敏感性。3737383839394040二二抗原抗原- -抗體反應(yīng)受多種因素影抗體反應(yīng)受多種因素影響響1 1 電解質(zhì)：抗原電解質(zhì)：抗原- -抗體反應(yīng)通常應(yīng)用抗體反應(yīng)通常應(yīng)用0.85%0.85%的氯化鈉作為稀釋液的氯化鈉作為稀釋液 ，以供給，以供給適應(yīng)濃度的電解質(zhì)。適應(yīng)濃度的電解質(zhì)。2 2 溫度：一般常使用反應(yīng)在溫度：一般常使用反應(yīng)在3737度水浴度水浴 或孵育箱中進(jìn)行。或孵育箱中進(jìn)行。3.3.酸堿度：抗原酸堿度：抗原- -抗體反應(yīng)適應(yīng)的酸堿抗體反應(yīng)適應(yīng)的酸堿度度 為為PH6-8PH6-8。4.4.抗原抗體比例抗原抗體比例抗原-抗體反應(yīng)受多種因素影響4141第二節(jié)第二節(jié) 抗原抗體的檢測(cè)方法抗原抗

25、體的檢測(cè)方法凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)補(bǔ)體溶血反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)補(bǔ)體溶血反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)中和反應(yīng)中和反應(yīng)用標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)用標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)4242一一. .凝集反應(yīng)凝集反應(yīng) (Agglutination) (Agglutination)細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后形成凝集結(jié)合后形成凝集 現(xiàn)象，稱為凝聚反應(yīng)?，F(xiàn)象，稱為凝聚反應(yīng)。 (1) (1)、直接凝集：將細(xì)菌或紅細(xì)胞與相、直接凝集：將細(xì)菌或紅細(xì)胞與相應(yīng)的抗體直接反應(yīng)，出現(xiàn)細(xì)菌凝集或紅應(yīng)的抗體直接反應(yīng)，出現(xiàn)細(xì)菌凝集或紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。又分為玻片法和試管法。細(xì)胞

26、凝集現(xiàn)象。又分為玻片法和試管法。 (2) (2)、間接凝集：將可溶性抗原包被在、間接凝集：將可溶性抗原包被在紅細(xì)胞或乳膠顆粒表面，與相應(yīng)抗體反紅細(xì)胞或乳膠顆粒表面，與相應(yīng)抗體反應(yīng)出現(xiàn)顆粒凝集現(xiàn)象。應(yīng)出現(xiàn)顆粒凝集現(xiàn)象。4343血血 球球 凝凝 集集4444454546464747484849495050三三. .免疫標(biāo)記技術(shù)免疫標(biāo)記技術(shù)用熒光素、同位素或酶等示蹤物質(zhì)用熒光素、同位素或酶等示蹤物質(zhì) 標(biāo)記抗標(biāo)記抗體（或抗原）進(jìn)行抗原體（或抗原）進(jìn)行抗原- -抗體反應(yīng)。標(biāo)記物抗體反應(yīng)。標(biāo)記物質(zhì)與抗體（或抗原）的化學(xué)連接未改變抗質(zhì)與抗體（或抗原）的化學(xué)連接未改變抗體（或抗原）的免疫學(xué)特性，同時(shí)標(biāo)記物體（

27、或抗原）的免疫學(xué)特性，同時(shí)標(biāo)記物的性質(zhì)依然存在，因而極大的提高了反應(yīng)的性質(zhì)依然存在，因而極大的提高了反應(yīng)的靈敏度，可以對(duì)微量物質(zhì)進(jìn)行定量、定的靈敏度，可以對(duì)微量物質(zhì)進(jìn)行定量、定性或定位檢測(cè)。免疫標(biāo)記技術(shù)主要有四種性或定位檢測(cè)。免疫標(biāo)記技術(shù)主要有四種基本類型：免疫熒光技術(shù)、免疫膠體金標(biāo)基本類型：免疫熒光技術(shù)、免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)、免疫酶技術(shù)和同位素標(biāo)記技術(shù)。記技術(shù)、免疫酶技術(shù)和同位素標(biāo)記技術(shù)。51511.1.免疫熒光顯微技術(shù)免疫熒光顯微技術(shù) 用熒光素（常用的有異硫氰酸熒光用熒光素（常用的有異硫氰酸熒光素），與抗體連接成熒光抗體，再與待素），與抗體連接成熒光抗體，再與待測(cè)標(biāo)本的抗原反應(yīng)，置熒光顯微鏡

