質(zhì)譜分析法藥品質(zhì)量控制中的應用李曉東濟南

1、會計學1質(zhì)譜分析法藥品質(zhì)量控制中的應用李曉質(zhì)譜分析法藥品質(zhì)量控制中的應用李曉東濟南東濟南提提綱綱一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類二、質(zhì)譜法在藥品質(zhì)量控制中的應用二、質(zhì)譜法在藥品質(zhì)量控制中的應用三、質(zhì)譜法應用展望三、質(zhì)譜法應用展望一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類質(zhì)譜法質(zhì)譜法（Mass Spectrometry） 通過將被測物質(zhì)原子或分子離子化，利通過將被測物質(zhì)原子或分子離子化，利用電磁學原理，對荷電粒子或碎片粒子依用電磁學原理，對荷電粒子或碎片粒子依其質(zhì)量和電荷的比值（質(zhì)荷比，其質(zhì)量和電荷的比值（質(zhì)荷比，m/z）進）進行分離和分析，以達到確認其元素組成及行分離和分

2、析，以達到確認其元素組成及分子結(jié)構(gòu)的目的。分子結(jié)構(gòu)的目的。 一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類質(zhì)譜法的特點質(zhì)譜法的特點質(zhì)譜不屬波譜范圍，質(zhì)譜圖與電磁波的波長和分子內(nèi)質(zhì)譜不屬波譜范圍，質(zhì)譜圖與電磁波的波長和分子內(nèi) 某種物理量的改變無關。某種物理量的改變無關。質(zhì)譜是分子離子及碎片離子的質(zhì)量與其相對強度的質(zhì)譜是分子離子及碎片離子的質(zhì)量與其相對強度的 譜譜, , 譜圖與分子結(jié)構(gòu)有關。譜圖與分子結(jié)構(gòu)有關。 質(zhì)譜法進樣量少質(zhì)譜法進樣量少, , 靈敏靈敏, , 快速，特異，化學計量快速，特異，化學計量（Sensitivity，Speed，Specificity，Stoichiometry）質(zhì)譜

3、是唯一可以給出分子量質(zhì)譜是唯一可以給出分子量, , 確定分子式的方法確定分子式的方法, , 而而 分子式的確定對化合物的結(jié)構(gòu)鑒定是至關重要的。分子式的確定對化合物的結(jié)構(gòu)鑒定是至關重要的。一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類因質(zhì)譜技術(shù)獲諾貝爾獎的五位科學家因質(zhì)譜技術(shù)獲諾貝爾獎的五位科學家一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類MSMS：Mass Spectrometry, Mass Spectrometer質(zhì)譜儀的分類：質(zhì)譜儀的分類： (1) (1) 有機質(zhì)譜儀：有機質(zhì)譜儀： - - 氣質(zhì)聯(lián)用，液質(zhì)聯(lián)用氣質(zhì)聯(lián)用，液質(zhì)聯(lián)用，傅立葉質(zhì)譜儀，激光解吸，傅立葉質(zhì)譜儀，激光解吸 飛行時

4、間質(zhì)譜儀飛行時間質(zhì)譜儀(2) (2) 無機質(zhì)譜儀無機質(zhì)譜儀- - 電感耦合等離子體質(zhì)譜電感耦合等離子體質(zhì)譜, , 同位素質(zhì)譜儀，二次同位素質(zhì)譜儀，二次 離子質(zhì)譜離子質(zhì)譜, ,氦質(zhì)譜檢漏儀氦質(zhì)譜檢漏儀一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類質(zhì)譜儀分析標準程序：質(zhì)譜儀分析標準程序：（1 1）樣品的導入）樣品的導入（2 2）樣品的離子化）樣品的離子化（3 3）被測離子進入電場或磁場）被測離子進入電場或磁場（4 4）離子按質(zhì)荷比（）離子按質(zhì)荷比（m/zm/z）進行分析）進行分析 （5 5）按質(zhì)荷比）按質(zhì)荷比m/z.m/z.進行檢測進行檢測一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類質(zhì)譜圖質(zhì)

5、譜圖以荷質(zhì)比以荷質(zhì)比m/zm/z為橫座標，以對基峰為橫座標，以對基峰( (最強離子峰，規(guī)最強離子峰，規(guī)定相對強度為定相對強度為100%)100%)相對強度為縱座標所構(gòu)成的譜圖。相對強度為縱座標所構(gòu)成的譜圖。一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類質(zhì)譜圖質(zhì)譜圖1527314546m/e相對豐度乙醇有機質(zhì)譜圖有機質(zhì)譜圖無機質(zhì)譜圖無機質(zhì)譜圖一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類同位素質(zhì)譜圖同位素質(zhì)譜圖氯苯質(zhì)譜圖氯苯質(zhì)譜圖溴丙烷質(zhì)譜圖溴丙烷質(zhì)譜圖一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類質(zhì)譜圖質(zhì)譜圖 質(zhì)譜在有機結(jié)構(gòu)分析上的應用主要有兩方面： 確定相對分子質(zhì)量和分子式； 在低分辨

