雞病化驗(yàn)與分析

1、雞病化驗(yàn)與分析雞病化驗(yàn)與分析主要內(nèi)容主要內(nèi)容 1 雞病化驗(yàn)室化驗(yàn)內(nèi)容雞病化驗(yàn)室化驗(yàn)內(nèi)容 2 診斷或化驗(yàn)結(jié)果的分析與應(yīng)用診斷或化驗(yàn)結(jié)果的分析與應(yīng)用 3 關(guān)于提高動(dòng)保中心的功能關(guān)于提高動(dòng)保中心的功能1雞病化驗(yàn)室化驗(yàn)內(nèi)容雞病化驗(yàn)室化驗(yàn)內(nèi)容 1.1 1.1 病理解剖及組織切片病理解剖及組織切片 1.2 1.2 病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查 1.3 1.3 血清學(xué)檢查血清學(xué)檢查 1.4 1.4 藥敏與藥效試驗(yàn)藥敏與藥效試驗(yàn) 1.5 1.5 免疫試驗(yàn)或治療性試驗(yàn)免疫試驗(yàn)或治療性試驗(yàn) 1.6 1.6 復(fù)制病例復(fù)制病例 1.7 1.7 消毒劑消毒效果試驗(yàn)或含量檢測消毒劑消毒效果試驗(yàn)或含量檢測 1.8 1.8 如何確定

2、檢查內(nèi)容如何確定檢查內(nèi)容 1.9 1.9 檢驗(yàn)方法的選擇檢驗(yàn)方法的選擇雞病化驗(yàn)室雞病化驗(yàn)室病理學(xué)病理學(xué)流行病學(xué)、流行病學(xué)、臨床表現(xiàn)臨床表現(xiàn)病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查血清學(xué)檢查血清學(xué)檢查相關(guān)試驗(yàn)或相關(guān)試驗(yàn)或檢驗(yàn)檢驗(yàn)診斷結(jié)果診斷結(jié)果控制措施控制措施 1.1 病理解剖及組織切片 病理學(xué)檢查是雞病診斷過程中最為重要的內(nèi)容。病理學(xué)檢查是雞病診斷過程中最為重要的內(nèi)容。 大體解剖大體解剖 采集病料做相關(guān)檢驗(yàn)采集病料做相關(guān)檢驗(yàn) 血樣血樣 病原檢測用樣品病原檢測用樣品 病理組織切片用樣品病理組織切片用樣品 病理組織切片病理組織切片 腫瘤病腫瘤病 一些產(chǎn)生包函體的病毒病（一些產(chǎn)生包函體的病毒?。↖BH、ILT、FP）

3、其他，如曲霉菌病其他，如曲霉菌病 1.2 病原學(xué)檢查1.2.1 顯微鏡直接檢查病原顯微鏡直接檢查病原 涂片或觸片（球蟲卵囊、梭菌、巴氏桿涂片或觸片（球蟲卵囊、梭菌、巴氏桿菌等）菌等）壓片（霉菌）壓片（霉菌）病理組織切片（組織滴蟲，其他寄生蟲）病理組織切片（組織滴蟲，其他寄生蟲） 1.2 1.2 病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查1.2.2 病原分離鑒定病原分離鑒定 細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 營養(yǎng)瓊脂，選擇性培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂，選擇性培養(yǎng)基 鑒定鑒定 菌落特征，染色特性，生化特性，血清學(xué)反應(yīng)，菌落特征，染色特性，生化特性，血清學(xué)反應(yīng)，復(fù)制病例。復(fù)制病例。 病毒分離與鑒定病毒分離與鑒定（一

4、般化驗(yàn)室不允許）（一般化驗(yàn)室不允許） 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 雞胚雞胚(SPF)，組織細(xì)胞，動(dòng)物體，組織細(xì)胞，動(dòng)物體鑒定鑒定 血清學(xué)反應(yīng)，形態(tài)特征，特征性的病理變化，分血清學(xué)反應(yīng)，形態(tài)特征，特征性的病理變化，分子生物學(xué)子生物學(xué) 1.2 病原學(xué)檢查1.2.3 試劑盒快速檢測病原試劑盒快速檢測病原 膠體金膠體金（20-30分鐘出結(jié)果，敏感性為分鐘出結(jié)果，敏感性為10-100萬萬EID50） 新城疫（新城疫（ND） 禽流感（禽流感（AI），含），含A型（型（H1-H15）、）、H5亞型和亞型和H9亞型。亞型。 PCR ELISA 霉形體（霉形體（MG、MS） 白血?。ò籽。ˋLV）膠體金 1.3 血清學(xué)檢查

5、 定性檢查定性檢查 常用方法：常用方法： 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)（瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)（AGP） 快速平板凝集試驗(yàn)（快速平板凝集試驗(yàn)（SPA） 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA） 應(yīng)用：應(yīng)用： 免疫抗體監(jiān)測免疫抗體監(jiān)測 IBD-AGP、MG-AGP或或ELISA等等 了解病原感染情況或疾病診斷了解病原感染情況或疾病診斷 P/T-SPA、CAV-ELISA、IBH-AGP、REV-ELISA、 MG-SPA或或ELISA等等 注意檢驗(yàn)結(jié)果中有假陽性或假陰性。注意檢驗(yàn)結(jié)果中有假陽性或假陰性。 定量檢查定量檢查 常用方法：常用方法： 紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)（紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)（HI） 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（酶聯(lián)

