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文檔簡介

1、高考生物實驗必修一一、觀察核酸在細胞中的分布材料:人的口腔上皮細胞試劑:甲基綠、吡羅紅混合染色劑原理:甲基綠能使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅能使RNA呈現(xiàn)紅色,因此利用這兩種染色劑將細胞染色,可以真核生物DNA主要分布在細胞核中,線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA;RNA主要分布在細胞質(zhì)中。步驟:1、取材 滴:在潔凈的載玻片上滴一滴質(zhì)量分數(shù)為0.9%的NaCl溶液(保持細胞滲透壓); 刮:用消毒牙簽在口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下; 涂:將牙簽上的碎屑涂抹在載玻片的生理鹽水中; 烘:將涂有口腔上皮細胞的載玻片在酒精燈的火焰上烘干。2、水解 解:將烘干的載玻片放入裝有30ml質(zhì)量分數(shù)為8%的鹽酸(改變細胞膜

2、的通透性,加速染色劑進入細胞,同時使染色質(zhì)中的DNA和蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合)的小燒杯中,進行材料的水解; 保:將小燒杯放入裝有30溫水的大燒杯中保溫5分鐘。3、沖洗涂片 沖:用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10秒鐘; 吸:用吸水紙吸去載玻片上的水分。4、染色 染:用2滴吡羅紅甲基綠混合染色劑滴在載玻片上,染色5分鐘; 吸:吸去多余染色劑; 蓋:蓋上蓋玻片。5、觀察 低:在低倍物鏡下,尋找染色均勻,色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,將物像調(diào)節(jié)清晰; 高:轉(zhuǎn)到高倍物鏡,調(diào)節(jié)細準焦螺旋,觀察細胞核和細胞質(zhì)的染色情況。實驗結(jié)果: 細胞核呈綠色,細胞質(zhì)呈紅色注意事項: 鹽酸的作用改變細胞膜的通透性,

3、加速染色劑進入細胞,同時使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合。二、檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)。1、還原糖(葡萄糖、果糖、麥芽糖)的檢測試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/ml的NaOH 乙液:0.05g/ml的CuSO4)顏色變化:淺藍色 磚紅色沉淀步驟:取樣液2mL于試管中加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)水浴加熱2min左右觀察顏色變化(白色淺藍色磚紅色)注意事項:甲乙液必須等量混合均勻后再加入樣液中,現(xiàn)配現(xiàn)用  必須用水浴加熱2、脂肪的鑒定 試劑:蘇丹或蘇丹染液 顏色變化:橘黃色或

4、紅色步驟: 制作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央                            染色(滴蘇丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴體積分數(shù)50%的酒精洗去浮色吸去多余的酒精)         

5、60;              制作裝片(滴12滴清水于材料切片上蓋上蓋玻片)                        鏡檢鑒定(顯微鏡對光低倍鏡觀察高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)注意事項:切片要薄,如厚薄不均就會導致觀察時有的地

6、方清晰,有的地方模糊。       50%酒精的作用是:洗去浮色       需使用顯微鏡觀察 3蛋白質(zhì)的鑒定    顏色變化:變成紫色試劑:雙縮脲試劑( A液:0.1g/ml的NaOH B液: 0.01g/ml的CuSO4 )步驟:試管中加樣液2mL加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻觀察顏色變化(紫色)注意事項:先加A液1ml,再加B液4滴蛋清要先稀釋4淀粉的檢測和觀察 試劑:碘液顏色

7、變化:變藍三、使用顯微鏡觀察多種多樣的細胞。高倍鏡的使用步驟(1)在低倍鏡下找到物像,將物像移至視野中央。(2) 轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,換上高倍鏡。(3) 調(diào)節(jié)光圈和反光鏡,使視野亮度適宜。(4)調(diào)節(jié)細準焦螺旋,使物像清晰。顯微鏡的放大倍數(shù)=目鏡的放大倍數(shù)×物鏡的放大倍數(shù)面積的放大倍數(shù)=顯微鏡放大倍數(shù)的平方。顯微鏡下的物像與實際上下,左右相反。四、用高倍顯微鏡觀察線粒體和葉綠體。1實驗原理 (1)葉肉細胞中的葉綠體,呈綠色、扁平的橢球形或球形,散布于細胞質(zhì)中,可以在高倍顯微鏡下觀察它的形態(tài)。(2)線粒體普遍存在于動物細胞和植物細胞中,健那綠染液(活細胞染液)能專一性使活細胞中的線粒體