6、質(zhì)譜中，由分子結(jié)構(gòu)與裂解方式的經(jīng)驗規(guī)律，鑒定某些官能團，給出分子的結(jié)構(gòu)信息； 定量模式：GC/MS SIMLC/MS/MS SIM or MRMICP/MS SIM一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類計算機控制系統(tǒng)計算機控制系統(tǒng)樣品樣品導入導入離子離子源源質(zhì)量質(zhì)量分析分析放大放大記錄記錄檢測檢測器器真空系統(tǒng)真空系統(tǒng)GCGCHPLCHPLCICPICP* 2005版起版起中國藥典中國藥典二部附錄收載質(zhì)譜法二部附錄收載質(zhì)譜法一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類* 實現(xiàn)質(zhì)譜技術(shù)的關鍵實現(xiàn)質(zhì)譜技術(shù)的關鍵-高真空高真空 離子源和質(zhì)量分析器的壓力在離子源和質(zhì)量分析器的壓力在 104

7、 105 Pa和105 106 Pa 或10-610-7mmHg和10-710-8mmHg* 儀器類型：機械泵機械泵+渦輪分子泵渦輪分子泵InletIonsourceMass AnalyzerDetectorDataSystemHigh Vacuum System一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類* 實現(xiàn)質(zhì)譜技術(shù)的關鍵實現(xiàn)質(zhì)譜技術(shù)的關鍵-高真空高真空 -質(zhì)譜是檢測帶電粒子質(zhì)譜是檢測帶電粒子,帶電粒子在電磁場的作用下，帶電粒子在電磁場的作用下，加速運動。如果有空氣，帶電粒子可能和空氣中的其他加速運動。如果有空氣，帶電粒子可能和空氣中的其他分子發(fā)生碰撞，使離子很快淬滅而達不到檢測器，

8、并分子發(fā)生碰撞，使離子很快淬滅而達不到檢測器，并引引起額外的離子分子反應，改變裂解模型，譜圖復雜化起額外的離子分子反應，改變裂解模型，譜圖復雜化，影響分離及檢測。影響分離及檢測。一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類* 氣質(zhì)聯(lián)用氣質(zhì)聯(lián)用一、質(zhì)譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類* 液質(zhì)聯(lián)用液質(zhì)聯(lián)用單四極桿和串聯(lián)質(zhì)譜。 空間串聯(lián)：空間串聯(lián)：QQQ、Q-Trap、Q-TOF、TOF-TOF 時間串聯(lián)：時間串聯(lián)：Ion Trap、Orbitrap、FT-MSESI APCI- - APIAPI是液相色譜是液相色譜/ /質(zhì)譜聯(lián)用質(zhì)譜聯(lián)用儀最常用的離子化方式。儀最常用的離子化方式。一、質(zhì)

9、譜儀器的原理及分類一、質(zhì)譜儀器的原理及分類* 電感耦合等離子體質(zhì)譜電感耦合等離子體質(zhì)譜四極桿，雙聚焦、飛行時間質(zhì)譜 * 電感耦合等離子體質(zhì)譜電感耦合等離子體質(zhì)譜二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用* 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法質(zhì)譜聯(lián)用法* 氣相色譜氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法質(zhì)譜聯(lián)用法* 電感耦合等離子體質(zhì)譜：電感耦合等離子體質(zhì)譜：可進行定性、半定量、定量可進行定性、半定量、定量分析及同位素比值的準確測量，還可與其他技術(shù)如分析及同位素比值的準確測量，還可與其他技術(shù)如HPLCHPLC、HPCEHPCE、GCGC聯(lián)用進行元素的形態(tài)、分布特性等的分析，廣泛應聯(lián)用進行元素的形態(tài)、分布特性

10、等的分析，廣泛應用于環(huán)境、半導體、醫(yī)學、生物、冶金、石油、核材料分析用于環(huán)境、半導體、醫(yī)學、生物、冶金、石油、核材料分析等領域。等領域。 * 氣質(zhì)聯(lián)用：氣質(zhì)聯(lián)用：靈靈敏度高，適合于低分子化合物（分子量敏度高，適合于低分子化合物（分子量氣溶膠 -固體顆粒 -氣體分子 -原子 -離子 汽化 去溶劑化 氣化 原子化 離子化ICP炬管炬管二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用ICP-MS檢測限及質(zhì)量分析范圍檢測限及質(zhì)量分析范圍二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用市場上金屬元素分析儀器對比市場上金屬元素分析儀器對比二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的

11、應用根據(jù)溶液的濃度舉例如下，供參考：每個樣品測定1-3個元素，元素濃度為亞或低于ppb級，如果被測元素要求能滿足的情況下，G-AAS是最合適的。每個樣品5-20個元素，含量為亞ppm至%，ICP-AES是最合適的。每個樣品需測4個以上的元素，在亞ppb及ppb含量，而且樣品的量也相當大，ICP-MS是較合適的。電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，ICP-MS（1） 在中藥材及中藥注射劑檢驗中的應用在中藥材及中藥注射劑檢驗中的應用 阿膠，白芍，丹參，甘草，枸杞子，黃芪，金銀花，山楂，西洋參阿膠，白芍，丹參，甘草，枸杞子，黃芪，金銀花，山楂，西洋參 人參總皂苷，人參莖葉總皂苷，薄荷腦，

