檢測(cè)系統(tǒng)分析性能驗(yàn)證及確認(rèn)

1、檢測(cè)系統(tǒng)分析性能驗(yàn)證及確認(rèn)宋鑒清-論語衛(wèi)靈公 檢測(cè)系統(tǒng)：是指完成一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、操作程序、質(zhì)控品、樣品、質(zhì)量控制、保養(yǎng)計(jì)劃、操作者等的組合。檢測(cè)系統(tǒng)的用途：為患者提供準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果。 要記?。?jiǎn)螁我粋€(gè)試劑盒上的所謂分析性能，一定不就是試劑盒的！因?yàn)橹挥性噭]有儀器的合作，就沒有這些分析性能！ 同樣，儀器廠商宣傳的那些分析性能一定是在該儀器上使用了某個(gè)廠商的試劑盒才具有的！ 因此所有的分析性能一定是一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的！不是試劑盒的、也不是某個(gè)儀器的！常見檢測(cè)系統(tǒng)配套檢測(cè)系統(tǒng)-性能驗(yàn)證： A+A+A 封閉系統(tǒng) A+B+B 配套開放系統(tǒng)自建檢測(cè)系統(tǒng)-性能確認(rèn)： A+B+C 非配套

2、開放系統(tǒng)LDH 乳酸脫氫酶性能特征(羅氏)-1LDH 乳酸脫氫酶性能特征(羅氏)-2ISO 15189認(rèn)可準(zhǔn)則的要求驗(yàn)證（verification）確認(rèn)（validation）定義通過提供客觀證據(jù)證明給定項(xiàng)目滿足規(guī)定的要求通過提供客觀證據(jù)對(duì)特定的預(yù)期用途或應(yīng)用要求已得到滿足的認(rèn)定。適用范圍配套檢測(cè)系統(tǒng)固定組合的檢測(cè)系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)方法。非標(biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)或制定的方法、超出預(yù)定范圍使用的標(biāo)準(zhǔn)方法和修改過的確認(rèn)方法（自建檢測(cè)系統(tǒng)）。完成者臨床實(shí)驗(yàn)室獨(dú)立完成廠商，方法的研究和開發(fā)者，或臨床實(shí)驗(yàn)室。性能指標(biāo)精密度，正確度，可報(bào)告范圍，有時(shí)還有檢出限。精密度，正確度，可報(bào)告范圍，檢出限，干擾，攜帶污染等。目

3、的滿足廠商聲明或預(yù)期用途。滿足檢驗(yàn)預(yù)期用途的特定要求。CNAS CL02：2012 5.5.1.3性能驗(yàn)證與確認(rèn)的區(qū)別性能驗(yàn)證項(xiàng)目的選擇（一）5.5檢驗(yàn)方法和程序的分析性能驗(yàn)證內(nèi)容至少應(yīng)包括正確度、精密度和可報(bào)告范圍。 CNAS-CL38：2012醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床化學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明5.5檢驗(yàn)方法和程序的分析性能驗(yàn)證內(nèi)容至少應(yīng)包括：檢出限，精密度（包括重復(fù)性和中間精密度）、符合率，并 應(yīng)明確檢驗(yàn)項(xiàng)目的預(yù)期用途，如篩查、診斷、確認(rèn)。CNAS-CL39：2012醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明性能驗(yàn)證項(xiàng)目的選擇（二）5.5尿液干化學(xué)分析儀性能驗(yàn)證的內(nèi)容

4、至少應(yīng)包括陰性和陽(yáng)性符合率CNAS-CL41：2012醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在體液學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明5.5血液分析儀的性能驗(yàn)證內(nèi)容至少應(yīng)包括正確度、精密度、可報(bào)告范圍等。CNAS-CL43：2012醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床血液學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明WS/T 403-2012臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量指標(biāo)WS/T 406-2012臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求WS/T 408-2012臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南WS/T 492-2016臨床檢驗(yàn)定量測(cè)定項(xiàng)目精密度與正確度性能驗(yàn)證EP5-A3.Evaluationofprecisionofquantitativemeasur

