色譜分法引論ppt課件

1、分析化學分析化學第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論An Introduction to Chromatography1903/1906年年 邁克爾邁克爾茨維特茨維特(Michael Tswett) 華沙大華沙大學學 俄國的植物學家俄國的植物學家 植物的石油醚提取液在碳酸鈣吸附劑填植物的石油醚提取液在碳酸鈣吸附劑填充的玻璃管中分別出葉綠素及其他色充的玻璃管中分別出葉綠素及其他色素素 (1(1粗葉綠素粗葉綠素+ +石油醚石油醚 2 2 石油醚石油醚 流動相流動相 相對運動相對運動 固定相吸附劑固定相吸附劑CaCO3 CaCO3 胡蘿卜素胡蘿卜素 利用不同物質利用不同物質葉黃素葉黃素 在流動

2、相與固定相在流動相與固定相葉綠素葉綠素 作用時的行為差作用時的行為差異得到分別異得到分別( (吸附吸附) ) 3 3小刀割開，用醇溶出小刀割開，用醇溶出 吸附作用吸附作用1931年年 庫恩庫恩 奧地利化學家奧地利化學家 胡蘿卜素植物色素分別胡蘿卜素植物色素分別20世紀世紀30年代年代 離子交換色譜建立離子交換色譜建立1940年年 吸附色譜與電泳相結合吸附色譜與電泳相結合1941年年 分配色譜創(chuàng)建分配色譜創(chuàng)建1952年年 氣相色譜法建立氣相色譜法建立1968年年 高效液相色譜法建立高效液相色譜法建立1975年之后年之后 離子色譜、超臨界流體色譜、高效毛細管電泳、場流動分級分別離子色譜、超臨界流體

3、色譜、高效毛細管電泳、場流動分級分別 Tiselius, A.W.K. Martin, A.J.P. Synge, R.L.M. 1948年 Nobel 化學獎 1952年 Nobel 化學獎 吸附色譜與電泳 分配色譜19 1 概要及術語概要及術語 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 塔板實際塔板實際 速率實際速率實際 總分別效能目的總分別效能目的 19 3 色譜的定性定量色譜的定性定量 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論19 -1 概要及術語概要及術語氣氣 體體(氣相色譜氣相色譜 GC 液體液體(液相色譜液相色譜 LC 超臨界流體

4、超臨界流體 超臨界流體超臨界流體 色譜色譜SFC流動相流動相固定相固定相固定相固定相外形外形稱號稱號1、分類、分類 液 液固固固固固固鍵鍵合合吸吸附附劑劑吸吸附附劑劑鍵鍵合合交交換換柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱平面平面 平面平面氣液氣液色譜色譜 氣固氣固色譜色譜 液液液液色譜色譜 薄層或薄層或紙色譜紙色譜 鍵合鍵合相色相色譜譜 尺寸尺寸排阻排阻色譜色譜 離子離子交換交換色譜色譜 超臨界超臨界流體流體 色譜色譜液固液固色譜色譜 多多孔孔第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語2、平面色譜、平面色譜 薄層色譜薄層色譜 0.25mm 厚厚 纖維素，硅膠纖維素，

5、硅膠 玻板玻板 紙色譜紙色譜 濾紙濾紙 液液-液液 萃取為原理萃取為原理 組份在兩相中反復分配組份在兩相中反復分配 因毛細作用而上升因毛細作用而上升溶劑溶劑 溶質在水相中各種存在方式總濃溶質在水相中各種存在方式總濃度度 分配比分配比 k = c水水/c有有 溶質在有機相中各種存在方式總濃度溶質在有機相中各種存在方式總濃度第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語2、平面色譜、平面色譜 固定相濾紙巳吸水固定相濾紙巳吸水20%20% 流動相上升前沿流動相上升前沿 比移值比移值 Rf1=Zx1 / Z Rf1=Zx1 / ZZ x2 Rf2=Zx2 / ZZ x2