6、免疫吸附試驗(yàn)（ELISA） 應(yīng)用：免疫抗體監(jiān)測；疾病診斷應(yīng)用：免疫抗體監(jiān)測；疾病診斷 1.4 藥敏與藥效試驗(yàn)藥敏與藥效試驗(yàn)1.4.1 藥敏試驗(yàn)藥敏試驗(yàn) 由死、淘雞分離到細(xì)菌后，常通過紙由死、淘雞分離到細(xì)菌后，常通過紙片法選擇敏感藥物。片法選擇敏感藥物。1.4.2 藥效試驗(yàn)藥效試驗(yàn) 通常通過測定最小抑菌濃度（通常通過測定最小抑菌濃度（MIC）的方法來比較選擇藥物及檢驗(yàn)藥品的品質(zhì)。的方法來比較選擇藥物及檢驗(yàn)藥品的品質(zhì)。 1.5 免疫試驗(yàn)或治療性試驗(yàn)選擇疫苗選擇疫苗營養(yǎng)性疾病營養(yǎng)性疾病細(xì)菌性疾病細(xì)菌性疾病 1.6 復(fù)制病例 初步確定疾病是否是具有傳染性；初步確定疾病是否是具有傳染性； 確認(rèn)某些疾病確

7、認(rèn)某些疾病 中毒中毒 營養(yǎng)性疾病營養(yǎng)性疾病 某些傳染病某些傳染病 1.7 消毒劑消毒效果檢測或含量檢測 消毒劑消毒劑MIC測定測定 模擬現(xiàn)場消毒試驗(yàn)?zāi)M現(xiàn)場消毒試驗(yàn) 含量測定含量測定 火堿，福爾馬林，氯制劑等?；饓A，福爾馬林，氯制劑等。1.8 如何確定檢查內(nèi)容 根據(jù)發(fā)病日齡、發(fā)病時(shí)間，臨床表現(xiàn)，流行病學(xué)、大根據(jù)發(fā)病日齡、發(fā)病時(shí)間，臨床表現(xiàn)，流行病學(xué)、大體病理變化初步診斷結(jié)果，采集合適的病料，選擇檢體病理變化初步診斷結(jié)果，采集合適的病料，選擇檢查內(nèi)容。例如：查內(nèi)容。例如： ND、AI 育雛期發(fā)病或發(fā)病初期檢測病原，育成、育雛期發(fā)病或發(fā)病初期檢測病原，育成、產(chǎn)蛋期或發(fā)病后產(chǎn)蛋期或發(fā)病后1-2周采血

8、檢測抗體周采血檢測抗體 球蟲球蟲 直接鏡檢（直接涂片或蟲卵計(jì)數(shù)）直接鏡檢（直接涂片或蟲卵計(jì)數(shù)） 細(xì)菌感染細(xì)菌感染 直接做細(xì)菌培養(yǎng)直接做細(xì)菌培養(yǎng) 腫瘤病腫瘤病 病理組織切片接合病理組織切片接合ELISA檢測抗體或病原檢測抗體或病原 盡可能采用最快速、經(jīng)濟(jì)、簡便易行的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。盡可能采用最快速、經(jīng)濟(jì)、簡便易行的方法進(jìn)行檢驗(yàn)。 最常見的錯(cuò)誤做法是發(fā)病初期采血化驗(yàn)。最常見的錯(cuò)誤做法是發(fā)病初期采血化驗(yàn)。 1.9 檢驗(yàn)方法的選擇 優(yōu)先選擇國際或國家標(biāo)準(zhǔn)方法；優(yōu)先選擇國際或國家標(biāo)準(zhǔn)方法； 水樣檢驗(yàn)，按飲用水國標(biāo)方法水樣檢驗(yàn)，按飲用水國標(biāo)方法 ND-HI、AI-HI，OIE或國標(biāo)方法或國標(biāo)方法 飼料（沙門

9、氏菌、霉菌）國標(biāo)方法飼料（沙門氏菌、霉菌）國標(biāo)方法 檢測試劑（盒）有規(guī)定方法的，按規(guī)定方法檢驗(yàn)；檢測試劑（盒）有規(guī)定方法的，按規(guī)定方法檢驗(yàn)； 其他情況，參考有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)制定檢驗(yàn)規(guī)程其他情況，參考有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)制定檢驗(yàn)規(guī)程 病、死雞的各種細(xì)菌分離病、死雞的各種細(xì)菌分離 藥敏試驗(yàn)或藥效檢驗(yàn)藥敏試驗(yàn)或藥效檢驗(yàn)2 2 診斷或化驗(yàn)結(jié)果的分析與應(yīng)用診斷或化驗(yàn)結(jié)果的分析與應(yīng)用 2.1 2.1 環(huán)境監(jiān)測環(huán)境監(jiān)測 2.2 2.2 病料細(xì)菌檢測病料細(xì)菌檢測 2.3 2.3 藥敏試驗(yàn)結(jié)果藥敏試驗(yàn)結(jié)果 2.4 2.4 藥效試驗(yàn)結(jié)果藥效試驗(yàn)結(jié)果 2.5 2.5 病毒檢測結(jié)果病毒檢測結(jié)果 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清

10、或卵黃抗體檢測結(jié)果2.1 環(huán)境檢測 根據(jù)下面的標(biāo)準(zhǔn)判定是否合格。樣品名稱樣品名稱檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品名稱樣品名稱檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)水樣水樣細(xì)菌總數(shù)細(xì)菌總數(shù)100100個(gè)個(gè)/ml/ml空氣樣品空氣樣品細(xì)菌總數(shù)細(xì)菌總數(shù)=30=30個(gè)個(gè)/ /平皿平皿總大腸菌群總大腸菌群MPN2MPN2霉菌霉菌=2=2個(gè)個(gè)/ /平皿平皿PHPH值值6.5-8.56.5-8.5大腸桿菌大腸桿菌金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌不得檢出不得檢出飼料飼料/ /原料原料沙門氏菌沙門氏菌不得檢出不得檢出表面試子表面試子細(xì)菌總數(shù)細(xì)菌總數(shù)=30=30個(gè)個(gè)/ /平方平方厘米厘米霉菌霉菌飼料飼料,45000,45000個(gè)個(gè)/g

