農(nóng)藥生物測(cè)定課后復(fù)習(xí)題

1、農(nóng)藥生物活性測(cè)定課后復(fù)習(xí)題1 簡述農(nóng)藥生物測(cè)定的概念、意義。度量農(nóng)藥對(duì)生物群體、個(gè)體、活體組織或細(xì)胞產(chǎn)生效應(yīng)大小的生物測(cè)定技術(shù)。通常采用不同藥劑劑量或濃度對(duì)測(cè)定對(duì)象產(chǎn)生的效應(yīng)強(qiáng)度，來評(píng)價(jià)兩種或兩種以上藥劑的相對(duì)效力。2 簡述農(nóng)藥生物測(cè)定的原理、原則。原理：研究藥劑與生物的相關(guān)性原則v 控制影響因素盡可能一致：溫度、濕度、光照等外界環(huán)境條件 ;農(nóng)藥的理化性狀;供試生物的生理狀態(tài) ;處理方法及處理部位v 設(shè)立對(duì)照：空白對(duì)照、溶劑對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)藥劑對(duì)照v 重復(fù)測(cè)定v 運(yùn)用生物統(tǒng)計(jì)分析試驗(yàn)結(jié)果v 供試生物應(yīng)盡量選擇農(nóng)作物害蟲、病原菌和農(nóng)田主要雜草3 何為高通量篩選，其組成部分有哪些？以玻璃片、膜片或培養(yǎng)板

2、為載體，用高密度、微量自動(dòng)化加樣的方法，實(shí)現(xiàn)短時(shí)間內(nèi)分析大量樣本。高通量篩選方法通常一次可以測(cè)定3841536個(gè)點(diǎn)，現(xiàn)在還有3456個(gè)點(diǎn)的超高通量篩選方法（ultra-high-throughput screening, UHTS）。主要組成部分：自動(dòng)化操作系統(tǒng)；高靈敏度檢測(cè)系統(tǒng)；分子、細(xì)胞水平的高特異性體外篩選模型；被篩樣品管理庫（即樣品庫）；數(shù)據(jù)采集傳輸處理系統(tǒng)4 何為殺蟲劑生物測(cè)定？度量殺蟲劑對(duì)昆蟲（包括螨類和昆蟲綱以外的小動(dòng)物）產(chǎn)生效應(yīng)大小的農(nóng)藥生物測(cè)定。通過比較不同殺蟲劑的劑量或濃度對(duì)供測(cè)昆蟲產(chǎn)生效應(yīng)強(qiáng)度的方法，來評(píng)價(jià)兩種或兩種以上殺蟲劑的相對(duì)效力。5 什么是標(biāo)準(zhǔn)目標(biāo)昆蟲？簡述目標(biāo)昆

3、蟲室內(nèi)飼養(yǎng)定向控制的條件？標(biāo)準(zhǔn)目標(biāo)昆蟲：是指被普遍采用的，具有一定代表性和經(jīng)濟(jì)意義，以及抗藥力穩(wěn)定均勻的農(nóng)藥殺蟲毒力和毒效指示試蟲群體。6 殺蟲劑生物測(cè)定中移取試蟲的方法有哪些？（1）一般移取法：對(duì)于活動(dòng)強(qiáng)度不大或具有假死習(xí)性的試蟲（棉鈴蟲等），可用鑷子移取。體型小，軟體或易碰傷的試蟲（蚜蟲、紅蜘蛛等），用毛筆移取，注意刺吸式口器的口針。 沾藥未干的試蟲，必須等藥干后才能移取。（2）趨光法：利用昆蟲的趨光性來移取試蟲（如家蠅）。（3）吸蟲法：適用于活動(dòng)強(qiáng)度不大，微小的或易受機(jī)械傷害的目標(biāo)昆蟲（擬谷盜、米象等），用真空或喉管空氣注射吸蟲法移取。（4）自行遷移移蟲法：利用試蟲的自行遷移生活特性達(dá)到