6、Rf2=Zx2 / Z Zx2 Zx2 圖中圖中kx2kx2小小快快Rf2Rf2大大 x1 kx1 x1 kx1大大慢慢Rf1Rf1小小 分開分開 Zx1 Zx1 斑點位置斑點位置 Rf Rf 值值 定定性性 斑點用熒光、光度積分值斑點用熒光、光度積分值 定量定量 展開劑有機溶劑流動相展開劑有機溶劑流動相第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語3、柱色譜、柱色譜1 1以以GLCGLC為例為例 Gas Gas 流動相流動相 高沸點有機化合物固定液高沸點有機化合物固定液 固定相固定相 化學隋性固體微粒擔體化學隋性固體微粒擔體 溶解溶解 揮發(fā)揮發(fā) 現(xiàn)代柱色譜后加現(xiàn)

7、代柱色譜后加GasGas帶帶 A A 檢測器檢測器組分組分A L A L 可記錄到柱后組分濃度可記錄到柱后組分濃度 轉換成的電信號強度轉換成的電信號強度第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語3、柱色譜、柱色譜2色譜圖色譜圖 隨時間隨時間 t 記錄色譜流出曲線，即色譜圖記錄色譜流出曲線，即色譜圖I tR W t0 tR h W h/2 0.607h o Wb t 進樣進樣 空氣空氣 組分組分1 組分組分2 惰性物質惰性物質 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語3、柱色譜、柱色譜3術語術語基線基線 ot死時間死時間 t0

8、 柱出口處流動相柱出口處流動相的體積流速的體積流速 死體積死體積 V0=t0F0 通常用校正體積通常用校正體積流速流速保管時間保管時間 tR 即柱溫暖大氣壓即柱溫暖大氣壓的載氣流速的載氣流速 保管體積保管體積 VR=tRF0 校正保管體積校正保管體積 VR0=tRFC調整保管時間調整保管時間 tR= tR t0 柱柱內平均體積流速內平均體積流速 調整保管體積調整保管體積 VR= VR V0 = tR F0 凈保管體積凈保管體積 VR0 =tR FC 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語3、柱色譜、柱色譜 3術語術語 柱內平均體積流速柱內平均體積流速 FC

9、 ?可用皂膜流量計在柱后測得流速可用皂膜流量計在柱后測得流速F視體積流速進展視體積流速進展 飽和水蒸氣壓校正飽和水蒸氣壓校正 P0 - PW / P0 柱溫校正柱溫校正 Tc / Tr 壓力校正因子壓力校正因子 j=(3 /2 ) (Pi/P0)2-1 / (Pi/P0)3-1 F 室室 溫暖大氣壓力下載氣流速溫暖大氣壓力下載氣流速 FC = FP0 - PW / P0 Tc / Tr j F0 柱柱 溫暖大氣壓溫暖大氣壓力下載氣流速力下載氣流速對分配色譜：對分配色譜： 分配系數(shù)分配系數(shù)kdkd= Cs/CmCs-單位體積固定相中組分的質量單位體積固定相中組分的質量Cm-單位體積流動相中組分的

10、質量單位體積流動相中組分的質量對吸附色譜對吸附色譜 吸附平衡常數(shù)吸附平衡常數(shù)kaka= Cs/CmCs-每克固定相中吸附組分的質量每克固定相中吸附組分的質量Cm-每毫升流動相中組分的質量每毫升流動相中組分的質量第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語3、柱色譜、柱色譜 3術語術語分配容量容量因子，分配比分配容量容量因子，分配比k=ns/nm=(CsVs)/(CmVm)=kVs/Vm=k/第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語3、柱色譜、柱色譜 3術語術語ns, nm-分別為組分在固定相和流動相中的量；分別為組分在固定相和

11、流動相中的量；Vs，Vm-分別為固定相和流動相的體積；分別為固定相和流動相的體積；-相比相比 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語3、柱色譜、柱色譜 3術語術語色譜峰寬區(qū)域寬度色譜峰寬區(qū)域寬度 半峰寬度半峰寬度 W 1/2 = 22ln2 =2.354 峰底寬峰底寬 Wb = 4 拐點處峰寬拐點處峰寬 W = 2 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語3、柱色譜、柱色譜4 4色譜圖的信息色譜圖的信息 a. a. 色譜峰個數(shù)色譜峰個數(shù) 判別試樣中所含組判別試樣中所含組分的最少數(shù)分的最少數(shù) b. b. 色譜保管值色譜保管

