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文檔簡介
1、重點(diǎn)高中生物人教版選修 3?現(xiàn) 代生物科技專題?知識點(diǎn)總結(jié)作者:日期:選修3?現(xiàn)代生物科技專題?知識點(diǎn)總結(jié)專題基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性, 創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程是在 DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的DNA重組技術(shù)。(一) 基因工程的根本工具1“分子手術(shù)刀一一限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(1) 來源:主要是從 原核生物 中別離純化出來的。(2) 功能:能夠識別雙 分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的 磷酸二酯鍵 斷開,因此具有 專一性。(
2、3) 結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的 DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端 和平末端。2. “分子縫合針 一一DNA連接酶兩種DNA連接酶(E- coli DNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比擬: 相同點(diǎn):都縫合 磷酸二酯鍵。 區(qū)別:E - coli DNA連接酶來源于大腸桿菌,只能將雙鏈 DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較 低。(2) 與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將 單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶DNA聚合酶不同點(diǎn)
3、連接的DNA雙鏈單鏈模板不要模板要模板連接的對象2個DNA片段單個脫氧核苷酸加到已存在的單鏈DNA片段上相同點(diǎn)作用實(shí)質(zhì)形成磷酸二酯鍵化學(xué)本質(zhì)蛋白質(zhì)3. “分子運(yùn)輸車載體(1) 載體具備的條件: 能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存 。 具有一至多個限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。 具有標(biāo)記基因,供重組 DNA的鑒定和選擇。(2) 最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán) 狀DNA分子。(3) 其它載體: 入噬菌體的衍生物、動植物病毒(二) 基因工程的根本操作程序 第一步:目的基因的獲取1. 目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2. 原核基因采取
4、 直接別離獲得,真核基因是 人工合成。人工合成目的基因的常用方法有 反轉(zhuǎn)錄法 和化學(xué)合成法。3. PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1) PCR的含義:是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。(2) 目的:獲取大量的目的基因(3) 原理:DNA雙鏈復(fù)制(4) 過程:第一步:加熱至 9095 C DNA解鏈為單鏈;第二步:冷卻到 5560 C,引物與兩條單鏈 DNA結(jié)合;第三步:加熱至 7075 C,TaqDNA聚合酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成。(5) 特點(diǎn):指數(shù)(2n)形式擴(kuò)增第二步: 基因表達(dá)載體的構(gòu)建1. 目的:使目的基因在受體細(xì)胞中 穩(wěn)定存在,并且可以 遺傳至下一代,使目的基因能夠 表達(dá)
5、和發(fā)揮作用。2. 組成:目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因(1) 啟動子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因 轉(zhuǎn) 錄岀mRNA最終獲得所需的蛋白質(zhì)。(2) 終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的 尾端。3標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因些,從而將 含有目的基因的細(xì)胞 篩選出來。常用的標(biāo)記基因是 抗生素基因。第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 _1. 轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。2. 常用的轉(zhuǎn)化方法:將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有 基因
6、槍法和 花粉管通道法 等。將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù)。方法的受體纟將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少,最常用的原核細(xì)胞是 大腸桿菌,其轉(zhuǎn)化方法是:先用 Ca2+處理細(xì)胞,使其成為 感受態(tài)細(xì)胞,再將重組表達(dá)載 體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。3. 重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。第四步:目的基因的檢測和表達(dá)1. 首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否 插入了目的基因,方法是采用 DNA分子雜交DNA-D