28、下觀測(cè)標(biāo)本的抗原反應(yīng)，置熒光顯微鏡下觀察，抗原抗體復(fù)合物散發(fā)出熒光，借此察，抗原抗體復(fù)合物散發(fā)出熒光，借此對(duì)標(biāo)本中的抗原作鑒定和定位。對(duì)標(biāo)本中的抗原作鑒定和定位。 包括直接熒光法、間接熒光法和補(bǔ)體包括直接熒光法、間接熒光法和補(bǔ)體法。法。5252間接免疫熒光法示意圖間接免疫熒光法示意圖53535454用熒光抗體示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法用熒光抗體示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗體法；用已知的熒光抗原標(biāo)記稱熒光抗體法；用已知的熒光抗原標(biāo)記物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱熒光抗物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱熒光抗原法。因?yàn)闊晒馍夭坏芘c抗體球蛋原法。因?yàn)闊晒馍夭坏芘c抗體球蛋白結(jié)合，用于檢測(cè)或定位各種抗

29、原，也白結(jié)合，用于檢測(cè)或定位各種抗原，也可以與其他蛋白質(zhì)結(jié)合，用于檢測(cè)或定可以與其他蛋白質(zhì)結(jié)合，用于檢測(cè)或定位抗體，但是在實(shí)際工作中熒光抗原技位抗體，但是在實(shí)際工作中熒光抗原技術(shù)很少應(yīng)用，所以人們習(xí)慣稱為熒光抗術(shù)很少應(yīng)用，所以人們習(xí)慣稱為熒光抗體技術(shù)，或稱為免疫熒光技術(shù)。體技術(shù)，或稱為免疫熒光技術(shù)。 2.2.免疫熒光測(cè)定技術(shù)免疫熒光測(cè)定技術(shù)5555（1 1）時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)）時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)原理：原理：TRFIA TRFIA 是用三價(jià)稀土離子及其螯合是用三價(jià)稀土離子及其螯合劑作為示蹤物，如銪（劑作為示蹤物，如銪（Eu3+) Eu3+) 來標(biāo)記抗體、來標(biāo)記抗體、抗原，待反應(yīng)體系發(fā)生后，用

30、時(shí)間分辨熒抗原，待反應(yīng)體系發(fā)生后，用時(shí)間分辨熒光儀測(cè)定最后產(chǎn)物中的熒光強(qiáng)度，根據(jù)熒光儀測(cè)定最后產(chǎn)物中的熒光強(qiáng)度，根據(jù)熒光強(qiáng)度和相對(duì)熒光強(qiáng)度比值，判斷反應(yīng)體光強(qiáng)度和相對(duì)熒光強(qiáng)度比值，判斷反應(yīng)體系中分析物的濃度，達(dá)到定量分析的目的。系中分析物的濃度，達(dá)到定量分析的目的。 5656優(yōu)點(diǎn)：技術(shù)集酶標(biāo)記、同位素標(biāo)記技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：技術(shù)集酶標(biāo)記、同位素標(biāo)記技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)于一身，具有靈敏度高、特異性的優(yōu)點(diǎn)于一身，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好、標(biāo)記物制備簡(jiǎn)便、儲(chǔ)存強(qiáng)、穩(wěn)定性好、標(biāo)記物制備簡(jiǎn)便、儲(chǔ)存時(shí)間長(zhǎng)、無放射性污染、檢測(cè)重復(fù)性好、時(shí)間長(zhǎng)、無放射性污染、檢測(cè)重復(fù)性好、操作流程短、標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍寬和應(yīng)用范操作流程短、標(biāo)