12、值 定性定性 c. c. 色譜峰面積或峰高色譜峰面積或峰高 定量定量 A = K A = K C C d. d. 保管值與區(qū)域寬度保管值與區(qū)域寬度 評價柱分別評價柱分別效能根據(jù)效能根據(jù) e. e. 兩峰間距兩峰間距 評價兩組分能否分別評價兩組分能否分別 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 -1 概要及術語概要及術語3、柱色譜、柱色譜 4色譜圖的信息色譜圖的信息 上面色譜圖由實驗得到，是實驗現(xiàn)實上面色譜圖由實驗得到，是實驗現(xiàn)實但但 1為什么出這樣的峰？為什么不是其為什么出這樣的峰？為什么不是其它外形？色譜過程究竟如何？它外形？色譜過程究竟如何？ 2獲得色譜圖的詳細安裝？獲得色譜圖的

13、詳細安裝？ 怎樣才干獲取最好的色譜信號？怎樣才干獲取最好的色譜信號？ 3如何解釋圖、詳細如何定性？定量？如何解釋圖、詳細如何定性？定量？ 有何特點。有何特點。第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際1 塔板實際以氣液分配色譜作闡明塔板實際以氣液分配色譜作闡明 1想象想象 Martin 比較為蒸餾塔比較為蒸餾塔 0 1 2 3 4 5 6 氣相氣相G H 體積體積V 載氣載氣 液相液相L 一個塔板、板高一個塔板、板高H 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 1 塔板實際塔板實際 2假定假定 a

14、. 每一塔板內、組份迅速到達平衡。每一塔板內、組份迅速到達平衡。 b. 載氣間歇進入，每一次為一個塔板體積。載氣間歇進入，每一次為一個塔板體積。 c. 載氣不可緊縮。載氣不可緊縮。 d. 一開場組份都在一開場組份都在 0 號塔板上，沿柱長方向分號塔板上，沿柱長方向分散不思索。散不思索。 e. 組份的分配系數(shù)組份的分配系數(shù) K = CL/ CG，在每個塔板，在每個塔板上是常數(shù)。上是常數(shù)。3色譜氣過程的分解動作色譜氣過程的分解動作 分配比分配比 k=p/q 組份在液相中分量組份在液相中分量 / 組組份在氣相中分量份在氣相中分量 對混合組份對混合組份 A ,B 假設假設 kA=1 即即 A 組份在平

15、衡時，氣液中各組份在平衡時，氣液中各一半量一半量 kB= 0即即 B 組份在平衡時，液相中不組份在平衡時，液相中不溶解溶解 進樣初始態(tài)進樣初始態(tài) A+B 參與載氣體積數(shù)參與載氣體積數(shù) N=0 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 1 塔板實際塔板實際進樣初始態(tài)進樣初始態(tài) A+B r=0 1 2 3 4 A+B r=0 1 2 3 4 5 n5 n參與載氣體積數(shù)參與載氣體積數(shù) N=0 N=0 平衡時平衡時 N=1 V1 N=1 V1 N=2 V2 N=2 V2 N=3 V3 N=3 V3 N=4 V4 N=4 V4 N=n Vn A B B

16、A N=n Vn A B B A第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 1 塔板實際塔板實際 3色譜氣過程的分解動作色譜氣過程的分解動作 上圖中的分布是一個二項式分布，可用上圖中的分布是一個二項式分布，可用二項式展開計算。二項式展開計算。當當 N N 或或 n n 很大時，用數(shù)理統(tǒng)計，正態(tài)很大時，用數(shù)理統(tǒng)計，正態(tài)分布，概率分布函數(shù)給出表達式分布，概率分布函數(shù)給出表達式 n n， n n 為塔為塔板數(shù)。板數(shù)。第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 1 塔板實際塔板實際 3色譜氣過程的分解動作色

17、譜氣過程的分解動作 4 4 表達式表達式柱效能概念上圖可見，對于同一柱長柱效能概念上圖可見，對于同一柱長L L，假設塔，假設塔板數(shù)板數(shù)n n 即即 H , H ,那么平衡分配次數(shù)愈多那么平衡分配次數(shù)愈多 . . 闡闡明該物質在這個柱上的效能愈大明該物質在這個柱上的效能愈大n n 可衡量一根柱的效能可衡量一根柱的效能,n ,n 愈大，被分別的能夠愈大，被分別的能夠愈大愈大 n n實際實際=16(tR/Wb)2=5.545 (tR/ W1/2)2=16(tR/Wb)2=5.545 (tR/ W1/2)2 H H實際實際= L/n= L/n實際實際n n 表示一定條件下，柱分別才干發(fā)揚程度的標表示一

