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1、大豆異黃酮的提取Soybean Isoflavone1.安全第一,實(shí)驗(yàn)全程要穿實(shí)驗(yàn)服。取用有毒有害的試劑一定要做好防護(hù)措施。2.配好的試劑貼上標(biāo)簽,寫上日期、姓名和試劑名稱。維護(hù)和愛(ài)惜實(shí)驗(yàn)室的儀器、設(shè)備。3.做完實(shí)驗(yàn)一定要收拾實(shí)驗(yàn)臺(tái)、搞好衛(wèi)生。藥品、試劑歸位。4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,到我這簽字,檢查后才能離開(kāi)。沒(méi)簽字的計(jì)曠課處理。5.最后離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室的同學(xué)關(guān)水電、門窗。實(shí)驗(yàn)守則一、大豆異黃酮概述大豆含有大量活性成分,被人們稱為“功能性成分寶庫(kù)”。大豆異黃酮(Soybean Isoflavone)是大豆生長(zhǎng)中形成一類次生代謝產(chǎn)物,屬于黃酮類化合物中異黃酮類成分,主要是指以3苯并吡喃酮為母核化合物。常溫下大
2、豆異黃酮性質(zhì)穩(wěn)定,易溶于醇類、酯類、酮類溶劑和稀堿中,不溶于水,難溶于石油醚、苯、正己烷等非極性有機(jī)溶劑。大豆異黃酮是生物黃酮一種。自然界中異黃酮資源十分有限,主要來(lái)源于豆科植物莢豆類、葛根等少數(shù)植物,其中以大豆含量較高,為 0.1%0.5%。抗癌抗癌抗心血管疾病抗心血管疾病抗骨抗骨質(zhì)質(zhì)疏松癥疏松癥抗抗婦婦女更年期女更年期綜綜合癥合癥 Bioactivities of Soybean IsoflavoneSoybean Isoflavone1 實(shí)驗(yàn)原理有機(jī)溶劑萃取法是國(guó)內(nèi)外提取異黃酮使用在廣泛的方法,常用的有機(jī)溶劑主要有:乙醇、甲醇、乙酸乙酯以及它們的水溶液。在有機(jī)溶劑萃取法中最常用的溶劑為乙
3、醇,即醇提法。提取過(guò)程中,乙醇的濃度對(duì)提取結(jié)果有較大的影響。一般認(rèn)為,乙醇濃度高有利于異黃酮的提取,但這還跟異黃酮物質(zhì)的某一特定結(jié)構(gòu)有關(guān),高濃度乙醇適用于提取游離型的苷元,低濃度的乙醇適用于提取糖苷形式的異黃酮。二、大豆異黃酮的提取豆渣豆渣干燥干燥過(guò)濾過(guò)濾離心離心乙醇溶液提乙醇溶液提取異黃酮取異黃酮脫脂脫脂冷卻冷卻回收上清液回收上清液2 實(shí)驗(yàn)提取工藝流程圖 3 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì) 4 大豆異黃酮的測(cè)定大豆異黃酮的測(cè)定 (1)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作: 準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)大豆異黃酮5 mg,用無(wú)水乙醇定容至50 mL,即標(biāo)準(zhǔn)液。分別準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)液0.1,0.5,0.8,1,2,5 mL 于10 mL 容量瓶中, 加乙醇定容,260 nm處測(cè)定其吸光值,得到的大豆異黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。 (2)樣品液中大豆異黃酮含量的測(cè)定: 取一定量樣品液直接在260 nm處測(cè)定其吸光值,計(jì)算異黃酮濃度,再計(jì)算異黃酮的提取率。 W = ( C * V / M ) * 100W:大豆異黃酮的得率;C:大豆異黃酮的濃度(mg/mL);V:大豆異黃酮提取溶液的體積(mL);M:大豆粉的質(zhì)量(mg)。(3)實(shí)驗(yàn)
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