室作業(yè)指導(dǎo)書檢驗

1、PCR室作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號：ABCD-3-PR-0131第A版編制： 審核： 批準(zhǔn)： 生效日期：2006年8月8日ABCD人民醫(yī)院檢驗科編 制 說 明本分冊文件可以作為單獨(dú)申請衛(wèi)生部PCR實驗室認(rèn)可的全套作業(yè)文件，因此作為ISO15189質(zhì)量管理體系的PCR室作業(yè)文件，要對其重復(fù)部分進(jìn)行刪減，各檢驗科根據(jù)各自用途要求與特點進(jìn)行選用，特此說明。 2006年8月8日 目 錄序號主 題 內(nèi) 容 代 號頁 號1PCR實驗室的設(shè)置及管理ABCD-3-PR-0172PCR實驗室工作制度ABCD-3-PR-0283PCR實驗室內(nèi)務(wù)管理制度ABCD-3-PR-0394ABCD-3-PR-04105PCR實驗

2、室清潔程序ABCD-3-PR-05126PCR標(biāo)本唯一標(biāo)識編號規(guī)則ABCD-3-PR-06137PCR基因擴(kuò)增實驗室的要求ABCD-3-PR-07148PCR廢棄物的處理程序ABCD-3-PR-08179基因擴(kuò)增檢測及結(jié)果分析ABCD-3-PR-091810臨床標(biāo)本的保存操作程序ABCD-3-PR-1021標(biāo)本的采集運(yùn)送接收程序ABCD-3-PR-112212PCR生物防護(hù)措施ABCD-3-PR-122413PCR實驗室化學(xué)試劑配ABCD-3-PR-132514PCR實驗室記錄管理制度ABCD-3-PR-142615PCR應(yīng)急處理程序ABCD-3-PR-152816PCR試劑的質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序

3、ABCD-3-PR-163017PCR消耗品進(jìn)購質(zhì)檢貯存程序ABCD-3-PR-173118PCR室內(nèi)質(zhì)量控制操作程序ABCD-3-PR-183319PCR室間質(zhì)量控制操作程序ABCD-3-PR-193520PCR溫度校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序ABCD-3-PR-203621核酸擴(kuò)增熒光儀操作維護(hù)規(guī)程ABCD-3-PR-213722干式恒溫器操作維護(hù)規(guī)程ABCD-3-PR-224323離心機(jī)操作維護(hù)規(guī)程ABCD-3-PR-234524冰箱操作維護(hù)規(guī)程ABCD-3-PR-244725生物安全柜操作維護(hù)規(guī)程ABCD-3-PR-254926移液器操作維護(hù)規(guī)程ABCD-3-PR-265127沙眼衣原體核酸擴(kuò)增熒

4、光檢測ABCD-3-PR-275428乙肝病毒核酸擴(kuò)增熒光檢測ABCD-3-PR-285629丙肝病毒核酸擴(kuò)增熒光檢測ABCD-3-PR-295830結(jié)核桿菌核酸擴(kuò)增熒光檢測ABCD-3-PR-306031高速冷凍離心機(jī)操作維護(hù)規(guī)程ABCD-3-PR-3162附錄表格檢驗科基因檢測實驗室平面圖ABCD/001實驗室主要負(fù)責(zé)人簡歷表ABCD/002PCR實驗室工作人員一覽表ABCD/003PCR擴(kuò)增接收標(biāo)本記錄表ABCD/004拒收標(biāo)本記錄本ABCD/005標(biāo)本超低溫保存記錄表ABCD/006PCR試劑購買記錄表ABCD/007試劑驗收記錄表ABCD/008PCR室特殊耗材驗收記錄表ABCD/0

5、09普通耗材驗收記錄表ABCD/010室間質(zhì)評記錄表ABCD/011PCR室內(nèi)質(zhì)控記錄表ABCD/012室內(nèi)質(zhì)控圖ABCD/013PCR實驗室環(huán)境溫濕度記錄表ABCD/014冰箱溫度質(zhì)控圖ABCD/015儀器使用記錄表ABCD/016儀器設(shè)備維護(hù)和校準(zhǔn)記錄表ABCD/017紫外消毒車消毒記錄表ABCD/018應(yīng)急處理登記表ABCD/019PCR廢血標(biāo)本處理交接表ABCD/020垃圾處理記錄表ABCD/021實驗室清潔消毒記錄表ABCD/022PCR檢驗報告單ABCD/023耗材進(jìn)購記錄表ABCD/024試劑耗材供應(yīng)商一覽表ABCD/025 修 訂 頁序號文件編號頁碼需更改的內(nèi)容更改內(nèi)容批準(zhǔn)人批

6、準(zhǔn)日期1234567891011121314151617181920PCR實驗室的設(shè)置及管理1目的：建立實驗室的合理設(shè)置和科學(xué)管理，防止實驗污染，保證檢測結(jié)果的可靠性。2適用范圍：本程序適用于分子診斷室的設(shè)置、工作流程和日常管理等。3負(fù)責(zé)人： 4細(xì)則：41 分子診斷室為檢驗科下設(shè)的專業(yè)實驗室，從事臨床標(biāo)本的基因擴(kuò)增檢測及相關(guān)科研工作。42 本實驗室采用實時熒光定量PCR技術(shù)作為臨床基因診斷的主要手段，實驗室分為三個區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū)（第一區(qū)）、標(biāo)本處理區(qū)（第二區(qū)）、擴(kuò)增分析區(qū)（第三區(qū)）。每一工作區(qū)配備專用的設(shè)備、儀器、輔助設(shè)施、耗材、清潔用品、辦公用品、專用工作服，并有明顯的區(qū)分標(biāo)識。各區(qū)標(biāo)簽顏色

7、：紅色（第一區(qū)）、白色或綠色（第二區(qū)）、藍(lán)色（第三區(qū)）；專用工作服：粉紅色（第一區(qū)）、白色（第二區(qū)）、藍(lán)色（第三區(qū)）。標(biāo)本的接收則在檢驗科標(biāo)本接收處進(jìn)行。43 各工作區(qū)專用的儀器設(shè)備、辦公用品、工作服、實驗耗材和清潔用具等，不可混用。44 各工作區(qū)配置、功能和內(nèi)務(wù)管理見各相關(guān)SOP文件。45 嚴(yán)格遵守從“試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本處理區(qū)擴(kuò)增分析區(qū)”的單一流向制度，不得逆向進(jìn)入前一工作區(qū)。46 非本實驗室工作人員，未經(jīng)許可不得入內(nèi)；進(jìn)修、實習(xí)或其他科室人員因科研活動需要，進(jìn)入實驗區(qū)域（試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本處理區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)） 需首先熟悉本程序的各項規(guī)定并嚴(yán)格遵守執(zhí)行，在本實驗室人員監(jiān)督指導(dǎo)下進(jìn)行。47 實驗完畢

