五日生化需氧量的測定

1、五日生化需氧量的測定五日生化需氧量的測定稀釋接種法稀釋接種法1.方法原理：方法原理： 生化需氧量是指在規(guī)定條件下，微生生化需氧量是指在規(guī)定條件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物質(zhì)，特別是有物分解存在水中的某些可氧化物質(zhì)，特別是有機(jī)物所進(jìn)行的生物化學(xué)過程中消耗溶解氧的量。機(jī)物所進(jìn)行的生物化學(xué)過程中消耗溶解氧的量。 對某些地表水及大多數(shù)工業(yè)廢水，因?qū)δ承┑乇硭按蠖鄶?shù)工業(yè)廢水，因含較多的有機(jī)物，需要稀釋后再培養(yǎng)測定，含較多的有機(jī)物，需要稀釋后再培養(yǎng)測定，以降低其濃度和保證有充足的溶解氧。為了以降低其濃度和保證有充足的溶解氧。為了保證水樣稀釋后有足夠的溶解氧，稀釋水通保證水樣稀釋后有足夠的溶解氧，

2、稀釋水通常要通入空氣或氧氣進(jìn)行曝氣，使稀釋水中常要通入空氣或氧氣進(jìn)行曝氣，使稀釋水中溶解氧接近飽和。稀釋水中還應(yīng)加入一定量溶解氧接近飽和。稀釋水中還應(yīng)加入一定量的無機(jī)營養(yǎng)鹽和緩沖物質(zhì)的無機(jī)營養(yǎng)鹽和緩沖物質(zhì),以保證微生物生以保證微生物生長的需要。長的需要。2. 稀釋接種法測定稀釋接種法測定BOD5時(shí)需注意的問題時(shí)需注意的問題2.1 樣品的采集及保存樣品的采集及保存 采集樣品時(shí)應(yīng)充滿并密封于瓶中，在采集樣品時(shí)應(yīng)充滿并密封于瓶中，在0-4條件下進(jìn)行保存，一般應(yīng)在條件下進(jìn)行保存，一般應(yīng)在6h內(nèi)進(jìn)行分析。內(nèi)進(jìn)行分析。若需要遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)運(yùn)，在任何情況下，貯存時(shí)若需要遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)運(yùn)，在任何情況下，貯存時(shí)間不應(yīng)超過間

3、不應(yīng)超過24h。 2.2 時(shí)間的影響時(shí)間的影響 樣品中的樣品中的BOD5濃度易隨時(shí)間的變化而變化，濃度易隨時(shí)間的變化而變化，樣品儲存時(shí)間、測定過程時(shí)間和培養(yǎng)時(shí)間均樣品儲存時(shí)間、測定過程時(shí)間和培養(yǎng)時(shí)間均會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。這就要求我們在進(jìn)會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。這就要求我們在進(jìn)行行BOD5的測定時(shí)需要嚴(yán)格控制培養(yǎng)時(shí)間和的測定時(shí)需要嚴(yán)格控制培養(yǎng)時(shí)間和樣品儲存時(shí)間。樣品儲存時(shí)間。 2.3. 溫度的影響溫度的影響 溫度與微生物的增長速率相關(guān)，直接影響溫度與微生物的增長速率相關(guān)，直接影響 微生物的生長繁殖，進(jìn)而影響微生物的生長繁殖，進(jìn)而影響B(tài)OD5的測定的測定結(jié)果。另外，溫度的變化還會引起溶解氧的結(jié)果。

4、另外，溫度的變化還會引起溶解氧的變化。因此，應(yīng)嚴(yán)格控制采樣溫度、樣品儲變化。因此，應(yīng)嚴(yán)格控制采樣溫度、樣品儲存溫度、實(shí)驗(yàn)室溫度及培養(yǎng)箱溫度。存溫度、實(shí)驗(yàn)室溫度及培養(yǎng)箱溫度。2.4 pH值的影響值的影響 水樣的水樣的pH若超出若超出6.5-7.5范圍時(shí)，應(yīng)加酸或范圍時(shí)，應(yīng)加酸或堿調(diào)節(jié)至此范圍；稀釋水和接種稀釋水的堿調(diào)節(jié)至此范圍；稀釋水和接種稀釋水的pH值應(yīng)為值應(yīng)為7.2。2.5. 生物因素的影響生物因素的影響2.5.1 接種液的質(zhì)量接種液的質(zhì)量 對于一般的地表水、生活污水或者不含對于一般的地表水、生活污水或者不含或少含微生物的工業(yè)廢水的測定，在測定時(shí)或少含微生物的工業(yè)廢水的測定，在測定時(shí)應(yīng)進(jìn)行接