5、ementprocedures;approvedguideline-thirdedition.2014EP15-A3.Userverificationofprecisionandestimationofbias；approvedguideline-thirdedition.2014EP9-A2.MethodComparisonandBiasEstimationUsingPatientSamples;ApprovedGuidelineSecondEditionEP6A.EvaluationoftheLinearityofQuantitativeMeasurementrocedures:AStat

6、isticalApproach;ApprovedGuidelineEP10A2.PreliminaryEvaluationofQuantitiveClinicalofLaboratoryMethods;ApprovedGuidelineSecondEdition.性能驗(yàn)證相關(guān)的基本概念精密度（precision）:在規(guī)定的條件下，對(duì)同一或類似被測(cè)對(duì)象重復(fù)測(cè)量所得示指或測(cè)得值間的一致程度。精密度的度量通常以不精密度（SD、方差或CV）表示。批（Run）：在檢測(cè)系統(tǒng)真實(shí)性和精密度穩(wěn)定的間隔期，一般不超過24小時(shí)或不少于2小時(shí)。正確度(trueness)：無窮多次重復(fù)測(cè)量所得量值的平均值與一個(gè)參考量

7、值間的一致程度。與系統(tǒng)測(cè)量誤差有關(guān)，與隨機(jī)測(cè)量誤差無關(guān)，以偏倚（Bias）表示。準(zhǔn)確度(accuracy)：?jiǎn)未螜z測(cè)結(jié)果與參考值間的一致程度，以總誤差（TE）表示。性能驗(yàn)證相關(guān)的基本概念線性（linearity）：檢測(cè)樣本時(shí)，在一定范圍內(nèi)可以直接按比例關(guān)系得出分析物含量的能力?？傉`差(total error)：實(shí)驗(yàn)室用某方法在多次獨(dú)立檢測(cè)中分析某樣品所得各個(gè)結(jié)果值與靶值之差在一定置信區(qū)間內(nèi)的最大允許范圍。靈敏度(analytical sensitivity)：校準(zhǔn)曲線的斜率，即對(duì)于規(guī)定量的變化分析程序產(chǎn)生信號(hào)的變化。檢測(cè)限(detection limit)：分析程序具有適當(dāng)?shù)拇_定檢出的分析物的

8、最小濃度或量。檢測(cè)限依賴于空白讀數(shù)大小。性能驗(yàn)證的實(shí)施過程 對(duì)檢驗(yàn)程序的性能驗(yàn)證涉及到多方面工作，為了得到可靠結(jié)果，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或?qū)嶒?yàn)主持人應(yīng)對(duì)此項(xiàng)工作有一個(gè)概括了解，先制定一個(gè)方案，包括如下工作： 1、性能驗(yàn)證項(xiàng)目的選擇、質(zhì)量目標(biāo)確定、性能驗(yàn)證方案制定及實(shí)施工作計(jì)劃； 2、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（人員培訓(xùn)、儀器維護(hù)及校準(zhǔn)、樣本留取及制備）； 3、實(shí)驗(yàn)操作、數(shù)據(jù)收集、處理； 4、結(jié)論。分析質(zhì)量指標(biāo)的確定分析質(zhì)量指標(biāo)（analytical quality specifications）;又稱質(zhì)量目標(biāo)（quality goals）、質(zhì)量規(guī)范（quality specification）、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（qualit

9、y standards）和分析性能目標(biāo)（analytical performance goals）。判斷臨床檢驗(yàn)結(jié)果精密度、正確度和準(zhǔn)確度水平高低的指標(biāo)，或臨床檢驗(yàn)結(jié)果應(yīng)達(dá)到的精密度、正確度和準(zhǔn)確度要求，通常用不精密度、偏倚和總誤差來表示。層次模式設(shè)定策略協(xié)議條款1評(píng)價(jià)分析性能對(duì)特定床決策的影響特定臨床情況下的質(zhì)量規(guī)范2評(píng)價(jià)分析性能對(duì)一般臨床決策的影響A.基于生物變異的一般質(zhì)量規(guī)范B.基于醫(yī)療觀點(diǎn)的一般質(zhì)量規(guī)范3專業(yè)建議A.國(guó)家或國(guó)際專家小組指南B.個(gè)別或?qū)W會(huì)工作組專家指南4由法規(guī)機(jī)構(gòu)或室間質(zhì)量評(píng)價(jià)組織者制定的質(zhì)量規(guī)范A.由法規(guī)機(jī)構(gòu)制定的質(zhì)量規(guī)范B.由室間質(zhì)量評(píng)價(jià)組織者制定的質(zhì)量規(guī)范5已發(fā)表的