8、后做好清潔消毒工作。5. 本文涉及以下圖表：1.實驗室設(shè)計平面圖PCR實驗室工作制度1目的 ：保持良好的工作環(huán)境，以確保檢測結(jié)果的可靠性，防止交叉污染，防止差錯、事故及糾紛的發(fā)生。2適用范圍：所有本實驗室人員。3負(fù)責(zé)人： 4細(xì)則：41 本實驗室進(jìn)行臨床基因擴(kuò)增檢測及相關(guān)實驗工作，不得進(jìn)行其它實驗操作。4243在各區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程。44試劑準(zhǔn)備區(qū)只能進(jìn)行試劑的貯存及配制等相關(guān)操作（見相關(guān)SOP文件）。45標(biāo)本處理區(qū)只能進(jìn)行臨床標(biāo)本的保存，核酸提取、保存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時cDNA的合成（見相關(guān)SOP文件）。46擴(kuò)增分析區(qū)只能進(jìn)行DNA或c

9、DNA的擴(kuò)增、實時熒光PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析（見相關(guān)SOP文件）。47進(jìn)行實驗時嚴(yán)格執(zhí)行本實驗室的各項操作規(guī)程，及時做好各種操作記錄，力求準(zhǔn)確、可靠。實驗完畢，做好清潔、整理及分析統(tǒng)計等工作。48室內(nèi)儀器由專人負(fù)責(zé)，未經(jīng)許可，不得隨意使用或挪用；愛護(hù)使用儀器，定期進(jìn)行保養(yǎng)與維修。49 愛護(hù)醫(yī)院財產(chǎn)，注意安全；離開實驗室前應(yīng)關(guān)好門窗，檢查水、電等。PCR實驗室內(nèi)務(wù)管理制度1目的：保證實驗室日常內(nèi)務(wù)管理及清潔工作順利進(jìn)行。2適用范圍：實驗室相關(guān)人員及醫(yī)院相關(guān)清潔工人。3負(fù)責(zé)人： 4細(xì)則：41非本室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入實驗室。42各區(qū)的用品不得混用。43實驗人員要有強(qiáng)烈的時間觀念，按時上下班，不遲

10、到、早退。44進(jìn)入實驗室的工作人員必須遵守實驗室的單一流向的規(guī)定，禁止逆向走動。45所有儀器（如PCR擴(kuò)增儀）須有專人負(fù)責(zé)，并有使用；實驗人員必須熟悉儀器性能后方允許操作，并嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。46。47每天了解儀器運(yùn)轉(zhuǎn)情況及試劑使用情況，確保儀器整潔安全，試劑合格使用。48。49注意保持實驗室衛(wèi)生整潔，嚴(yán)禁在室內(nèi)抽煙、吃零食，非實驗操作人員應(yīng)盡量少入。4. 10下班前檢查門、窗、水、電，節(jié)假日應(yīng)指定人員負(fù)責(zé)檢查實驗室的儀器、設(shè)備。PCR實驗室清潔程序1目的：保證實驗室環(huán)境的整潔，防止污染。2適用范圍：適于實驗室工作環(huán)境、實驗臺面、工作服、移液器等的清潔消毒工作。3負(fù)責(zé)人： 操作人： 4細(xì)則：4

11、1 實驗室地面必須平整、干凈，通道要利于通行，沒有無用的物品阻礙。42 合理規(guī)劃實驗室內(nèi)物品，做到擺放整齊、有序，無用的或使用效率低的物品放置到儲存處，常用的物品要容易尋找到。43抽屜、柜子、文件類物品要作好標(biāo)記，以方便識別。44 實驗結(jié)束后用2%戊二醛對臺面進(jìn)行清潔，并用移動紫外燈進(jìn)行消毒。45每天對使用過的移液器用75%酒精進(jìn)行擦拭。每周1次對移液器咀進(jìn)行75%酒精浸泡15分鐘左右，若使用過程中發(fā)生污染應(yīng)隨時浸泡處理。46實驗過程中如發(fā)生標(biāo)本或試劑外濺，應(yīng)立即用2%戊二醛滴上，濾紙蓋上半小時，然后用酒精擦洗，并用移動紫外燈消毒。47 每天實驗前開啟各區(qū)的通風(fēng)系統(tǒng)，各區(qū)實驗結(jié)束后，分別打開傳

12、遞窗紫外燈、移動紫外燈（對實驗臺面消毒）、天花板紫外燈消毒實驗室，每次開啟 3060分鐘。48 待紫外燈消毒時間足夠后，依次關(guān)閉各區(qū)紫外燈并記錄。49 依次清潔三個區(qū)的實驗臺面和地面，各區(qū)清潔消毒工具均專用，不可混用，注意按照單一方向流程的原則來進(jìn)行清潔。410 處理好各區(qū)廢棄物，交醫(yī)院集中處理。411 每周將工作服交院洗衣房洗滌消毒，不同實驗區(qū)的工作服隔開洗滌。5. 本文涉及以下表格實驗室清潔消毒記錄表 垃 圾 處 理 記 錄 表 PCR標(biāo)本唯一標(biāo)識編號規(guī)則1目的：保證標(biāo)本編號的唯一性，也是準(zhǔn)確發(fā)放報告的基礎(chǔ)。2適用范圍：使用核酸擴(kuò)增熒光檢測實驗室所開展的四種檢測項目：乙型肝炎病毒、丙型肝炎

13、病毒、結(jié)核桿菌、沙眼衣原體。3負(fù)責(zé)人： 操作人： 4程序：41 按檢測日期分類標(biāo)記根據(jù)標(biāo)本送檢的日期，每天的標(biāo)本對應(yīng)標(biāo)記一種唯一的代號。如當(dāng)天為2005年3月1日，則編為050301。42 按檢測類型分類標(biāo)記根據(jù)檢測項目的不同，每種檢測項目對應(yīng)標(biāo)記一種唯一的代號。如乙型肝炎病毒標(biāo)記為B，丙型肝炎病毒標(biāo)記為HC，結(jié)核桿菌標(biāo)記為T，沙眼衣原體為C。43 按驗單接收順序編號在同種檢測類型的驗單中，按驗單順序編號。如第一個檢測乙型肝炎病毒的驗單編為B01，第二個檢測乙型肝炎病毒的驗單編為B02，第三個檢測結(jié)核的驗單編為B03等。44 特殊標(biāo)本的編號如有特殊情況，應(yīng)在標(biāo)記前面增加特異字母區(qū)別開，如住院的