11、/g霉菌霉菌=2=2個(gè)個(gè)/ /平方平方厘米厘米細(xì)菌總數(shù)細(xì)菌總數(shù)魚粉魚粉,2,210106 6個(gè)個(gè)/g/g大腸桿菌大腸桿菌金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌不得檢出不得檢出新墊料新墊料霉菌霉菌4500020mm，極敏，極敏 ！注意：監(jiān)床口服！注意：監(jiān)床口服給藥，除了考慮細(xì)菌對給藥，除了考慮細(xì)菌對藥品的敏感性，還須考藥品的敏感性，還須考慮藥物是否經(jīng)腸道吸收慮藥物是否經(jīng)腸道吸收及藥品吸收后的分布、及藥品吸收后的分布、代謝情況。代謝情況。2.4 2.4 藥效試驗(yàn)結(jié)果藥效試驗(yàn)結(jié)果 抗菌藥物，抗菌藥物，MIC值越小，值越小，藥效越好；藥效越好； 中藥，除少數(shù)藥品外中藥，除少數(shù)藥品外（如楊樹花），應(yīng)無抑（如楊樹花

12、），應(yīng)無抑菌活性或只有較低的體菌活性或只有較低的體外抑菌活性（如黃芩外抑菌活性（如黃芩苷）；苷）； 同一藥品，如不同批次同一藥品，如不同批次的藥品的藥品MIC有明顯差異，有明顯差異，說明其配方有改變。說明其配方有改變。 現(xiàn)場應(yīng)使用現(xiàn)場應(yīng)使用MIC100010001000100016 16 10001000 2.5 病毒檢測結(jié)果 2.5.1 NDV 檢測方法檢測方法檢測結(jié)果檢測結(jié)果結(jié)果分析結(jié)果分析雞胚分離雞胚分離分離到弱毒分離到弱毒（MDT60h） 如弱毒苗免疫后兩周內(nèi)分離到弱毒，常為疫苗毒；如弱毒苗免疫后兩周內(nèi)分離到弱毒，常為疫苗毒；ND弱毒不是引起發(fā)病的主因。弱毒不是引起發(fā)病的主因。分離到強(qiáng)

13、毒分離到強(qiáng)毒（MDT60h 提示雞群有提示雞群有ND強(qiáng)毒感染，是否引起發(fā)病要考慮強(qiáng)毒感染，是否引起發(fā)病要考慮雞群的雞群的ND免疫水平及臨床表現(xiàn)：免疫水平及臨床表現(xiàn)： 1）育雛期死亡增加或產(chǎn)蛋期產(chǎn)蛋下降但死淘正）育雛期死亡增加或產(chǎn)蛋期產(chǎn)蛋下降但死淘正常，可能主要由常，可能主要由ND引起。引起。 2）免疫良好的育成期雞群即使感染）免疫良好的育成期雞群即使感染ND強(qiáng)毒也不強(qiáng)毒也不會(huì)引起嚴(yán)重的疾病。會(huì)引起嚴(yán)重的疾病。未分離到病毒未分離到病毒 抗體水平較高的育成雞或產(chǎn)蛋雞群，感染抗體水平較高的育成雞或產(chǎn)蛋雞群，感染ND強(qiáng)強(qiáng)毒后，排毒量少，排毒時(shí)間短，不易分離到病毒，毒后，排毒量少，排毒時(shí)間短，不易分離到

14、病毒，需要后續(xù)的血清抗體檢測做進(jìn)一步判定。需要后續(xù)的血清抗體檢測做進(jìn)一步判定。PCR方法方法陽性或陰性陽性或陰性 有典型臨床表現(xiàn)時(shí)的陽性結(jié)果有一定診斷意義。有典型臨床表現(xiàn)時(shí)的陽性結(jié)果有一定診斷意義。膠體金方膠體金方法法陽性或陰性陽性或陰性 雛雞急性發(fā)病時(shí)檢測結(jié)果陽性可診斷為雛雞急性發(fā)病時(shí)檢測結(jié)果陽性可診斷為ND。 2.5 病毒檢測結(jié)果 2.5.2 H9亞型AIV檢測方法檢測方法檢測結(jié)果檢測結(jié)果結(jié)果分析結(jié)果分析雞胚分離雞胚分離陽性陽性 提示雞群有提示雞群有H9亞型亞型AIV感染，是否引起發(fā)病要考慮感染，是否引起發(fā)病要考慮雞群的雞群的H9亞型亞型AI免疫水平及臨床表現(xiàn)：免疫水平及臨床表現(xiàn)： 1）育

15、雛期死亡增加，同時(shí)有典型的）育雛期死亡增加，同時(shí)有典型的H9亞型亞型AI病變病變（氣管出血，支氣管栓塞，肺瘀血），主要由該病原（氣管出血，支氣管栓塞，肺瘀血），主要由該病原引起。引起。 2）無）無H9亞型亞型AI抗體的產(chǎn)蛋雞群產(chǎn)蛋嚴(yán)重下降，可抗體的產(chǎn)蛋雞群產(chǎn)蛋嚴(yán)重下降，可主要由該病原引起（須排除主要由該病原引起（須排除ND）。）。陰性陰性 抗體水平較高的雞群，感染病毒后，排毒量少，排抗體水平較高的雞群，感染病毒后，排毒量少，排毒時(shí)間短，不易分離到病毒，需要后續(xù)的血清抗體檢毒時(shí)間短，不易分離到病毒，需要后續(xù)的血清抗體檢測做進(jìn)一步判定。測做進(jìn)一步判定。PCR方法方法陽性或陰陽性或陰性性 有典型臨床