12、燈盞花素，茵陳提取物，人參總皂苷，人參莖葉總皂苷，薄荷腦，燈盞花素，茵陳提取物， 三七總皂苷，共三七總皂苷，共15個品種個品種-鉛不得過百萬分之五；鎘不得過千萬分之三；砷不得過百萬分之二；汞不得過鉛不得過百萬分之五；鎘不得過千萬分之三；砷不得過百萬分之二；汞不得過千萬分之二；銅不得過百萬分之二十。千萬分之二；銅不得過百萬分之二十。 （2） 在制品分析中的應用在制品分析中的應用- Al、Ni、Pd等過程代入的金屬元素等過程代入的金屬元素二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（1） 在化妝品檢驗中的應用在化妝品檢驗中的應用氣相色譜氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，質(zhì)譜聯(lián)用儀，GC/MS（2）

13、 在塑化劑檢驗中的應用在塑化劑檢驗中的應用（3） 在農(nóng)藥殘留檢驗中的應用在農(nóng)藥殘留檢驗中的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（1） 在化妝品檢驗中的應用在化妝品檢驗中的應用 - 風險及限用物質(zhì)：二噁烷、苯酚等風險及限用物質(zhì)：二噁烷、苯酚等 以二噁烷為例：以二噁烷為例：SN/T 1784-2006頂空氣相色譜頂空氣相色譜- -質(zhì)譜法：質(zhì)譜法： -頂空進樣，交聯(lián)頂空進樣，交聯(lián)5%5%苯基甲基硅烷毛細管柱苯基甲基硅烷毛細管柱 ，質(zhì)譜檢測器，質(zhì)譜檢測器下限下限2.5mg/kg檢測離子（m/z）離子相對豐度比（%）允許相對偏差（%）8810058應用標準品測定離子相對豐度比20

14、43應用標準品測定離子相對豐度比25二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（2） 在塑化劑檢驗中的應用在塑化劑檢驗中的應用 GB/T 21911-2008 含含16中鄰苯二甲酸中鄰苯二甲酸酯類增塑劑，不包含鄰酯類增塑劑，不包含鄰苯二甲酸二異壬酯苯二甲酸二異壬酯DINP和鄰苯二甲酸二和鄰苯二甲酸二異癸酯異癸酯DIDP. .二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（2） 在塑化劑檢驗中的應用在塑化劑檢驗中的應用DIDP 1ppmDIDP 10ppm二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用 GB/T 19648-2006 水果和蔬菜中水果和蔬菜中50

15、0種農(nóng)藥及相關化學品種農(nóng)藥及相關化學品殘留的測定殘留的測定 氣相色譜氣相色譜-質(zhì)譜法質(zhì)譜法GB/T 19426-2003 蜂蜜、果汁和果酒中蜂蜜、果汁和果酒中304種農(nóng)藥多殘留種農(nóng)藥多殘留測定方法測定方法 氣相色譜氣相色譜-質(zhì)譜和液相色譜質(zhì)譜和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T 19650-2005 動物組織中動物組織中437種農(nóng)藥多殘留測定方法種農(nóng)藥多殘留測定方法 氣相色譜氣相色譜-質(zhì)譜和液相色譜質(zhì)譜和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 （已作廢）（已作廢） （3） 在農(nóng)藥殘留檢驗中的應用在農(nóng)藥殘留檢驗中的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用2010年版年版中國藥典中

16、國藥典一部附錄收載一部附錄收載“農(nóng)藥殘留量測定法農(nóng)藥殘留量測定法”采用氣相色譜法，采用氣相色譜法，ECD，NPD檢測檢測收載品種：甘草，黃芪，人參總皂苷，人參莖葉總皂苷收載品種：甘草，黃芪，人參總皂苷，人參莖葉總皂苷（3） 在農(nóng)藥殘留檢驗中的應用在農(nóng)藥殘留檢驗中的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用發(fā)展趨勢：發(fā)展趨勢：測定方法分兩個層次：測定方法分兩個層次： 一為色譜法（一為色譜法（GCGC、HPLCHPLC） 方法包括樣品前處理（提取、凈化）、色譜測定、方法包括樣品前處理（提取、凈化）、色譜測定、 色譜驗證和質(zhì)譜確證色譜驗證和質(zhì)譜確證 二為色二為色- -質(zhì)聯(lián)機法（質(zhì)聯(lián)