14、單和門診的單、其它醫(yī)院送來的單和本醫(yī)院的單要區(qū)分開等。45 編號步驟a）對當(dāng)天送來的標(biāo)本，根據(jù)編號的基本原則編號，每個樣本的每個檢測項目對應(yīng)一個唯一的編號（如050301T04）。b） 用筆在每張檢驗申請單和對應(yīng)的樣品管上作好相同的標(biāo)記。c） 做好標(biāo)本的接收記錄，每個樣本的記錄都應(yīng)包括以下信息：接收時間、醫(yī)院、科室、送檢醫(yī)生、患者姓名、性別、年齡、標(biāo)本類別、標(biāo)本狀態(tài)、送標(biāo)本者、接收人、檢驗單號、標(biāo)本唯一統(tǒng)編號等。d）處理好樣品、點樣后，將反應(yīng)管放入擴(kuò)增儀上開始擴(kuò)增。f）擴(kuò)增得到結(jié)果后，先在統(tǒng)計簿上填入結(jié)果，作好記錄，再一一把實驗結(jié)果填入相應(yīng)申請單。g）發(fā)放檢驗報告單。5. 本文涉及以下圖表：P

15、CR擴(kuò)增接收標(biāo)本記錄表 PCR基因擴(kuò)增實驗室的要求1目的：規(guī)定在各區(qū)內(nèi)所進(jìn)行的工作及其操作。2適用范圍：所有在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行的工作。3負(fù)責(zé)人： 操作人： 4程序：試劑貯存、準(zhǔn)備區(qū)試劑貯存、準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)入PCR實驗室的工作人員（含衛(wèi)生員），都必須遵守實驗室的規(guī)則，尤其嚴(yán)格遵守進(jìn)入PCR實驗室的唯一流向。不可進(jìn)入PCR擴(kuò)增后區(qū)打掃衛(wèi)生，再返回擴(kuò)增前區(qū)工作。防止非本室工作人員串崗，進(jìn)入本室。尤其不得為找人，而逆向誤入PCR實驗室。總則（1） PCR實驗室工作人員應(yīng)具備醫(yī)學(xué)檢驗、微生物檢驗基本知識，大專以上學(xué)歷，并受過PCR實驗的基礎(chǔ)知識和技能培訓(xùn)。（2） PCR實驗室分試劑準(zhǔn)備，樣本準(zhǔn)備，PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物檢

16、測四個室，各室的實驗物品（含加樣器，試管架，吸頭，記錄紙，筆等），不得混用，須貼上標(biāo)簽予以區(qū)別。（3） 實驗室技術(shù)人員必須嚴(yán)格按照PCR實驗室操作程序進(jìn)行，包括實驗室擦洗。臺面消毒，離心管，吸頭的無菌滅活準(zhǔn)備，儀器使用和廢棄物處理等。（4） 進(jìn)入實驗室的工作人員必須更換各室不同的工作服（含帽和鞋），勤換洗工作服，以及遵守實驗室的唯一流向的規(guī)定，嚴(yán)禁反向流動。（5） 進(jìn)入PCR實驗室后區(qū)的物品不許帶進(jìn)PCR實驗室前區(qū)。每天實驗開始前，必須清潔地面和消毒實驗室前區(qū)。實驗結(jié)束應(yīng)紫外線消毒實驗臺面，產(chǎn)物分析室紫外燈最好徹夜開啟，排風(fēng)扇應(yīng)晝夜工作。每天下班前處理好廢物，應(yīng)關(guān)好水、電、煤氣和門窗。（6）

17、定期校準(zhǔn)和維修PCR儀、酶標(biāo)儀及離心機(jī)、水浴箱等儀器設(shè)備。（7） 實驗室內(nèi)不得飲食、吸煙。4.1.1實驗人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)白色工作服，接收標(biāo)本須戴一次性手套。4.1.2記錄實驗室干、濕度，繪制冰箱溫度圖。使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項記錄，書寫工整詳細(xì)。4.1.3對送檢的標(biāo)本實行雙簽制度，并仔細(xì)檢查是否符合檢測要求，對有不符合要求的標(biāo)本及時通知相關(guān)科室重新采樣，并作記錄，每份標(biāo)本需給出唯一性編號。4.1.44.1.5每次實驗結(jié)束后，清潔實驗臺及地面打開紫外燈消毒30分鐘。4.2.5使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項記錄，書寫工整詳細(xì)。4.2.6準(zhǔn)備好的試劑送入下一區(qū) ，還原實驗臺

18、面，將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，將本區(qū)垃圾帶出實驗室。4.2.7白色工作服留在本區(qū)。4.2.8本區(qū)維持相對正壓狀態(tài)（開啟緩沖區(qū)的排氣扇）。實驗結(jié)束后，清潔實驗臺及地面打開紫外燈消毒30分鐘。4.3.1實驗人員進(jìn)入該區(qū)須在緩沖區(qū)更換專用藍(lán)色工作服及拖鞋。實驗中須使用一次性帽子，戴手套，手套在實驗過程中疑有污染應(yīng)立即更換。將傳入本區(qū)的試劑放入冰箱冷凍室試劑存放專區(qū)暫存。記錄實驗室干、濕度，繪制冰箱溫度圖。4.3.4使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項記錄，書寫工整詳細(xì)。按試劑盒說明書對標(biāo)本進(jìn)行處理，4.3.6將樣后的試劑傳送下一區(qū)，還原實驗臺面，4.3.7使用

19、過的離心管、吸頭須置于盛有1084液的廢液缸中，4.3.8將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，將垃圾帶出本區(qū)。將藍(lán)色工作服留在本區(qū)。本區(qū)應(yīng)避免不必要的走動，同時維持相對正壓狀態(tài)，實驗結(jié)束后，清潔實驗臺及地面打開紫外燈消毒30分鐘。實驗人員進(jìn)入該區(qū)須在緩沖區(qū)更換專用粉色工作服及拖鞋。4.4.2記錄實驗室干、濕度，繪制冰箱溫度圖。使用帶有本區(qū)標(biāo)識的記錄本、紙和筆，每項記錄，書寫工整詳細(xì)。將傳入本區(qū)加樣后的試劑上機(jī)擴(kuò)增4.4.4.6將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，然后將垃圾帶出實驗室。將粉色工作服留在本室再離開實驗室4.4.8嚴(yán)禁本區(qū)物品帶