16、表現(xiàn)時(shí)的陽性結(jié)果有一定診斷意義。有典型臨床表現(xiàn)時(shí)的陽性結(jié)果有一定診斷意義。膠體金方膠體金方法法陽性或陰陽性或陰性性 雛雞急性發(fā)病時(shí)檢測結(jié)果陽性可診斷為雛雞急性發(fā)病時(shí)檢測結(jié)果陽性可診斷為AI H9，同，同時(shí)時(shí)ND和和AI H5結(jié)果陰性時(shí)可診斷為結(jié)果陰性時(shí)可診斷為AI H9。 2.5 病毒檢測結(jié)果 2.5.3 H5亞型AIV檢測方法檢測方法檢測結(jié)果檢測結(jié)果結(jié)果分析結(jié)果分析雞胚分離雞胚分離陽性陽性 不同毒株病毒的毒力和抗原性差異很大，但任何不同毒株病毒的毒力和抗原性差異很大，但任何有臨床發(fā)病的雞群，病毒分離陽性都應(yīng)首先考慮該有臨床發(fā)病的雞群，病毒分離陽性都應(yīng)首先考慮該病。病。陰性陰性 抗體水平較高的

17、雞群，感染病毒后，排毒量少，抗體水平較高的雞群，感染病毒后，排毒量少，排毒時(shí)間短，不易分離到病毒，需要后續(xù)的血清抗排毒時(shí)間短，不易分離到病毒，需要后續(xù)的血清抗體檢測做進(jìn)一步判定。體檢測做進(jìn)一步判定。PCR方法方法陽性或陰陽性或陰性性 可疑病例陽性具有診斷意義。可疑病例陽性具有診斷意義。膠體金方法膠體金方法陽性或陰陽性或陰性性 可疑病例陽性具有診斷意義。可疑病例陽性具有診斷意義。2.5 病毒檢測結(jié)果病毒檢測結(jié)果 2.5.4 IBV 傳染性支氣管炎（傳染性支氣管炎（IB）的）的病毒分離鑒定工作較為復(fù)雜，病毒分離鑒定工作較為復(fù)雜，通常需要做下面一系列工作：通常需要做下面一系列工作： 雞胚接種雞胚接種

18、出現(xiàn)典型的出現(xiàn)典型的“侏儒胚侏儒胚”提示存在提示存在IBV 病例復(fù)制病例復(fù)制能復(fù)制出病能復(fù)制出病例證明分離物為主要病原例證明分離物為主要病原 疫苗免疫攻毒疫苗免疫攻毒某毒株某毒株的疫苗能提供保護(hù)除了可的疫苗能提供保護(hù)除了可證實(shí)分離物為證實(shí)分離物為IBV，同時(shí)，同時(shí)為現(xiàn)場選擇最有效的疫苗為現(xiàn)場選擇最有效的疫苗提供依據(jù)。提供依據(jù)。 2.5 病毒檢測結(jié)果病毒檢測結(jié)果2.5.4 IBV 不同毒株疫苗的免疫保護(hù)試驗(yàn)不同毒株疫苗的免疫保護(hù)試驗(yàn) 將將108只只1日齡的蛋雛雞分成日齡的蛋雛雞分成5組，每組組，每組21-22只，除只，除對照組外，其余對照組外，其余4組組3d時(shí)分別用時(shí)分別用H120+28/86、

19、腎型、腎型IB 2#（本室編號(hào)）、（本室編號(hào)）、Ma5及及IB 4-91疫苗點(diǎn)眼免疫，疫苗點(diǎn)眼免疫，免疫后免疫后5天天（8d）用）用分離毒分離毒經(jīng)滴鼻點(diǎn)眼攻毒，劑量約經(jīng)滴鼻點(diǎn)眼攻毒，劑量約105EID50/只只（感染尿囊液（感染尿囊液10倍稀釋后，倍稀釋后，0.1ml/只），攻毒后每天觀察只），攻毒后每天觀察并記錄雞只發(fā)病和死亡情況，共觀察并記錄雞只發(fā)病和死亡情況，共觀察14天，天，死亡死亡如下：如下： 2.5 2.5 病毒檢測結(jié)果病毒檢測結(jié)果 2.5.5 IBDV 通過采集有病變的法氏囊，處理后與通過采集有病變的法氏囊，處理后與IBD標(biāo)準(zhǔn)陽性標(biāo)準(zhǔn)陽性血清做瓊指擴(kuò)散試驗(yàn)，陽性說明法氏囊組織中含

20、大量病血清做瓊指擴(kuò)散試驗(yàn)，陽性說明法氏囊組織中含大量病毒，具有一定診斷意義。毒，具有一定診斷意義。 但需注意的是中等毒力或中等偏強(qiáng)毒力疫苗免疫后，但需注意的是中等毒力或中等偏強(qiáng)毒力疫苗免疫后，此法也可檢出陽性。此法也可檢出陽性。 2.5.6 MDV 該病很少通過病毒分離鑒定方法進(jìn)行診斷，但取毛該病很少通過病毒分離鑒定方法進(jìn)行診斷，但取毛囊浸出液與囊浸出液與MD標(biāo)準(zhǔn)陽性血清做瓊指擴(kuò)散試驗(yàn)，陽性結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)陽性血清做瓊指擴(kuò)散試驗(yàn)，陽性結(jié)果具有診斷意義。具有診斷意義。 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.1 ND-HI抗體抗體 ND母源抗體下降基本規(guī)律（如圖所示）母源抗