31、準(zhǔn)曲線范圍寬和應(yīng)用范圍廣泛等優(yōu)點(diǎn)，圍廣泛等優(yōu)點(diǎn)，5757注意：所用試劑和器材務(wù)必防塵；注意：所用試劑和器材務(wù)必防塵； Eu3+ Eu3+標(biāo)記物的溶解和稀釋必須盡標(biāo)記物的溶解和稀釋必須盡 量準(zhǔn)確，務(wù)必在加樣量準(zhǔn)確，務(wù)必在加樣1 1小時(shí)內(nèi)配制。小時(shí)內(nèi)配制。5858（2 2）電化學(xué)發(fā)光免疫分析）電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)技術(shù)原理：電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)是繼放射免疫原理：電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)是繼放射免疫分析法、酶免疫分析法、熒光免疫分析法、化分析法、酶免疫分析法、熒光免疫分析法、化學(xué)發(fā)光免疫分析法后的最先進(jìn)的免疫分析方法。學(xué)發(fā)光免疫分析法后的最先進(jìn)的免疫分析方法。電化學(xué)發(fā)光（電化學(xué)發(fā)光（ECLECL）是

32、一種在電極表面由電化）是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，實(shí)際上包括了學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，實(shí)際上包括了電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個(gè)過程。直接以電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個(gè)過程。直接以Ru(bpy)32+Ru(bpy)32+標(biāo)記抗體，反應(yīng)時(shí)標(biāo)記物直接發(fā)標(biāo)記抗體，反應(yīng)時(shí)標(biāo)記物直接發(fā)光。且光。且Ru(bpy)32+Ru(bpy)32+在電極表面的反應(yīng)過程可在電極表面的反應(yīng)過程可以周而復(fù)始進(jìn)行，產(chǎn)生許多光子，使光信號(hào)得以周而復(fù)始進(jìn)行，產(chǎn)生許多光子，使光信號(hào)得以增強(qiáng)。以增強(qiáng)。 5959優(yōu)點(diǎn)：非放射性標(biāo)記物避免了放射性核優(yōu)點(diǎn)：非放射性標(biāo)記物避免了放射性核素的污染；磁性微粒（素的污染；磁性微粒（2.8

33、2.8m m）為固相）為固相載體表面積大，吸附率高，近似均相免載體表面積大，吸附率高，近似均相免疫反應(yīng)；疫反應(yīng)； 鏈霉親和素與生物素是最特異鏈霉親和素與生物素是最特異及牢固的結(jié)合；應(yīng)用范圍廣；檢測(cè)敏感及牢固的結(jié)合；應(yīng)用范圍廣；檢測(cè)敏感度高；檢測(cè)所需樣本量少。度高；檢測(cè)所需樣本量少。 60602.2.酶免疫測(cè)定酶免疫測(cè)定(Enzyme Immunoassay, EIA)(Enzyme Immunoassay, EIA) 是用酶（常用的有辣根過氧化物酶是用酶（常用的有辣根過氧化物酶HRPHRP和和堿性磷酸酶堿性磷酸酶AP) AP) 標(biāo)記的抗體進(jìn)行的抗原抗標(biāo)記的抗體進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)。體反應(yīng)。EIA

34、EIA將抗原抗體反應(yīng)的特異性與酶將抗原抗體反應(yīng)的特異性與酶催化作用的高效性相結(jié)合，通過酶作用于催化作用的高效性相結(jié)合，通過酶作用于底物后顯色來判定結(jié)果。常用的方法有酶底物后顯色來判定結(jié)果。常用的方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和酶免疫組化法，前者測(cè)聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和酶免疫組化法，前者測(cè)定可溶性抗原或抗體，后者測(cè)定組織或細(xì)定可溶性抗原或抗體，后者測(cè)定組織或細(xì)胞表面的抗原。胞表面的抗原。6161(1).(1).酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) (ELISA) 將已知的抗原或抗體吸附在固相載體（聚苯乙烯微量反將已知的抗原或抗體吸附在固相載體（聚苯乙烯微量反應(yīng)板）表面，使抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行。