7、NA技術(shù)。2. 其次還要檢測目的基因是否 轉(zhuǎn)錄出mRNA方法是采用 DNA分子雜交DNA-RNA技術(shù)。3. 最后檢測目的基因是否 翻譯成蛋白質(zhì),方法是采用 抗原一抗體雜交 技術(shù)。4. 有時還需進(jìn)行個體生物學(xué)水平的鑒定。如生物抗蟲或抗病的鑒定等。三基因工程的應(yīng)1. 植物基因工程: 抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改進(jìn)植物的品質(zhì)。2. 動物基因工程:提高動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物。3. 基因治療:把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用。4. 基因診斷:又稱為 DNA診斷,是采用基因檢測的方法來判斷患者是否出現(xiàn)了基因異常或攜帶病原體。四蛋白質(zhì)工程的概念,
8、對現(xiàn)有蛋 自然界已蛋白iTg分干跚.-蛋白質(zhì)三側(cè)蛋白質(zhì)工程是指以 蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系 作為根底,通過基因修飾或基因合成 白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種 新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。 基因工程在原那么上只能生產(chǎn) 存在的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄蛋白質(zhì)工程與基因工程區(qū)別蛋白質(zhì)工程基因工程實(shí)質(zhì)通過改造基因,以疋向改造天然蛋白 質(zhì),甚至創(chuàng)造自然界不存在的蛋白質(zhì)將目的基因從供體轉(zhuǎn)移到受體細(xì) 胞,并在受體細(xì)胞中表達(dá)結(jié)果:合成自然界不存在的蛋白質(zhì)只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是在基因工程根底上,延伸出的第二代基因工程專題2 細(xì)胞工程一植物細(xì)胞工程1. 理論根底原理:細(xì)胞全能性全能性表
9、達(dá)的難易程度:受精卵生殖細(xì)胞干細(xì)胞體細(xì)胞;植物細(xì)胞動物細(xì)胞2. 植物組織培養(yǎng)技術(shù)1 過程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞一-愈傷組織 一-試管苗 一-植物體2用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)3地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。1過程:新的原生植物難日翌番主冊甲 植物細(xì)胞乙-粵算跌3. 植物體細(xì)胞雜交技術(shù)豪邁地笑 第4頁共10頁 就算跌倒也要豪邁地笑鮒蟲環(huán)轆猊処愈傷組織再叫稱植慄(2) 誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括 離心、振動、電刺激 等。化學(xué)法一般是用 聚乙二醇(PEG作為誘導(dǎo)劑。(3) 意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。(二
10、) 動物細(xì)胞工程1. 動物細(xì)胞培養(yǎng)(1) 概念:動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成 單個細(xì)胞,然后放在適宜的 培養(yǎng)基中, 讓這些細(xì)胞生長和繁殖。(2) 動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物 的器官或組織剪碎t用 胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成 單個細(xì)胞t制成細(xì)胞懸液t轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行 原代培養(yǎng)t貼滿瓶壁的細(xì)胞重胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。(3) 細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁 細(xì)胞分裂生長到外表 相互抑制時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。(4) 動物細(xì)
11、胞培養(yǎng)需要滿足以下條件 無菌、無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行 無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。 營養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常需參加血清、血漿等天然成分。 溫度:適宜溫度:哺乳動物多是36.5 C+ 0.5 C ; pH: 7.27.4。 氣體環(huán)境:95%空氣+ 5%CO2 Q是細(xì)胞代謝 所必需的,CO的主要作用是 維持培養(yǎng)液的 pH。(5) 動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。2. 動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克
