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文檔簡介

1、一、 名詞解釋1. 氣溶膠(aerosol)液體或固體懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑一般為0.001-100m的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的穩(wěn)定的分散體系2.實驗室生物安全指在從事病原微生物實驗活動的實驗室中避免病原微生物對工作人員和相關人員的危害,對環(huán)境的污染和對公眾的危害,為了保證試驗研究的科學性還要保護被試驗因子免受污染。(課本第1頁)1 簡述實驗室生物安全的重要意義。1. 開展病原微生物研究的需要2. 生物防護(國防)的需要3. 傳染病預防與控制的需要4. 動物防疫工作的需要5. 出入境檢驗檢疫工作的需要6. 醫(yī)院感染控制的需要2 試述我國微生物實驗室生物安全有哪些相關的法律法規(guī)?1. 中華人民共和

2、國傳染病防治法2. 病原微生物實驗室生物安全管理條例3. 人間傳染的病原微生物名錄4. 醫(yī)療廢物管理條例5. 實驗室生物安全通用要求(GB19489-2008)6. 生物安全實驗室建設技術規(guī)范(GB50346-2011)7. 微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則(WS233-2002)8. 可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規(guī)定3 試述微生物菌毒種及樣本的運輸與保藏方法。一、 運輸 1. 感染性物質(zhì)運輸?shù)娜匕b體系內(nèi)層容器:將樣品采用防水、防漏的內(nèi)層容器包裝并貼上指示內(nèi)容物的標簽中層包裝:內(nèi)層容器和中層容器間應放置足量的吸水性材料外層包裝:硬質(zhì)2. 托運人培訓如果不采用

3、路運,而采用航空,則按照國家民用航空總局批準培訓中介空運咨詢服務有限公司承運3. 運輸審批3.1申請資料3.1.1.填寫樣本運輸申請表;3.1.2 法人資格證明材料(復印件);3.1.3 接收樣本單位同意接收的證明文件;3.1.4 容器或包裝材料的批準文號、合格證書(復印件)或者高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸容器或包裝材料承諾書;3.1.5 其它有關資料。4. 專人護送4.1運輸高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本,應當有專人護送,護送人員不得少于兩人;4.2申請單位應當對護送人員進行相關的生物安全知識培訓;4.3在護送過程中采取相應的防護措施。5.運輸后續(xù)工作規(guī)定第十六條在運輸結束后,

4、申請單位應當將運輸情況向原批準部門書面報告。二、保藏方法(請大家自己發(fā)揮)1.保藏機構:實驗室在相關實驗活動結束后,應及時將病原微生物菌(毒)種和樣本就地銷毀或送交保藏機構保管。2.保藏管理:帳目(總帳和分類帳)和實際庫存相符;有進出和操作記錄:編號(唯一標示號)來源;名稱(種名和株名);保存方法和保存日期;批號或代次;分發(fā)。4 生物安全實驗室根據(jù)安全等級不同可分為幾個類型?(四類)一級生物安全防護水平(BSL1)適合于已知其特征的、在健康成人中不引起疾病的、對實驗室工作人員和環(huán)境危害性最小的生物因子的工作。許多通常與人類疾病不相關的病原微生物是條件致病性的。對于在體內(nèi)已經(jīng)繁殖多代的疫苗株不要

5、簡單地認為是無毒的。二級生物安全防護水平(BSL2)適用于操作我國的第三類(少量二類)危害的致病微生物。適合于從未知病原的人身上取血、體液和組織。三級生物安全防護水平(BSL3)適用于操作我國第二類(個別第一類)病原微生物。四級生物安全防護水平(BSL4)適用于操作我國第一類病原微生物。另外,與四級生物安全防護水平的微生物具有相近的或一致的抗原關系的微生物也應該在該防護水平進行研究。我國尚未發(fā)現(xiàn)或已經(jīng)滅絕的微生物5如何建設一個生物安全二級實驗室?在滿足BSL1實驗室設施的基礎上,增加以下內(nèi)容:門應能夠自動關閉,有可視窗。有適當?shù)幕馂膱缶鞑恍杼厥獾耐L設備。但在計劃安裝新的設備時,應當考慮要設