20、至其他區(qū)，該區(qū)需維持負(fù)壓狀態(tài)，排氣扇24小時排氣，實驗結(jié)束后清潔該區(qū)打開紫外燈照射，最好整夜消毒，記錄紫外燈使用情況。5. 本文涉及以下表格PCR實驗室環(huán)境溫濕度記錄表 冰箱溫度質(zhì)控圖 實驗室清潔消毒記錄表 垃 圾 處 理 記 錄 表 紫外消毒車消毒記錄表 PCR廢棄物的處理程序1目的：保證實驗室、實驗人員和外部環(huán)境的安全。2適用范圍：核酸擴(kuò)增熒光檢測實驗室常用化學(xué)試劑（NaOH、EDTA、乙醇、生理鹽水等）、實驗室廢棄物的處理；3負(fù)責(zé)人： 操作人： 4細(xì)則：4.1科室職責(zé)應(yīng)對本室工作人員講明本程序在預(yù)防交叉、實驗室污染及切斷傳播途徑中的重要性，并要求嚴(yán)格執(zhí)行。4.2實驗室所有垃圾，裝入專用污

21、物袋內(nèi)，各區(qū)備有：生活垃圾袋（黑色）及生物污染垃圾袋（黃色）。使用過的一次性消耗品(如試管、吸頭、離心管、等)，先放入10%次氯酸鈉溶液中浸泡24小時后，再放入黃色垃圾袋內(nèi)，使用過的手套、鞋套等直接放入黃色垃圾袋內(nèi)交醫(yī)院集中處理。4.3 夾取標(biāo)本的工具，如鉗、鑷、接種環(huán)、吸管等，用后均應(yīng)消毒清潔，進(jìn)行微生物檢驗時，應(yīng)重新滅菌，金屬工具可燒灼滅菌或消毒液浸泡；玻璃制品干熱或壓力蒸汽滅菌。4.4 一次性塑料痰盂，用2%戊二醛液浸泡24小時后，放入黃色垃圾袋內(nèi)交醫(yī)院集中處理。4.5 廢棄標(biāo)本如血、尿、胸水、腹水、腦脊液、唾液、胃液、腸液、關(guān)節(jié)腔液等用10%的84液浸泡24小時后，交醫(yī)院集中處理。4.

22、6 盛標(biāo)本的容器，若為一次性使用的紙質(zhì)容器及其外面包被的廢紙，放入污物袋里交醫(yī)院處理；對可再次使用的玻璃、塑料或搪瓷容器，煮沸15分鐘或加入10%次氯酸鈉溶液浸泡24小時，消毒液每日更換，消毒后用洗滌劑及流水刷洗，瀝干，用于微生物培養(yǎng)采樣者，用壓力蒸汽滅菌后備用。4.7 廢棄標(biāo)本及其容器裝入黃色垃圾袋內(nèi)、封閉，交醫(yī)院污物處理中心處理。4.8日常生活垃圾如紙屑等按一般垃圾交醫(yī)院處理。5. 本文涉及以下表格PCR廢血標(biāo)本處理交接表 基因擴(kuò)增檢測實驗及結(jié)果分析1、目的：保證擴(kuò)增及結(jié)果分析的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化。2適用范圍：適用于本室使用的普通離心機(jī)。3負(fù)責(zé)人：肖靜 操作人：胡可存 蔣藝勤4、標(biāo)準(zhǔn)程序：4.

23、1 基因擴(kuò)增檢測標(biāo)準(zhǔn)程序：擴(kuò)增反應(yīng)前須先在樣本輸入模板上按照事先排好的標(biāo)本位置進(jìn)行設(shè)置。每次實驗除待檢標(biāo)本，還需包括：陰性對照、陽性對照、室內(nèi)質(zhì)控品各一份，一組陽性標(biāo)準(zhǔn)品（4個梯度108、106、105、104）。4.1.1打開電腦電源開關(guān)，進(jìn)入Windows NT界面。4.1.2 接著打開PCR儀電源開關(guān)，預(yù)熱5分鐘。 雙擊電腦桌面的ABI Prism 5700 SDS Software圖標(biāo)進(jìn)入程序設(shè)置界面。4.1.4單擊 “文件”菜單中的 “新建”命令，（或單擊工具欄中的“新建”按扭）。在測定、容器和模板中做相應(yīng)的選擇，點擊OK。 4.1.5應(yīng)用檢測管理程序，并將其添加到樣品板文檔中。 4

24、.1.6檢測反應(yīng)管，4.1.7 根據(jù)當(dāng)次實驗所需條件編輯時間和溫度。運(yùn)行樣品板文檔。4.2 結(jié)果分析標(biāo)準(zhǔn)程序 ：應(yīng)按以下步驟進(jìn)行：全部曲線陰性對照陽性對照陽性室內(nèi)質(zhì)控品陽性標(biāo)準(zhǔn)品逐個分析（標(biāo)出陽性標(biāo)本和可疑標(biāo)本）調(diào)整參數(shù)，獲得較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，顯示定量結(jié)果登記，發(fā)報告。4.2.1 整體曲線的觀察：將所有曲線選中進(jìn)行整體觀察1）觀察是否存在污染情況（包括標(biāo)本污染和試劑污染），特別應(yīng)注意大量曲線在同一Ct值出現(xiàn)上漲的情況。2）觀察是否有光路傳導(dǎo)阻滯或電壓波動等機(jī)器原因形成的異常曲線。4.2.2 陰性對照的分析陰性對照：試劑中加入與待檢標(biāo)本進(jìn)行同樣處理的已知陰性標(biāo)本。作用：用以監(jiān)測實驗室和前處理過程中

25、是否存在污染。4.2.3 陽性對照的分析陽性對照：試劑中加入與待檢標(biāo)本進(jìn)行同樣處理的已知陽性標(biāo)本。作用：用以監(jiān)測實驗?zāi)芊裾z出陽性標(biāo)本，避免假陰性的出現(xiàn)。4.2.4 室內(nèi)質(zhì)控品的分析室內(nèi)質(zhì)控品：試劑中加入與待檢標(biāo)本進(jìn)行同樣處理的已知濃度室內(nèi)質(zhì)控品。作用：用以監(jiān)控日常實驗的精密度。4.2.5 陽性標(biāo)準(zhǔn)品的分析1）各梯度曲線的分布是否均勻，若各梯度曲線均未分開，則表明陽模稀釋可能存在問題，提示實驗中存在較大人為誤差。2）觀察各曲線的Ct值是否在平日的正常位置。情況1：若出現(xiàn)低拷貝標(biāo)準(zhǔn)品做不出，而各曲線Ct 值均后移，則判斷是否為試劑擴(kuò)增效率下降（如試劑過期或保存條件不合格）。情況2：出現(xiàn)低拷貝標(biāo)