35、用洗滌法將應(yīng)板）表面，使抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行。用洗滌法將液相中游離成分洗除。主要有雙抗體夾心法、間接法液相中游離成分洗除。主要有雙抗體夾心法、間接法BAS-BAS-ELISAELISA等。等。 (2) ELISA (2) ELISA方法有方法有: :a.a.雙抗體雙抗體 / / 抗原夾心法測(cè)抗原抗原夾心法測(cè)抗原 / / 抗體抗體: : 包被在固相載體上的抗體包被在固相載體上的抗體 / / 抗原與加入的待測(cè)抗原抗原與加入的待測(cè)抗原 / / 抗體及酶標(biāo)抗體抗體及酶標(biāo)抗體 / / 抗原三者在一定條件下進(jìn)行溫育反應(yīng)，抗原三者在一定條件下進(jìn)行溫育反應(yīng)，若待測(cè)樣本中含有特異性抗原若待測(cè)樣本中含有特異

36、性抗原 / / 抗體，則在孔內(nèi)形成抗體抗體，則在孔內(nèi)形成抗體 / / 抗原抗原- -抗原抗原 / / 抗體抗體- -酶復(fù)合物酶復(fù)合物, , 經(jīng)過嚴(yán)格洗滌后經(jīng)過嚴(yán)格洗滌后, ,復(fù)合物與復(fù)合物與底物作用后將顯色。底物作用后將顯色。6262 b. b.間接法測(cè)抗體：間接法測(cè)抗體： 將抗原包被在固相載體上，樣本中含有將抗原包被在固相載體上，樣本中含有特異性抗體則結(jié)合成抗原抗體復(fù)合物，再特異性抗體則結(jié)合成抗原抗體復(fù)合物，再與加入的酶標(biāo)記抗抗體結(jié)合與加入的酶標(biāo)記抗抗體結(jié)合, , 形成抗原抗形成抗原抗體酶標(biāo)抗抗體復(fù)合物。酶催化底物顯色。體酶標(biāo)抗抗體復(fù)合物。酶催化底物顯色。C.C.竟?fàn)幏y(cè)抗體：竟?fàn)幏y(cè)抗體：

37、 包被抗原于固相載體上，檢測(cè)時(shí)加入包被抗原于固相載體上，檢測(cè)時(shí)加入樣本和酶標(biāo)記抗體，如樣本中含有特異性抗樣本和酶標(biāo)記抗體，如樣本中含有特異性抗體將與酶標(biāo)記抗體竟?fàn)幣c包被的固相抗原結(jié)體將與酶標(biāo)記抗體竟?fàn)幣c包被的固相抗原結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物，固相上無酶催化合形成抗原抗體復(fù)合物，固相上無酶催化底物，而不顯色。底物，而不顯色。6363 包被抗體于固相載體上，檢測(cè)時(shí)加入樣本、包被抗體于固相載體上，檢測(cè)時(shí)加入樣本、中和抗原和酶標(biāo)記抗體，如待測(cè)樣本中含有特中和抗原和酶標(biāo)記抗體，如待測(cè)樣本中含有特異性抗體將與固相抗體竟?fàn)幹泻涂乖Y(jié)合形成異性抗體將與固相抗體竟?fàn)幹泻涂乖Y(jié)合形成抗體抗原抗體復(fù)合物，固相上無酶催