21、體下降基本規(guī)律（如圖所示）1)一周約下降一周約下降2個(gè)滴度（蛋雞個(gè)滴度（蛋雞4-5天下降天下降1個(gè)滴度）個(gè)滴度）2）下降速度與以下因素有關(guān)：）下降速度與以下因素有關(guān)：-卵黃吸收情況卵黃吸收情況-生長速度生長速度-免疫或自然感染免疫或自然感染 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.1 ND-HI抗體抗體 雛雞早期接種雛雞早期接種ND疫苗后的抗體變化情況疫苗后的抗體變化情況 -接種疫苗越早，母源抗體對免疫應(yīng)答的影響越大；接種疫苗越早，母源抗體對免疫應(yīng)答的影響越大； -用滅活苗用滅活苗+弱毒活苗于弱毒活苗于7d或或7d后免疫，雞群可獲得后免疫，雞群可獲得較高的抗體水平。較高的

22、抗體水平。0123456716d20d24d28d33d37d3d,DN&IO;7d,DN&IO+NDK3d,DN&IO;9d,DN&IO+NDK3d,DN&IO;11d,DN&IO+NDK3d,DN&IO;13d,DN&IO+NDK3d,NDK;9d,DN&IO+NDK3d,NDK無2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)血清或卵黃抗體檢測結(jié)果果 2.6.1 ND-HI抗體抗體 正常種雞雞群抗體變正常種雞雞群抗體變化情況化情況 8WNDK二免后，二免后，抗體水平上升至較高抗體水平上升至較高水平；水平； 具有較高抗體水平具有較高抗體水

23、平的雞群，接種弱毒活的雞群，接種弱毒活苗對抗體水平影響不苗對抗體水平影響不大，接種滅活苗后抗大，接種滅活苗后抗體可上升體可上升1-2個(gè)滴度；個(gè)滴度； 進(jìn)入產(chǎn)蛋期后，雞進(jìn)入產(chǎn)蛋期后，雞群抗體水平會(huì)下降群抗體水平會(huì)下降3個(gè)個(gè)滴度左右。滴度左右。 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.1 ND-HI抗體抗體 商品肉雞抗體水平分析（商品肉雞抗體水平分析（1）舍號(hào)舍號(hào)日齡日齡樣品數(shù)樣品數(shù)抗體分布抗體分布GMTGMT%CV0 01 12 23 34 45 56 67 78 81#34d2020 1 110103 36 6 3.703.7026%26%2#34d2020 2

24、2 4 412122 2 4.604.6023%23%3#34d1818 1 14 45 53 35 5 4.394.3929%29%4#34d2020 2 22 25 56 64 41 1 4.554.5530%30%免疫情況：免疫情況：1dAvinew+H1208dlasota+H1209dND+H914dIBD19d新支妥新支妥 分析：該雞群總體抗體分析：該雞群總體抗體水平尚可，但部分樣品抗體水水平尚可，但部分樣品抗體水平偏低，如感染野外強(qiáng)毒，可平偏低，如感染野外強(qiáng)毒，可引起引起10%10%左右的死亡率。左右的死亡率。2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.

25、1 ND-HI抗體抗體 商品肉雞抗體水平分析（商品肉雞抗體水平分析（2）舍舍號(hào)號(hào)日日齡齡項(xiàng)目項(xiàng)目抗體水平分布抗體水平分布數(shù)數(shù)量量0 01 12 23 34 45 56 67 78 89 910101111GMT 1#1#29d29dND-HIND-HI1919 3 33 37 72 24 45.055.052#2#29d29dND-HIND-HI2020 3 39 96 62 23.353.353#3#29d29dND-HIND-HI1919 3 36 64 44 42 23.793.794#4#29d29dND-HIND-HI1919 11112 26 65.165.165#5#29d29d

26、ND-HIND-HI2020 4 44 45 56 61 16.256.256#6#29d29dND-HIND-HI2020 3 33 36 61 12 24 41 14.904.901#1#34d34dND-HIND-HI1818 1 14 46 64 42 21 13.283.282#2#34d34dND-HIND-HI1919 1 12 27 72 22 25 55.165.163#3#34d34dND-HIND-HI2020 2 21 14 45 58 83.803.804#4#34d34dND-HIND-HI2020 4 42 22 26 62 23 31 13.453.455#5#

27、34d34dND-HIND-HI2020 5 59 95 51 15.105.106#6#34d34dND-HIND-HI2020 2 23 37 74 41 13 33.603.60 問題：以上是同一雞群問題：以上是同一雞群2929和和3434日齡的抗體檢測結(jié)果，該雞群是否有日齡的抗體檢測結(jié)果，該雞群是否有NDND野外野外強(qiáng)毒感染？強(qiáng)毒感染？ 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.1 ND-HI抗體抗體 商品肉雞抗體水平分析（商品肉雞抗體水平分析（3）舍號(hào)舍號(hào)TestTest抗體水平分布抗體水平分布GMTGMT%CV%CV日齡日齡NrNr0 0 1 1 2 2

28、3 34 45 56 67 78 89 91010111112121#1#30d30dND-HIND-HI1919 1 15 54 42 24 43 39.69.618%18%2#2#30d30dND-HIND-HI1919 2 23 37 72 21 12 21 11 15.75.739%39%3#3#30d30dND-HIND-HI2020 7 79 91 11 12 24.14.131%31%4#4#30d30dND-HIND-HI2020 1 12 21 19 91 16 610.510.514%14%發(fā)生發(fā)生ND的典型抗體水平：的典型抗體水平： 1）先感染的雞舍抗體水平整體異升高；）

29、先感染的雞舍抗體水平整體異升高； 2）感染中期的雞舍抗體離散度大，部分雞只抗體已異常升高；）感染中期的雞舍抗體離散度大，部分雞只抗體已異常升高； 3）采樣時(shí)尚有雞舍抗體水平正常。）采樣時(shí)尚有雞舍抗體水平正常。 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.1 ND-HI抗體抗體 育成期發(fā)生育成期發(fā)生ND的典型抗體水平的典型抗體水平抗體水平分布抗體水平分布舍號(hào)舍號(hào)周齡周齡TestTestNrNr- -4 45 56 67 78 89 910101111121213131414GMTGMTH1H18W8WND-HIND-HI23232 28 811112 212.5712.