17、機法（GC/MSGC/MS、LC/MSLC/MS） 方法包括樣品前處理（提取、凈化）、色譜質(zhì)聯(lián)機測定方法包括樣品前處理（提取、凈化）、色譜質(zhì)聯(lián)機測定液相色譜液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，質(zhì)譜聯(lián)用儀，LC/MS（1） 在藥典中的應用在藥典中的應用（3） 非法添加及有害殘留檢驗中的應用非法添加及有害殘留檢驗中的應用（2） 主成分及有關物質(zhì)分析中的應用主成分及有關物質(zhì)分析中的應用（4） 基因工程藥品檢驗中的應用基因工程藥品檢驗中的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（1） 在藥典中的應用在藥典中的應用 2010年版年版 中國藥典中國藥典一部收錄三個品種一部收錄三個品種- - 川楝子及

18、苦楝皮中的川楝素進行含量測定川楝子及苦楝皮中的川楝素進行含量測定 川楝素川楝素(Toosendanin): C30H38O11 MW.574.62 反相C18體系，乙腈-0.01%甲酸溶液（31:69）為流動相，采用單級四級桿質(zhì)譜檢測器，電噴霧離子化（ESI）負離子模式下選擇質(zhì)荷比（m/z）為573的離子進行檢測。理論塔板數(shù)按川楝素計算應不低于8000。通過外標法，以川楝素兩個峰面積之和計算川楝素的含量。二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（1） 在藥典中的應用在藥典中的應用 2010年版年版 中國藥典中國藥典一部收錄三個品種一部收錄三個品種- - 千里光中的阿多尼弗林堿進

19、行了雜質(zhì)檢查千里光中的阿多尼弗林堿進行了雜質(zhì)檢查 阿多尼弗林堿阿多尼弗林堿 Adonifoline C18H23NO7，MW= 365具有細胞毒性具有細胞毒性 反相C18體系，乙腈-0.5%甲酸溶液（7:93）為流動相,采用單級四級桿質(zhì)譜為檢測器，電噴霧離子化（ESI）正離子模式下選擇質(zhì)荷比（m/z）為366離子進行檢測。理論塔板數(shù)按阿多尼弗林堿計算應不低于8000。以百合堿為內(nèi)標，計算校正因子，測定阿多尼弗林堿的含量。二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（1） 在藥典中的應用在藥典中的應用 USP32- 血管升壓素（血管升壓素（Vasopressin Vasopressi

20、n ）: ESI+: ESI+，10841084（單電荷）和（單電荷）和 543543（雙電荷）；（雙電荷）；- 人重組血清白蛋白（人重組血清白蛋白（Recombinant Albumin HumanRecombinant Albumin Human）: 585: 585個個 氨基酸組成，分子量氨基酸組成，分子量66,438 Da66,438 Da，ESI+ESI+多電荷質(zhì)譜圖去卷積，多電荷質(zhì)譜圖去卷積， 20Da20Da之內(nèi)誤差；之內(nèi)誤差； - 醋酸去氨加壓素（醋酸去氨加壓素（Desmopressin AcetateDesmopressin Acetate）: ESI+: ESI+，m/z

21、m/z 10691069，MS/MSMS/MS，m/z m/z 641641、 742742和和 995995子離子。子離子。二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（2） 主成分及有關物質(zhì)分析中的應用主成分及有關物質(zhì)分析中的應用* 藥典中的定性鑒別（已知物的鑒別） 化學、紅外、紫外、色譜保留時間化學、紅外、紫外、色譜保留時間* 液質(zhì)聯(lián)用定性鑒別（未知物的鑒別） 色譜保留時間色譜保留時間 (1)(1) 一級質(zhì)譜分子離子一級質(zhì)譜分子離子 (2)(2) 二級質(zhì)譜全掃描二級質(zhì)譜全掃描 (4)(4)* * EU guideline: 46 Identification points 一

22、個一個多反應監(jiān)測多反應監(jiān)測MRM (2)MRM (2)- - 歐盟歐盟96/23/EC96/23/EC及及2002/657/EC2002/657/EC指令指令- - D,Hubert F, et.alD,Hubert F, et.al，Trends in Analytical ChemistryTrends in Analytical Chemistry, , 2001, 20(8), 20(8), 435二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（2） 主成分及有關物質(zhì)分析中的應用主成分及有關物質(zhì)分析中的應用鑒定數(shù)據(jù)點系統(tǒng)鑒定數(shù)據(jù)點系統(tǒng)質(zhì)譜技術(shù)質(zhì)譜技術(shù)IP / ionIP /

23、ion低分辨率質(zhì)譜低分辨率質(zhì)譜 (LR-MS)(LR-MS)1.01.0低分辨率質(zhì)譜低分辨率質(zhì)譜L LR-MSR-MSn n 母離子母離子1.01.0低分辨低分辨率質(zhì)譜率質(zhì)譜( (LR-MSLR-MSn n )Transition products )Transition products1.51.5高分辨率質(zhì)譜高分辨率質(zhì)譜(HR-MS)(HR-MS)2.02.0高分辨率質(zhì)譜（高分辨率質(zhì)譜（HR-MSHR-MSn n ）母離子）母離子2.02.0高分辨率質(zhì)譜高分辨率質(zhì)譜( (HR-MSHR-MSn)n) Transition products Transition products2.52.5