38、化底抗體抗原抗體復(fù)合物，固相上無酶催化底物，而不顯色。物，而不顯色。d. d. 固相捕獲法測(cè)固相捕獲法測(cè)IgMIgM抗體：抗體： 將抗抗體（抗人將抗抗體（抗人鏈）包被于固相載體鏈）包被于固相載體上，如樣本中含有特異性抗體則結(jié)合成抗抗體上，如樣本中含有特異性抗體則結(jié)合成抗抗體抗體復(fù)合物，加入抗原及酶標(biāo)記抗體則進(jìn)一抗體復(fù)合物，加入抗原及酶標(biāo)記抗體則進(jìn)一步形成抗抗體抗體抗原酶標(biāo)記抗體復(fù)合步形成抗抗體抗體抗原酶標(biāo)記抗體復(fù)合物。酶催化底物并顯色。物。酶催化底物并顯色。646465656666ELISAELISA原理及分類67673.3.膠體金法膠體金法膠體金法，又稱金標(biāo)法，是一種常用的標(biāo)膠體金法，又稱金

39、標(biāo)法，是一種常用的標(biāo)記技術(shù)，是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用記技術(shù)，是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù)。于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù)。目前在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用主要是免疫層析目前在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用主要是免疫層析法和快速免疫金滲濾法，具有簡(jiǎn)單、快速、法和快速免疫金滲濾法，具有簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確和無污染等優(yōu)點(diǎn)。各類快速檢測(cè)試紙準(zhǔn)確和無污染等優(yōu)點(diǎn)。各類快速檢測(cè)試紙均采用免疫層析法，大量以塑料為載體的均采用免疫層析法，大量以塑料為載體的快速檢測(cè)塊均采用快速免疫金滲濾法快速檢測(cè)塊均采用快速免疫金滲濾法6868 層析法免疫膠體金檢測(cè)試劑結(jié)構(gòu)示意圖 69697070肝炎標(biāo)志物檢測(cè)一一

40、. .乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒（乙型肝炎病毒（HBVHBV）是具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的）是具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的DNADNA病毒，核心內(nèi)含有一雙股病毒，核心內(nèi)含有一雙股DNADNA和和DNADNA聚合酶，外面有聚合酶，外面有一層含有表面抗原（一層含有表面抗原（HBsAgHBsAg）的外衣）的外衣 HBV HBV的抗原復(fù)的抗原復(fù)雜，其外殼中有表面抗原，核心成分中有核心抗原雜，其外殼中有表面抗原，核心成分中有核心抗原和和e e抗原，感染后可引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相抗原，感染后可引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。應(yīng)的抗體。HBVHBV感染的種屬范圍很窄，只局限于人感染的種屬范圍很窄，只局限于人和黑猩

41、猩。和黑猩猩。 1. 1. 乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗原(HBsAg)(HBsAg)和表面抗體和表面抗體( (抗抗- -HBs)HBsAgHBs)HBsAg存在于病毒顆粒的外殼以及小球形顆粒存在于病毒顆粒的外殼以及小球形顆粒和管狀顆粒。于感染后和管狀顆粒。于感染后2-122-12周，丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶周，丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)(ALT)升高前，即可由血內(nèi)測(cè)到，升高前，即可由血內(nèi)測(cè)到， HBsAg HBsAg有有“a”“a”、“b”“b”、“y”“y”、“r”“r”、“w”“w”等多種抗原決定簇，其中等多種抗原決定簇，其中“a”“a”是共同的抗原決定簇，在我國的主要是是共同的抗原決定簇，在我國的主

42、要是adradr亞型。亞型。 7171 乙肝病毒解剖模型（1 1）7272 乙肝病毒解剖模型（2）7373 抗抗-HBs-HBs對(duì)同型感染具有保護(hù)作用。近期感染者所產(chǎn)對(duì)同型感染具有保護(hù)作用。近期感染者所產(chǎn)HBsHBs屬屬IgMIgM，而長(zhǎng)期存在血中的為抗，而長(zhǎng)期存在血中的為抗-HBsIgG-HBsIgG。 前前S1S1及前及前S2S2蛋白具有與蛋白具有與HBsAgHBsAg不同的抗原。完整的不同的抗原。完整的HBVHBV顆顆粒含有粒含有S S蛋白及前蛋白及前S2S2蛋白，而缺陷病毒顆粒則無前蛋白，而缺陷病毒顆粒則無前S1S1蛋白。蛋白。血清中出現(xiàn)前血清中出現(xiàn)前S1S1、前、前S S抗原是抗原是