18、定條件下，柱分別才干發(fā)揚程度的標志。志。由于由于tRtR中含有中含有t0,t0,實踐在分配中發(fā)揚作用僅是實踐在分配中發(fā)揚作用僅是tRtR中的中的tRtR部分部分 n n有效有效=16(tR / Wb)2=5.545 (tR / =16(tR / Wb)2=5.545 (tR / W1/2)2W1/2)2 H H有效有效= L/n= L/n有效有效 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 1 塔板實際塔板實際5關于塔板數(shù)計算的幾個問題關于塔板數(shù)計算的幾個問題a. n 是人為概念，不同方法測得的塔板數(shù)相差很是人為概念，不同方法測得的塔板數(shù)相差很大

19、，但它有用為比較類似色譜柱或制備柱時的大，但它有用為比較類似色譜柱或制備柱時的技術好壞建立了規(guī)范技術好壞建立了規(guī)范 b. n不僅決議于組分及兩相的性質，還與一系列操不僅決議于組分及兩相的性質，還與一系列操作條件有關因此作條件有關因此 比較柱效能時，必需指定組份、比較柱效能時，必需指定組份、固定相及含量、柱溫、流動相及速度、進樣量固定相及含量、柱溫、流動相及速度、進樣量等。等。c. 不同組份在同一柱上，不同組份在同一柱上，k值大的，值大的，n值較大值較大 。d. 不對稱色譜峰，計算會產(chǎn)生較大誤差，可到達不對稱色譜峰，計算會產(chǎn)生較大誤差，可到達1020%，峰愈近正態(tài)分布，誤差愈小。，峰愈近正態(tài)分布

20、，誤差愈小。e. 檢測器呼應與濃度應有線性呼應，否那么檢測器呼應與濃度應有線性呼應，否那么n值值不真實。不真實。f. 計算計算n時，保管值與峰寬應有一樣單位。時，保管值與峰寬應有一樣單位。 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 1 塔板實際塔板實際6 對塔板實際評價對塔板實際評價勝利：勝利： a. 解釋色譜流出曲線外形呈正態(tài)分布解釋色譜流出曲線外形呈正態(tài)分布 b. 濃度極大點位置濃度極大點位置 c. 評價柱效應能高低的塔板數(shù)計算評價柱效應能高低的塔板數(shù)計算存在問題：存在問題：a. 不能闡明板高的影響要素不能闡明板高的影響要素 b. 色譜寬變

21、寬緣由色譜寬變寬緣由 c. 不能解釋不同流速的不能解釋不同流速的 n 值不同值不同 假定與實踐不相符引起假定與實踐不相符引起 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 1 塔板實際塔板實際第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 2 速率實際速率實際1范第姆特公式范第姆特公式 1956年年 荷蘭荷蘭 范范第姆特第姆特(Van Deemter)公式公式: H = A + B /u + Cu 概括了影響概括了影響 H 的動力學效應的動力學效應A項項渦流分散項渦流分散項 即多徑項即多徑項 t1 t0

22、t1t1峰變寬峰變寬 t1 A = 2dP 不規(guī)那么因子不規(guī)那么因子 顆粒平均直徑顆粒平均直徑 表示不均性表示不均性 填充物不規(guī)那么性，使途徑不同填充物不規(guī)那么性，使途徑不同 對空心柱對空心柱 A = 0 要使要使H小小 怎樣辦？怎樣辦？ 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 2 速率實際速率實際 1范第姆特公式范第姆特公式B/u項項分子分散項分子分散項 即縱向分散即縱向分散 試樣試樣塞塞 向兩邊縱向分散向兩邊縱向分散 要使要使H小小 怎怎樣辦？樣辦？ GC 中此項不計中此項不計 B = Bm + Bs = 2m Dm +s Ds k 流動

