醫(yī)學細菌形態(tài)學檢查

1、 顯微鏡顯微鏡的使用的使用顯微鏡的發(fā)明，使人看到了許多以前從未看到過的生物，如細菌、病毒等，也使人看到了生物的許多微小結構，如線粒體的結構，從而對生物學的發(fā)展起著重要的推動作用。顯微鏡是生物學研究的重要儀器之一。在醫(yī)學、工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中顯微鏡也有著重要用途，例如在醫(yī)學診斷上，可對人血液中的紅細胞進行計數(shù)等。 顯微鏡是人類各個時期最偉大的發(fā)明物之一。在它發(fā)明出來之前，人類關于周圍世界的觀念局限在用肉眼，或者靠手持透鏡幫助肉眼所看到的東西。 顯微鏡把一個全新的世界展現(xiàn)在人類的視野里。人們第一次看到了數(shù)以百計的“新的”微小動物和植物，以及從人體到植物纖維等各種東西的內部構造。顯微鏡還有助于科學家發(fā)現(xiàn)新物

2、種，有助于醫(yī)生治療疾病。上圖：這是17世紀英國科學家羅伯特胡克的顯微鏡。它有一根內裝透鏡的簡易皮管，安放在一個可調整的架子上。灌滿水的玻璃球用來把光聚焦到物體上。最早的顯微鏡是16世紀末期在荷蘭制造出來的。發(fā)明者可能是一個叫做札恰里亞斯詹森的荷蘭眼鏡商，或者另一位荷蘭科學家漢斯利珀希，他們用兩片透鏡制作了簡易的顯微鏡，但并沒有用這些儀器做過任何重要的觀察。后來有兩個人開始在科學上使用顯微鏡。第一個是意大利科學家伽利略。他通過顯微鏡觀察到一種昆蟲后，第一次對它的復眼進行了描述。第二個是荷蘭亞麻織品商人安東尼凡列文虎克（1632年-1723年），他自己學會了磨制透鏡。他第一次描述了許多肉眼所看不見

3、的微小植物和動物。1931年，恩斯特魯斯卡通過研制電子顯微鏡，使生物學發(fā)生了一場革命。這使得科學家能觀察到像百萬分之一毫米那樣小的物體。1986年他被授予諾貝爾獎。 第一節(jié) 光學顯微鏡的發(fā)展歷史 早在公元前一世紀，人們就已發(fā)現(xiàn)球形透明物體可使物體放大成像。后來逐漸對球形玻璃表面能使物體放大成像的規(guī)律有了認識。 1590年，荷蘭和意大利的眼鏡制造者已經(jīng)造出類似顯微鏡的放大儀器。1610年前后，意大利的伽利略和德國的開普勒通過實驗研究出合理的顯微鏡光路結構。 1665年前后，英國的胡克在顯微鏡中加入粗動和微動調焦機構、照明系統(tǒng)和承載標本片的工作臺。16731677年期間，荷蘭的列文胡克制成單組元放

4、大鏡式的高倍顯微鏡。 19世紀，高質量消色差浸液物鏡的出現(xiàn)，使顯微鏡觀察微細結構的能力大為提高。1827年阿米奇第一個采用了浸液物鏡。19世紀70年代，德國人阿貝奠定了顯微鏡成像的古典理論基礎。 這些都促進了顯微鏡制造和顯微觀察技術的迅速發(fā)展，并為19世紀后半葉包括科赫、巴斯德等在內的生物學家和醫(yī)學家發(fā)現(xiàn)細菌和微生物提供了有力的工具。 在顯微鏡本身結構發(fā)展的同時，顯微觀察技術也在不斷創(chuàng)新：1850年出現(xiàn)了偏光顯微術；1893年出現(xiàn)了干涉顯微術；1935年荷蘭物理學家澤爾尼克創(chuàng)造了相襯顯微術，他為此在1953年獲得了諾貝爾物理學獎。 古典的光學顯微鏡只是光學元件和精密機械元件的組合，它以人眼作為