30、57H2H28W8WND-HIND-HI24243 317173 31 112.0812.08H3H38W8WND-HIND-HI24241 13 313133 34 4 7.257.25H4H48W8WND-HIND-HI24241 13 37 78 84 41 1 7.547.54H5H58W8WND-HIND-HI24242 26 65 58 83 3 7.177.17H6H68W8WND-HIND-HI15151 15 57 71 11 1 6.736.73H7H78W8WND-HIND-HI24242 27 76 65 53 31 1 7.137.13H8H88W8WND-HIND-

31、HI23233 31 114144 41 1 6.966.96 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.1 ND-HI抗體抗體 產(chǎn)蛋期發(fā)生非典型產(chǎn)蛋期發(fā)生非典型ND的抗體水平的抗體水平抗體水平分布抗體水平分布舍號(hào)舍號(hào)周齡周齡TestTestNrNr-9 91010111112121313141415151616GMTGMTH1H130W30WND-HIND-HI24241 15 55 511112 211.3311.33H2H230W30WND-HIND-HI27274 410109 94 411.4811.48H3H330W30WND-HIND-HI24241

32、12 214146 61 111.1711.17H4H430W30WND-HIND-HI24243 311118 82 211.3811.38H5H530W30WND-HIND-HI24242 29 97 72 21 13 313.0013.00H6H630W30WND-HIND-HI24243 32 213136 611.9211.92H7H730W30WND-HIND-HI24248 86 66 63 31 111.2911.29H8H830W30WND-HIND-HI24242 29 910103 311.5811.58 盡管雞群已有很高的抗體水平，感染野外強(qiáng)毒后抗體水平仍然明盡管雞群已

33、有很高的抗體水平，感染野外強(qiáng)毒后抗體水平仍然明顯上升（雞群同時(shí)有產(chǎn)蛋下降）。顯上升（雞群同時(shí)有產(chǎn)蛋下降）。2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.1 ND-HI抗體抗體 雞群感染雞群感染ND野外強(qiáng)毒后抗體水平變化特點(diǎn)：野外強(qiáng)毒后抗體水平變化特點(diǎn)： 1）感染后）感染后10-14天抗體水平異常升高，抗體上升的天抗體水平異常升高，抗體上升的幅度與感染前的抗體水平幅度與感染前的抗體水平“成反比成反比”； 2）感染后初期抗體水平離散度較大，但很快整體）感染后初期抗體水平離散度較大，但很快整體上升至較高水平；上升至較高水平； 3）有多個(gè)雞舍的雞場，感染往往先由）有多個(gè)雞舍的雞

34、場，感染往往先由1-2個(gè)雞舍開個(gè)雞舍開始，逐漸傳播到其他雞舍。始，逐漸傳播到其他雞舍。 注意：抗體水平較低的雞群，免疫滅活疫苗后，注意：抗體水平較低的雞群，免疫滅活疫苗后，在抗體上升期（在抗體上升期（10-20天），抗體水平離散度往往天），抗體水平離散度往往較大，易誤判為野毒感染。較大，易誤判為野毒感染。2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.2 AI H9-HI抗體抗體 AI H9-HI抗體變化規(guī)律與抗體變化規(guī)律與ND抗體變化相似，包括：抗體變化相似，包括： 1）首免受母源抗體干擾，首免后抗體水平往往上升）首免受母源抗體干擾，首免后抗體水平往往上升不理想，抗體離散度大；

35、二免、甚至三免后雞群方可獲得不理想，抗體離散度大；二免、甚至三免后雞群方可獲得理想的抗體水平。理想的抗體水平。 2）感染野毒后，雞群抗體水平會(huì)異常升高。）感染野毒后，雞群抗體水平會(huì)異常升高。 同時(shí)同時(shí)AI H9-HI抗體與抗體與ND抗體變化也有不同，包括：抗體變化也有不同，包括： 1）AI H9只有滅活苗可用，首免后抗體離散度更大；只有滅活苗可用，首免后抗體離散度更大； 2）不同毒株）不同毒株H9亞型亞型AI的抗原性有較大差異，當(dāng)使用與的抗原性有較大差異，當(dāng)使用與疫苗抗原性差異較大的毒株檢測抗體時(shí)，檢測到的抗體水疫苗抗原性差異較大的毒株檢測抗體時(shí)，檢測到的抗體水平往往較低。平往往較低。 3）與

36、）與ND強(qiáng)毒相比，強(qiáng)毒相比，AI H9病毒毒力相對較弱，免疫雞病毒毒力相對較弱，免疫雞群自然感染野毒后，抗體水平上升幅度相對較小。群自然感染野毒后，抗體水平上升幅度相對較小。2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.2 AI H9-HI抗體抗體 不同抗原檢測抗體的差異不同抗原檢測抗體的差異 樣品編號(hào)樣品編號(hào)1 12 23 34 45 56 67 78 8GMTGMT抗原抗原1 110107 79 99910999.0 9.0 抗原抗原2 211119 912121111101012121111121211.0 11.0 相同的樣品，用不同的抗原檢測，抗體水平相差相同的樣品，