8、呈現(xiàn)藍綠色,而線粒體周圍的細胞質(zhì)中為無色的狀態(tài)。通過染色,可以在高倍顯微鏡下觀察到處于生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。2材料  蘚類、菠菜或黑藻的葉,人的口腔上皮細胞。3方法步驟:1、觀察葉綠體低倍鏡下找到葉片細胞高倍鏡下觀察。2、觀察線粒體取材染色制片低倍鏡下找到口腔上皮細胞高倍鏡下觀察。五、觀察植物細胞質(zhì)壁分離和復原1原理:植物細胞的吸水和失水細胞內(nèi)的液體環(huán)境主要指的是液泡里面的細胞液。原生質(zhì)層:細胞膜和液泡膜以及兩層膜之間的細胞質(zhì)(相當于選擇透過性膜)外界溶液濃度>細胞液濃度時,細胞質(zhì)壁分離外界溶液濃度<細胞液濃度時,細胞質(zhì)壁分離復原外界溶液

9、濃度=細胞液濃度時,水分進出細胞處于動態(tài)平衡中央液泡大小原生質(zhì)層位置細胞大小質(zhì)壁分離(蔗糖溶液)變小脫離細胞壁基本不變質(zhì)壁分離復原(清水)逐漸恢復原來大小恢復原位基本不變2、 質(zhì)壁分離產(chǎn)生的條件:具有大液泡   具有細胞壁 細胞內(nèi)外溶液濃度差活細胞3、 質(zhì)壁分離產(chǎn)生的原因:內(nèi)因原生質(zhì)層伸縮性大于細胞壁伸縮性    外因外界溶液濃度>細胞液濃度(不斷失水)4、材料:紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞(具紫色大液泡),質(zhì)量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。5、步驟:制作洋蔥鱗片葉外表皮細胞臨時裝片觀察蓋玻片一側(cè)滴蔗糖溶

10、液,另一側(cè)用吸水紙吸引觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細胞壁分離)蓋玻片一側(cè)滴清水, 另一側(cè)用吸水紙吸引觀察(質(zhì)壁分離復原)注意事項:低倍鏡下觀察填圖并寫出4、6、7處液體的顏色六、探究影響酶活性的因素1實驗原理:淀粉遇碘后,形成紫藍色的復合物。麥芽糖和葡萄糖遇碘后,不形成紫藍色的復合物,但能與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應,生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。2方法步驟:(1)溫度對酶活性的影響編號123可溶性淀粉液2ml2ml2ml溫度601000新鮮的淀粉酶溶液1ml1ml1ml碘液,1滴1滴1滴實驗結(jié)果未變藍  變藍  變藍(2)pH對酶活性的影響編號123新鮮豬肝研磨

11、液兩滴兩滴兩滴pH鹽酸蒸餾水氫氧化鈉H2O2溶液2mL2 mL2 mL實驗結(jié)果無氣泡很多氣泡無氣泡3實驗結(jié)論:(1)在最適宜的溫度和最適宜的ph條件下,酶的活性最高。(2)低溫導致酶活性下降,高溫、過酸、過堿導致酶活性喪失。七、葉綠體色素的提取和分離1、原理:葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑無水乙醇提取色素 各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴散速度不同分離色素2、步驟: (1)稱取5g綠色葉片并剪碎 提取色素 研缽研磨漏斗過濾 (2)加入少量SiO2、CaCO3和10ml無水乙醇收集到試管內(nèi)并塞緊管口(1)將干燥的濾紙剪成10cm長,1cm寬的紙條,剪去一端兩角(使層析液同時到制濾

12、紙條達濾液細線)(2)在距剪角一端1cm處用鉛筆畫線 (1)用毛細管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻地劃一條濾液細線,均勻,直,細,濾液劃線 (2)干燥后重復劃2-3次 (1)向燒杯中倒入3ml層析液(不能讓濾液細線觸及層析液)紙上層析 (2)將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內(nèi)壁,輕輕插入層析液中 (3)用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯(防止揮發(fā))觀察結(jié)果:濾紙條上出現(xiàn)四條寬度、顏色不同的彩帶(如下圖)最寬:葉綠素a;最窄:葉綠素b;(含量)相鄰色素帶最近:葉綠素a和葉綠素b;相鄰色素帶最遠:胡蘿卜素和葉黃素。(溶解度)注意事項:(1)二氧化硅:為了使研磨充分;碳酸鈣:保護色素免受破壞;無水乙醇:色素的溶劑。(2