12、隆動物(1) 哺乳動物核移植可以分為 胚胎細(xì)胞 核移植(比擬容易)和 體細(xì)胞核移植(比擬難)。(2) 選用去核卵(母)細(xì)胞的原因:卵(母)細(xì)胞比擬大,容易操作;卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,營養(yǎng)豐富。(3)體細(xì)胞核移植的大致過程是:(右圖)卵祁融劇糞體樹牛是怵軫牛1 1¥RfflsnffiU理亠1魚in如葩|核移植申甜體盤中一慢科1|另一頭母鎔羊的于討. 1屜維.曲生胚胎移植1井悅齡財(cái)林皓精牛(4)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:加速家畜遺傳改進(jìn)進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育; 保護(hù)瀕危物種,增大存活數(shù)量生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白作為異種移植的供體; 用于組織器官的移植等。(5)體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題:克隆動物存
13、在著健康問題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。3. 動物細(xì)胞融合(1) 動物細(xì)胞融合也稱 細(xì)胞雜交,是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。融合后形成的具有原來兩 個或多個 細(xì)胞潰傳信息的單核細(xì)胞,稱為 雜交細(xì)胞。(2) 動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理根本相同,誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類 似,常用的誘導(dǎo)因素有 聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激 等。(3) 動物細(xì)胞融合的意義:克服了 遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物生物新品種 培育的重要手段。(4) 動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比擬:比擬工程細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用法4.單克隆抗體
14、12分 B淋巴纟瘤細(xì)胞細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞 選擇培養(yǎng)細(xì)|口從腹培 培、 從培345雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)單克隆抗體的作用O既能大量繁殖,又能特異性強(qiáng),靈敏度高,并能大量制備 。植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生 質(zhì)體融合離心、電刺激、振動, 聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和 性,獲得雜種植株動物細(xì)胞 融合細(xì)胞膜的流動性使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞 融合除應(yīng)用植物細(xì)胞雜交 手段外,再加滅活的 病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體的技術(shù)之抗體:一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種 特異性抗體。從血清中別離出的抗體 產(chǎn)量低、純度低、特異性差 。 單克隆抗體的制備過程:準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,
15、并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、 作為診斷試劑 :快速的優(yōu)點(diǎn)。 用于治療疾病和運(yùn)載藥物 :主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈,也有少量用于治療其它疾病。專題3胚胎工程13.1體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育 胚胎工程的建立場所:睪丸的曲細(xì)精管精子的發(fā)時間:從初情期開始,到生殖機(jī)能衰退.1精原細(xì)胞-多個初級精母細(xì)胞通過數(shù)次有絲分裂I過程 1個初級精母細(xì)胞T 2個次級精母細(xì)胞T 4個精子細(xì)胞通過減數(shù)分裂,即 Ml和Mil -3 精子細(xì)胞T精子通過變形場所:卵巢時間:從胎兒時期開始胎兒時期完成了卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的儲藏卵子的發(fā)卵原細(xì)胞-初級卵母細(xì)胞1個次級卵母細(xì)胞+第一極體排卵前后完成
16、1個卵子+第二極體精子和卵子結(jié)合過程中完成 的過程。受精過程2 1個初級卵母細(xì)胞T*3 1個次級卵母細(xì)胞T概念:精子和卵子結(jié)合成合子受精卵場所:雌性的輸卵管內(nèi)1受精前的準(zhǔn)備階段1 :精子獲能受驚前的準(zhǔn)備階段 2:卵子的準(zhǔn)備過程a.精子穿越放射冠和透明帶:頂體反響,透明帶反響Q 受精階段 彳.進(jìn)入卵黃膜:卵黃膜封閉作用就算跌倒也要豪邁地笑第6頁共10頁就算跌倒也要豪邁地笑c.原核形成和配子結(jié)合.一卵裂期:細(xì)胞在透明帶中進(jìn)行有絲分裂早期胚胎發(fā)育桑椹胚:胚胎細(xì)胞達(dá) 32個左右,每一個細(xì)胞都是細(xì)胞囊胚:有囊胚腔,岀現(xiàn)了囊胚從透明帶中伸展岀來的孵化過程、原腸胚:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞形成外胚層和內(nèi)胚層,滋養(yǎng)層發(fā)育