4、混勻移蟲的目的。如蚜蟲等。（5）麻醉法：對(duì)于飛翔或活動(dòng)強(qiáng)度大的試蟲，采用物理或化學(xué)方法進(jìn)行麻醉處理。7 論述胃毒、觸殺、熏蒸、內(nèi)吸、忌避作用測(cè)定技術(shù)的基本原理及方法。一、胃毒作用測(cè)定技術(shù)的基本原理：通過試蟲吞食帶藥食料，由消化道中毒致死，以測(cè)定胃毒毒力的殺蟲劑生物測(cè)定技術(shù)。無限取食法：試蟲可以無限制地取食含有殺蟲劑的飼料，不計(jì)算實(shí)際吞食藥量的用藥方法。此法簡單，但不能避免其他毒殺作用的干擾；藥量不易掌握，有拒食效應(yīng)時(shí)難獲得滿意結(jié)果。例如：1）飼料混藥喂蟲法2）培養(yǎng)基混藥法3）毒餌法4）土壤混藥法定量取食法：使供試?yán)ハx按預(yù)定殺蟲劑的劑量取食，或能準(zhǔn)確地測(cè)出試蟲取食后所吞食藥量的用藥方法。例如：葉

5、片夾毒法）、液滴飼喂法、口腔注射法二、觸殺作用測(cè)定技術(shù)原理：將藥劑施于蟲體的全部或局部（合適部位），使藥劑經(jīng)體壁進(jìn)入蟲體而發(fā)揮觸殺作用。直接施藥法：直接將藥劑施加在昆蟲體表（噴粉及噴霧法、浸漬法、浸玻片法）。局部施藥法：將藥劑均勻地施于蟲體的合適部位，使其充分發(fā)揮觸殺作用。由于藥劑不接觸昆蟲的口器，可以避免胃毒作用的干擾（藥膜法、點(diǎn)滴法）。三、熏蒸作用測(cè)定技術(shù)的基本原理：使藥劑以氣態(tài)經(jīng)呼吸系統(tǒng)進(jìn)入蟲體，在作用部位產(chǎn)生毒力反應(yīng)，以測(cè)定熏蒸毒力的殺蟲劑生物測(cè)定。方法：溫度25，相對(duì)濕度50%下進(jìn)行的。熏蒸時(shí)間一股不超過5小時(shí)。試驗(yàn)昆蟲最常用的是米象與雜擬谷盜成蟲(羽化后23天)，也可以用黃粉甲幼蟲

6、或麥蛾幼蟲(3齡左右)。四、內(nèi)吸毒力測(cè)定技術(shù)的基本原理：使藥劑經(jīng)根、莖、葉或種子吸收和傳導(dǎo)后，通過供試?yán)ハx取食植物帶毒組織或汁液產(chǎn)生中毒反應(yīng)，以衡量內(nèi)吸毒力的殺蟲劑生物測(cè)定。直接測(cè)定法：將試蟲置于經(jīng)殺蟲劑處理植株的未施藥的部位，隔一定時(shí)間后，觀察試蟲中毒死亡情況，以判斷內(nèi)吸殺蟲能力的方法。間接測(cè)定法：利用敏感水生昆蟲（蚊幼蟲）對(duì)受藥植物浸出液的反應(yīng)，來測(cè)定進(jìn)入植物體內(nèi)的內(nèi)吸殺蟲劑有效成分含量的方法8 簡述葉片夾毒法的基本原理和實(shí)驗(yàn)方法?；驹硎怯脙蓮埲~片，中間均勻地放入一定量的殺蟲劑飼喂目標(biāo)昆蟲，然后由被吞服的葉片面積，計(jì)算出吞服的藥量。1、夾毒葉片的制備2、飼喂方法3、結(jié)果檢查4、致死中量

7、的計(jì)算9 何為殺菌劑生物測(cè)定。利用病原菌或感菌生物體對(duì)殺菌劑的反應(yīng)，來確定殺菌劑效力(毒力,藥效)的農(nóng)藥生物測(cè)定。10 簡述菌種保存的方法？1）傳代培養(yǎng)保藏法：是將菌株定期的移植到新鮮的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)保存的方法。是最基本的保藏法。2）液體石蠟覆蓋保藏法：是傳代培養(yǎng)保藏法的一種改進(jìn)，利用在斜面上加注滅菌的液體石蠟使培養(yǎng)物隔絕空氣，同時(shí)防止培養(yǎng)基干涸而達(dá)到延長保藏時(shí)間的目的。本法適用于霉菌、酵母菌、放線菌和好氣細(xì)菌的保存。3）水保藏法：將細(xì)菌或真菌懸浮在無菌水中在室溫下保存菌種的方法。4）冷凍保藏法：通過冷凍使細(xì)胞停止活動(dòng)進(jìn)行保存的方法。）、低溫冰箱保藏法（冷凍法）：將菌體移入分散劑中，保存在低