5、種，以引入能分解廢水中有機(jī)物的應(yīng)進(jìn)行接種，以引入能分解廢水中有機(jī)物的微生物。接種液一般采用城市污水或表層土微生物。接種液一般采用城市污水或表層土壤浸出液。壤浸出液。 城市污水，一般采用生活污水，在室溫城市污水，一般采用生活污水，在室溫下放置一晝夜，取上清液供用。下放置一晝夜，取上清液供用。 表層土壤浸出液，取表層土壤浸出液，取100g花園土壤，加花園土壤，加入入1L水，混合并靜置水，混合并靜置10min，取上清液供用。，取上清液供用。 上清液的接種量，按水樣的性質(zhì)確定。上清液的接種量，按水樣的性質(zhì)確定。 啤酒廠：啤酒廠： 接種量一般以接種量一般以7-8ml/L水為宜。水為宜。 印染廢水：上清液

6、印染廢水：上清液2ml/L,再加入再加入7ml/L馴化接種液。馴化接種液。 葡萄糖谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：接種量一般以葡萄糖谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：接種量一般以2-3ml/L水水 為宜。為宜。 當(dāng)廢水中存在著難于被一般生活污水中當(dāng)廢水中存在著難于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有機(jī)物或含有劇的微生物以正常速度降解的有機(jī)物或含有劇毒物質(zhì)時(shí)，在其排污口的下游毒物質(zhì)時(shí)，在其排污口的下游3-8km處取水處取水樣做為廢水的馴化接種液，同時(shí)加入適量表樣做為廢水的馴化接種液，同時(shí)加入適量表層土壤或生活污水，使能適應(yīng)該種廢水的微層土壤或生活污水，使能適應(yīng)該種廢水的微生物大量繁殖。生物大量繁殖。 當(dāng)水樣中含有銅、鉛、鋅

7、、鎘、鉻、砷、當(dāng)水樣中含有銅、鉛、鋅、鎘、鉻、砷、氰等有毒物質(zhì)時(shí)，可使用經(jīng)馴化的微生物接氰等有毒物質(zhì)時(shí)，可使用經(jīng)馴化的微生物接種液的稀釋水進(jìn)行稀釋，或提高稀釋倍數(shù)以種液的稀釋水進(jìn)行稀釋，或提高稀釋倍數(shù)以減少毒物的濃度。減少毒物的濃度。 2.5.2 抑制硝化作用抑制硝化作用 水中有機(jī)物的生物氧化過程可分為兩水中有機(jī)物的生物氧化過程可分為兩個(gè)階段，第一階段主要是碳?xì)浠衔锉谎趸?，個(gè)階段，第一階段主要是碳?xì)浠衔锉谎趸?，稱為碳化階段，在稱為碳化階段，在20下約需下約需20d才能完成，才能完成，BOD測定的一般是該階段的耗氧量。第二測定的一般是該階段的耗氧量。第二階段是含氮化合物及部分氨氧化為亞硝酸鹽

8、階段是含氮化合物及部分氨氧化為亞硝酸鹽及硝酸鹽，稱為硝化階段，在及硝酸鹽，稱為硝化階段，在20約需約需100d 。對一般水樣，測定。對一般水樣，測定BOD5時(shí)的硝化作時(shí)的硝化作用并不顯著。但對于生化處理的出水，因其用并不顯著。但對于生化處理的出水，因其含有大量的硝化細(xì)菌，在測定含有大量的硝化細(xì)菌，在測定BOD5時(shí)也包時(shí)也包括了部分含氮化合物的需氧量，因此需要加括了部分含氮化合物的需氧量，因此需要加入硝化抑制劑，抑制硝化作用對入硝化抑制劑，抑制硝化作用對BOD5測定測定的影響?？稍诿可♂屗畼又屑尤氲挠绊?。可在每升稀釋水樣中加入2ml濃度濃度為為500mg /L的丙烯基硫脲。的丙烯基硫脲。 2.

9、6 稀釋倍數(shù)的確定稀釋倍數(shù)的確定 確定合理的稀釋倍數(shù)是成功測定確定合理的稀釋倍數(shù)是成功測定BOD5的關(guān)鍵之一，稀釋的倍數(shù)一般以五日培養(yǎng)后的關(guān)鍵之一，稀釋的倍數(shù)一般以五日培養(yǎng)后消耗的溶解氧占原有溶解氧的消耗的溶解氧占原有溶解氧的40%-70%為為宜，也就是恰當(dāng)?shù)南♂尡葢?yīng)使培養(yǎng)后的剩余宜，也就是恰當(dāng)?shù)南♂尡葢?yīng)使培養(yǎng)后的剩余溶解氧溶解氧1mg/L，消耗的溶解氧大于，消耗的溶解氧大于2mg/L。先測定水樣的先測定水樣的CODcr值，然后根據(jù)水樣的值，然后根據(jù)水樣的CODcr濃度選用合適的稀釋倍數(shù)，一般一個(gè)濃度選用合適的稀釋倍數(shù)，一般一個(gè)樣品應(yīng)做樣品應(yīng)做3-4個(gè)不同的稀釋比，如果經(jīng)個(gè)不同的稀釋比，如果經(jīng)