13、)過濾時不能用濾紙,用尼龍布。(3)濾紙條要剪去兩角:防止兩側(cè)層析液擴散過快。(4)濾液細線要直:防止色素帶的重疊;干后要重畫幾次:增加色素量,使色素帶的顏色更深一些。(5) 濾液細線不能觸到層析液: 防止色素溶解到層析液中。八、探究酵母菌的呼吸方式 1、原理:酵母菌是一種單細胞真菌,屬于兼性厭氧菌 。在有氧條件下進行有氧呼吸,產(chǎn)生二氧化碳和水:C6H12O6 6O2 6H2O6CO2 12H2O 能量在無氧條件下進行無氧呼吸,產(chǎn)生酒精和少量二氧化碳:C6H12O62C2H5OH 2CO2 少量能量2、裝置:控制有氧無氧的條件:有氧條件的控制:向盛有酵母菌和葡萄糖溶液的錐形瓶(A瓶)

14、中不斷通入空氣。通入A瓶前應先通入NaOH溶液是為了除去空氣中的CO2,這樣才能說明A瓶產(chǎn)生的CO2是酵母菌產(chǎn)生的。無氧條件的控制:密封盛有酵母菌和葡萄糖溶液的錐形瓶(B瓶)。B瓶應封口一段時間后再連通盛有澄清石灰水的錐形瓶,這樣做是為了耗盡瓶內(nèi)的氧氣,以證明B瓶產(chǎn)生的CO2是在無氧條件下產(chǎn)生的。3檢測:(1)檢測CO2的產(chǎn)生:使澄清石灰水變渾濁或使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。(2)檢測酒精的產(chǎn)生:橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與酒精發(fā)生反應,變成灰綠色。九、觀察細胞的有絲分裂1實驗原理:(1)高等植物的分生組織有絲分裂較旺盛。(2)有絲分裂各個時期細胞內(nèi)染色體的形態(tài)和行為變化不同,可

15、用高倍顯微鏡根據(jù)各個時期內(nèi)染色體的變化情況,識別該細胞處于那個時期。(3)細胞核內(nèi)的染色體易被堿性染料(如龍膽紫)染成深色。2步驟:(1)洋蔥根尖的培養(yǎng)在上實驗課之前的3-4天,取洋蔥一個,放在廣口瓶上。瓶內(nèi)裝滿清水,讓洋蔥的底部接觸到瓶內(nèi)的水面。把這個裝置放在溫暖的地方培養(yǎng)。待根長約5cm,取生長健壯的根尖制成臨時裝片觀察。(2)裝片的制作制作流程為:解離漂洗染色制片過程方 法時 間目 的解離上午10時至下午2時,剪去洋蔥根尖2-3mm,立即放入盛入有15%鹽酸和95%酒精混合液(1:1)的玻璃皿中,在溫室下解離。3-5min用藥液使組織中的細胞相互分離開來漂洗待根尖酥軟后,用鑷子取出,放入

16、盛入清水的玻璃皿中漂洗。約10min洗去藥液,防止解離過度染色把根尖放進盛有質(zhì)量濃度為0.01g/ml或0.02g/ml的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)的玻璃皿中染色。3-5min染料能使染色體著色。制片用鑷子將這段根尖取出來,放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把根尖能碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕的按壓載玻片。使細胞分散開來,有利于觀察3、觀察a低倍鏡觀察:找到分生區(qū)細胞,其特點是細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正在分裂b高倍鏡觀察:在低倍鏡觀察的基礎上換高倍鏡,直到看清細胞的物像為止前期:出現(xiàn)染色體核膜核仁消失紡錘絲出現(xiàn)中期:著絲粒位于赤道面紡錘體明顯后期:著絲點

17、分裂,染色體分裂成兩組子染色體向相反兩極運動末期:紡錘體出現(xiàn)核膜核仁出現(xiàn)4注意事項:(1)處于分裂間期的細胞數(shù)目最多。因為在細胞周期中,間期時間最長。(2)所觀察的細胞不能看到中期變化到后期:因為所觀察的細胞都是停留在某一時期的死細胞。十、細胞大小與物質(zhì)運輸?shù)年P系1實驗目的:通過探究細胞大小,即細胞的表面積與體積之比(即細胞的相對表面積),與物質(zhì)運輸效率之間的關系,探討細胞不能無限長大的原因。2實驗原理:NaOH和酚酞相遇,呈紫紅色。3方法步驟:(1)用塑料餐刀將瓊脂塊切成三塊邊長分別為3cm、2cm、1cm的正方體(2)將三塊瓊脂塊放在燒杯內(nèi),加入NaOH溶液,將瓊脂塊淹沒,浸泡10min。