8、溫冰箱內(nèi)。 ）、液氮保藏法：將菌種用液氮進(jìn)行超低溫（-196）處理保存。本法適用范圍最廣，適于絕大多數(shù)微生物、病毒、人類和動(dòng)植物組織、原代及傳代細(xì)胞、雜交瘤、體外質(zhì)粒、重組DNA、單細(xì)胞藻株、原生動(dòng)物等。5）干燥保藏法：將細(xì)菌或真菌干燥，停止代謝活動(dòng)，然后進(jìn)行冷凍或冷藏的保存方法。6）冷凍干燥保藏法：將細(xì)胞冷凍使代謝活動(dòng)完全停止，然后在真空下通過冰的升華除去水分并在真空狀態(tài)下保存。為防止冷凍干燥過程中細(xì)胞受到損傷，要在菌體內(nèi)加入適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)劑，然后進(jìn)行冷凍干燥。7）寄主保藏法：霜霉菌、銹菌、白粉菌等專性寄生菌的保存，一般是在植株幼苗上接種使其發(fā)病，隔一定時(shí)間后，取其孢子再接種到新的植物幼苗上，如

9、此反復(fù)進(jìn)行菌種保存。8）基因工程菌的保藏：基因工程菌最好應(yīng)保藏在含低濃度選擇劑的培養(yǎng)基中。例如，質(zhì)粒pBR322。它除了能將外源DNA 輸入Ecoli細(xì)胞外，還賦予Ecoli細(xì)胞Ampr和Tetr。如果在培養(yǎng)基中加入Amp和Tet，則培養(yǎng)時(shí)可選擇出含pBR322質(zhì)粒的細(xì)胞。11 簡述孢子萌發(fā)試驗(yàn)法、生長速率測(cè)定法、附著法、稀釋法和抑菌圈測(cè)定法的基本原理和測(cè)定方法？一、孢子萌發(fā)試驗(yàn)法的基本原理：通過藥劑與病菌孢子接觸后，根據(jù)抑制病菌孢子萌發(fā)的多少來判定藥劑效力的殺菌劑生物測(cè)定方法?？捎糜跉⒕鷦┑暮Y選，藥劑抗雨水沖刷的測(cè)定，也可用于殺菌劑作用方式的測(cè)定。二、生長速率測(cè)定法的基本原理：利用

10、病菌在含有不同濃度藥劑的培養(yǎng)基上生長速度的快慢，來判定藥劑毒力大小的殺菌劑生物測(cè)定方法。適用于不產(chǎn)孢子或產(chǎn)生孢子緩慢，而菌絲生長迅速、整齊、平伏于培養(yǎng)基上呈放射狀生長的病菌。三、附著法的基本原理：將病菌孢子附著于滅菌的種子、濾紙片、果皮或其它保護(hù)材料上，使其接觸藥劑，在一定條件下培養(yǎng)一定時(shí)間后觀察有無菌絲生長，以比較藥劑效果。常用于殺真菌劑的生物測(cè)定。四、稀釋法的基本原理：又稱最低抑制濃度測(cè)定法。通過測(cè)定能完全抑制病菌生長的藥劑最低濃度，來衡量藥劑毒力的殺菌劑生物測(cè)定方法。此法可用于多種化合物對(duì)真菌、細(xì)菌和酵母藥效篩選的毒力測(cè)定。五、抑菌圈測(cè)定法的基本原理：通過藥劑在含菌培養(yǎng)基平面上水平擴(kuò)散，

11、形成大小不同的抑菌圈來比較毒力的殺菌劑生物測(cè)定方法。12 簡述溫室盆栽試驗(yàn)中接菌施藥方法及藥效調(diào)查方法？接菌方法：噴灑法：是將病原菌的孢子制成孢子懸浮液噴灑于植物表面。噴粉法：是直接用孢子粉（用滑石粉稀釋）噴撒于植物葉片上。涂抹法：是用手指或紗布將孢子懸浮液涂抹于葉片表面，或在孢子懸浮液中加適量金剛砂，用手指涂抹于葉片表面。注射法：是將病原菌孢子懸浮液用注射針注入寄主的生長點(diǎn)或幼嫩部分。針刺法：用滅菌的針刺傷寄主組織，然后將病菌接種在傷口內(nèi)。拌種法：將病原菌的孢子拌在植物種子中。浸種法：將孢子懸浮液與種子浸泡在一起，然后播種。土壤接種法：將病菌在播種前或播種時(shí)拌在土壤中。蘸根接種法：將幼苗的根