24、低分辨率質(zhì)譜二級全掃描低分辨率質(zhì)譜二級全掃描 (LR-MS(LR-MS Full Scan Full Scan) )4.04.0二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（2） 主成分及有關物質(zhì)分析中的應用主成分及有關物質(zhì)分析中的應用相對豐度相對豐度(% (% 基峰基峰) )GC-MS/EIGC-MS/EIGC-MS/CI, GC-MS/MSGC-MS/CI, GC-MS/MSn n LC-MS, LC-MS-MSLC-MS, LC-MS-MSn n 50 % 50 % 10 % 10 % 20 % 20 % 20 % - 50 % 20 % - 50 % 15 % 15 % 2

25、5 % 25 % 10 % - 20 % 10 % - 20 % 20 % 20 % 30 % 30 % 10 % 10 % 50 % 50 % 50 % 50 %相對強度的容許量相對強度的容許量二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（2） 主成分及有關物質(zhì)分析中的應用主成分及有關物質(zhì)分析中的應用相對強度的容許量相對強度的容許量 20 % 20 % 25 % 30 % 50 %二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（2） 主成分及有關物質(zhì)分析中的應用主成分及有關物質(zhì)分析中的應用- - 鹽酸洛美沙星光降解分析鹽酸洛美沙星光降解分析二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二

26、、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用鹽酸洛美沙星光降解分析鹽酸洛美沙星光降解分析RT: 0.00 - 24.99024681012141618202224Time (min)-500050010001500200025003000350040004500500055006000uAU9.522.347.5710.902.715.5611.846.7212.883.250.87NL:1.52E6Channel A UV lome02_031017133550ABClome02_031017133550 #291RT: 6.48AV: 1SB: 4 5.88-6.11, 6.99-7.19NL: 8.64E

27、4T: + c APCI corona SIM ms 307.00-309.00307.0307.2307.4307.6307.8308.0308.2308.4308.6308.8309.0m/z05101520253035404550556065707580859095100Relative Abundance308.0307.3308.8lome02_031017133550 #252RT: 5.63AV: 1SB: 2 5.15-5.28, 5.89-6.02NL: 3.64E4T: + c APCI corona SIM ms 292.00-296.00292.0292.5293.02

28、93.5294.0294.5295.0295.5296.0m/z05101520253035404550556065707580859095100Relative Abundance294.0293.0295.8lome02_031017133550 #590-598RT: 12.84-12.97AV: 2SB: 5 13.93-14.32, 12.13-12.41NL: 3.07E5T: + c APCI corona SIM ms 367.00-369.00367.0367.2367.4367.6367.8368.0368.2368.4368.6368.8369.0m/z051015202

29、53035404550556065707580859095100Relative Abundance368.0368.8ABC二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（2） 非法添加及有害殘留檢驗中的應用非法添加及有害殘留檢驗中的應用 2006年年3月，月，SFDA通用補充檢驗方法及項目的批準通用補充檢驗方法及項目的批準 - 治療肥胖癥中成藥（治療肥胖癥中成藥（SFDA2006004） 麻黃堿、芬氟拉明、西布曲明麻黃堿、芬氟拉明、西布曲明 - 治療消渴癥中成藥（治療消渴癥中成藥（SFDA2006005） 苯乙雙胍、格列吡嗪、格列本脲苯乙雙胍、格列吡嗪、格列本脲 - 消腫止痛類中

30、成藥（消腫止痛類中成藥（SFDA2006006） 雙氯芬酸、氨基比林雙氯芬酸、氨基比林 - 止咳平喘類中成藥（止咳平喘類中成藥（SFDA2006007） 茶堿茶堿 - 鎮(zhèn)靜安神類中成藥（鎮(zhèn)靜安神類中成藥（SFDA2006008） 地西泮、氯硝西泮地西泮、氯硝西泮 - 鎮(zhèn)靜安神類中成藥（鎮(zhèn)靜安神類中成藥（SFDA2006024） 艾司唑侖艾司唑侖 - 補腎壯陽類中成藥（補腎壯陽類中成藥（SFDA2006009） 西地那非、他達拉非西地那非、他達拉非二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（3） 非法添加及有害殘留檢驗中的應用非法添加及有害殘留檢驗中的應用RT: 0.16 - 25

31、.3024681012141618202224Time (min)020406080100Relative Abundance020406080100Relative Abundance200000400000uAU0500000100000015000002000000uAU1.0819.6218.4817.9315.2214.5315.688.186.6619.621.0715.2218.4817.9315.6814.538.1811.2610.6613.8721.6819.6318.6015.7618.0315.3214.6416.2123.591.1420.7813.9621.448.