26、準(zhǔn)品做不出，而高拷貝曲線Ct值均正常，則提示可能存在低拷貝陽性標(biāo)準(zhǔn)品的降解情況。3）每日必做104標(biāo)準(zhǔn)品，用作以下三方面監(jiān)控：一是否存在操作誤差，如加樣量過少等原因?qū)е?04標(biāo)準(zhǔn)品未能檢出；二是否存在稀釋后的梯度放置過久，低拷貝標(biāo)準(zhǔn)品降解的情況；三是若高拷貝標(biāo)準(zhǔn)品出現(xiàn)Ct值后移，且能排除情況1、2，則判斷是否為試劑靈敏度下降。4.2.6 單個曲線的判斷：逐個分析每條曲線，判斷曲線的陰陽性或?qū)倏梢汕€。（可疑標(biāo)本是指曲線在25個Ct值后出現(xiàn)上漲且平臺趨勢不明顯或上漲幅度比較低的標(biāo)本?？梢蓸?biāo)本要第二天重做，兩次結(jié)果一致則報陽性，否則結(jié)果報陰性。）曲線觀察內(nèi)容：在基線選擇28時觀察熒光強(qiáng)度（是否有三

27、期特征）。并分別在Delta Rn vs.Cycle 、Ct vs.Well Number和 Rn vs.Cycle這三種擴(kuò)增圖形式下分析數(shù)據(jù)。4.2.7 得出定量結(jié)果：調(diào)節(jié)基線和閾值以得到一較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。電腦據(jù)此曲線給出陽性結(jié)果值。此時應(yīng)排除某些陰性標(biāo)本因熒光曲線假性上揚(yáng)而得出的假陽性結(jié)果和某些弱陽性標(biāo)本因終末熒光值過低而顯示的假陰性。4.2.8 發(fā)放報告：及時登記檢測結(jié)果記錄，發(fā)放臨床報告。4.3實驗結(jié)果無效的判斷標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)下述四種情況中的任何一種或多種，當(dāng)次實驗結(jié)果不可發(fā)，查找原因，重做實驗。4.3.1 陰性對照出現(xiàn)擴(kuò)增。4.3.2 陽性對照無擴(kuò)增。 4.3.3大批甚至所有的標(biāo)本都擴(kuò)增

28、了。4.3.4 室內(nèi)質(zhì)控血清檢測結(jié)果出現(xiàn)失控情況，實驗失控的具體標(biāo)準(zhǔn)詳見室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。4.4實驗結(jié)果有效的判斷標(biāo)準(zhǔn)：達(dá)到下列要求后，當(dāng)次實驗有效，可以發(fā)放結(jié)果。4.4.1陰性對照沒有擴(kuò)增，陽性對照擴(kuò)增。4.4.2陽性標(biāo)準(zhǔn)品梯度曲線平滑均勻，斜率、截距和相關(guān)系數(shù)三個參數(shù)的數(shù)值均在范圍內(nèi)。4.4.3室內(nèi)質(zhì)控血清檢測結(jié)果處于在控狀態(tài)，具體標(biāo)準(zhǔn)詳見5. 本文涉及以下表格室間質(zhì)評記錄表 PCR室內(nèi)質(zhì)控記錄表 室內(nèi)質(zhì)控圖 臨床標(biāo)本的保存操作程序1目的：臨床標(biāo)本正確保存，以便必要時復(fù)查。2適用范圍：分子診斷室的所有臨床檢測標(biāo)本。3負(fù)責(zé)人： 操作人： 4程序：41 處理前的標(biāo)本保存a）HBV：全血標(biāo)本

29、可4下短期（24h內(nèi)）保存，長期保存則需分離出血清（血漿），保存于-20下。d）HCV：在1小時內(nèi)分離血清，吸取200µl，加入20u Rnasin，保存于-20。盡可能快的提取RNA。c）TB：痰或胸腹水、腦脊液、膿液標(biāo)本用于TB檢測的短期保存可置于4下，長期保存則于-20下。d）CT：標(biāo)本短期（24h內(nèi)）保存置于4下，長期保存則需在-20下。42 報告發(fā)出后的標(biāo)本保存：a） 提取的核酸標(biāo)本當(dāng)天檢測可置4保存，如當(dāng)天不檢測應(yīng)置-20保存。報告發(fā)出后第二天丟棄。b） 原始血清/血漿樣本在報告發(fā)出后放入低溫冰箱-20保存1個星期，以備復(fù)查。超過1個星期保存期的標(biāo)本由室負(fù)責(zé)人酌情處理，一

30、般按生物傳染性物品交醫(yī)院統(tǒng)一處理。c）血清/血漿標(biāo)本放置低溫冰箱保存時須有記錄，按編號順序存放，并由專人負(fù)責(zé)管理。43 特殊標(biāo)本的處理：對暫不檢測的項目和規(guī)定時間外收到的零散樣本，要隨時登記和交班，以免漏檢，遺失和延誤檢驗。對特殊樣本或特殊病人的樣本，實行“首接”負(fù)責(zé)制，所謂特殊樣本是指難于采集的樣本，以及特殊病人的樣本一律實行“首接”負(fù)責(zé)制，無論那位工作人員，一旦收到樣本后，均須負(fù)其責(zé)任，不得以任何借口推托，及時和正確保管和轉(zhuǎn)送樣本到有關(guān)實驗室或有關(guān)人員，同時作交班記錄和雙簽名。對于做長期病情動態(tài)考察的病人標(biāo)本一律置于-20下長期保存，使用時再按需取出檢測。5. 本文涉及以下圖表：PCR擴(kuò)增

31、接收標(biāo)本記錄表 拒收標(biāo)本記錄本 標(biāo)本超低溫保存記錄表 臨床標(biāo)本的采集、運(yùn)送、接收程序1目的：規(guī)范臨床待檢標(biāo)本的正確采集、送檢和處理。2適用范圍：分子診斷室的所有臨床檢測標(biāo)本。3負(fù)責(zé)人： 操作人： 4程序：41 標(biāo)本的采集411 標(biāo)本由臨床各科室接受過臨床基因擴(kuò)增檢測有關(guān)標(biāo)本采集、保存、運(yùn)輸知識培訓(xùn)的醫(yī)護(hù)人員采集并送至實驗室。412標(biāo)本采集要求a）血液標(biāo)本：用2ml真空采集管或1.5ml高壓滅菌離心管采集血液標(biāo)本，血標(biāo)本采集后在2小時內(nèi)送達(dá)實驗室（HCV采用EDTA抗凝的血漿）。離心（檢驗單與標(biāo)本一道）后用一次性吸管吸取血清或血漿加入經(jīng)消毒的1.5ml的離心管中，編號。b）痰標(biāo)本：用帶蓋的無菌一