17、成胎膜和胎盤,內(nèi)胚層包圍著原腸腔13.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)試管動物技術(shù):通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。r 方法一:用促性腺激素處理,使其超數(shù)排卵,從中輸卵管沖取精子針對f卵母細(xì)胞的采集Q實(shí)驗(yàn)動物,家畜豬、羊等方法二:從屠宰母畜卵巢中采集II方法三:借助超聲波探測儀、內(nèi)窺鏡、腹腔鏡等工具直接從活體母畜卵巢中吸取針對大家畜或大型動物,如牛體外受精?卵母細(xì)胞的培養(yǎng):在體外人工培養(yǎng)成熟精子的采集:方法有假陰道法、手握法和電刺激法等精子的獲能:方法有培養(yǎng)法通過獲能培養(yǎng)液、化學(xué)誘導(dǎo)法通過肝素或鈣離子載體A23187獲能溶液或?qū)S玫氖?/p>
18、精溶液'受精:獲能的精子 +培養(yǎng)成熟的卵子 完成受精胚胎早期培養(yǎng).條件:受精卵在發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)培養(yǎng)液成分:無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等13.3胚胎工程的應(yīng)用及前景概念:是指將雌性動物的早期胚胎,或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎,移植到其中提供胚胎的同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。個體叫供體,接受胚胎的個體叫受體。應(yīng)用:胚胎移植是轉(zhuǎn)基因、核移植、或體外受精等技術(shù)的最后一道“工序 現(xiàn)狀:在牛的胚胎移植中,技術(shù)方法更為簡便、實(shí)用。意義:可充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體繁殖潛力。供體主要職能只是產(chǎn)生優(yōu)良特性的胚胎,縮短繁殖周期<胚
19、胎移植成功與否關(guān)系到:供體和受體的生理狀況胚胎移植生理學(xué)根底蛙*2根本程序供、受體生殖器官的生理變化相同,為胚胎提供相同的生理環(huán)境 早期胚胎沒有與母體子宮建立組織聯(lián)系,為胚胎收集提供可能 受體對外來胚胎根本不發(fā)生免疫排斥反響,為胚胎的存活提供可能 胚胎能與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但其遺傳物質(zhì)不受影響1 供、受體的選擇和處理使用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理、超數(shù)排卵處理配種或人工受精胚胎收集沖卵胚胎移植:手術(shù)法、檢查胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚、培養(yǎng)或保存196 'C的液氮 引岀子宮和卵巢將其注入;非手術(shù)法用移植管將其送入子宮移植后的檢查是否妊娠等概念:指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2、4或
20、8等份等,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。儀器設(shè)備:實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀操作程序選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚,移入盛有操作液的培養(yǎng)皿用分割針或分割刀切開胚胎,吸岀半個,注入空透明帶或直接將裸半胚移植 給受體。分割囊胚時要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。此時還可用分割針分割滋養(yǎng)層, 做胚胎DNA分析性別鑒定。乂局限:剛出生的動物體重偏低,毛色和斑紋上存在差異,同卵多胎的可能性有限。ES或EK纟田胞。概念:由早期胚胎或原始性腺中別離岀來的一類細(xì)胞。簡稱 特點(diǎn)形態(tài)上:體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯胚胎干細(xì)胞增殖而不發(fā)生分化;可冷凍保存;可進(jìn)行遺傳改造1 一移植ES細(xì)胞修復(fù)壞死或退化部位,治愈糖尿病、肝心衰
21、竭、成骨不良等病癥意義卡ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化,可培育人造組織器官-ES細(xì)胞在牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等誘導(dǎo)因子作用下可向不同類型組織細(xì)胞分化一動物胚胎發(fā)育的根本過程1、 胚胎工程是指對動物 早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù),女口胚胎移植、體外受精、胚胎分割、 胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過處理后獲得的胚胎,還需移植到雌性動物體內(nèi)生產(chǎn)后代,以滿足人類的各種需求。2、動物胚胎發(fā)育的根本過程1受精場所是母體的輸卵管上段。2 卵裂期:特點(diǎn):細(xì)胞 有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷增加,但胚胎的總體體積并不增加,或略有減小。3 桑椹胚:特點(diǎn):胚胎細(xì)胞數(shù)目到達(dá)32個左右時,胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán),形似桑椹。是全能細(xì)