43、HBVHBV活動(dòng)性復(fù)制的標(biāo)志。活動(dòng)性復(fù)制的標(biāo)志。 HBsAg HBsAg陽性患者原發(fā)性肝癌的發(fā)病概率為正常人的陽性患者原發(fā)性肝癌的發(fā)病概率為正常人的200200倍以上；倍以上； 2. HBcAg 2. HBcAg主要存在于受染的肝細(xì)胞核內(nèi)，復(fù)制后被釋至胞主要存在于受染的肝細(xì)胞核內(nèi)，復(fù)制后被釋至胞漿中，由胞漿中形成的漿中，由胞漿中形成的HBsAgHBsAg包裹，裝配成完整的病毒顆粒包裹，裝配成完整的病毒顆粒后釋放入血。血液中一般不能查到游離的后釋放入血。血液中一般不能查到游離的HBcAgHBcAg。血中的。血中的DaneDane顆粒經(jīng)去垢劑處理后可以查到其核心部分的顆粒經(jīng)去垢劑處理后可以查到其核

44、心部分的HBcAgHBcAg和和DNADNA聚合酶。聚合酶。7474 早期出現(xiàn)者主要是抗早期出現(xiàn)者主要是抗-HBcIgM-HBcIgM，是近期感染的重要標(biāo)志；抗，是近期感染的重要標(biāo)志；抗- -HBcIgGHBcIgG出現(xiàn)較遲，但可長(zhǎng)期存在?？钩霈F(xiàn)較遲，但可長(zhǎng)期存在?？?HBc-HBc對(duì)對(duì)HBVHBV感染無保護(hù)作感染無保護(hù)作用。血清中抗用。血清中抗-HBcIgM-HBcIgM陽性表明體內(nèi)有陽性表明體內(nèi)有HBVHBV復(fù)制，且有肝細(xì)胞復(fù)制，且有肝細(xì)胞損害；若抗損害；若抗-HbcIgG-HbcIgG陽性且滴度高，伴以抗陽性且滴度高，伴以抗-HBs-HBs陽性，則為乙陽性，則為乙型肝炎恢復(fù)期；若抗型肝炎

45、恢復(fù)期；若抗-HBcIgG-HBcIgG呈低滴度，抗呈低滴度，抗-HBcIgM-HBcIgM陰性，而陰性，而抗抗-HBs-HBs陽性，則是既往感染的標(biāo)志。陽性，則是既往感染的標(biāo)志。3. HBeAg3. HBeAg僅存在于僅存在于HBsAgHBsAg陽性者的血液中，通常伴有肝內(nèi)陽性者的血液中，通常伴有肝內(nèi)HBVDNAHBVDNA的復(fù)制，血中存在較多的復(fù)制，血中存在較多DaneDane顆粒和顆粒和HBVDNAHBVDNA聚合酶活性聚合酶活性增高，因此，增高，因此，HBeAgHBeAg陽性是病毒活動(dòng)性復(fù)制的重要指標(biāo)，傳染陽性是病毒活動(dòng)性復(fù)制的重要指標(biāo)，傳染性高。急性肝炎患者若性高。急性肝炎患者若HB