37、用不同的抗原檢測，抗體水平相差2個(gè)滴度。因此：個(gè)滴度。因此： 1）化驗(yàn)室監(jiān)測免疫抗體時(shí)，要使用與疫苗毒株相匹配的抗原，才）化驗(yàn)室監(jiān)測免疫抗體時(shí)，要使用與疫苗毒株相匹配的抗原，才能真實(shí)反映出免疫效果，也可使用與當(dāng)?shù)亓餍卸局晗嘟乖?，這樣更能能真實(shí)反映出免疫效果，也可使用與當(dāng)?shù)亓餍卸局晗嘟乖?，這樣更能代表疫苗免疫后的保護(hù)力；代表疫苗免疫后的保護(hù)力； 2）當(dāng)使用不同廠家或不同批次的抗原時(shí)，需要與原來的抗原比對）當(dāng)使用不同廠家或不同批次的抗原時(shí)，需要與原來的抗原比對試驗(yàn)，并將比對試驗(yàn)結(jié)果附于報(bào)告中。試驗(yàn)，并將比對試驗(yàn)結(jié)果附于報(bào)告中。2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.2 A

38、I H9-HI抗體抗體 種雞群抗體走勢種雞群抗體走勢AI H9 免疫：免疫： 10d ND+IB+H9 8W ND+IB+H9 17W ND+IB+H9 23W H9 32W ND+IB+H9首免后抗體水平很低。首免后抗體水平很低。 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.3 AI H5-HI抗體抗體 雞群做雞群做AI H5滅活苗免疫后，滅活苗免疫后，HI抗體變化規(guī)律與抗體變化規(guī)律與AI H9基本相基本相同，但抗體水平相對較低，解讀同，但抗體水平相對較低，解讀AI H5抗體水平要注意以下抗體水平要注意以下幾點(diǎn)：幾點(diǎn)： 抗原與疫苗相匹配，即抗原與疫苗相匹配，即AI

39、H5 Re-4疫苗免疫后用疫苗免疫后用AI H5 Re-4株抗原檢測；株抗原檢測； AI H5 Re-5疫苗免疫后用疫苗免疫后用AI H5 Re-5抗原檢測。抗原檢測。 由于由于H5亞型亞型AI毒株變異很快，不同地區(qū)、不同時(shí)間，甚毒株變異很快，不同地區(qū)、不同時(shí)間，甚至同一地區(qū)同一時(shí)期流行的毒株都會(huì)有差異，當(dāng)流行毒至同一地區(qū)同一時(shí)期流行的毒株都會(huì)有差異，當(dāng)流行毒株抗原性變異較大時(shí)，免疫雞群即使感染野毒，用現(xiàn)有株抗原性變異較大時(shí)，免疫雞群即使感染野毒，用現(xiàn)有抗原也可能檢測不到抗體的變化，或者抗體變化不明顯，抗原也可能檢測不到抗體的變化，或者抗體變化不明顯，此時(shí)，要接合臨床表現(xiàn)做相應(yīng)的病原學(xué)檢測，方

40、可準(zhǔn)確此時(shí)，要接合臨床表現(xiàn)做相應(yīng)的病原學(xué)檢測，方可準(zhǔn)確診斷疾病。診斷疾病。 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.3 AI H5-HI抗體抗體 種雞禽種雞禽H5 RE-4抗體走勢抗體走勢 AI H5 Re-4+Re-5免疫時(shí)間：免疫時(shí)間：15-16d； 6W 13W； 21W 25W； 32W首免后抗體水平很低。首免后抗體水平很低。 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.3 AI H5-HI抗體抗體 種雞禽種雞禽H5 RE-5抗體走勢抗體走勢 AI H5 Re-4+Re-5免疫時(shí)間：免疫時(shí)間：15-16d； 6W 13W； 21W 25W； 32W首免后抗體水

41、平很低。首免后抗體水平很低。 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.4 IB-ELISA抗體抗體 ELISA抗體檢測結(jié)果解讀，主要參考試劑盒廠抗體檢測結(jié)果解讀，主要參考試劑盒廠/商商提供的數(shù)據(jù)，同時(shí)化驗(yàn)室要根據(jù)本地雞群的免疫、提供的數(shù)據(jù)，同時(shí)化驗(yàn)室要根據(jù)本地雞群的免疫、感染情況積累一些基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。感染情況積累一些基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。IDEXX的的IB ELISA主要參數(shù)如下：主要參數(shù)如下：IB活苗免疫后活苗免疫后3-5W，抗體效價(jià)為，抗體效價(jià)為1000-4000;IB滅活苗免疫后滅活苗免疫后5-8W，抗體效價(jià)為，抗體效價(jià)為5000-16000。 如抗體效價(jià)高于此范圍，則說明

42、有與疫苗如抗體效價(jià)高于此范圍，則說明有與疫苗毒抗原性差異較大的野毒感染。毒抗原性差異較大的野毒感染。SYB-XG Z-6# - IBVCountTiter G roups0123450123456789 10 11 12 13 14 15 16 17 18 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.4 IB-ELISA抗體抗體 商品肉雞發(fā)生商品肉雞發(fā)生IB后的抗體水平后的抗體水平2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.5 MG SPA或或ELISA抗體抗體 MG 快速平板凝集試驗(yàn)（快速平板凝集試驗(yàn)（SPA） 簡單易行；簡單易行； 檢測結(jié)