5、接收器來觀察放大的像。后來在顯微鏡中加入了攝影裝置，以感光膠片作為可以記錄和存儲的接收器?，F(xiàn)代又普遍采用光電元件、電視攝像管和電荷耦合器等作為顯微鏡的接收器，配以微型電子計算機后構成完整的圖像信息采集和處理系統(tǒng)。 第二節(jié) 顯微鏡原理一、基本光學原理一、基本光學原理 1.折射 2.透鏡的性能 3.凸透鏡的五種成象規(guī)律折射和折射率折射和折射率 光線在均勻的各向同性介質中，兩點之間以直線傳播，當通過不同密度介質的透明物體時，則發(fā)生折射現(xiàn)象，這是由于光在不同介質的傳播速度不同造成的。當與透明物面不垂直的光線由空氣射入透明物體(如玻璃)時，光線在其介面改變了方向，并和法線構成折射角。 Definitio

6、ns Acceptance angle Numerical Aperture NA = n sin Rayleigh resolution criterion for a circular aperture x = 0.61 /NARayleigh criterion for ; www.imb-jena.de See more interactive tutorials at Numerical AperatureResolutionRayleigh Criterion 透鏡的性能透

7、鏡的性能 透鏡是組成顯微鏡光學系統(tǒng)的最基本的光學元件，物鏡目鏡及聚光鏡等部件均由單個和多個透鏡組成。依其外形的不同，可分為凸透鏡(正透鏡)和凹透鏡(負透鏡)兩大類。 當一束平行于光軸的光線通過凸透鏡后相交于一點，這個點稱焦點，通過交點并垂直光軸的平面，稱焦平面。焦點有兩個，在物方空間的焦點，稱物方焦點，該處的焦平面，稱物方焦平面；反之，在象方空間的焦點，稱象方焦點，該處的焦平面，稱象方焦平面。 光線通過凹透鏡后，成正立虛像，而凸透鏡則成倒立實像。實像可在屏幕上顯現(xiàn)出來，而虛像不能。 二、成象原理 物體位于物鏡前方，離開物鏡的距離大于物鏡的焦距，但小于兩倍物鏡焦距。所以，它經(jīng)物鏡以后，必然形成一

8、個倒立的放大的實像。放大的實像位于目鏡的物方焦點上，或者在很靠近F2的位置上。再經(jīng)目鏡放大為虛像后供眼睛觀察。虛像的位置取決于物方焦點和放大實像之間的距離，可以在無限遠處，也可以在觀察者的明視距離處。目鏡的作用與放大鏡一樣。所不同的只是眼睛通過目鏡所看到的不是物體本身，而是物體被物鏡所成的已經(jīng)放大了一次的像。 OPTICAL MICROSCOPESImage construction for a simple biconvex lens 凸透鏡的五種成象規(guī)律凸透鏡的五種成象規(guī)律 1. 當物體位于透鏡物方二倍焦距以外時，則在象方二倍焦距以內、焦點以外形成縮小的倒立實象； 2. 當物體位于透鏡物方

9、二倍焦距上時，則在象方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實象； 3. 當物體位于透鏡物方二倍焦距以內，焦點以外時，則在象方二倍焦距以外形成放大的倒立實象； 4. 當物體位于透鏡物方焦點上時，則象方不能成象； 5. 當物體位于透鏡物方焦點以內時，則象方也無象的形成，而在透鏡物方的同側比物體遠的位置形成放大的直立虛象。 三、光學技術參數(shù) 1.數(shù)值孔徑數(shù)值孔徑（NA）是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質的折射率（n）和孔徑角（u）半數(shù)的正弦之乘積。用公式表示如下：NA=n sin 2.分辨率 顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個物點的最小間距，又稱“鑒別率”。其計算公式是=/2 NA 3.總放大倍率單個物

10、鏡的放大倍率目鏡的放大倍率 4.焦深 焦深為焦點深度的簡稱，即在使用顯微鏡時，當焦點對準某一物體時，不僅位于該點平面上的各點都可以看清楚，而且在此平面的上下一定厚度內，也能看得清楚，這個清楚部分的厚度就是焦深。 5.視場直徑 觀察顯微鏡時，所看到的明亮的圓形范圍叫視場，它的大小是由目鏡里的視場光闌決定的。 視場直徑也稱視場寬度，是指在顯微鏡下看到的圓形視場內所能容納被檢物體的實際范圍。視場直徑愈大，愈便于觀察。 6.覆蓋差 顯微鏡的光學系統(tǒng)也包括蓋玻片在內。由于蓋玻片的厚度不標準，光線從蓋玻片進入空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變，從而產(chǎn)生了相差，這就是覆蓋差。覆蓋差的產(chǎn)生影響了顯微鏡的成響質量。