46、eAgHBeAg持續(xù)陽性持續(xù)陽性1010周以上，則易于轉(zhuǎn)為周以上，則易于轉(zhuǎn)為持續(xù)感。持續(xù)感。7575 HBV HBV是通過接觸、血液及血制品、母嬰垂直傳播是通過接觸、血液及血制品、母嬰垂直傳播等方式傳播。在我國約有等方式傳播。在我國約有6060的乙肝病毒攜帶者是通的乙肝病毒攜帶者是通過母嬰垂直傳播的。過母嬰垂直傳播的。二二. .甲型肝炎病毒（甲型肝炎病毒（HAVHAV） HAV HAV屬微小核糖核酸病毒屬微小核糖核酸病毒 (RNA) (RNA)主要引起急性感主要引起急性感染，經(jīng)糞口途徑傳播，有季節(jié)性，可引起暴發(fā)流行。染，經(jīng)糞口途徑傳播，有季節(jié)性，可引起暴發(fā)流行。三三. .丙型肝炎抗體丙型肝炎抗

47、體(HCV)(HCV) 測(cè)定丙型肝炎抗體是判定急、慢性丙型肝炎的重測(cè)定丙型肝炎抗體是判定急、慢性丙型肝炎的重要指標(biāo)。丙型肝炎病毒（要指標(biāo)。丙型肝炎病毒（HCVHCV）是一種具有脂質(zhì)外殼）是一種具有脂質(zhì)外殼的的RNARNA病毒病毒 HCV HCV感染者血中的感染者血中的HCVHCV濃度極低，抗體反應(yīng)濃度極低，抗體反應(yīng)弱而晚，血清抗弱而晚，血清抗-HCV-HCV在感染后平均在感染后平均1818周陽轉(zhuǎn)，至肝功周陽轉(zhuǎn)，至肝功能恢復(fù)正常時(shí)消退，而慢性患者抗能恢復(fù)正常時(shí)消退，而慢性患者抗-HCV-HCV可持續(xù)多年并可持續(xù)多年并具有傳染性。具有傳染性。7676 在2個(gè)月左右的潛伏期后，只有大約四分之一的病人

48、會(huì)出現(xiàn)食欲差、疲倦、黃疸等癥狀；而大部分的患者卻沒有任何感覺。而且，感染后大約要經(jīng)過二十年左右才會(huì)出現(xiàn)肝硬化。因此，有很多人根本不知道自己經(jīng)感染。而丙肝可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝細(xì)胞癌（HCC），對(duì)患者的健康和生命危害極大 HCV主要通過輸血和血制品來進(jìn)行傳播。 四四. .丁型肝炎病毒丁型肝炎病毒(HDV) (HDV) 是一種缺陷的嗜肝單鏈?zhǔn)且环N缺陷的嗜肝單鏈RNARNA病毒，病毒，需要需要HBVHBV的輔助才能進(jìn)行復(fù)制，因此的輔助才能進(jìn)行復(fù)制，因此HDVHDV和和HBVHBV同時(shí)或重疊感染。同時(shí)或重疊感染。7777五五. .戊型肝炎病毒（戊型肝炎病毒（HEV

49、HEV） HEV HEV對(duì)氯仿敏感，在對(duì)氯仿敏感，在44或或2020下易被破壞，下易被破壞，在鹼性環(huán)境中較穩(wěn)定。在鹼性環(huán)境中較穩(wěn)定。HEVHEV存在于替伏末期及發(fā)病存在于替伏末期及發(fā)病初期的患者糞便中。有明顯的季節(jié)性，多散發(fā)于雨初期的患者糞便中。有明顯的季節(jié)性，多散發(fā)于雨季后，糞口傳播是主要的傳播途徑。季后，糞口傳播是主要的傳播途徑。甲型和戊型肝炎病毒主要引起急性感染，經(jīng)糞口途甲型和戊型肝炎病毒主要引起急性感染，經(jīng)糞口途徑傳播，有季節(jié)性，可引起暴發(fā)流行。徑傳播，有季節(jié)性，可引起暴發(fā)流行。乙、丙、丁型肝炎常表現(xiàn)為慢性經(jīng)過，主要經(jīng)血液傳乙、丙、丁型肝炎常表現(xiàn)為慢性經(jīng)過，主要經(jīng)血液傳播，無季節(jié)性，多

