所有詳細(xì)試劑配方

1、SDS-PAGE30%聚丙烯酰胺溶液-30%（w/v）Acrylamide 【組分濃度】各種組分名稱配制不同體積所需各成分的體積(mL)或質(zhì)量(g)30%Acr-Bis(29:1)1000ml100ml29%Acrylamide(丙烯酰胺)290g29g1%BIS(N,N-亞甲丙烯酰胺)10g1g【配制方法】將29克丙烯酰胺和1克N,N-亞甲丙烯酰胺溶于總體積為60ml溫?zé)幔?7左右）的去離子水中，充分?jǐn)嚢枞芙?，補(bǔ)加水至終體積為100ml。0.45µm微孔濾膜過濾除菌和雜質(zhì)，儲(chǔ)于棕色瓶，4避光（用鋁箔紙包扎起來）保存。嚴(yán)格核實(shí)PH不得超過7.0，因可以發(fā)生脫氨基反應(yīng)是光催化或堿催化的

2、。使用期不得超過兩個(gè)月，隔幾個(gè)月須重新配制。如有沉淀，可以過濾?！颈４鏃l件】4避光（用鋁箔紙包扎起來）保存【注意事項(xiàng)】丙烯酰胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性并可通過皮膚吸收，其作用具有累積性。稱量丙烯酰胺和N,N-亞甲丙烯酰胺時(shí)應(yīng)戴手套和面具?？烧J(rèn)為聚丙烯酰胺無毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因?yàn)樗€可能含有少量未聚合材料。1MTris-HCL（pH6.8）(濃縮膠buffer)【組分濃度】1MTris-HCL名稱用量備注Tris12.1g去離子水80ml濃鹽酸9ml(36%的濃鹽酸)預(yù)實(shí)驗(yàn)已確定去離子水加入去離子水定容至100ml后，室溫保存【配制方法】稱量121.1gTris堿溶于800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞?/p>

3、解，加>0.7mL的濃HCL調(diào)節(jié)所需要的pH值（7.4-大約0.7mL，7.6-大約0.6mL，8.0-大約0.42mL），將溶液定容至1L，高溫高壓滅菌后，室溫保存。應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位?！颈４鏃l件】室溫保存。【注意事項(xiàng)】對(duì)人體有刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。1.5MTris-HCL（pH8.8）(分離膠buffer)【組分濃度】1.5MTris-HCL名稱用量備注Tris18.17g去離子水80ml濃鹽酸3ml(36%的濃鹽酸)預(yù)實(shí)驗(yàn)已確定去離子水加入去離子水定容至100ml后，室溫

4、保存【配制方法】1L稱量181.7gTris堿溶于800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙猓訚釮CL調(diào)節(jié)所需要的pH值=8.8，將溶液定容至1L，高溫高壓滅菌后，室溫保存。（1.5mmol/LTris-HCL(pH8.8):18.15gTris和48ml1mol/LHCL混合，加水稀釋到100ml終體積。過濾后40C保存。）【保存條件】室溫保存【注意事項(xiàng)】應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。 10%十二烷基硫酸鈉SDS溶液-10%(w/v)SDS 【組分濃度】10%(w/v)SDS名稱用量備注SDS10g

5、去離子水80ml加入去離子水定容至100ml后，室溫保存【配制方法】稱取2g高純度的SDS置于100200ml燒杯中，加入約16ml的去離子水，68加熱溶解，滴加濃鹽酸調(diào)節(jié)PH至7.2，定容至20ml后，室溫保存【保存條件】室溫保存【注意事項(xiàng)】保存條件：    4保存。注意事項(xiàng)：    易燃，有腐蝕性，請(qǐng)注意防護(hù)。    易揮發(fā)，使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。    為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。保存條件：  

6、;  4保存。注意事項(xiàng)：    易燃，有腐蝕性，請(qǐng)注意防護(hù)。    易揮發(fā)，使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。    為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套對(duì)人體有害，請(qǐng)注意防護(hù)。10%過硫酸銨溶液-10%(w/v)AP 【組分濃度】10%(w/v) 過硫酸銨名稱用量備注過硫酸銨0.1g去離子水1ml現(xiàn)配現(xiàn)用【配制方法】稱取0.1g過硫酸銨置于1.5ml離心管，加1mL去離子水吹打溶解，4保存【保存條件】4保存【注意事項(xiàng)】10%過硫酸銨溶液在4保存時(shí)，可使用2周左右

7、，超過期限會(huì)失去催化作用5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液- 5×Tris-Glycine buffer （SDS-PAGE電泳緩沖液）【組分濃度】各種組分名稱配制不同體積所需各成分的體積(mL)或質(zhì)量(g)1000ml500ml0.125M Tris15.1g1.25M glycine(甘氨酸)94.0g0.5%(W/V)SDS5.0g【配制方法】稱取15.1gTris，94.0g甘氨酸（glycine），5.0gSDS，用800ml蒸餾水或去離子水溶解，充分?jǐn)嚢枞芙?，定容?000ml，室溫保存。得0.125mol/L Tris-1.25mol/L甘氨酸電極緩沖液

8、。臨用前稀釋5倍?！颈４鏃l件】室溫保存，兩年有效?！咀⒁馐马?xiàng)】配制好的電泳液使用時(shí)間不宜超過兩周。 電泳緩沖液可以回收，回收后可再使用1-2次，但為了取得最佳的電泳效果，應(yīng)使用新電泳液。  5×SDS-PAGE加樣緩沖液- 5×SDS-PAGE Loading Buffer 【組分濃度】0.25MTris-HCL(pH6.8)；10%(W/V)SDS；0.5%(W/V) BPB(溴酚藍(lán))；50%(V/V) 甘油；5%(W/V)-巰基乙醇(2-ME)各種組分名稱配制不同體積所需各成分的體積(mL)或質(zhì)量(g)5ml3ml1MTris-HCL(pH6.8)1

9、.25mlSDS0.5gBPB(溴酚藍(lán))25mg甘油2.5ml（0.5mL/份）分裝，室溫保存，使用前加25L 2-ME/小份，保存一個(gè)月左右。-巰基乙醇(2-ME) 0.25ml【配制方法】量取1.25mL 1MTris-HCL（pH6.8），0.5g SDS，25mg BPB，2.5mL甘油，置于10mL塑料離心管中，加去離子水溶解后，定容至5mL，小份（0.5mL/份）分裝，于室溫保存。使用前將25L的2-ME加入到每小份中。加入2-ME的Loading Buffer可在室溫下保存一個(gè)月左右?！颈４鏃l件】-20保存，至少一年有效。 【注意事項(xiàng)】SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)中含少量DTT和巰基乙醇，有輕微刺激性氣味，必須完全溶解后再使用。 摘自Takara 商品目錄-實(shí)驗(yàn)室常規(guī)試劑配制方法 TEMED原液直接使用考馬斯亮藍(lán)R-250染色液 【組分濃度】0.1%(w/v)考馬斯亮藍(lán)R-250，25%(v/v)異丙醇，10%(v/v)冰醋酸各種組分名稱配制不同體積所需各成分的體積(mL)或質(zhì)量(g)1000ml400ml備注考馬斯亮藍(lán)R-250