10、當(dāng)前技術(shù)水平數(shù)據(jù)A.已發(fā)表的能力驗(yàn)證和室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的數(shù)據(jù)B.已發(fā)表的特定的方法學(xué)設(shè)定質(zhì)量目標(biāo)的層次模式和方法質(zhì)量目標(biāo)質(zhì)量目標(biāo)精密度驗(yàn)證 采用2個(gè)濃度的質(zhì)控物，每天分析1個(gè)批次，每個(gè)濃度重復(fù)檢測(cè)4次，連續(xù)5天。數(shù)據(jù)經(jīng)過離群值檢驗(yàn)，收集220=40個(gè)有效數(shù)據(jù)，并通過統(tǒng)計(jì)分析評(píng)價(jià)方法計(jì)算總精密度和批內(nèi)精密度，與允許范圍進(jìn)行比較，判斷結(jié)果是否接受。將估計(jì)的批內(nèi)精密度和室內(nèi)精密度與本室規(guī)定的相應(yīng)的允許范圍(CV批內(nèi)1/4總允許誤差，CV總行業(yè)標(biāo)準(zhǔn))比較，判斷驗(yàn)證是否通（同時(shí)參考CLIA規(guī)定的TEa、廠商聲明）。 參考臨床檢驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)EP15-A2WS/T 492-2016方法精密度分析方案結(jié)果匯總儀器

11、名稱：日立7600-210項(xiàng)目濃度水平濃度水平精密度CV%允許范圍判定結(jié)果驗(yàn)證值判定結(jié)果精密度CV%允許范圍判定結(jié)果驗(yàn)證值判定結(jié)果CACV批內(nèi)0.77%1.25%通過0.0621 通過CV批內(nèi)1.20%1.25%通過0.0783 通過CV總1.41%2.0%通過0.1254 通過CV總1.77%2.0%通過0.1258 通過PCV批內(nèi)1.20%2.50%通過0.0444 通過CV批內(nèi)1.17%2.50%通過0.0579 通過CV總1.38%4.0%通過0.0584 通過CV總2.01%4.0%通過0.1130 通過MGCV批內(nèi)1.59%3.75%通過0.0678 通過CV批內(nèi)1.24%3.75

12、%通過0.1008 通過CV總2.56%5.5%通過0.1261 通過CV總2.43%5.5%通過0.2103 通過臨床血液學(xué)批內(nèi)精密度 試驗(yàn)方案批內(nèi)精密度以連續(xù)檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，使用1份正常濃度水平的臨床標(biāo)本，按常規(guī)方法重復(fù)檢測(cè)11次，計(jì)算后10次的算術(shù)平均值、標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)，與允許的變異系數(shù)進(jìn)行比較，判斷結(jié)果是否接受。（參考WS/T 406-2012臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求）日間精密度 試驗(yàn)方案日間精密度以室內(nèi)質(zhì)控在控結(jié)果的變異系數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，使用Sysmex配套質(zhì)控品（低值、中值、高值）當(dāng)前批號(hào)累積的變異系數(shù)，與允許的變異系數(shù)進(jìn)行比較，判斷結(jié)果是否接受。（參考WS

13、/T 406-2012臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求）臨床血液學(xué)臨床案例臨床案例1 1臨床案例臨床案例1 1臨床案例臨床案例1 1正確度驗(yàn)證 WS/T 406-2012臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求WS/T 492-2016臨床檢驗(yàn)定量項(xiàng)目精密度與正確度性能驗(yàn)證EP9-A3:Measurementprocedurecomparisonandbiasestimationusingpatientsamples;approvedguideline-thirdedition.2013EP9-A2：MethodComparisonandBiasEstimationUsingPatientSamp