32、次性塑料瓶收集清晨第一口痰標(biāo)本送檢。（對于無痰或少痰的患者，可用45加溫的100g/L NaCl水溶液霧化吸入或改變體位以使痰液易于咳出；對于小兒可以輕壓胸骨柄上方以誘導(dǎo)咳痰，用消毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射，用棉拭子采集標(biāo)本。）標(biāo)本在室溫下保存不能超過24小時。c）生殖道拭子：尿道或陰道分泌物由醫(yī)生用專用取樣拭子（滅菌，一次性）采集樣本，及時送檢。采集生殖道拭子標(biāo)本，要求男性病人在采樣前2小時內(nèi)不能排尿，采樣時，將棉拭子伸入男性尿道及女性宮頸口23cm，轉(zhuǎn)動一周以獲得上皮細(xì)胞。d）尿液：由病人自留尿液于無菌封閉的杯中送檢。e）腦脊液和胸腹水：由臨床醫(yī)生采集后放入消毒的試管中及時送檢。注意：所

33、有上述用于臨床標(biāo)本采集的容器如試管或離心管，均應(yīng)使用前高壓滅菌和密封。42 標(biāo)本的運(yùn)送標(biāo)本采集后，密閉、標(biāo)（貼）姓名，應(yīng)盡可能快的送至檢測實驗室，如運(yùn)送時間需2小時以上，必須用冰盒送至實驗室。標(biāo)本中如加入了適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定劑，如用于RNA測定加入4mol/L異硫氰酸胍鹽（GITC）的血清（漿）標(biāo)本和用于DNA測定的EDTA抗凝血等，則可在室溫下運(yùn)送或郵寄。45 接收451嚴(yán)格對各類樣本的查對和雙簽制度，對病房各樣本及時進(jìn)行驗收，查對，不符合要求的樣本一律退回，并有書面記錄。452 分類驗證4521 一般內(nèi)容進(jìn)入實驗室的樣本在進(jìn)行編號、離心前，工作人員應(yīng)再次認(rèn)真查對姓名，聯(lián)號，住院號，病區(qū)床號，項目等

34、。對不符合要求者應(yīng)作記錄，并及時通知采樣科室，正確及時地補(bǔ)采樣，以免延誤病人的檢測結(jié)果報告。對書寫不清楚的申請單，當(dāng)事者要及時與病房聯(lián)系(可電話)，明確受檢者姓名，住院號，性別，年齡，病區(qū)，床號和檢驗項目等；并作相應(yīng)記錄。4522 按檢測項目驗證標(biāo)本a）HBV：所需標(biāo)本類型為未溶血的血清或血漿，注意血漿標(biāo)本所用的抗凝劑，用EDTA-K2，不可使用肝素。標(biāo)本為全血時應(yīng)及時分離出血漿保存。b）HCV：同上，但標(biāo)本為血清時，要在1小時內(nèi)分離出血清用于檢測。c）TB：晨起第一口深部痰(不能為唾液)、胸腹水、腦脊液、膿液或穿刺液。d）CT：尿道或陰道分泌物。4523 實驗室人員對標(biāo)本進(jìn)行查驗，出現(xiàn)下表中

35、不合要求的情況時，應(yīng)拒收標(biāo)本，登記并告知相關(guān)科室。類別拒收原因1未正確使用抗凝劑的標(biāo)本造成凝血的標(biāo)本2嚴(yán)重溶血3嚴(yán)重脂血4采血量不足（血清200uL、全血1mL） 5檢測項目TB的標(biāo)本是唾液而不是晨痰6標(biāo)本容器破裂，標(biāo)本被污染7標(biāo)本的病人姓名、年齡、性別等與檢驗單不相符8RNA檢測，采樣時間超過 2小時9其他可能嚴(yán)重影響檢驗結(jié)果的原因4524 拒收程序a）對拒收的不合格標(biāo)本應(yīng)在拒收標(biāo)本記錄本上登記。b）填寫不合格標(biāo)本處置單，并隨同申請單送返送檢科室。c）必要時電話告之相關(guān)科室醫(yī)生或護(hù)士。5. 本文涉及以下圖表：PCR擴(kuò)增接收標(biāo)本記錄表 PCR擴(kuò)增拒收標(biāo)本記錄表 PCR生物安全防護(hù)措施1目的：預(yù)

36、防工作人員在實驗過程中被感染或污染。2適用范圍：適用于本室所有工作人員。3負(fù)責(zé)人： 操作人： 4細(xì)則：41 實驗人員在實施生物防護(hù)措施時，應(yīng)嚴(yán)格遵守各項相應(yīng)的規(guī)章制度，建立起強(qiáng)烈的生物防護(hù)意識。42 每天更換廢液缸的2%戊二醛溶液，并保證2%戊二醛溶液用量為廢液缸內(nèi)總液量的五分之一左右。配置消毒液時，正確量取足量的消毒劑（用量杯，保證濃度），水的用量也要正確，缸體密封性良好。43 實驗臺面日常清潔時使用75%的酒精擦拭。44 每區(qū)每次實驗后紫外燈照射3060分鐘，如有需要可延長照射時間。45 所有來自病人的血液或體液標(biāo)本均應(yīng)視作傳染源，因此在標(biāo)本的采集、運(yùn)輸過程中，標(biāo)本容器應(yīng)完好無泄漏。46

37、處理標(biāo)本時應(yīng)穿工作服、戴手套，以免沾上皮膚。如手或其它部位的皮膚沾上血液或體液標(biāo)本以及試劑，應(yīng)立即沖洗干凈。有下列情況之一者，需另外消毒：手接觸有傳染性的微生物，水龍頭、水池肥皂可能被污染，工作服可能被大量細(xì)菌污染。消毒劑可用“84”消毒液。47 在實驗過程中，病人標(biāo)本（血液、體液）或試劑不慎濺入眼內(nèi)應(yīng)立即用清水洗。48 實驗過程中在使用針具等銳器時，盡量小心防止受傷。若被銳器刺破時，應(yīng)立即脫下手套，盡量擠壓傷處，使血流出，然后用碘酒、酒精消毒，必要時進(jìn)行預(yù)防補(bǔ)救措施。49 在實驗過程中病人標(biāo)本（血液、體液）外漏時，應(yīng)立即用2%戊二醛滴上，濾紙或紗布蓋上半小時，然后用酒精擦洗，并用紫外燈消毒。

