破損淀粉含量測定定稿

1、小麥粉破損淀粉含量測定（-淀粉酶法GB/T 9826-2008）1 定義小麥中的淀粉顆粒在研磨過程中受到機(jī)械損傷而產(chǎn)生破損的淀粉。2 原理在研磨過程中小麥的淀粉顆粒會受到損傷，破損淀粉含量會影響小麥粉的吸水性和面團(tuán)揉混特性。小麥粉中破損淀粉對-淀粉酶的敏感性大大高于未破損淀粉，在常溫下能被-淀粉酶降解生成糊精和一定量的還原糖。利用此特性，在規(guī)定的條件下，用-淀粉酶降解小麥粉中破損淀粉，再用鐵氰化鉀法測定其還原糖量，并根據(jù)法蘭德的經(jīng)驗公式計算小麥粉中的破損淀粉值。3 試劑除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，水為蒸餾水。3.1 乙酸緩沖液溶解4.1g無水乙酸鈉于水中，加入3.0mL冰乙酸，用水定容至

2、1000mL，溶液pH值應(yīng)為4.64.8。3.2 10%硫酸溶液將100mL濃硫酸加入到大約700mL水中，用水定容至1000mL，溶液的濃度為3.68mol/L±0.05mol/L。3.3 12%鎢酸鈉溶液稱取12.0g鎢酸鈉溶于水中，并定容至100mL。3.4 -淀粉酶制品由米曲霉制得的真菌酶（活力大于10U/mg）。3.5 0.1mol/L堿性鐵氰化鉀溶液配制與標(biāo)定稱取32.9g 干燥純凈的鐵氰化鉀與44.0g無水碳酸鈉用水定容至1000mL，貯于棕色瓶避光保存。鐵氰化鉀溶液的標(biāo)定：準(zhǔn)確量取10.0mL的鐵氰化鉀溶液，加入25mL乙酸鹽溶液和10mL10%碘化鉀溶液后混勻。用0

3、.1N的硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色，加2mL 5g/L可溶性淀粉溶液滴至藍(lán)色完全消失。0.1mol/L硫代硫酸鈉溶液的消耗量應(yīng)為10.0±0.05mL，說明溶液可以繼續(xù)使用。3.6 乙酸鹽溶液稱取70g氯化鉀和40g硫酸鋅于水中完全溶解后，緩慢加入200mL冰乙酸，用水定容至1000mL。3.7 0.1mol/L硫代硫酸鈉溶液的配制與標(biāo)定稱取24.82g硫代硫酸鈉（含5個結(jié)晶水）和3.8g四硼酸鈉用新煮沸并冷卻了的純水定容至1000mL，貯于棕色瓶避光保存。放置1周后使用。標(biāo)定：稱取基準(zhǔn)物質(zhì)重鉻酸鉀（K2Cr2O7）0.1g各三份，精確至0.0001g，加15mL水溶解后加1.

4、5gKI和10mL10%硫酸塞好塞子充分混勻，于暗處放置20min后取出。取出后加150mL蒸餾水稀釋，用0.1N硫代硫酸鈉溶液滴定。滴定要點：當(dāng)溶液由棕紅色變成淡黃色時加2mL5g/L的淀粉溶液，此時溶液變藍(lán)，繼續(xù)滴定滴至藍(lán)色消失即為終點。同時做空白實驗。計算公式：N=m(K2Cr2O7)/0.04903(V1-V0) 3.8 5g/L的可溶性淀粉溶液用少量冷水調(diào)和1g的可溶性淀粉，然后慢慢加入沸騰的水中（小于200mL）。溶液冷卻后，用蒸餾水定容至200mL。3.9 10%碘化鉀溶液稱取10g碘化鉀溶解后定容至100mL。4 儀器和用具4.1 恒溫水?。嚎煽販?0±0.14.2