32、056.8012.456.1510.681.8419.7018.5517.9714.5915.2615.728.2316.497.326.7410.51 11.331.19NL: 2.27E6Channel A UV Mixture1_8_06NL: 5.55E5Channel B UV Mixture1_8_06NL: 1.12E9m/z= 20.0-2000.0 F: + c ESI Full ms 120.00-1500.00 MS Mixture1_8_06NL: 1.38E8TIC F: - c ESI Full ms 120.00-1500.00 MS Mixture1_8_06U

33、V 235nmUV 254nm(+) ESI-MS(-) ESI-MS八種降糖藥液質(zhì)聯(lián)用方法的建立八種降糖藥液質(zhì)聯(lián)用方法的建立 二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（3） 非法添加及有害殘留檢驗中的應用非法添加及有害殘留檢驗中的應用* * 糖皮質(zhì)激素的基本結(jié)構(gòu)中糖皮質(zhì)激素的基本結(jié)構(gòu)中均具有環(huán)戊烷駢多氫菲母核，均具有環(huán)戊烷駢多氫菲母核，其中其中C3C3的酮基、的酮基、C20C20的羰基的羰基及及C4-5C4-5的雙鍵是保持生理功的雙鍵是保持生理功能所必需，結(jié)構(gòu)上可通過在能所必需，結(jié)構(gòu)上可通過在C1C12 2引入雙鍵，在引入雙鍵，在C6C6、 C9C9、 C16 C16 、C2

34、1C21引入結(jié)構(gòu)修飾基引入結(jié)構(gòu)修飾基團來增強其抗炎作用，減弱團來增強其抗炎作用，減弱水鹽代謝作用。水鹽代謝作用。C OCH2OHORABCD123456789101112131415161718192021OHM1+準分子離子峰：潑尼松龍 m/z361.2潑尼松 m/z359.3地塞米松 m/z393.2醋酸可的松 m/z403.2醋酸潑尼松龍 m/z403.2醋酸潑尼松 m/z401.3醋酸地塞米松 m/z435.1二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（3） 非法添加及有害殘留檢驗中的應用非法添加及有害殘留檢驗中的應用 糖皮質(zhì)糖皮質(zhì)激素類藥物激素類藥物RT: 2.00 -

35、 15.0023456789101112131415Time (min)020406080100Relative Abundance020000400006000080000100000120000uAU3.627.395.113.399.688.9513.213.897.423.715.163.4213.199.033.279.732.98NL: 1.21E5Channel C UV 7std_06NL: 1.99E7m/z= 358.8-359.8+360.7-361.7+392.7-393.7+400.8-401.8+402.7-403.7+402.8-403.8+434.6-435.6

36、 F: + c ESI Full ms 300.00-600.00 MS 7std_06RT: 2.00 - 15.00 SM: 5G23456789101112131415Time (min)102030405060708090100Relative Abundance-50000500010000150002000025000uAU2.543.828.993.314.756.096.396.927.157.709.073.005.787.5711.3814.038.4913.575.1212.543.296.884.549.99 10.574.106.652.56NL: 2.90E4Cha

37、nnel C UV Shenjinjiaonang_03NL: 1.91E6m/z= 358.8-359.8+360.7-361.7+392.7-393.7+400.8-401.8+402.7-403.7+402.9-403.9+434.6-435.6 F: + c ESI Full ms 300.00-600.00 MS Shenjinjiaonang_03HPLC-UV MS色譜圖 （a）七種糖皮質(zhì)激素對照品；（b）供試品 * * 以潑尼松計算，柱上靈敏度達到以潑尼松計算，柱上靈敏度達到0.5ng 0.5ng 二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用保健食品：肥胖癥、消渴癥

38、、消腫止痛、補腎壯陽保健食品：肥胖癥、消渴癥、消腫止痛、補腎壯陽伐地那非伐地那非_Vardenafil_Vardenafil（LevitraLevitra，艾力達，利維他），艾力達，利維他）他達那非他達那非_Tadalafil_Tadalafil（CialisCialis，希愛力，西力士，希愛力，西力士) )西地那非西地那非_Sildenafil_Sildenafil（ VIAGRAVIAGRA，萬艾可，偉哥），萬艾可，偉哥） - -磷酸二酯酶磷酸二酯酶5 5（PDE5PDE5）抑制劑類）抑制劑類二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用磷酸二酯酶磷酸二酯酶5 5（PDE5PDE

39、5）抑制劑類）抑制劑類HNNNNSNOONOOHNNNNSNOONOOHNNNNSNOONOOOHHNNNNOONONSildenafil (Viagra)MS: 474.2 Homosildenafil MS: 488.2Hydroxy-homosildenafilMS: 504.2Acetildenafil（Hongdenafil） MS: 466.3NHNNOOOOHNNNNSNOONOOTadalafilMS: 389.1 Vardenafil MS: 488.2HNNNNSNOONHOOAildenafil MS: 488.2HNNNNSNOONOOOHHydroxysildenaf