14、les;ApprovedGuideline-SecondEdition，2002EP15-A2：UserVerificationofPerformanceforPrecisionandTrueness,2005EP15-A3.Userverificationofprecisionandestimationofbias；approvedguideline-thirdedition.2014臨床血液學(xué)1試驗(yàn)過程1.1 樣本的準(zhǔn)備選取10份檢測(cè)結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的新鮮臨床樣本。1.2 試驗(yàn)步驟 10份標(biāo)本分別在該儀器上檢測(cè)2次，記錄各項(xiàng)目20次檢測(cè)結(jié)果，計(jì)算均值； 相同樣本在臨檢室標(biāo)準(zhǔn)儀器（J-300

15、1-LJ）上同樣檢測(cè)2次，記錄各項(xiàng)目20次檢測(cè)結(jié)果，計(jì)算均值，設(shè)為靶值； 該儀器檢測(cè)結(jié)果均值與靶值計(jì)算偏倚。1.3 質(zhì)量控制 整個(gè)試驗(yàn)階段檢測(cè)儀器狀態(tài)正常，各批次質(zhì)控結(jié)果均符合要求。2 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析 各試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析方法參考臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求。3 試驗(yàn)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)各項(xiàng)目的偏倚應(yīng)符合表6的要求。正確度初步評(píng)價(jià) 先用5個(gè)定值PT樣品進(jìn)行正確度初步評(píng)價(jià)，每個(gè)樣品測(cè)量1次，計(jì)算5個(gè)樣品與靶值之間的平均偏倚，若允許偏差（衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)）初步評(píng)價(jià)通過，直接進(jìn)行正確度確認(rèn)；若不通過則進(jìn)行校準(zhǔn)，初步評(píng)價(jià)通過后再進(jìn)行正確度確認(rèn)。檢測(cè)PT樣品5份，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)量3次，計(jì)算每個(gè)樣品均值與靶值的

16、相對(duì)偏倚；檢測(cè)參考方法定值的新鮮血清樣品5份，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)量3次，計(jì)算每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)量的均值與靶值的相對(duì)偏倚；用實(shí)驗(yàn)方法和參考方法同時(shí)檢測(cè)40份新鮮樣品，每天測(cè)量10個(gè)樣品，每個(gè)樣品測(cè)量1次，連續(xù)4天。以參考方法結(jié)果為橫座標(biāo)X，實(shí)驗(yàn)方法為縱座標(biāo)Y，繪制散點(diǎn)圖，計(jì)算回歸方程，計(jì)算參考區(qū)間兩端和醫(yī)學(xué)決定水平處的相對(duì)偏倚。 （-EP9-A3EP9-A3）偏倚允許偏差，正確度得到確認(rèn)。確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方法有證參考物質(zhì)（CRMs）：已用參考方法或決定性方法定值，可從美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局（NIST）或其他國(guó)際組織認(rèn)可的提供者獲得;從能力驗(yàn)證試驗(yàn)（PT）中獲得的參考物：如CAP和衛(wèi)生部檢驗(yàn)中心能力驗(yàn)證試驗(yàn)中提供的調(diào)查品

17、;廠商提供的正確度確認(rèn)物或質(zhì)控物;室間質(zhì)量評(píng)價(jià)計(jì)劃中使用的質(zhì)控物;由第三方提供的已用不同方法定值的物質(zhì)。定值參考物質(zhì)檢測(cè)的回收實(shí)驗(yàn)比 對(duì) 試驗(yàn)方案收集樣本20份，其濃度應(yīng)均勻分布整個(gè)分析測(cè)量范圍。采用試驗(yàn)方法和比較方法分別檢測(cè)20份樣本，試驗(yàn)持續(xù)4天，每天測(cè)定5份樣本。每種方法對(duì)于每個(gè)樣本重復(fù)測(cè)定2次，將樣本按1、2、3、4、5的順序進(jìn)行第一次測(cè)定，再按反向順序測(cè)定第二次。順序中的樣本濃度盡量隨機(jī)排列。其測(cè)定結(jié)果經(jīng)過方法內(nèi)、方法間離群值檢驗(yàn)，X值合適范圍檢驗(yàn)，離散度均勻性檢查等步驟，繪制散點(diǎn)圖，粗略分析方法間是否呈線性關(guān)系。通過線性回歸分析估計(jì)在醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚的95%可信區(qū)間大??；或