5、耐熱玻璃試管：25×220mm4.3 量筒：100mL；50mL；25mL4.4 玻璃漏斗及中速定量無灰濾紙；可用離心代替4.5 天平：感量0.01g；0.1mg4.6 移液管或移液器：1mL、5mL、10mL4.7 pH計或精密pH試紙：可測pH4.64.84.8 定時器4.9 滴定管：25 mL4.10 錐形瓶：150 mL4.11 玻璃棒。4.12 水浴鍋：沸水浴5 操作步驟5.1 酶解乙酸緩沖液置于30水浴中。稱取1.00g（14%濕基）面粉樣品置于150mL錐形瓶中。稱取0.050g酶，加入到錐形瓶中，再加入45mL乙酸緩沖液。用玻璃棒混勻。從加入乙酸緩沖液起，在30恒溫水

6、浴中準(zhǔn)確保溫15min。保溫后，加入3mL10%硫酸溶液和2mL12%鎢酸鈉溶液，充分混合，靜置2min，然后過濾或離心。若過濾需棄去最初810滴濾液，收集濾液于干凈錐形瓶中，此濾液即為試樣測定液。若離心，上清液即為測定樣液另取一支試管不加小麥粉和淀粉酶，同時同上操作，所得濾液即為空白對照液。5.2 測定還原糖立即準(zhǔn)確吸取5.0mL濾液于試管中，向試管中準(zhǔn)確加入10mL0.1M堿性鐵氰化鉀溶液，混合均勻后將試管浸入劇烈沸騰的水中，試管中的液面應(yīng)低于沸水液面3cm4cm。試管在沸水鍋中準(zhǔn)確煮沸20min。注：樣品提取物的過濾處理與沸水浴處理的時間間隔不要超過1520min。進(jìn)一步延遲可能引起蔗糖

7、在酸溶液中的分解而導(dǎo)致測定錯誤。取出試管立即用流水冷卻。冷卻后將試管中溶液倒入容積為150mL的錐形瓶中，并用25mL乙酸鹽溶液分3次洗滌試管，并將洗滌液也加入錐形瓶?；靹蚝蠹尤?0mL10%碘化鉀溶液，并徹底混勻。然后用0.1mol/L的硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色時加2mL5g/L淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并記錄下消耗的硫代硫酸鈉溶液的體積為V1(mL)。吸取空白對照液5mL代替樣品液，同上操作，記錄用去硫代硫酸鈉溶液的體積為V0(mL)。6 結(jié)果計算6.1 還原糖含量先按式（1）計算出氧化樣品液中還原糖所需0.1M鐵氰化鉀體積，在工具此表查表，即可查得樣品中含還原糖（以麥芽糖計算

8、）的毫克數(shù)（mg），按式（1）計算：V = V1 V0 （1）式中：氧化試樣液中還原糖所需的0.1M鐵氰化鉀液的體積，mL；V1滴定試樣液用去硫代硫酸鈉的體積，mL；V0滴定空白液用去硫代硫酸鈉的體積，mL；6.2 小麥粉破損淀粉值（P）數(shù)值以%計算 （2）式中：m由表1得到的10g淀粉中麥芽糖毫克數(shù)，單位為毫克（mg）；5樣品稀釋倍數(shù)；1.6461%的淀粉轉(zhuǎn)化為麥芽糖，所以乘以0.61的倒數(shù)1.64。7 結(jié)果允許差在相同條件下，兩次測定結(jié)果之差不得超過平均值的5%，測定結(jié)果保留小數(shù)點后兩位。表1 鐵氰化鉀-麥芽糖的轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)表被還原的0.1mol/L鐵氰化鉀的體積mL每10g淀粉中含有的麥芽糖

9、的量mg被還原的0.1mol/L鐵氰化鉀的體積mL每10g淀粉中含有的麥芽糖的量mg被還原的0.1mol/L鐵氰化鉀的體積mL每10g淀粉中含有的麥芽糖的量mg被還原的0.1mol/L鐵氰化鉀的體積mL每10g淀粉中含有的麥芽糖的量mg0.1052.301164.502376.703790.20102.401214.602446.803850.30152.501264.702516.903920.40202.601304.802577.003980.50252.701354.902647.104060.60312.801405.002707.204120.70262.901455.102767.304180.80413.001515.202827.404250.90463.101565.302887.504311.00513.201615.402957.604381.10563.301665.503027.704451.20603.401715.603087.804511.30653.501765.703157.904581.40713.601825.803228.004651.50763.701885.903288.104721.60803.801956.003348.204781.70853.902016.103418.3