38、410 實驗完畢離開時，應(yīng)脫下所有該實驗區(qū)個人防護(hù)裝備。411 實驗完畢后應(yīng)對實驗室進(jìn)行紫外消毒。412 遇有意外事故應(yīng)立即報告科室負(fù)責(zé)人，當(dāng)事人應(yīng)立即注射相關(guān)疫苗或進(jìn)行預(yù)防性治療，并進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察，嚴(yán)重者應(yīng)報告院技術(shù)負(fù)責(zé)人。5. 本文涉及以下表格紫外消毒車消毒記錄表 實驗室清潔消毒記錄表 PCR實驗室化學(xué)試劑配制程序1目的：保證實驗中用到的各種溶液符合實驗要求。2適用范圍：核酸擴(kuò)增熒光檢測實驗室常用溶液：4%NaOH溶液、75%酒精、消毒劑（三氯異氰尿酸或 二氯異氰尿酸鈉）、2%戊二醛溶液等。3負(fù)責(zé)人： 操作人： 4程序：44 化學(xué)試劑的配制：441 用具：干燥潔凈的250ml量桶一只，100

39、0ml量桶一只，1000ml燒杯一只，三角燒瓶兩只，天平一架，100ml塑料試劑瓶、2000ml廣口瓶各一只。442 配制步驟：4421 配制4%NaOH溶液:a）用天平稱取4克分析純的NaOH固體，置于一只三角燒瓶中。b）用250ml量桶準(zhǔn)確取100ml水，緩緩注入盛放NaOH固體的三角燒瓶中。c）搖蕩三角燒瓶使NaOH固體充分溶解。d）然后緩緩傾倒入100ml塑料試劑瓶中密封保存?zhèn)溆谩?422 配制消毒劑:a）一般桌面、器具和地面的消毒只要使有效氯達(dá)到500mg/L，即可達(dá)到消毒作用。b）消毒劑為粉狀（20克/袋），如配制一升的消毒劑溶液，則取500g，倒入燒杯中，緩緩加入1000ml水充

40、分溶解，備用。c）如需加大消毒力度，則有效氯濃度加大。4423 配制75%酒精溶液:a）一般常規(guī)消毒的75%酒精由醫(yī)院藥劑科提供。b）RNA提取的75%酒精的配制，試劑盒提供DEPC水，酒精用分析純的無水酒精，根據(jù)當(dāng)天的標(biāo)本數(shù)量進(jìn)行配制。4424 配制2%戊二醛溶液:a）準(zhǔn)確量取戊二醛原液20ml倒入1000ml燒杯中。b）量取980ml水，緩緩倒入1000ml燒杯中，混勻，加至2000ml廣口瓶中備用。注意事項：每份配制好的溶液保質(zhì)期為14天PCR實驗室記錄管理制度1、目的：確保檢驗資料的記錄、保存狀態(tài)在控2、適用范圍：實驗過程中產(chǎn)生的數(shù)據(jù)、文本資料的記錄3負(fù)責(zé)人： 操作人： 4、工作程序：

41、4.1 書面記錄文件的管理： 本實驗室的書面記錄包括：001 ABCD人民醫(yī)院檢驗科基因檢測實驗室平面圖-編號ABCD/001002實驗室主要負(fù)責(zé)人簡歷表-編號ABCD/002003PCR實驗室工作人員一覽表-編號ABCD/003004PCR擴(kuò)增接收標(biāo)本記錄表-編號ABCD/004005拒收標(biāo)本記錄本-編號ABCD/005006標(biāo)本超低溫保存記錄表-編號ABCD/006007PCR試劑購買記錄表-編號ABCD/007008試劑驗收記錄表-編號ABCD/008009PCR室特殊耗材驗收記錄表-編號ABCD/009010普通耗材驗收記錄表-編號ABCD/010011室間質(zhì)評記錄表-編號ABCD/0

42、11012PCR室內(nèi)質(zhì)控記錄表-編號ABCD/012013室內(nèi)質(zhì)控圖-編號ABCD/013014 PCR實驗室環(huán)境溫濕度記錄表-編號ABCD/014015冰箱溫度質(zhì)控圖-編號ABCD/015016儀器使用記錄表-編號ABCD/016017儀器設(shè)備維護(hù)和校準(zhǔn)記錄表-編號ABCD/017018紫外消毒車消毒記錄表-編號ABCD/018019應(yīng)急處理登記表-編號ABCD/019020 PCR廢血標(biāo)本處理交接表-編號ABCD/020021垃圾處理記錄表-編號ABCD/021022實驗室清潔消毒記錄表-編號ABCD/022023 PCR檢驗報告單-編號ABCD/023024耗材進(jìn)購記錄表-編號ABCD/

43、024025試劑耗材供應(yīng)商一覽表-編號ABCD/0254.1.2 填寫書面記錄，需使用黑色墨水或圓珠筆，字跡清晰，如有涂改，在涂改處應(yīng)有涂改人簽名，不得在記錄表上進(jìn)行無關(guān)書寫，保持記錄表清潔、完整。實驗記錄表嚴(yán)格專用，不同實驗區(qū)不得混用。4.1.3 每個記錄本要納入檔案管理，寫完后及時放入檔案柜，每月分類裝訂成冊,并依照要求進(jìn)行編號,如2003年5月的實驗結(jié)果記錄本、試劑消耗記錄本、室內(nèi)質(zhì)控圖分別編為200305SYJG、200305SJXH、200305SLZK，分別放于檔案柜的不同位置以便查詢。標(biāo)本原始檢測申請單最后保存于倉庫2年，其它實驗記錄保存于各自實驗操作區(qū)內(nèi)，保存5年。4.1.4

44、定期對保存的記錄進(jìn)行分析總結(jié)，形成總結(jié)報告，以便改進(jìn)工作。4.1.5 在沒有實驗室職責(zé)同意的情況下，不得隨意將記錄借出。在記錄借出時需有實驗室職責(zé)、經(jīng)手人、借閱人的簽名方可。4.2 電腦上記錄文件的管理4.2.1記錄文件必須保存在非系統(tǒng)分區(qū)中，如D盤，保存路徑要清晰、便捷、易查找。4.2.2文件夾目錄結(jié)構(gòu)要求層次分明，一整年的實驗結(jié)果均保存在一個年度文件夾里，如“2003年”文件夾；每個年度文件夾包含12個月文件夾，如“Jan01”、“Feb02”，每天的實驗結(jié)果就保存在當(dāng)月文件夾里。4.2.3 實驗文件保存時以當(dāng)天日期命名，若某天進(jìn)行了多次實驗，命名時在后面以a、b、c等字母標(biāo)識，如2003