6、置通風系統(tǒng),使空氣向內(nèi)流動而不發(fā)生循環(huán)。如果沒有通風系統(tǒng),那么實驗室窗戶應當能夠打開,同時要安裝防蟲的紗窗。實驗室所在建筑內(nèi)配備高壓蒸汽滅菌器。實驗室內(nèi)使用專門的工作服;戴乳膠手套。有可靠的電力供應和應急照明。必要時,重要設備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等應設備用電源。實驗室出口有黑暗中可明確辨認的標識。應在實驗室內(nèi)配備生物安全柜。簡略版:可自動關閉門、生物安全標識、可靠的電力供應和應急照明、專用個人防護設施(一級防護)、生物安全柜、高壓蒸氣滅菌器補充;BSL-1的設施要求應為安全運行以及清潔和維護提供充足的空間。實驗室的工作區(qū)域外有存放外衣和私人物品的設備。應該有洗手池,最好安裝在出口處。窗子

7、和門入口處安裝防媒介昆蟲和嚙齒動物的 實驗室的墻壁、天花板和地板應當是光滑、易清潔、不滲水以及耐化學品和消毒劑的腐蝕。地板應當是防滑的,同時應盡可能地避免管線暴露在外。實驗臺應當密封于墻上,不滲水,并可耐消毒劑、酸、堿、有機溶劑的腐蝕并能適度耐熱。在實驗室內(nèi)進行操作時均應保證照明,避免不必要的反光和閃光。6生物安全柜可分為幾個等級?簡述其基本原理(請大家自己發(fā)揮)。 生物安全柜(BSC)有三個級別,即級、級(A1、A2、B1、B2型)和級一共有6種。級為密閉袖套操作,其余為前開口操作。所有生物學污染的管道均為負壓狀態(tài)或由負壓的管道通風系統(tǒng)包圍。原理(來源百度百科):一級生物安全柜可保護工作人員

8、和環(huán)境而不保護樣品。氣流原理和實驗室通風櫥一樣,不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。所有類型的生物安全柜都在排氣和進氣口使用HEPA過濾器。一級生物安全柜本身無風機,依賴外接通風管中的風機帶動氣流,由于不能對試驗品或產(chǎn)品提供保護,目前已較少使用。二級生物安全柜是目前應用最為廣泛的柜型。 與級生物安全柜一樣,級生物安全柜也有氣流流入前窗開口,被稱作“進氣流”,用來防止在微生物操作時可能生成的氣溶膠從前窗逃逸。與級生物安全柜不同的是,未經(jīng)過濾的進氣流會在到達工作區(qū)域前被進風格柵俘獲,因此試驗品不會受到外界空氣的污染。 級生物安全柜的一個獨特之處在于經(jīng)過HEPA過濾器過濾的垂直層流氣流從安全柜頂

9、部吹下,被稱作“下沉氣流”。下沉氣流不斷吹過安全柜工作區(qū)域,以保護柜中的試驗品不被外界塵?;蚣毦廴?。三級生物安全柜是為4級實驗室生物安全等級而設計的,是目前世界上最高安全防護等級的安全柜。柜體完全氣密,100%全排放式,所有氣體不參與循環(huán),工作人員通過連接在柜體的手套進行操作,俗稱手套箱(Golve box),試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染,適用于高風險的生物試驗。7簡述正確使用生物安全柜的方法(自由發(fā)揮)。應安裝在實驗室內(nèi)氣流流動小,人員走動少,離門和中央空調(diào)送風口較遠的地方。生物安全柜的周圍應有一定的空間,與墻壁至少保持30cm的距離,便于清潔環(huán)境衛(wèi)生。注意保潔,每天做完