23、相流動相 固定相固定相 彎曲因子彎曲因子 分散系數(shù)分散系數(shù) 分配分配比比 1 Dm :0.011cm2/ss 分散時的途徑彎曲即分散受阻系數(shù)分散時的途徑彎曲即分散受阻系數(shù) Ds: 10-410-5 Dm要要B 對一定柱對一定柱Dm ( 組份分子量組份分子量 柱溫柱溫 柱壓柱壓 載氣分載氣分子量子量)要要u 即停留時間短即停留時間短 留意留意:與與是有區(qū)別的是有區(qū)別的, 填充物均勻填充物均勻,而而不一定不一定第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 2 速率實際速率實際 1范第姆特公式范第姆特公式第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19

24、2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際2 速率實際速率實際 1范第姆特公式范第姆特公式Cu項項傳質阻力項傳質阻力項 傳質過程指什么？傳質過程指什么？ 濃度不均勻而發(fā)生的質量遷移過濃度不均勻而發(fā)生的質量遷移過程程 表現(xiàn)為兩相中的分散過程及溶解、平衡、轉表現(xiàn)為兩相中的分散過程及溶解、平衡、轉移過程移過程GL例：例： 組分在氣相任一部位組分在氣相任一部位 挪動速度由氣相轉質阻力系數(shù)表示挪動速度由氣相轉質阻力系數(shù)表示 G 移至移至界面界面 C = Cm + Cs L 移至移至 挪動速度由液相轉質阻力系數(shù)表示挪動速度由液相轉質阻力系數(shù)表示 組分在液相中任一部位組分在液相中任一部位 第第19章章 色譜分

25、析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際2 速率實際速率實際 1范第姆特公式范第姆特公式Cu項項傳質阻力項傳質阻力項 傳質阻力使峰變寬傳質阻力使峰變寬組分在氣相中濃度組分在氣相中濃度 CG 柱間隔柱間隔組分在液相中濃度組分在液相中濃度 CL 理想形狀瞬間平衡理想形狀瞬間平衡 實踐情況實踐情況 有有 CL=KCG 氣相在運動平衡氣相在運動平衡 需需求時間求時間 平衡常數(shù)假設平衡常數(shù)假設K=1 傳質阻力存?zhèn)髻|阻力存在在 那么柱那么柱x 間隔有等濃度間隔有等濃度 A點：點： CLKCG B點：點： CLKCG 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過

26、程的討論實際色譜過程的討論實際2 速率實際速率實際 1范第姆特公式范第姆特公式Cu項項傳質阻力項傳質阻力項 C= Cs+ Cm 構成因子構成因子 固定相液膜厚度固定相液膜厚度 分配比分配比 與容量因子有關的系數(shù)與容量因子有關的系數(shù) GLC LLC Cs qk ds2 sds2固定相固定相 (1k2 Ds Ds Cm 0.01k2 dp2 (m+ sm) dp2流動相流動相 1k2 Dm Dm 流動相因流動對流動相因流動對 在微孔中滯留流動相在微孔中滯留流動相 傳質阻力的奉獻傳質阻力的奉獻 對傳質阻力的奉獻對傳質阻力的奉獻 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際

27、色譜過程的討論實際2 速率實際速率實際 1范第姆特公式范第姆特公式Cu項項傳質阻力項傳質阻力項 s固定相因流動對固定相因流動對 傳質阻力的奉獻傳質阻力的奉獻 m流動相因流動對流動相因流動對 傳質阻力的奉獻傳質阻力的奉獻 sm在微孔中滯留流動相在微孔中滯留流動相 對傳質阻力的奉獻對傳質阻力的奉獻 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際2 速率實際速率實際 1范第姆特公式范第姆特公式第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際2 速率實際速率實際2范氏方程的開展范氏方程的開展GL中：中：1962年年

28、吉丁斯吉丁斯Giddings“渦流分散耦合實際渦流分散耦合實際 展寬要素相互影響、不是簡單加和、流動方式極展寬要素相互影響、不是簡單加和、流動方式極為復雜為復雜 A項修正為與氣相傳質相互作用有關項修正為與氣相傳質相互作用有關 A=(1/ 2dP)+(1/ Cm u)-1 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際2 速率實際速率實際 2范氏方程的開展范氏方程的開展 LL 中：中： 范氏方程可進范氏方程可進 一步簡化一步簡化 當當dP足夠小時，足夠小時， 2dP與與 mdp2/Dm合并，合并， 近似表達為近似表達為Au 0.33 H = Au 0.