11、 國際上規(guī)定，蓋玻片的標準厚度為0.17mm，許可范圍在0.16-0.18mm，在物鏡的制造上已將此厚度范圍的相差計算在內。物鏡外殼上標的0.17，即表明該物鏡所要求的蓋玻片的厚度。 7.工作距離 WD第三節(jié) 照明方法 顯微鏡的照明方法按其照明光束的形成，可分為“透射式照明”，和“落射式照明”兩大類。前者適用于透明或半透明的被檢物體，絕大數(shù)生物顯微鏡屬于此類照明法；后者則適用于非透明的被檢物體，光源來自上方，又稱“反射式照明”。主要應用與金相顯微鏡或熒光鏡檢法。 一、透射式照明 1.臨界照明 光源經(jīng)過聚光鏡后，成像于物平面上,若忽略光能的損失，則光源像的亮度與光源本身相同，因此，這種方法相當于

12、在物平面上放置光源。 2.柯拉照明 臨界照明中物面光照度不均勻的缺點，在柯拉照明中可以消除。在光源與聚光鏡之間加一輔助聚光鏡?？梢?，由于不是直接利用光源，而是把光源均勻照明了的輔助聚光鏡（也稱為柯拉鏡）成像在標本上，所以物鏡的視場（標本）得到均勻的照明。 二、落射式照明 在觀察不透明物體時，例如通過金相顯微鏡觀察金屬磨片，往往是采用從側面或者從上面加以照明的方式。此時，被觀察物體的表面上沒有蓋玻璃片，標本像的產(chǎn)生是靠進入物鏡的反射或散射光線。 三、暗視場照明方法 用暗視場方法可以觀察超顯微質點。所謂超顯微質點，是指那些小于顯微鏡分辨極限的微小質點。暗視場照明的原理是：不使主要的照明光線進入物鏡

13、，能夠進入物鏡成像的只是由微粒所散射的光線。因此，在暗的背景上給出了亮的微粒的像，視場背景雖暗，但襯度（對比）很好，可以使分辨率提高。 暗視場照明又有單向和雙向之分。第四節(jié) 光學顯微鏡的組成結構 光學顯微鏡包括光學系統(tǒng)和機械裝置兩大部分。 一、機械裝置 1. 機架 2. 目鏡筒 3. 物鏡轉換器 4. 載物臺 5. 調焦機構 6. 聚光器調節(jié)機構 二、光學系統(tǒng) （一）目鏡 （二）物鏡 1. 物鏡的主要參數(shù) 2. 物鏡的基本類型 （三）光源 （四）聚光器 1. 阿貝聚光鏡 2. 消色差聚光鏡 3. 搖出式聚光鏡 4. 其它聚光鏡顯微鏡的構造概說 目鏡 鏡筒 旋轉盤 高倍物鏡 低倍物鏡 鏡臂 固定

14、夾 載物臺 粗調節(jié)輪 細調節(jié)輪 反光鏡(燈光) 光圈 鏡座 目鏡放大倍率有10X / 15X，可因應個人的雙眼距離來調整鏡筒 介于接目鏡與接物鏡之間旋轉盤接于鏡筒下方，通常有三個接孔，可接不同倍數(shù)的接物鏡，本身可以旋轉藉以更換不同倍數(shù)的接物鏡。高倍物鏡-低倍物鏡有不同倍數(shù)在標本上方 低倍鏡放大倍數(shù)小，較短，視野亮。 高倍鏡放大倍數(shù)大， 較長，視野暗。鏡臂 連接鏡筒及鏡座，可供握取顯微鏡。固定夾 夾住標本避免滑落載物臺 為放置標本玻片的平臺，中央有一圓孔，可供光線通過。粗調節(jié)輪 位于鏡臂兩側，可調節(jié)載物臺的升降，以供對焦 轉動時鏡筒升降的幅度大。細調節(jié)輪 位于鏡臂兩側，可調節(jié)載物臺的升降，以供對

15、焦 轉動時鏡筒升降的幅度小。 使用高倍物鏡時的專用調節(jié)輪反光鏡 位于載物臺下方中央，由凹面鏡子組成，可使光線向上反射，經(jīng)過載物臺上的圓孔進入物鏡和目鏡，到達觀察者的眼睛。 但若陽光不強則需用燈光加強光源光圈 接于反光鏡上方，上有一支調整柄，可用以調整光圈孔徑大小，以調整投射于標本上之光線強弱 。鏡座顯微鏡之最底部。物鏡特性放大倍數(shù)數(shù)值孔徑值焦深工作距離藍光搜索物鏡40.1040mm1720mm2.3 m低倍鏡100.2516mm48mm0.9m高倍鏡40450.550.654mm0.50.7mm0.35m油鏡90 100 1 . 251 . 41.82.0mm0.1mm0.18m不同顯微鏡物鏡