43、果受抗原質(zhì)量的影響很大檢測結(jié)果受抗原質(zhì)量的影響很大檢測抗原不同，檢測抗原不同，結(jié)果就不同；結(jié)果就不同； 多種因素可導(dǎo)致出現(xiàn)假陽性；多種因素可導(dǎo)致出現(xiàn)假陽性； 現(xiàn)在公認(rèn)可用的抗原為原英特威公司的現(xiàn)在公認(rèn)可用的抗原為原英特威公司的MG平板凝集抗平板凝集抗原。原。 MG ELISA抗體，主要參考試驗(yàn)盒廠商提供的數(shù)據(jù)進(jìn)行解抗體，主要參考試驗(yàn)盒廠商提供的數(shù)據(jù)進(jìn)行解讀。讀。IDEXX的試劑盒判讀如下：的試劑盒判讀如下：弱毒苗免疫后的弱毒苗免疫后的3-63-6周，滴度多數(shù)在周，滴度多數(shù)在group1group1。如果陽轉(zhuǎn)。如果陽轉(zhuǎn)率高于率高于80%80%，則免疫是相對成功的；如果陽轉(zhuǎn)率在，則免疫是相對成功的

44、；如果陽轉(zhuǎn)率在30-30-40%40%，則推薦加強(qiáng)免疫。如果抗體的滴度在，則推薦加強(qiáng)免疫。如果抗體的滴度在group2-3group2-3，則預(yù)示著此免疫雞群已存在野毒的感染。則預(yù)示著此免疫雞群已存在野毒的感染。兩次滅活苗免疫后兩次滅活苗免疫后3-43-4周檢測，抗體滴度在周檢測，抗體滴度在group2-3group2-3（from 2,0004,000 titerfrom 2,0004,000 titer）左右。）左右。FlockChek Mycoplasma gallisepticum Antibody Test Kit 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6

45、.5 MG SPA或或ELISA抗體抗體 免疫非感染雞群的免疫非感染雞群的MG-ELISA抗體水平抗體水平FlockChek Mycoplasma gallisepticum Antibody Test KitFlockChek Mycoplasma gallisepticum Antibody Test Kit histogram in chronic infected population 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.5 MG SPA或或ELISA抗體抗體 持續(xù)感染雞群的持續(xù)感染雞群的MG-ELISA抗體水平抗體水平 2.6 2.6 血清或卵黃抗體

46、檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.8 P/T-SPA（雞白?。u白痢/雞傷寒沙門氏菌快速平雞傷寒沙門氏菌快速平板凝集）抗體板凝集）抗體可出現(xiàn)假陽性的情況：可出現(xiàn)假陽性的情況： -油苗免疫后；油苗免疫后； -血清有污染；血清有污染； -凍存過或貯存時(shí)間過長的血清；凍存過或貯存時(shí)間過長的血清； -其他細(xì)菌感染等。其他細(xì)菌感染等。注意：其他注意：其他D群沙門氏菌（如腸炎群沙門氏菌（如腸炎沙門氏菌、都柏林沙門氏菌感染后，沙門氏菌、都柏林沙門氏菌感染后，因其有相同的菌體抗原，也會(huì)出現(xiàn)因其有相同的菌體抗原，也會(huì)出現(xiàn)陽性反應(yīng)。陽性反應(yīng)。 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2

47、.6.6 CAV-ELISA抗體抗體 種雞通常在種雞通常在12-14區(qū)期做區(qū)期做CAV-ELISA抗體檢抗體檢測，一般會(huì)出現(xiàn)以三種結(jié)果：測，一般會(huì)出現(xiàn)以三種結(jié)果： 全部陰性全部陰性雞群無野毒感染，需要在雞群無野毒感染，需要在18W之前做免疫之前做免疫或人工感染；或人工感染； 部分陽性部分陽性雞群正處于感染期，雞群無須免疫；雞群正處于感染期，雞群無須免疫； 全部陽性全部陽性雞群已全部感染野毒，雞群無須免疫。雞群已全部感染野毒，雞群無須免疫。PS4-F11-16W -3B - C A V100CountTi ter G roups012345601234PS4-F11-16W -2A - C A

48、V100CountTi ter G roups01234501234 2.6 血清或卵黃抗體檢血清或卵黃抗體檢測結(jié)果測結(jié)果 2.6.7 IBH-AGP抗體抗體 通常用瓊脂擴(kuò)散試通常用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)于驗(yàn)于12-14W檢測檢測雞包函體肝炎雞包函體肝炎（IBH）的抗體陽）的抗體陽轉(zhuǎn)率。轉(zhuǎn)率。 部分抗體陽性，雞群部分抗體陽性，雞群已感染；已感染； 全部陰性，建議人工全部陰性，建議人工感染野毒（可采集抗感染野毒（可采集抗體陽性雞群的墊料放體陽性雞群的墊料放雞群中）。雞群中）。 2.6 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.8 IBD-AGP或或ELISA抗體抗體 通常采用定量較為準(zhǔn)確的通常采用定量較為準(zhǔn)確的ELISA方法方法檢測雛雞的母源抗體來確定檢測雛雞的母源抗體來確定IBD首免首免時(shí)間。時(shí)間。 如果雞苗來源不同，建議采集如果雞苗來源不同，建議采集7d 雛雞的血樣進(jìn)行檢測，雛雞的血樣進(jìn)行檢測，以避免卵黃吸收差異較大帶來的誤差；以避免卵黃吸收差異較大帶來的誤差； 根據(jù)疫苗可突破的母源抗體水平，以根據(jù)疫苗可突破的母源抗體水平，以3.5天為半衰期（蛋天為半衰期（蛋雞雞4-5天）計(jì)算出首免日齡。天）計(jì)算出首免日齡。 2.6 血清或卵黃抗體檢測結(jié)果血清或卵黃抗體檢測結(jié)果 2.6.7 IBH-AGP或或