22、胞。4囊 胚:特點(diǎn):細(xì)胞開始出現(xiàn) 分化 該時期細(xì)胞的 全能性仍比擬高。聚集在胚胎一端個體較大的細(xì)胞稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán),將來發(fā)育成胎兒的各種組織。中間的空腔稱為囊胚腔。5原腸胚:特點(diǎn):有了 三胚層的分化,具有 囊胚腔和原腸腔。二胚胎干細(xì)胞1、 哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱 ES或EK細(xì)胞,來源于早期胚胎或從原始性腺 中別離出來。2、具有胚胎細(xì)胞的特性,在形態(tài)上表現(xiàn)為 體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯;在功能上,具有 發(fā)育的全能性,可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外,在體外培養(yǎng)的條件下,可以增殖而不發(fā)生 分化,可進(jìn)行 冷凍保存,也可進(jìn)行遺傳改造。3、胚胎干細(xì)胞的主要用途是: 可用于研究哺乳動物個體發(fā)生和發(fā)
23、育規(guī)律; 是在體外條件下研究 細(xì)胞分化的理想材料,在培養(yǎng)液中參加 分化誘導(dǎo)因子,如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時,就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化,這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理提供了有效的手段; 可以用于治療人類的某些頑疾,如帕金森綜合癥、少年糖尿病等; 利用可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性,移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能; 隨著組織工程技術(shù)的開展,通過ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化,定向培育出人造組織器官,用于器官移植,解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥的問題。三胚胎工程的應(yīng)用1. 體外受精和胚胎的早期培養(yǎng)然后,從輸卵管中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。第三種方法
24、是借助超聲波探測儀、腹腔鏡等直接從活體動物的人工培養(yǎng)成熟后,才能與獲能的精子受精。獲能處理。1卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng): 主要方法:用促性腺激素 處理,使其排出更多的卵子, 第二種方法:從剛屠宰母畜的卵巢 中采集卵母細(xì)胞; 卵巢中吸取卵母細(xì)胞。采集的卵母細(xì)胞,都要在體外經(jīng)2精子的采集和獲能:在體外受精前,要對精子進(jìn)行3受精:獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細(xì)胞在 獲能溶液或?qū)S玫氖芫?溶液中完成受精過程。4胚胎的早期培養(yǎng):精子與卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液 中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查 受精狀況和受精受體移植或冷凍保存。不同動物胚胎移植的時間更早的階段移植,人的卵的發(fā)育能力。培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些
25、無機(jī)鹽和有機(jī)鹽夕卜,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸 等營養(yǎng)成 分,以及血清等物質(zhì)。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時,可將其取出向 不同。牛、羊一般要培育到 桑椹胚或囊胚 階段才能進(jìn)行移植,小鼠、家兔等實(shí)驗(yàn)動物可在 體外受精胚胎可在4個細(xì)胞階段移植。2. 胚胎移植同種的、生理狀態(tài)相“供體,接受胚胎的個體稱1胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎,或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同的其它雌性動物的體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。其中提供胚胎的個體稱為“為“受體。供體為優(yōu)良品種,作為受體的雌性動物應(yīng)為常見或存量大的品種。 地位:如轉(zhuǎn)基因、核移植,或體外受精 等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎,
26、都必須經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得 后代,是胚胎工程的最后一道“工序 。2胚胎移植的意義:大大縮短了 供體本身的繁殖周期,充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力 。(3) 生理學(xué)根底:動物發(fā)情排卵后,同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。 早期胚胎在一定時間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的收集提供了可能。 受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)廠免疫排斥反響。這為胚胎在受體的存活提供了可能。 供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但供體胚胎的 遺傳特性在孕育過程中不受影響。(4) 根本程序主要包括: 對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能 優(yōu)秀的供體