29、33 + B /u + Cs+ Cm u 填充良好，粒徑較大多孔膜填充良好，粒徑較大多孔膜ds很小時，很小時，HPLC中縱向分散很小中縱向分散很小 H = Au 0.33 +Cm u第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際2 速率實際速率實際3 3勝利之處勝利之處 解釋影響板高要素解釋影響板高要素 填充均勻度填充均勻度 顆粒大小顆粒大小 流動相流速流動相流速 類型類型 固定相厚度固定相厚度 對選擇操作條對選擇操作條件具有指點意義件具有指點意義 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 10 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際3 柱的總分

30、別效能目的柱的總分別效能目的1n 作為柱效能目的作為柱效能目的即反映物質在柱中到達分配平衡次數(shù)即反映物質在柱中到達分配平衡次數(shù)但不能直接反映難分別物質對但不能直接反映難分別物質對A、B的的分別效果分別效果第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際3 柱的總分別效能目的柱的總分別效能目的2分別度分別度R 即總分別效能目的即總分別效能目的 R=2(tR2-tR1)/(Wb1+Wb2) 濃度濃度A/B=1/1時時 R=1 分別程度分別程度 98% R=1.5 分別程度分別程度99.9% 完全分別完全分別 相鄰兩峰相鄰兩峰Wb1+Wb2= 8 R= (t

31、R2-tR1)/ 4第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際3 柱的總分別效能目的柱的總分別效能目的3色譜分別方程式色譜分別方程式R、k、n三者關系三者關系令令 Wb1+Wb2= 2W R= (tR2-tR1)/W= (tR2-tR1 )/W 即即 W= (tR2-tR1)/ R= (tR2-tR1 )/R又又 n有效有效=16(tR2 / W2)2 或或n實際實際=16(tR2/W2)2即有即有 n有效有效=16R tR2 / (tR2-tR1 )2 =16R2(2,1 / 2,1 1)2 R=(n有效有效 /4)(2,1 1)/2,1 第第

32、19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際 3 柱的總分別效能目的柱的總分別效能目的 3色譜分別方程式色譜分別方程式管值管值 R=(n實際實際/4) ( -1) / k2/ 1+k 2) 色譜分別根本方程式色譜分別根本方程式k 220 k2/(1+k 2)=1 n有效有效=n實實際際 第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際3 柱的總分別效能目的柱的總分別效能目的 4討論討論R是是 容量因子容量因子k2 分別系數(shù)分別系數(shù) 即相對保管值即相對保管值2,1 柱效能柱效能 n 函數(shù)函數(shù)第第19章章 色譜分析

33、法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際3 柱的總分別效能目的柱的總分別效能目的 4討論討論 提高提高R的方法的方法: A. 使使k 那么那么k2/(1+k 2) R 太大太大 a. 延伸分析時間延伸分析時間 b. 呵斥檢測困難呵斥檢測困難 K 普通在普通在 27 k10分別度提高不明顯分別度提高不明顯 k2淋洗時間會出現(xiàn)極小值淋洗時間會出現(xiàn)極小值B. 使使n那么那么R。分別改善、峰變窄有利提高分析靈敏。分別改善、峰變窄有利提高分析靈敏度度 但添加柱長使但添加柱長使n, 延伸分析時間。延伸分析時間。 設法使設法使H，才是添加，才是添加R 的最好方法的最好方法第第19

34、章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 19 2 色譜過程的討論實際色譜過程的討論實際3 柱的總分別效能目的柱的總分別效能目的 4討論討論 提高提高R的方法的方法:C. 使使 那么那么 1/ R 2 時時 短時間內組分會完全分別短時間內組分會完全分別 接近接近1 時時 延伸時間才干完全分別延伸時間才干完全分別 (=1.01分別時間是分別時間是=1.1時的時的84倍倍) =1時時 無法分別無法分別 一定，一定，R正比于正比于n有效有效,即分別度直接與即分別度直接與n有有效有關效有關 闡明闡明n有效更能正確地代表柱效能。有效更能正確地代表柱效能。第第19章章 色譜分析法引論色譜分析法引論 17 3 色譜的定性定量色譜的定性定量 1. 色譜的定性對照色譜的定性對照 利用保管值進展