10、5d培培養(yǎng) 后 ， 測 其 溶 解 氧 時(shí) ， 當(dāng) 向 水 樣 中 加養(yǎng) 后 ， 測 其 溶 解 氧 時(shí) ， 當(dāng) 向 水 樣 中 加1mlMnSO4及及2ml堿性碘化鉀溶液后，瓶內(nèi)堿性碘化鉀溶液后，瓶內(nèi)出現(xiàn)白色絮狀沉淀，說明此培養(yǎng)液剩余溶解出現(xiàn)白色絮狀沉淀，說明此培養(yǎng)液剩余溶解氧為零，應(yīng)加大稀釋比。氧為零，應(yīng)加大稀釋比。 溶解氧消耗量小于溶解氧消耗量小于2mg/L，有兩種可能，有兩種可能，一是稀釋倍數(shù)過大；另一種可能是微生物菌一是稀釋倍數(shù)過大；另一種可能是微生物菌種不適應(yīng)，活性差，或含毒物質(zhì)濃度過大。種不適應(yīng)，活性差，或含毒物質(zhì)濃度過大。 對工業(yè)廢水稀釋倍數(shù)的確定，書上列出對工業(yè)廢水稀釋倍數(shù)的

11、確定，書上列出了三個(gè)系數(shù)：了三個(gè)系數(shù)：0.075，0.15，0.225。根據(jù)本。根據(jù)本站以往的經(jīng)驗(yàn)，在選擇系數(shù)的時(shí)候，可以在站以往的經(jīng)驗(yàn)，在選擇系數(shù)的時(shí)候，可以在0.075-0.15之間，之間，0.15-0.225之間多選擇幾之間多選擇幾個(gè)系數(shù)。比如某水樣個(gè)系數(shù)。比如某水樣CODcr濃度為濃度為100mg/L,我們可以選擇系數(shù)為我們可以選擇系數(shù)為0.11，0.13，0.14，0.15。 由高錳酸鹽指數(shù)與一定的系數(shù)的乘積由高錳酸鹽指數(shù)與一定的系數(shù)的乘積 求得的稀釋倍數(shù)求得的稀釋倍數(shù) 對地表水稀釋倍數(shù)的確定，也同樣如此。比如，對地表水稀釋倍數(shù)的確定，也同樣如此。比如，高錳酸鹽指數(shù)的濃度為高錳酸鹽指

12、數(shù)的濃度為5-10mg/L之間時(shí)，我們可之間時(shí)，我們可以在系數(shù)以在系數(shù)0.2-0.3之間，再增加之間，再增加0.22，0.25，0.28等等幾個(gè)系數(shù)。幾個(gè)系數(shù)。 高錳酸鹽指數(shù)（高錳酸鹽指數(shù)（mg/L） 系數(shù)系數(shù)高錳酸鹽指數(shù)（高錳酸鹽指數(shù)（mg/L） 系數(shù)系數(shù)5 -5-10 0.2 0.310-20 0.4、0.620 0.5、0.7、1.03 樣品分析過程中應(yīng)注意的細(xì)節(jié)：樣品分析過程中應(yīng)注意的細(xì)節(jié)：3.1 固定溶解氧的時(shí)候，應(yīng)將吸管插入溶解氧瓶的固定溶解氧的時(shí)候，應(yīng)將吸管插入溶解氧瓶的液面下。液面下。3.2 加入硫酸后混合搖勻，一定要確保沉淀物全部加入硫酸后混合搖勻，一定要確保沉淀物全部溶解。

13、溶解。3.3 在稀釋水樣時(shí)，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀在稀釋水樣時(shí)，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀釋水（或接種稀釋水）于釋水（或接種稀釋水）于1000ml量筒中，加入需量筒中，加入需要量的均勻水樣，再加入稀釋水（或接種稀釋水）要量的均勻水樣，再加入稀釋水（或接種稀釋水）至定量至定量,用帶膠板的玻棒小心上下混勻，混勻時(shí)勿用帶膠板的玻棒小心上下混勻，混勻時(shí)勿使攪拌棒的膠板露出水面，防止產(chǎn)生氣泡。使攪拌棒的膠板露出水面，防止產(chǎn)生氣泡。 4. 驗(yàn)證試驗(yàn)驗(yàn)證試驗(yàn) 為了檢查接種稀釋水，接種水和分析人為了檢查接種稀釋水，接種水和分析人員的技術(shù)，需進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。將每升含葡萄員的技術(shù)，需進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。將每升含葡萄糖和谷氨酸各糖和谷氨酸各150mg的標(biāo)準(zhǔn)溶液以的標(biāo)準(zhǔn)溶液以1：50稀稀釋比稀釋后（用接種稀釋水），與水樣同步釋比稀釋后（用接種稀釋水），與水樣同步測定測定BOD5，測得值應(yīng)在，測得值應(yīng)在