16、的特性比較 光(450nm時可以達到的分辨率) 三、數(shù)碼攝像系統(tǒng) 數(shù)碼顯微鏡的組成結構與光學顯微鏡基本相同，不同處在于數(shù)碼顯微鏡以攝像頭作為接收元件，外帶圖像采集卡、軟件并與微機聯(lián)用。 第五節(jié) 光學顯微鏡的分類 一、光學顯微鏡的分類方法一、光學顯微鏡的分類方法 按使用目鏡的數(shù)目可分為雙目、單目和多目顯微鏡； 按圖像是否有立體感可分為立體視覺和非立體視覺顯微鏡； 按觀察對像可分為生物和金相顯微鏡等； 按光學原理可分為偏光、相差和微差干涉對比顯微鏡等； 按光學組件不同可分為明視場，暗視場，相差顯微鏡； 按光源類型可分為普通光、熒光、紫外光、紅外光和激光顯微鏡等； 按接收器類型可分為目視、數(shù)碼（攝像

17、）顯微鏡等 常用的顯微鏡有雙目體視顯微鏡、金相顯微鏡、偏光顯微鏡、熒光顯微鏡等。 二、熒光顯微鏡二、熒光顯微鏡 與普通光學顯微鏡基本相同，主要區(qū)別在于光源、濾光片和聚光器。熒光顯微鏡是用短波長的光線照射用熒光素標記過的被檢物體，使之受激發(fā)后而產(chǎn)生熒光，然后觀察。目前大多數(shù)使用的是落射光裝置，常用高壓汞燈作為光源，可發(fā)出紫外光或藍紫光。濾光片有激發(fā)濾光片和吸收濾光片二種。 三、相差顯微鏡三、相差顯微鏡 相差顯微鏡利用被檢物體的光程之差進行鏡檢，也就是有效地利用光的干涉現(xiàn)象，將人眼不可分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹?，即使是無色透明的物質也可清晰可見。這大大便利了活體細胞的觀察，因此相差鏡檢法廣泛應

18、用于倒置顯微鏡中。 Phase Contrast Useful for samples lacking in contrast Makes use of differences in refractive index between sample and solvent 四、倒置顯微鏡四、倒置顯微鏡 由于上述樣品特點的限制，被檢物體均放置在培養(yǎng)皿（或培養(yǎng)瓶）中，這樣就要求倒置顯微鏡的物鏡和聚光鏡的工作距離很長，能直接對培養(yǎng)皿中的被檢物體進行顯微觀察和研究。因此，物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過來，故稱為“倒置顯微鏡”。 倒置顯微鏡是為了適應生物學、醫(yī)學等領域中的組織培養(yǎng)、細胞離體培養(yǎng)、浮游生物

19、、環(huán)境保護、食品檢驗等顯微觀察。 五、暗視場顯微鏡五、暗視場顯微鏡 分辨率高,安裝有暗視野聚光器的物鏡并配有強光光源。 六、數(shù)碼顯微鏡六、數(shù)碼顯微鏡 數(shù)碼顯微鏡是以攝像頭（即電視攝像靶或電荷耦合器）作為接收元件的顯微鏡。在顯微鏡的實像面處裝入攝像頭取代人眼作為接收器，通過這種光電器件把光學圖像轉換成電信號的圖像，然后對之進行尺寸檢測、顆粒計數(shù)等工作。這類顯微鏡可以與計算機聯(lián)用，這便于實現(xiàn)檢測和信息處理的自動化，多應用于需要進行大量繁瑣檢測工作的場合。 第六節(jié)第六節(jié) 顯微鏡的使用顯微鏡的使用 【實驗目的】 通過本實驗學會科學的使用顯微鏡，尤其對油鏡的使用。 【實驗器材】 明場顯微鏡、暗場顯微鏡、