18、者如數(shù)據(jù)離散度均勻，可計(jì)算各濃度的平均偏倚及平均百分比偏倚大小。將兩種偏倚與偏倚的允許范圍進(jìn)行比較以判定是否符合要求。參考臨床檢驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)EP9-A2WS/T 407-2012 醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)定量檢驗(yàn)結(jié)果的可比性驗(yàn)證指南方法內(nèi)離群值檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法差值絕對(duì)值的均值：0.19 接受限為前者4倍：0.77 實(shí)驗(yàn)方法相對(duì)差值絕對(duì)值的均值：0.02 接受限為前者4倍：0.07 比較方法差值絕對(duì)值的均值：0.21 接受限為前者4倍：0.85 比較方法相對(duì)差值絕對(duì)值的均值：0.02 接受限為前者4倍：0.08 方法間離群值檢驗(yàn)E值：0.22 E的控制限=4*E=0.878E值：0.0146 E的控制限=4*E=

19、0.0585 X值合適范圍的檢驗(yàn)CNAS-CL38：2012醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床化學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)比對(duì)分析臨床案例臨床案例2 2臨床案例臨床案例2 2臨床案例臨床案例2 2臨床案例臨床案例2 2臨床案例臨床案例2 2臨床案例臨床案例2 2臨床案例臨床案例2 2可報(bào)告范圍臨床可報(bào)告范圍分析測(cè)量范圍線性評(píng)價(jià)方法1.目測(cè)法:主觀、粗略、不能確定每個(gè)點(diǎn)的線性程度；2.改良Doumas方法（平均斜率法）； 3.CAP設(shè)備委員會(huì)（IRC）采用的多項(xiàng)式回歸分析方法(CAP-IRC法)；4.CLSI EP-6A法（定量檢驗(yàn)方法的線性評(píng)價(jià)）。樣本來源1.病人標(biāo)本；2.低濃度的標(biāo)本（或推

20、薦的稀釋液）稀釋高濃度標(biāo)本；3.病人樣本中添加分析物（如CaCl2、Glu)、加入量原則上少于總體積的10%；4.商業(yè)質(zhì)控物/校準(zhǔn)物/線性驗(yàn)證物質(zhì)。項(xiàng)目名稱項(xiàng)目名稱線性范圍線性范圍水平水平1 1質(zhì)控均值質(zhì)控均值水平水平2 2質(zhì)控均值質(zhì)控均值鉀1.5-10.0 4.017.519鈣0.05-52.413.24血糖0.11-41.66.8419.85肌酐92總蛋白1-13052.2760.95丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶4-100083195.3肌酸激酶3-2300233.1623.9低密度脂蛋白0.026-18.103.0794.57淀粉酶3-1500130.9262.5膽固醇 0.13-20.77 4.8117.313線性：0.11-41.66.8419.856.8419.85平均斜率法評(píng)價(jià)分析測(cè)量范圍（改良Doumas方法）試驗(yàn)方案選取接近儀器標(biāo)注的分析測(cè)量范圍上限（其樣本濃度不低于標(biāo)定分析范圍上限的85%）和下限的兩個(gè)分析濃度的樣本(H和L)，按照1L、0.8L0.2H、0.6L+0.4H、0.4L+0.6H、0.2L+0.8H、1H的比例關(guān)系配制6個(gè)系列濃度的樣本。對(duì)每個(gè)混合樣本進(jìn)行多次(至少2次)檢測(cè)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)后擬合回歸線ybx+a。試驗(yàn)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)將擬