18、用塑料勺不時翻動瓊脂塊。注意:不要用勺子將瓊脂塊切開或挖動其表面(3)戴上手套,用塑料勺將瓊脂塊從NaOH溶液中取出,用紙巾把它們擦干,用塑料刀把瓊脂塊切成兩半。觀察切面,測量每一塊上NaOH擴散的深度。紀錄測量結(jié)果。注意:每兩次操作之間必須把刀擦干(4)根據(jù)測量結(jié)果進行計算,并填寫下表瓊脂塊的邊長/cm表面積/cm2體積/cm3相對表面積NaOH擴散的深度比值(NaOH擴散的體積/整個瓊脂塊的體積)3542720.519/27224830.57/816160.514實驗結(jié)論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減?。?NaOH擴散的體積與整個瓊脂塊體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。必修二

19、一、觀察細胞的減數(shù)分裂 1、目的要求:通過觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片,識別減數(shù)分裂不同階段的染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目,加深對減數(shù)分裂過程的理解。2、材料用具:蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片,顯微鏡。3、方法步驟:(1)在低倍鏡下觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片,識別初級精母細胞、次級精母細胞和精細胞。(2)先在低倍鏡下依次找到減數(shù)第一次分裂中期、后期和減數(shù)第二次分裂中期、后期的細胞,再在高倍鏡下仔細觀察染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目。二、低溫誘導染色體加倍1、原理:用低溫處理植物分生組織細胞,能夠抑制紡錘體的形成,以致影響染色體被拉向兩極,細胞也不能分裂成兩個子細胞,于是,植物細胞染色體數(shù)目發(fā)生

20、變化。 2、方法步驟:(1)培養(yǎng):洋蔥長出約1cm左右的不定根時,放入冰箱的低溫室內(nèi)(4),誘導培養(yǎng)36h。(2)固定:剪取誘導處理的根尖約0.51cm,放入卡諾氏液中浸泡0.51 h,以固定細胞的形態(tài),然后用體積分數(shù)為95%的酒精沖洗2次。(3)制作裝片:解離漂洗染色制片(4)觀察,低倍鏡高倍鏡,比較:視野中既有正常的二倍體細胞,也有染色體數(shù)目發(fā)生改變的細胞.三 、調(diào)查常見的人類遺1、 要求:調(diào)查的群體應足夠大;選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病。如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等.2、 方法: 分組調(diào)查,匯總數(shù)據(jù),統(tǒng)一計算.某種遺傳病的患病人數(shù)3、計算公式:某種遺傳病的發(fā)病率=

21、-×100%某種遺傳病的被調(diào)查人數(shù)必修三一、探究植物生長調(diào)節(jié)劑對扦插枝條生根的作用1、實驗原理:適宜的濃度的NAA溶液促進迎春條插條生根,濃度過高或過低都不利于插條生根。常用的生長素類似物:NAA(萘乙酸), 2,4-D, IPA(苯乙酸). IBA(吲哚丁酸)等2、方法:浸泡法:把插條的基部浸泡在配置好的溶液中,深約3cm,處理幾小時或一天。處理完畢就可以扦插了。這種處理方法要求溶液的濃度較低,并且最好是在遮蔭和空氣濕度較高的地方進行處理。沾蘸法:把插條的基部在濃度較高的藥液中蘸一下(約5s),深約1.5cm即可。3、預實驗:先設計一組濃度梯度較大的實驗進行探索,在此基礎上設計細致

22、的實驗??梢詾檫M一步的實驗摸索條件,也可以檢驗實驗設計的科學性和可行性。二、探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化 1 原理:我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量為縱坐標和時間為橫標軸做曲線,從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況。培養(yǎng)酵母菌(與溫度、氧氣、培養(yǎng)液有關):可用液體培養(yǎng)基培養(yǎng);計數(shù):血細胞計數(shù)板(2mm×2mm方格,培養(yǎng)液厚0.1mm),可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細胞數(shù)目來計算單位體積的細胞的總數(shù)目。2 酵母菌計數(shù)方法:抽樣檢測法。 先將蓋玻片放在計數(shù)室上,用吸管吸取培養(yǎng)液,滴于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行滲入。多余培養(yǎng)液用濾紙吸去。稍待片刻,待細菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部,將計數(shù)板放在載物臺的中央,計數(shù)一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量,再以此為根據(jù),估算試管中的酵母菌總數(shù)。注意:從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前,要將試管輕輕震蕩幾次2結(jié)論:根據(jù)7天所統(tǒng)計的酵母菌種群數(shù)量畫出酵母菌種群數(shù)量的增長曲線:培養(yǎng)液酵母菌種群數(shù)量隨時間呈S型增長變化。3注意事項(1) 從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)時,應將試管振蕩幾次,以便使酵母

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