20、倒置顯微鏡、數(shù)碼顯微鏡、細菌涂片、石蠟切片、培養(yǎng)細胞。 【操作步驟】 （1）把顯微鏡放在座前桌面上稍偏左的位置，鏡座應距桌沿 67 cm左右。（2）接通電源，打開光源開關，轉動物鏡轉換器，使低倍鏡頭正對載物臺上的通光孔，把孔徑光闌調至最大，調節(jié)光強到合適大小，使光線通過聚光器入射到鏡筒內，這時視野內呈明亮的狀態(tài)。 （3）放置樣品于載物臺上，使樣品中要被觀察的部分位于通光孔的正中央，然后用標本夾夾好。用10物鏡聚焦，先轉動粗調節(jié)旋鈕，使載物臺上升，物鏡逐漸接近樣品。然后注視目鏡內，（要養(yǎng)成睜開雙眼用顯微鏡進行觀察的習慣，以便在觀察的同時能繪圖），并轉動細調節(jié)旋鈕，使載物臺慢慢下降，不久即可看到玻

21、片中材料的放大物像。 （4）調節(jié)雙目鏡筒的光瞳距離 內退或外拉有刻度的滑板，使兩眼都能看到樣品，使左右兩個視場象合二為一。 （5）屈光度的調節(jié) 調節(jié)屈光度是為了適應觀察者的視力。最簡單的方法是先調節(jié)右面目鏡，同時用微調使標本聚焦，右眼看到清晰的圖象。然后再用左眼觀察，不動粗細調節(jié)旋鈕，只轉動左側目鏡的調節(jié)環(huán)，直至獲得最清晰的圖象。 （6）如果在視野內看到的物像不符合實驗要求，可慢慢調節(jié)載物臺移動手柄。調節(jié)時應注意玻片移動的方向與視野中看到的物像移動的方向正好相反。如果物像不甚清晰，可以調節(jié)微動調焦手輪，直至物像清晰為止。 （7）如果進一步使用高倍物鏡觀察，先把物像中需要放大觀察的部分移至視野中

22、央，再轉換高倍物鏡，這時物像不很清晰，可以轉動微動調焦手輪進行調節(jié)。 （8）在轉換高倍物鏡并且看清物像之后，可以根據(jù)需要調節(jié)孔徑光闌的大小或聚光器的高低，使光線符合要求（一般孔徑光闌為視場光闌的60%80%）。 （9）觀察完畢，先將物鏡鏡頭從通光孔處移開，然后將孔徑光闌調至最大，再將載物臺緩緩落下，并檢查零件有無損傷（特別要注意檢查物鏡是否沾水沾油，如沾了水或油要用鏡頭紙擦凈），檢查處理完畢后即可裝箱。 【注意事項】 （1）必須熟練掌握并嚴格執(zhí)行使用規(guī)程。 （2）取送顯微鏡時一定要一手握住彎臂，另一手托住底座。顯微鏡不能傾斜，以免目鏡從鏡筒上端滑出。取送顯微鏡時要輕拿輕放。 （3）觀察時，不能

23、隨便移動顯微鏡的位置。 （4）凡是顯微鏡的光學部分，只能用特殊的擦鏡頭紙與溶液一同擦拭，不能亂用他物擦拭，更不能用手指觸摸透鏡，以免汗液玷污透鏡。 （5） 保持顯微鏡的干燥、清潔，避免灰塵、水及化學試劑的玷污。 （6） 轉換物鏡鏡頭時，不要搬動物鏡鏡頭，只能轉動轉換器?，F(xiàn)在顯微鏡有電動轉換,這點比較好,使用也很方便.是一個發(fā)展方向。 （7） 切勿隨意轉動調焦手輪。使用微動調焦旋鈕時，用力要輕，轉動要慢，轉不動時不要硬轉。 （8） 不得任意拆卸顯微鏡上的零件，嚴禁隨意拆卸物鏡鏡頭，以免損傷轉換器螺口，或螺口松動后使低高倍物鏡轉換時不齊焦。 （9） 使用高倍物鏡時，勿用粗動調焦手輪調節(jié)焦距，以免移

24、動距離過大，損傷物鏡和玻片。 （10） 用完先關光源，后拔電源插頭，這樣對燈泡有保護作用。 WaterAirSoilFoodPeopleAnimal染色觀察普通染色特殊染色單染法復染法革蘭氏染色抗酸染色細菌的觀察不染色觀察壓滴法懸滴法 應用：主要用于觀察活菌的動力和運動方式 常用方法：壓滴法、懸滴法 【實驗目的】 1.認識細菌的基本形態(tài)。2.學習并掌握細菌壓滴片及懸滴片的制作方法。 【實驗材料】 1. 接種環(huán)、載玻片、蓋玻片、凹槽玻片、凡士林、酒精燈、顯微鏡。 2. 大腸桿菌和金葡菌612h肉湯培養(yǎng)物。【實驗方法】1 懸滴法標本制作 取2張潔凈凹玻片，在凹窩四周涂少許凡士林。用接種環(huán)各取1環(huán)大