50、為散發(fā)，并可發(fā)展為肝硬化和肝播，無季節(jié)性，多為散發(fā)，并可發(fā)展為肝硬化和肝細(xì)胞癌。細(xì)胞癌。7878類風(fēng)濕性因子（類風(fēng)濕性因子（RFRF）：是一種以變性）：是一種以變性IgGIgG為靶抗原為靶抗原的自身抗體，主要存在于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的的自身抗體，主要存在于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清和關(guān)節(jié)液中，它是一種抗變性血清和關(guān)節(jié)液中，它是一種抗變性IgGIgG的抗體，可的抗體，可與與IgGFcIgGFc段結(jié)合。檢測(cè)方法一般有膠乳凝集試驗(yàn)、段結(jié)合。檢測(cè)方法一般有膠乳凝集試驗(yàn)、雙抗原夾心雙抗原夾心ELISAELISA法、速率散射比濁法。法、速率散射比濁法。膠乳凝集試驗(yàn)?zāi)z乳凝集試驗(yàn) ：將變性：將變性IgGIgG包

51、被于聚苯乙烯膠乳包被于聚苯乙烯膠乳顆粒上，這種致敏膠乳在與待測(cè)血清中的顆粒上，這種致敏膠乳在與待測(cè)血清中的RFRF相遇相遇時(shí)，即發(fā)生肉眼可見的凝集。時(shí)，即發(fā)生肉眼可見的凝集。正常人正常人1 1：2020稀釋血清為陰性，操作要求稀釋血清為陰性，操作要求56305630分分鐘滅活，（滅活鐘滅活，（滅活C1qC1q以阻止假陽性凝集）。以阻止假陽性凝集）。 類風(fēng)濕診斷 7979臨床意義：未經(jīng)治療的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者其陽性率為80%，且滴定度常在1：160以上。 RF不是僅在RA患者中出現(xiàn)，在SLE、進(jìn)行性全身性硬化癥等自身免疫性疾病患者和部分老年人中RF的陽性率可達(dá)28.9%-50%，因而RF對(duì)RA患

52、者并不具有嚴(yán)格特異性， 抗鏈球菌溶血素抗鏈球菌溶血素“O”“O”，簡(jiǎn)稱抗，簡(jiǎn)稱抗“O”“O”或或ASO ASO 溶血性鏈球菌產(chǎn)生的一種代謝產(chǎn)物能溶血性鏈球菌產(chǎn)生的一種代謝產(chǎn)物能溶解紅細(xì)胞，所以這種產(chǎn)物被取名為溶解紅細(xì)胞，所以這種產(chǎn)物被取名為“O”“O”溶血溶血素，人體感染了素，人體感染了A A組溶血性鏈球菌后，組溶血性鏈球菌后，“O”“O”溶溶血素在體內(nèi)作為一種抗原物質(zhì)存在。為了測(cè)定血素在體內(nèi)作為一種抗原物質(zhì)存在。為了測(cè)定這種能中和鏈球菌溶血素這種能中和鏈球菌溶血素“O”“O”的抗體含量，就的抗體含量，就稱為抗鏈球菌溶血素稱為抗鏈球菌溶血素“O”“O”試驗(yàn)。試驗(yàn)。 8080臨床意義臨床意義: :溶血性鏈球菌感染、溶血性鏈球菌感染、猩紅熱、丹毒、鏈球性咽炎、猩紅熱、丹毒、鏈球性咽炎、扁桃體炎。對(duì)風(fēng)濕熱、急性腎扁桃體炎。對(duì)風(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎有間接診斷價(jià)值、若小球腎炎有間接診斷價(jià)值、若多次檢測(cè)結(jié)果遞增，并伴紅細(xì)多次檢測(cè)結(jié)果遞增，并伴紅細(xì)胞沉降率加快可有助于診斷。胞沉降率加快可有助于診斷。 8181免疫學(xué)檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制 （ELISA）質(zhì)量管