45、年5月8日做的兩次實驗，分別保存為20030508a和20030508b。4.2.4為了防止儲存實驗結(jié)果的電腦發(fā)生系統(tǒng)崩潰、硬件故障等問題導(dǎo)致實驗結(jié)果丟失、無法查詢等情況，每個月的實驗結(jié)果記錄文件都要用移動存儲設(shè)備（如軟盤、USB硬盤等）拷貝到另一部PC機(jī)上做備份；一年的數(shù)據(jù)要用刻錄機(jī)刻制一張CD光盤備份儲存，貼上標(biāo)簽，如“2003年實驗結(jié)果備份”,放入檔案柜妥善存放。PCR應(yīng)急處理程序1目的：在實際工作中，儀器設(shè)備發(fā)生故障、試劑盒發(fā)生質(zhì)量問題時，為保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性、及時，應(yīng)正確采取應(yīng)急措施，最大程度上避免或減輕不利影響。2適用范圍：適用于滿足核酸擴(kuò)增熒光檢測實驗室檢測需要并可能對檢驗結(jié)果

46、造成誤差的儀器設(shè)備和試劑盒。3負(fù)責(zé)人： 4細(xì)則：41 核酸擴(kuò)增熒光檢測實驗室工作人員在職責(zé)范圍內(nèi)均有責(zé)任熟悉各種儀器和相關(guān)設(shè)備的性能、要求、維護(hù)和保養(yǎng)、常見故障的排除、尤其要嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作。42 工作人員在職責(zé)范圍內(nèi)均有責(zé)任有意識地注意以求及時發(fā)現(xiàn)并報告儀器設(shè)備和試劑盒的異常情況。43 作為應(yīng)急處理，潛在著一定的可能影響檢測質(zhì)量的不確定因素。室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)在第一時間檢查核實應(yīng)急措施的有效性。44 儀器設(shè)備故障441 室負(fù)責(zé)人接到異常情況報警后，立即現(xiàn)場確認(rèn)異常情況的性質(zhì)：觀察有誤、誤操作、偶發(fā)現(xiàn)象或確屬不能立即排除的故障。442 用紅牌故障標(biāo)志標(biāo)示故障儀器，以防被錯誤使用。443有滿足要求

47、的替用設(shè)備的，啟用替用設(shè)備（準(zhǔn)用儀器）。借用其他部門儀器設(shè)備時，及時聯(lián)系借用并核實該設(shè)備的使用狀態(tài)。替用、借用或備用設(shè)備的使用在滿足質(zhì)量要求的同時，必須同時滿足實驗室管理措施（特別是防污染）的要求。444不能解決的問題，應(yīng)及時與供應(yīng)方會同解決。根據(jù)雙方合同約定，及時通知供應(yīng)方。供應(yīng)方技術(shù)支持人員將在規(guī)定的時間內(nèi)隨身攜帶備用設(shè)備到達(dá)現(xiàn)場。445儀器維修后，調(diào)試實驗通過后才能重新啟用。取下紅色故障標(biāo)示（暫停使用），換上藍(lán)色正常標(biāo)示（正常使用）。446 室主任須檢查并隨時跟蹤所采取措施的有效性。447對未能及時排除故障時，必須及時上報科室，在科主任批準(zhǔn)下，應(yīng)積極聯(lián)系附近的其他已得到衛(wèi)生部臨檢中心認(rèn)證

48、的臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室檢驗，以滿足病人和臨床或科研需求。45 試劑盒質(zhì)量發(fā)生問題，經(jīng)核實后，及時通知供貨商迅速更換另一批次試劑，使用前需先作質(zhì)量檢測，合格后方可使用。46 儀器設(shè)備故障或試劑質(zhì)量問題不能得到解決，預(yù)期將會影響到檢測報告的及時發(fā)出，可將標(biāo)本送至其它已得到衛(wèi)生部臨檢中心認(rèn)證的臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室檢查；如已影響到報告的及時發(fā)出，應(yīng)在門診取報告處向病人公告或向相關(guān)病區(qū)公告，取得病人的諒解。47 影響到檢測報告發(fā)出的情況，應(yīng)在應(yīng)急處理記錄表作記錄。5. 本文涉及以下表格：應(yīng)急處理記錄表 試劑的質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序1目的：保證每批用于臨床實驗的試劑的質(zhì)量良好，符合要求。2適用范圍：各種用于

49、臨床實驗的核酸擴(kuò)增熒光檢測試劑（HBV、HCV、TB、CT）。3負(fù)責(zé)人： 操作人： 4程序：41 收到試劑后，目測試劑是否處在凍存狀態(tài)。42 核對試劑品種和數(shù)量并檢查包裝：外包裝（廠名廠址、批準(zhǔn)文號、批號和有效期等）；內(nèi)包裝（試劑瓶完整性、試劑配備品種完整性、使用說明書有否等）。43 及時將試劑轉(zhuǎn)入20冰箱保存。將上述檢測核對情況在記錄本上登記。44 最遲在前批次試劑存量尚可維持常規(guī)實驗一周時，按如下要求對新批號試劑進(jìn)行效驗實驗。45 效驗實驗：451 要求設(shè)置：空白對照、陰性對照、陽性對照、室內(nèi)質(zhì)控各一，陽性標(biāo)準(zhǔn)品梯度（104、105、106、108）。452 出現(xiàn)如下情況中任何一種的，判斷為試劑不合格，不能用于臨床檢測：a）空白對照出現(xiàn)擴(kuò)增。如擴(kuò)增曲線CT值大于25，需重復(fù)實驗確證試劑污染。b）陽性對照和陽性標(biāo)準(zhǔn)品均未檢出，或陽性對照未檢出而陽性標(biāo)準(zhǔn)品檢出率大幅下降，表示試劑失效或檢測靈敏度大幅下降。453 陽性對照未檢出，陽性標(biāo)準(zhǔn)品檢測正常，提示樣品提取液可能存在問題。重復(fù)新舊提取液陽性對照實驗，確定提取液失效問題。更換提取液后該批試劑方可使用。454 空白對照無擴(kuò)增，陰性對照有擴(kuò)增，排除其他