10、實驗后,清除所有廢棄物,再用75%酒精消毒。一般濾膜有5-10年使用壽命,在儀器壓力表顯示壓力為50%的時候,需要更換濾膜。在使用前先開機自凈,并開啟紫外線滅菌燈,確保工作區(qū)無污染達到百級狀態(tài)。滅菌時應關閉前窗。工作時前窗開啟高度應小于200mm,區(qū)域內(nèi)氣壓正常。工作臺面為304不銹鋼,有污染物殘時應及時用酒精清理干凈,以確保工作臺面使用壽命。開啟前窗時應注意不使設備受到強烈振動,以保持平板玻璃的完整性。由于剩余的培養(yǎng)基可能會使微生物生長繁殖,因此在實驗結束時,包括儀器設備在內(nèi)的生物安全柜里的所有物品都應清除表面污染,并移出安全柜。在每次使用前后,要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺面和內(nèi)壁要

11、用消毒劑進行擦拭,所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里可能發(fā)現(xiàn)的任何微生物。在每天實驗結束時,應擦拭生物安全柜的工作臺面、四周以及玻璃的內(nèi)外側等部位來清除表面的污染。在對目標生物體有效時,可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后,還必須用無菌水再次進行擦拭。8舉例說明在生物安全實驗室注重操作細節(jié)的重要性。(自由發(fā)揮)1.1956年,前蘇聯(lián)的一個實驗室曾有9支裝有感染了委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒鼠腦的安瓿被打破。由于沒采取必要的措施,結果在幾天內(nèi)造成24名工作人員感染;2.1998年,我國某大城市的某高校在使用大白鼠進行實驗時,有兩名學生被大白鼠咬傷,還有一些學生在給實驗老鼠放血、

12、解剖的過程中,未按照要求戴手套操作,結果在29名實驗人員中,有9人感染了流行性出血熱;3.三起嚴重的實驗室SARS病毒感染事件1.新加坡的實驗室sars感染事件2.中國臺灣地區(qū)的實驗室感染事件3.中國大陸的實驗室感染事件從以上幾起事故中不難看出,發(fā)生感染的一個共同原因是工作人員主觀上的麻痹大意,沒有遵守實驗室的安全操作規(guī)則和程序,即使具有完善的設備和標準的操作程序也不能杜絕事故的發(fā)生,因而加強實驗室的安全監(jiān)督管理是防止此類事件發(fā)生的首要任務。9消毒滅菌的方法有哪些?1.化學消毒滅菌液體化學試劑殺滅微生物繁殖體或芽孢對象:物體表面、空氣和污染物等方式:擦洗、熏蒸和浸泡等2.物理消毒滅菌紫外線、高

13、壓蒸汽滅菌、焚燒和HEPA過濾除菌等。10 什么是實驗室活動的危害評估?對某一個特定的操作程序或?qū)嶒灮蛭⑸锓N類的危險度進行評估,最有效的工具之一就是列出微生物的危險度等級。11 如何進行實驗室活動的危害評估?(自由發(fā)揮)依據(jù)實驗室生物安全通用要求(GB19489-2008),危害程度評估至少包括以下內(nèi)容;生物因子的種類(已知的、未知的、基因修飾的或未知傳染性的生物材料,來源、傳染性、致病性、傳播途徑、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、感染劑量、濃度、動物實驗數(shù)據(jù)、預防和治療。12 試述人間傳染的病原微生物名錄對實驗室活動的危害評估的重要性。(自由發(fā)揮)1. 病原微生物實驗室生物安全管理條例按危害程度對病原體進行分類:四類病原微生物,危害逐級降低;實驗室生物安全通用要求(GB19489-2008),根據(jù)生物因子對個體和群體的危害程度將其分為4級,危害逐級增強。以上兩種分類方法與國際不接軌,在使用過程中易引起混亂,可采用人間傳染的病原微生物名錄的分類方法;2. 人間傳染的病原微生物名錄將380種人間傳染病原微生物分為三大類,分別是病毒分類名

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