25、腸桿菌，葡萄球菌培養(yǎng)物分別置于兩片蓋玻片中央。將凹玻片倒合于蓋玻片上，使凹窩中央正對菌液。迅速翻轉載玻片，用小鑷子輕壓，使蓋玻片與凹窩邊緣粘緊封閉，以防水分蒸發(fā)。先用低倍鏡拽到懸滴邊緣，再換高倍鏡，觀察時應下降聚光器，縮小光圈，減少光亮，使背景較暗易于觀察。2 壓滴法標本制作 接種環(huán)取23環(huán)菌液置于潔凈載玻片中央。用小鑷子夾1塊蓋玻片輕輕覆蓋在菌液上，放置蓋玻片時應注意，將蓋玻片的一端接觸菌液，緩緩放下，避免產(chǎn)生氣泡并防止菌懸液外溢。先用低倍鏡觀察，找到細菌所在部位后再換高倍鏡觀察，看細菌能否運動 【實驗結果】 大腸桿菌有鞭毛，運動活波，可向不同方向迅速運動，葡萄球菌無鞭毛，不能做真正運動，只

26、能在一定范圍內做位移不大的顫動，這就是布朗運動。 ThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Desig Inc. 染色固定自然干燥制片干燥水洗復染脫色鏡檢【實驗目的】1、掌握單染色的操作技術2、觀察細菌的基本形態(tài)【實驗原理】 單染色即用單純的一種染料進行染色，一般細菌菌體多帶負電荷，易于和帶正電荷的堿性染料結合而被染色，故常用美藍、結晶紫或石碳酸復紅等堿性染料。此法僅能顯示細菌的大小、形態(tài)與排列，不能顯示細菌的結構與染色特性?！静牧吓c試劑】 1. 葡萄球菌和大腸桿菌1824h固

27、體培養(yǎng)物 2. 美藍和稀釋石碳酸復紅染液 3. 載玻片、酒精燈、接種環(huán)、染色架、濾紙等【方法】 1. 在載玻片上滴一滴蒸餾水，用接種環(huán)挑取培養(yǎng)物少許，置載玻片的水滴中，與水混合做成懸液并涂成直徑約 2. 手執(zhí)載玻片的一端，標本向上，在酒精燈火焰外層盡快的來回通過34次，共約，使水份蒸發(fā)，此時細菌菌體緊貼在玻片上。 3. 滴加染液（）以覆蓋涂抹的菌膜為度，不宜過多，染色時間為 。用細小的水流輕輕沖洗染色劑（），直至無多余的染液，濾紙從旁吸干。 4. 首先在低倍鏡下找到物像，然后在涂膜中央滴一滴香柏油，換成油浸鏡觀察兩個菌種的形態(tài)和排列。 【結果】 葡萄球菌 蘭色 葡萄狀排列 大腸桿菌 紅色 散在

28、排列去除油鏡上的香柏油：先用干凈的擦鏡紙擦2-3 次，再換另一張擦鏡紙蘸取少許二甲苯以除去殘留的香柏油，最后用擦鏡紙擦干。擦鏡頭時應順著鏡頭直徑方向擦，不要沿著圓周方向擦。 錄錄像像演演示示【定義】 用兩種或兩種以上不同染料可將細菌染成不同的顏色，除可觀察細菌的大小、形態(tài)與排列外，還反應出細菌染色特性，具有鑒別細菌種類的價值。常用的有革蘭染色法和抗酸染色法。 復染色一般要經(jīng)過制片、固定、染色、脫色、復染、水洗、干燥和鏡檢八個步驟。 【實驗目的】 了解革蘭氏染色的原理，并掌握革蘭氏染色法的操作技術。 【實驗原理】 根據(jù)酒精脫色后結晶紫是否能在細菌上滯留，可以將細菌分為革蘭氏染色陽性菌（G+）和革蘭氏染色陰性菌（G-）。用結晶紫初染后，所有的細菌都染上藍紫色。G+細胞壁肽聚糖層數(shù)多，且肽聚糖為空間網(wǎng)狀結構，再經(jīng)乙醇