27、,有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力 的受體,供體和 受體是同一物種。并用激素進(jìn)行 同期發(fā)情處理,用促性腺激素 對供體母 配種或人工授精 。 對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(也叫沖卵)。對胚胎進(jìn)行 質(zhì)量檢查,此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到 桑椹或胚囊胚 階段。直接向受體移植或放入 196 C的 液氮中保存。 對胚胎進(jìn)行移植。 移植后的檢查。對受體母牛進(jìn)行是否妊娠 的檢查。3. 胚胎分割(1) 概念:是指采用機(jī)械方法將 早期胚胎 切割2等份、4等份等,經(jīng)移植獲得 同卵雙胎或多胎 的技術(shù)。(2) 意義:來自同一胚胎的后代具有 相同的遺傳物質(zhì),屬于
28、無性繁殖。 材料:發(fā)育良好,形態(tài)正常的 桑椹胚或囊胚。(桑椹胚至囊胚 的發(fā)育過程中,細(xì)胞開始分化,但其全能性仍很高,也可用于胚胎分割。)操作過程:對囊胚階段的胚胎分割時,要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割,否那么會影響 分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。專題4生物技術(shù)的平安性和倫理問題(一) 轉(zhuǎn)基因生物的平安性爭論:(1) 基因生物與食物平安:反方觀點(diǎn):反對“實(shí)質(zhì)性等同、岀現(xiàn)滯后效應(yīng)、岀現(xiàn)新的過敏原、營養(yǎng)成分改變正方觀點(diǎn):有平安性評價、科學(xué)家負(fù)責(zé)的態(tài)度、無實(shí)例無證據(jù)(2) 轉(zhuǎn)基因生反方觀點(diǎn):擴(kuò)散到種植區(qū)之外變成野生種類、成為入侵外來物種、重組岀有害的病原體、成為超級雜草、有可能造成“基因污染正方觀點(diǎn): 生命力有
29、限、存在生殖隔離、花粉傳播距離有限、花粉存活時間有限(3) 轉(zhuǎn)基因生反方觀點(diǎn):打破物種界限、二次污染、重組岀有害的病原微生物、毒蛋白等可能通過食物鏈進(jìn)入人體正方觀點(diǎn):不改變生物原有的分類地位、減少農(nóng)藥使用、保護(hù)農(nóng)田土壤環(huán)境(二) 生物技術(shù)的倫理問題(1) 克隆人:兩種不同觀點(diǎn),多數(shù)人持否認(rèn)態(tài)度。否認(rèn)的理由:克隆人嚴(yán)重違反了 人類倫理道德,是克隆技術(shù)的濫用;克隆人沖擊了 現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系 等傳統(tǒng)的倫理道德觀 念;克隆人是在人為的制造在心理上和社會地位上都不健全的人??隙ǖ睦碛桑杭夹g(shù)性問題可以通過 胚胎分級、基因診斷和染色體檢查 等方法解決。不成熟的技術(shù)也只有通過實(shí)踐才能使之成熟。中國政
30、府的態(tài)度: 禁止生殖性克隆,不反對治療性克隆。四不原那么:不贊成、不允許、不支持、不接受 任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)。(2) 試管嬰兒:兩種目的試管嬰兒的區(qū)別兩種。不同觀點(diǎn),多數(shù)人持認(rèn)可態(tài)否認(rèn)的理由:把試管嬰兒當(dāng)作人體零配件工廠,是對生命的不尊重;早期生命也有活下去的權(quán)利,拋棄或殺死多余胚胎,無異于“謀殺??隙ǖ睦碛桑航鉀Q了不育問題,提供骨髓中造血干細(xì)胞救治患者最好、最快捷 的方法,提供骨髓造血干細(xì)胞并不會對試管嬰兒造成損傷?;蛏矸葑C:否認(rèn)的理由:個人基因資訊的泄漏造成基因歧視,勢必造成遺傳學(xué)失業(yè)大軍、造成個人婚姻困難、人際關(guān)系疏遠(yuǎn)等嚴(yán)重后果??隙ǖ睦碛桑和ㄟ^基因檢測可以及早采取預(yù)防措施,適時進(jìn)
31、行治療,到達(dá)挽救患者生命的目的。(三) 生物武器(1)種類:致病菌、病毒、生化毒劑,以及經(jīng)過基因重組的致病菌。 散布方式:吸入、誤食、接觸帶菌物品、被帶菌昆蟲叮咬等。 特點(diǎn):致病力強(qiáng)、多數(shù)具傳染性、傳染途徑多、污染面廣、有潛伏期、不易被發(fā)現(xiàn)、危害時間長等。(4)禁止生物武器公約及中國政府的態(tài)度專題5生態(tài)工程5.1 生態(tài)工程的根本原理生態(tài)工程建設(shè)目的:遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防止環(huán)境污染,達(dá)到經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益的同步開展。(少消耗、多效益、可持續(xù))生態(tài)經(jīng)濟(jì):主要是通過實(shí)行“循環(huán)經(jīng)濟(jì)原那么,使一個系統(tǒng)產(chǎn)生岀的污染物,能夠成為本系統(tǒng)或者另一個<系統(tǒng)的生產(chǎn)原料,從而實(shí)現(xiàn)廢棄物的資源化,而實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)最重要的手段之一是生態(tài)工程。1 物質(zhì)循環(huán)再生原理:物質(zhì)能在生態(tài)系統(tǒng)中循環(huán)往復(fù),分層分級利用2 物種多樣性原理:物種繁多復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性生態(tài)工程原理宅協(xié)調(diào)與平衡原理:生態(tài)系統(tǒng)的生物數(shù)量不能超過環(huán)境承載力環(huán)境容納量的限度4 整體性原理:生態(tài)系統(tǒng)建設(shè)要考慮自然、經(jīng)濟(jì)、社會
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