12、部稍加損傷，在孢子或菌絲體懸浮液中浸過以后移植。根部切傷接種法：是移植鏟或其他器具在植株的附近插入土壤中，使植株的根部部分受到損傷，然后將孢子或菌絲體的懸浮液灌注在根部附近的土壤中，最好從移植鏟插入的空隙中灌入。施藥方法：1) 測(cè)定藥劑的保護(hù)效果：先噴藥，后接菌。2) 測(cè)定藥劑的治療效果：先接菌，待病菌入侵后（1-2天）再施藥。3) 測(cè)定藥劑的內(nèi)吸作用：先噴藥，后接菌。4) 測(cè)定藥劑的持效期：一次施藥后，間隔1天，2天，4天，6天，8天或更長時(shí)間分期接種病原菌。5) 測(cè)定抗雨淋作用：先噴藥，用噴霧裝置降水淋洗一定時(shí)間以模擬降雨，然后接菌。效果調(diào)查：1）調(diào)查發(fā)病普遍率：以病害發(fā)生的普遍與否表示藥

13、劑的效果，計(jì)算調(diào)查總株（或總?cè)~）數(shù)中發(fā)病百分率。適用于某些土壤和種子傳染的苗期病害，也適用于全株性病害。2) 計(jì)數(shù)法：適用于葉斑類病害。調(diào)查每一葉上的病斑數(shù),求得平均每葉病斑數(shù),并以此比較發(fā)病情況,計(jì)算防治效果。3）分級(jí)計(jì)數(shù)法：將病害分級(jí)調(diào)查后，計(jì)算病情指數(shù)及防治效果。13 什么是除草劑生物測(cè)定？度量除草劑對(duì)雜草生物效應(yīng)大小和對(duì)作物安全性的農(nóng)藥生物測(cè)定。通常采用不同劑量的除草劑對(duì)供試雜草（或作物）產(chǎn)生效應(yīng)強(qiáng)度的相對(duì)比較方法，以評(píng)價(jià)一種或多種除草劑的相對(duì)效力（或安全性）。14 簡述除草劑生物測(cè)定的分類及原理（除草劑生物活性測(cè)定參數(shù)有哪些）。一、整株水平測(cè)定（1） 植株生長量：通過植物地上部分的生

14、長量或形態(tài)特征變化的大小，來測(cè)定除草劑效力高低。 以鮮重或株高為指標(biāo)。（2） 癥狀：有些除草劑可引起試材的典型癥狀，可以利用此種反應(yīng)來鑒定除草劑。二、組織或器官水平測(cè)定種子發(fā)芽：通過種子萌發(fā)率或?qū)ε哐?、胚根伸長長度的受抑制程度，來測(cè)定除草劑效力 。三、細(xì)胞或細(xì)胞器水平、酶水平測(cè)定1）生理生化指標(biāo)：通過對(duì)植物生理過程（二氧化碳交換量、水分消耗、黃化反應(yīng)、根系活力）的抑制效應(yīng)，來測(cè)定除草劑的活性和效力。2）植物的部分細(xì)胞或細(xì)胞器：如愈傷組織、線粒體、葉綠體等。3）藻類的應(yīng)用：濁度計(jì)測(cè)定生長量、分光光度計(jì)測(cè)定葉綠素含量、氧氣釋放、抑制面積的測(cè)定、直觀觀察4）新化合物的高通量篩選15 簡述除草劑生物測(cè)

