腺苷脫氨酶ADA測定

1、腺苷脫氨酶ADA測定1檢驗目的指導本室工作人員規(guī)范操作本檢測項目，確保檢測結果 的準確。2原理ADA腺苷+HO肌苷+NH3PNP肌苷+Pi次黃嘌呤+1-磷酸核糖XOD次黃嘌呤+2 H42O尿酸+2 H2QPODH 2C2 +4-AAP+EHSPT4H 2O+苯醌類3標本要求3.1使用新鮮血清，不使用血漿.3.2在采集血液后2h分離血清.3.3 8h內不能及時測定血清可存放于2-8 C冰箱保存,3天后測定的血清置-15 C- -20 C冰凍保存，但冰凍血清只能復融一次.3.4 嚴重溶血或脂血的標本不能作測定 .4 試劑4.1試劑：上海復星長征醫(yī)學科學有限公司ADA試劑盒（滬食藥監(jiān)械（準）字 20

2、14 第 2400166 號 YZB/ 滬 1546-40-2014 ）4.1.1 試劑組成試劑 1 60 ml, 試劑主要成分如下 :Tris HCL緩沖液（PH8.0）50.0mmol/L XO 0.2u/ml4-AAP 2.0mmol/LPOD 0.6u/mlPNP 0.1u/mlNaN3 0.2g/L試劑 2 60 ml, 試劑主要成分如下 :Tris HCL緩沖液（PH4.0）50.0mmol/L腺苷EHSPT2.0 mmol/L10.0mmol/L4.1.2 試劑準備： 試劑為即用式試劑穩(wěn)定性與貯存：28 C避光、密封的儲存條件下，試劑（盒）自生產之日起有效期為 12 個月。試劑

3、1 與試劑2啟用后，在210C避光的條件下可穩(wěn)定 20天。4.1.4 變質指示：當試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質，不能繼續(xù)使用。4.2 校準品：4.2.1 采用以檢測用水為空白的方式進行校準。4.2.2 校準及校準頻次的要求： 正常情況下，應每周至少對 測定進行一次校準。當發(fā)生下列情況時（如：使用的試劑批 號發(fā)生改變時、使用的儀器進行維修、保養(yǎng)或關鍵部件進行 更換后、質控品的測定結果發(fā)生漂移或超出規(guī)定的范圍等） 應重新對測定進行校準后再對患者的樣本進行檢測。5 儀器AU2700 生化分析儀，羅氏 P800 生化分析儀 , 西門子ADVIA-2400

4、生化分析儀，東芝 TBA-120 生化分析儀6 操作步驟6.1 樣品的準備：將標好號的樣品離心后放到儀器規(guī)定的位6.2 試劑的檢測：儀器開機后，檢查各種試劑的位置，體積等確認無誤后方可進行測定。6.3 項目基本參數(shù)： 參見生化檢驗 AU2700 生化分析儀，羅 氏 P800 生化分析儀 , 西門子 ADVIA-2400 生化分析儀，東芝 TBA-120 生化分析儀項目測定參數(shù)。6.4 儀器操作步驟：參見生化檢驗 AU2700生化分析儀，羅氏P800 生化分析儀 , 西門子 ADVIA-2400 生化分析儀，東芝TBA-120 生化分析儀操作規(guī)程。7 質量控制在每一批標本中都應把非定值血清水平

5、I 與 II 質控做為 未知標本進行分析，以 2S 為質控警告限， 3S 為失控限，繪 制質控圖，判斷是否在控。8 計算方法在病人結果可報告范圍內，儀器直接報告可靠的檢測結 果，以 U/L 報告。9 參考值4-22 u/L(37 C)10 臨床意義ADA在良惡性難辨的滲出液鑒別診斷上有重要價值，國內外研究表明，ADA對診斷結核性滲出液的特異性和敏感性明 顯優(yōu)于活檢和細菌學法、結核性胸腹水ADA活性顯著增高，癌性胸腹水不增高，而血清ADA活性二者無顯著差異，此外， 腦脊液ADA檢測可作為中樞神經系統(tǒng)疾病診斷和鑒別診斷的 重要指標，結核性腦膜炎顯著增高，病毒性腦炎不增高，顱 內腫瘤及中樞神經系統(tǒng)白血病稍增高。11 操作性能11.1本法的 ADA可報告范圍為 0 200 u/L (37C)11.2精密度CVC 5%11.3 準確度 測定值在正常及異常質控范圍內12 超出范圍結果處理 如果超過線性范圍用生理鹽水 1：1 稀釋，結果乘 213 病危報警值的處理：無。14 補救措施 當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。15 參考文獻15.1葉應嫵，王毓山，申子瑜主編全國臨床檢驗操作規(guī) 程中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編（第四版）15.2 錢士勻主編 . 臨床生物化學及生物化學檢驗實驗