40、ilMS: 490.2二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用Relative AbsorbanceRelative AbundanceRelative AbundanceRelative AbundanceHNNNNSNOONOOOH西地那非西地那非M+1:475.2M+1:475.2Hydroxy-homosildenafil- - 磷酸二酯酶磷酸二酯酶5 5（PDE5PDE5）抑制劑類藥物類似物分析）抑制劑類藥物類似物分析 二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用 問題（問題（1 1）成鹽藥物檢驗結(jié)論的描述）成鹽藥物檢驗結(jié)論的描述 - 改善藥物理化性質(zhì) -

41、 增強藥物的穩(wěn)定性，溶解性 - 影響藥物的作用時間 - 減輕了毒副作用等功能， 保持藥物療效是成鹽的前提 -氨茶堿，鹽酸克倫特羅，雙氯芬酸鈉、枸櫞酸西地那非等。 - -例：檢出雙氯芬酸，以雙氯芬酸鈉計含量為例：檢出雙氯芬酸，以雙氯芬酸鈉計含量為_%_%二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用 問題（問題（2 2） 最小檢出限的確定最小檢出限的確定Relative AbundanceuAURelative AbundanceuAURelative AbundanceuAURelative AbundanceRelative AbundanceRelative Abundancem

42、/z28325m/z31170m/z34346m/z377100m/z28322m/z31153m/z34361m/z377100m/z28325m/z31133m/z34326m/z3771002ng1ng100ng二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用 問題（問題（3 3）未檢出結(jié)論的描述未檢出結(jié)論的描述 - - 儀器靈敏度的表述儀器靈敏度的表述 - LOD- LOD的重要性的重要性 - - 殘留與非法添加（底線的選?。埩襞c非法添加（底線的選?。?- -毒害性、治療作用、污染造成、需復核毒害性、治療作用、污染造成、需復核 問題（問題（4 4）檢出非法添加含量極低檢出非法

43、添加含量極低(1.5）二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用 基因工程蛋白藥物中抗生素殘留檢測基因工程蛋白藥物中抗生素殘留檢測abxl-ms2 #167-176RT: 2.33-2.43AV: 10NL: 2.02E6F: + c ESI SRM ms2 349.9024.00 99.80-599.80100120140160180200220240260280300320340360380m/z05101520253035404550556065707580859095100Relative Abundance159.9173.9332.7190.7106.0191.911

44、3.9304.8210.8321.8214.5288.8349.8205.3145.9118.1260.7163.8189.6231.5249.7276.9369.8377.5125.8M+H=349.8-H2O-COOH-COHNNSNH2OOOHOH+m/z=191m/z=160m/z=106氨芐西林氨芐西林MS/MSConv.= 0.0525 g/mL， 0.5ng（10 L），）， SN4二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用 食品中氯霉素的殘留檢測食品中氯霉素的殘留檢測 HPLC & MRM（ODS，MeCN-H2O，Gradient program） ESI(-)

45、ESI(-)， Q1=Q1=321,Q3=152, 194 and 257RT: 0.00 - 5.000.00.20.40.60.81.01.21.41.61.82.02.22.42.62.83.03.23.43.63.84.04.24.44.64.8Time (min)020406080100020406080100020406080100Relative Abundance020406080100RT: 2.83AA: 60868SN: 15803.843.254.652.341.030.802.473.561.530.324.523.113.431.731.880.172.064.87

46、2.644.170.644.311.230.471.402.20RT: 2.83AA: 23577SN: 16694.653.201.032.133.793.574.213.392.373.970.114.421.400.834.901.692.541.890.680.310.461.241.53RT: 2.83AA: 13035SN: 1644RT: 2.83AA: 24218SN: 6393.843.252.341.030.802.474.593.564.761.530.323.113.431.734.431.880.172.062.644.174.311.230.541.402.20NL

47、:1.82E4TIC F: MS ICIS 1221C03NL:7.07E3Base Peak m/z= 151.50-152.50 F: MS ICIS 1221C03NL:4.48E3Base Peak m/z= 193.50-194.50 F: MS ICIS 1221C03NL:6.77E3Base Peak m/z= 256.50-257.50 F: MS ICIS 1221C03TIC321-152321-194321-257OHOHNHHHOClClO2NC11H12Cl2N2O5 FW=323.13二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用 食品中氯霉素的殘留檢測

48、食品中氯霉素的殘留檢測( (樣品樣品) )RT: 0.00 - 5.000.00.20.40.60.81.01.21.41.61.82.02.22.42.62.83.03.23.43.63.84.04.24.44.64.8Time (min)020406080100020406080100020406080100Relative Abundance020406080100RT: 2.86MA: 7799SN: 23841.302.052.581.581.832.202.340.991.172.990.813.144.893.680.313.293.960.094.490.573.414.264

49、.703.554.13RT: 2.85AA: 2757SN: 274RMS2.061.461.651.921.292.241.112.641.773.293.964.492.404.934.700.983.783.093.554.130.530.800.300.144.330.67RT: 2.85AA: 1107SN: 240RMS1.564.891.661.382.362.191.05 1.172.042.604.430.163.333.493.103.992.724.133.861.863.640.794.260.534.780.390.674.60RT: 2.86MA: 3554SN:

50、1NL:2.45E3TIC F: MS 1221G07NL:8.97E2Base Peak m/z= 151.50-152.50 F: MS ICIS 1221G07NL:3.82E2Base Peak m/z= 193.50-194.50 F: MS ICIS 1221G07NL:2.39E3Base Peak m/z= 256.50-257.50 F: MS 1221G07二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用RT: 1.49 - 6.561.52.02.53.03.54.04.55.05.56.06.5Time (min)020406080100Relative Abu

51、ndance020406080100Relative Abundance050000100000150000uAU3.483.124.444.152.584.573.603.092.786.435.826.234.225.516.023.305.104.014.585.935.623.216.453.822.80NL:1.92E5Channel B UV M070403A_03NL:2.35E8TIC F: + c ESI Full ms 150.00-1000.00 MS M070403A_03NL:9.80E6TIC F: + c ESI Full ms2 825.4030.00 225.

52、00-1000.00 MS M070403A_03甲氨蝶呤中的長春新堿檢測甲氨蝶呤中的長春新堿檢測“甲氨蝶呤甲氨蝶呤”事事件件二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用“力百汀力百汀”塑化劑事塑化劑事件件定性方法重復：定性方法重復：D:LTQ-FTshj-0614DIDP046/15/2011 7:36:59 AMDIDP,2.6ng/ul,AcONH4,5-95%RT: 0.00 - 10.00 SM: 11G0.00.51.01.52.02.53.03.54.04.55.05.56.06.57.07.58.08.59.09.510.0Time (min)050100Relat

53、ive Abundance0100020003000uAU1.221.690.910.861.790.625.084.932.252.550.442.702.924.713.140.183.394.023.614.15RT: 5.13MA: 19050742SN: 166RT: 9.36AA: 89685SN: 18RT: 0.67AA: 50872SN: 13RT: 1.39AA: 19697SN: 11RT: 8.89AA: 39159SN: 106.66 6.82 7.028.027.367.778.638.403.962.691.912.433.753.102.190.973.334.

54、10RT: 0.00 - 14.00 SM: 11G0.00.51.01.52.02.53.03.54.04.55.05.56.06.57.07.58.08.59.09.510.010.511.011.512.012.513.013.514.0Time (min)020406080100Relative Abundance050001000015000uAU7.497.352.114.662.925.676.076.986.431.328.508.839.089.429.76 10.047.577.988.33 8.62 8.969.35 9.58 9.825.027.307.006.746.

55、175.995.2510.16C18C4HPLC/MS/MS： Merck LiChroCART RP-18e C18，5 m，2.0 125 mm，5%乙酸銨乙酸銨-95甲醇梯度淋洗甲醇梯度淋洗HPLC/MS/MS： VyDAC 214MS C4，5 m，2.0 150 mm，5%乙酸銨乙酸銨-95甲醇梯度淋洗甲醇梯度淋洗二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用“力百汀力百汀”塑化劑事塑化劑事件件NICPBP15-Jun-2011m/z100150200250300350400450500%0100%0100DIDPES+2 50 (0.294)Daughters of 44

56、8ES+ 1.27e5141.09100.09148.92289.23166.95184.43447.60307.24308.54446.97416.58348.89448.48DIDPES+ 51 (0.300)Scan ES+ 2.39e7478.47415.40282.34130.01280.75166.02388.26304.30447.61479.76480.90d:ltq-ftshj-0614didp-std-106/16/2011 12:45:16 PMstd-DIDP-2.5ppm, AcONH4, 50-50%5-95%,C4 col,10uLdidp-std-10 #234

57、3-2386 RT: 7.51-7.61 AV: 15 SB: 143 6.40-6.88 , 8.16-9.04 NL: 2.45E6F: ITMS + c ESI Full ms 100.00-900.00100150200250300350400450500550600650700750800850900m/z0500000100000015000002000000Intensity447.28463.54881.40419.27882.42464.97435.80883.13509.95505.11355.25DIDP-std-03_110616102510 #1112-1132 RT

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59、46.62355.39449.23231.39Thermo LTQ-orbitrap XL靜電場軌道離子阱質(zhì)譜儀Waters AcquityTMUPLC，Quattro Premier XE 三重四級桿液相質(zhì)譜儀二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用二、質(zhì)譜法在藥品檢驗用的應用（4） 基因工程藥品檢驗中的應用基因工程藥品檢驗中的應用std_3%0H8 #34 RT: 0.61 NL: 1.26E8F: + c ESI Full ms 800.00-2000.0080090010001100120013001400150016001700180019002000m/z0510152025303540455

60、0556065707580859095100Relative Abundance1581.31702.71844.51476.41383.61703.61744.01873.31587.51746.61477.31593.61405.71882.81353.21757.8936.11230.41417.01499.61884.81772.2978.81430.91700.81079.01236.51806.3832.71948.51303.8893.31027.51202.01105.7std_3%0H8 #34 RT: 0.61 NL: 4.74E8F: + c ESI Full ms 80