15、定的測(cè)定方法。種子發(fā)芽測(cè)定法、植株生長量測(cè)定法、生理生化指標(biāo)測(cè)定法、癥狀鑒定法、愈傷組織鑒定法16 列舉至少5種抑制光合作用除草劑的生物測(cè)定方法。去胚乳小麥幼苗法、番茄水培法、浮萍法、圓葉片漂浮法、葉片內(nèi)葉綠素?zé)晒鉁y(cè)定法光合速率測(cè)定法、葉圓片亞硝酸還原酶活性測(cè)定法、離體葉綠體測(cè)定法17 何為植物激素的生物測(cè)定？利用敏感植物某些性狀反應(yīng)作指標(biāo)，對(duì)生理活性物質(zhì)進(jìn)行定性或定量的農(nóng)藥生物測(cè)定。18 簡述植物激素生物測(cè)定技術(shù)的分類，各常用測(cè)定方法的基本原理。生長素的生物測(cè)定方法：燕麥彎曲法、小麥胚芽鞘伸長法、綠豆生根法赤霉素的生物測(cè)定方法：水稻幼苗葉鞘伸長“點(diǎn)滴”法、 大麥胚乳法 矮生玉米葉鞘法細(xì)胞分裂

16、素的生物測(cè)定法： 蘿卜子葉增重法 莧紅素合成法 組織培養(yǎng)鑒定法 小麥葉片保綠法脫落酸的生物測(cè)定：小麥胚芽鞘伸長法 棉花外植體脫落法乙烯的生物測(cè)定法： 乙烯可抑制黃化豌豆幼苗下胚軸的伸長；使下胚軸細(xì)胞橫向擴(kuò)大，下胚軸短粗；偏向上生長，從而使下胚軸橫向生長。黃化幼苗對(duì)乙烯的這三種反應(yīng)被稱為“三重反應(yīng)”。19 如何利用豌豆、綠豆、蘿卜、棉花、燕麥來鑒別生長素、赤霉素、細(xì)胞分裂素、脫落酸和乙烯？（或者：大麥、小麥、綠豆、豌豆、蘿卜）生長素：綠豆生根法、赤霉素：矮生豌豆下胚軸試法、大麥胚乳法細(xì)胞分裂素：蘿卜子葉增重法、脫落酸：棉花外植體脫落法 、小麥胚芽鞘伸長法乙烯：黃化豌豆幼苗、20 論述農(nóng)藥對(duì)非靶標(biāo)

17、生物的毒性類型及測(cè)定技術(shù)。1）急性毒性：急性毒性是指機(jī)體(人或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物)一次(或24小時(shí)內(nèi)多次)接觸外來化合物之后所引起的中毒效應(yīng)，甚至引起死亡。2）亞急性（subacute toxicity）或亞慢性(subchronic toxicity)毒性：化學(xué)物對(duì)生物體多次重復(fù)作用后，所產(chǎn)生的毒性。是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物連續(xù)多日接觸較大劑量的外來化合物所出現(xiàn)的中毒效應(yīng)。所謂較大劑量，是指小于急性LD50的劑量。兩者的區(qū)別在于給藥劑量和給藥期限的不同，亞急性給藥期限一般為14-28天，而亞慢性則為3-6個(gè)月。3）慢性毒性（chronic toxicity）：化學(xué)物長期低劑量對(duì)生物體作用后，所產(chǎn)生的毒性。是指以低

18、劑量外來化合物長期給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接觸，觀察其對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所產(chǎn)生的毒性效應(yīng)。農(nóng)藥對(duì)非靶標(biāo)生物毒性測(cè)定包括急性毒性測(cè)定、亞急性毒性測(cè)定、 亞慢性毒性測(cè)定、慢性毒性測(cè)定。21 農(nóng)藥對(duì)靶標(biāo)生物的急性毒性測(cè)定試驗(yàn)中，染毒的途徑有哪些？1）經(jīng)口(胃腸道)接觸：灌胃：是將化合物配制成一定濃度，裝入注射器等定量容器，經(jīng)過導(dǎo)管注入胃內(nèi)。在每一試驗(yàn)系列中，同物種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌胃體積應(yīng)一致，以單位體重計(jì)算所給予的毫升數(shù)，即ml/kg或ml/g。吞咽膠囊：將一定劑量受試化合物裝入藥用膠囊內(nèi)，強(qiáng)制放到動(dòng)物的舌后后咽部迫使動(dòng)物咽下。此種方式劑量準(zhǔn)確，尤其適用于易揮發(fā)、易水解和有異味的化合物。家兔及貓、狗等大動(dòng)物可用此法。2）經(jīng)呼吸道接觸（吸入接觸）靜式吸入：系將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于一個(gè)有一定體積的密閉容器內(nèi)，加入定量的易揮發(fā)的液態(tài)化合物或一定體積的氣態(tài)化合物，在容器內(nèi)形成所需要的受試化合物濃