苦味酸法測(cè)定血清肌酐PPT精選文檔

1、1實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)五五苦味酸法苦味酸法測(cè)定血清測(cè)定血清肌酐肌酐2 肌酐（肌酐（CRE）是人體內(nèi)肌酸代謝的最終產(chǎn)物，）是人體內(nèi)肌酸代謝的最終產(chǎn)物，由腎排出，少部分來(lái)自食物，大部分在體內(nèi)生成，由腎排出，少部分來(lái)自食物，大部分在體內(nèi)生成，血肌酐的濃度主要取決于血肌酐的濃度主要取決于GFR。血肌酐的測(cè)定對(duì)中晚期腎疾病臨床意義較大。血肌酐的測(cè)定對(duì)中晚期腎疾病臨床意義較大。肌酐測(cè)定方法有化學(xué)法和酶法。肌酐測(cè)定方法有化學(xué)法和酶法。酶法主要有三種類型：酶法主要有三種類型：肌氨酸氧化酶法、肌酐氨基肌氨酸氧化酶法、肌酐氨基水解酶法和肌酐亞氨基水解酶法水解酶法和肌酐亞氨基水解酶法。3一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康膎1.掌握血清掌

2、握血清肌酐肌酐的測(cè)定原理和方法。的測(cè)定原理和方法。n2. 了解了解肌酐肌酐測(cè)定的參考范圍及臨床意義。測(cè)定的參考范圍及臨床意義。4二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 在堿性條件下，血清中的肌酐在堿性條件下，血清中的肌酐（C Crere）苦苦味酸反應(yīng)，生成橘紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物。味酸反應(yīng)，生成橘紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物。檢測(cè)檢測(cè)505nm505nm波長(zhǎng)處吸光度的變化，可知被測(cè)血波長(zhǎng)處吸光度的變化，可知被測(cè)血清中的肌酐的濃度。清中的肌酐的濃度。其反應(yīng)式如下：其反應(yīng)式如下： 肌酐肌酐+ +堿性苦味酸堿性苦味酸 紅色物質(zhì)紅色物質(zhì)OH-51 1、主要器具、主要器具微量移液器微量移液器三、器材三、器材試管與試管架試管

3、與試管架三用水浴箱三用水浴箱可見(jiàn)分光光度計(jì)可見(jiàn)分光光度計(jì)6四、試劑四、試劑n1.試劑試劑：R1R1：氫氧化鈉：氫氧化鈉n R2 R2：苦味酸：苦味酸n 工作液：將工作液：將R1R1與與R2R2按按1 1：1 1的比例混合面成。的比例混合面成。n2.肌酐標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液( (133133mol/L)mol/L)7五、操作步驟五、操作步驟n取試管取試管5支，按下表操作支，按下表操作加入物（加入物（ml）空白空白管管標(biāo)準(zhǔn)管標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管測(cè)定管(U)S1S2U1U2血清血清0.150.15133mol/L肌酐肌酐標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0.150.15生理鹽生理鹽水水0.15R1R20.750.750.

4、750.750.750.750.750.750.750.75 混勻后，混勻后，37度水浴箱放置，度水浴箱放置，2分鐘后，波長(zhǎng)分鐘后，波長(zhǎng)505nm處，空白管調(diào)零，處，空白管調(diào)零，先讀取先讀取S1、U1吸光度，吸光度，5分鐘后再讀取分鐘后再讀取S2、U2吸光度。吸光度。8六、計(jì)算六、計(jì)算 參考區(qū)間：男性：參考區(qū)間：男性：62-11562-115mol/Lmol/L 女女性：性：5353- -9797mol/Lmol/L血清血清肌酐肌酐（mmol/L）= AU/AS133mol/Lmol/L 9七、注意事項(xiàng)七、注意事項(xiàng) 1.血標(biāo)本血標(biāo)本無(wú)溶血，無(wú)溶血，應(yīng)及時(shí)處理應(yīng)及時(shí)處理。2.工作液開(kāi)蓋混合后，應(yīng)

5、置工作液開(kāi)蓋混合后，應(yīng)置2-8度避光保存，穩(wěn)定期度避光保存，穩(wěn)定期3天。天。10八、臨床意義八、臨床意義 肌酐經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)后不被腎小管重吸收，通過(guò)腎肌酐經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)后不被腎小管重吸收，通過(guò)腎小管排泄。小管排泄。只有當(dāng)只有當(dāng)GFRGFR下降到正常的下降到正常的1/31/3時(shí)，時(shí)，ScrScr才明才明顯顯上升，是反眏上升，是反眏GFRGFR減退的后期指標(biāo)。減退的后期指標(biāo)。增高增高：見(jiàn)于各種原因引起的腎小球?yàn)V過(guò)功能減退見(jiàn)于各種原因引起的腎小球?yàn)V過(guò)功能減退：各種：各種腎病，急慢性腎衰竭、重度充血性心力衰竭、心肌炎腎病，急慢性腎衰竭、重度充血性心力衰竭、心肌炎等。等。降低：降低：見(jiàn)于尿崩癥、進(jìn)行性肌萎縮、白血病、貧血等見(jiàn)于尿崩癥、進(jìn)行性肌萎縮、白血病、貧血等11九、方法學(xué)評(píng)價(jià)九、方法學(xué)評(píng)價(jià)1.化學(xué)法：即苦味酸法，該化學(xué)法：即苦味酸法，該法法成本低廉成本低廉，方法簡(jiǎn)便，方法簡(jiǎn)便，但試劑具毒性和