血型交叉配血

1、會(huì)計(jì)學(xué)1血型交叉配血血型交叉配血紅細(xì)胞紅細(xì)胞血清血清凝集凝集不凝集不凝集遇到遇到在抗原抗體反應(yīng)中的去離子和低離子在抗原抗體反應(yīng)中的去離子和低離子鹽水凝集法：鹽水凝集法：例如，例如，ABOABO血型鑒定試驗(yàn)血型鑒定試驗(yàn) 包括玻片法、試管包括玻片法、試管 法和微孔法法和微孔法但靈敏度相對(duì)較低，只在但靈敏度相對(duì)較低，只在一些基層醫(yī)院血庫(kù)使用一些基層醫(yī)院血庫(kù)使用低離子強(qiáng)度鹽水法：低離子強(qiáng)度鹽水法： 通過(guò)降低介質(zhì)溶液離子通過(guò)降低介質(zhì)溶液離子強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞膜外圍的強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞膜外圍的離子云，促進(jìn)紅細(xì)胞凝集，離子云，促進(jìn)紅細(xì)胞凝集，因而其靈敏度有所提高。因而其靈敏度有所提高。聚凝胺凝集法：聚凝胺凝集法

2、： 通過(guò)多聚季氨鹽溶液提供大量正電荷來(lái)中通過(guò)多聚季氨鹽溶液提供大量正電荷來(lái)中和紅細(xì)胞表面負(fù)電荷，減少紅細(xì)胞間的排斥，和紅細(xì)胞表面負(fù)電荷，減少紅細(xì)胞間的排斥，促進(jìn)紅細(xì)胞凝集，其靈敏度有較大提高。此方促進(jìn)紅細(xì)胞凝集，其靈敏度有較大提高。此方法目前在國(guó)內(nèi)使用較多。（法目前在國(guó)內(nèi)使用較多。（Rh,DuffyRh,Duffy）抗人球試驗(yàn)抗人球試驗(yàn) - 檢測(cè)檢測(cè) IgG抗人球試驗(yàn)：抗人球試驗(yàn)： 在鹽水凝集法或低離在鹽水凝集法或低離子強(qiáng)度鹽水法的基礎(chǔ)上，子強(qiáng)度鹽水法的基礎(chǔ)上，加入抗人球蛋白抗體，通加入抗人球蛋白抗體，通過(guò)抗人球蛋白抗體的特異過(guò)抗人球蛋白抗體的特異性橋連作用，促進(jìn)紅細(xì)胞性橋連作用，促進(jìn)紅細(xì)胞的

3、凝集?？煞譃橹苯雍烷g的凝集?？煞譃橹苯雍烷g接抗人球試驗(yàn)。接抗人球試驗(yàn)。 K, k, K, k, Fya, Fya, Fyb, JKa, JKb, Kpa, Kpb, Fyb, JKa, JKb, Kpa, Kpb, S, s, Lua, Lub S, s, Lua, Lub 反應(yīng)原理反應(yīng)原理 微柱凝膠免疫反應(yīng)的本質(zhì)是紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，也可稱之微柱凝膠血凝微柱凝膠免疫反應(yīng)的本質(zhì)是紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，也可稱之微柱凝膠血凝試驗(yàn)（試驗(yàn)（Microcolumn Gel Heamagglutination AssayMicrocolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHAMGHA

4、）在微柱凝膠）在微柱凝膠管中，紅細(xì)胞和相應(yīng)抗體結(jié)合后，形成紅細(xì)胞凝集團(tuán)塊。在一定離心力下，管中，紅細(xì)胞和相應(yīng)抗體結(jié)合后，形成紅細(xì)胞凝集團(tuán)塊。在一定離心力下，該凝集團(tuán)塊位于膠表面或膠中；而紅細(xì)胞未和相應(yīng)抗體結(jié)合，仍為分散的該凝集團(tuán)塊位于膠表面或膠中；而紅細(xì)胞未和相應(yīng)抗體結(jié)合，仍為分散的紅細(xì)胞，在同樣的離心力下，紅細(xì)胞沉降到微柱管尖底部。紅細(xì)胞，在同樣的離心力下，紅細(xì)胞沉降到微柱管尖底部。4+ 紅細(xì)胞復(fù)合物（凝集）位于凝膠表面紅細(xì)胞復(fù)合物（凝集）位于凝膠表面3+ 大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面，少部分位于凝膠中部大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面，少部分位于凝膠中部2+ 大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中部

5、，少部分位于凝膠中上部大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中部，少部分位于凝膠中上部1+ 紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中下部紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中下部 與同一卡中陰性管結(jié)果對(duì)照，如與陰性結(jié)果有差別，即為與同一卡中陰性管結(jié)果對(duì)照，如與陰性結(jié)果有差別，即為 紅細(xì)胞完全沉積在凝膠管尖底部紅細(xì)胞完全沉積在凝膠管尖底部完全溶血完全溶血 凝膠和液體無(wú)凝集或未凝集的紅細(xì)胞，液體出現(xiàn)透明清澈紅色凝膠和液體無(wú)凝集或未凝集的紅細(xì)胞，液體出現(xiàn)透明清澈紅色不完全溶血不完全溶血 殘留紅細(xì)胞在膠表面、膠中或膠底部，液體出現(xiàn)透明清澈紅色殘留紅細(xì)胞在膠表面、膠中或膠底部，液體出現(xiàn)透明清澈紅色混合凝集混合凝集 紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面和凝膠底部

6、紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面和凝膠底部反應(yīng)強(qiáng)度反應(yīng)強(qiáng)度現(xiàn)象及說(shuō)明現(xiàn)象及說(shuō)明 完全完全 不完全不完全 混混合凝集合凝集凝膠凝集試驗(yàn) 凝膠凝集試驗(yàn) - 原理 (1)w 通過(guò)離心使紅細(xì)胞被擠過(guò)裝有過(guò)濾介質(zhì)的小柱通過(guò)離心使紅細(xì)胞被擠過(guò)裝有過(guò)濾介質(zhì)的小柱w 凝集的紅細(xì)胞被阻擋在小柱中過(guò)濾介質(zhì)的頂部或凝集的紅細(xì)胞被阻擋在小柱中過(guò)濾介質(zhì)的頂部或中央，中央， 而未凝集的紅細(xì)胞則到達(dá)小柱的底部而未凝集的紅細(xì)胞則到達(dá)小柱的底部w 血型或血型或AHGAHG試劑被加入到過(guò)濾介質(zhì)試劑被加入到過(guò)濾介質(zhì)w 由于紅細(xì)胞和血清成分以不同的速度通過(guò)小柱（由于紅細(xì)胞和血清成分以不同的速度通過(guò)小柱（重力加速度不同），從而消除了血清中未結(jié)

7、合的重力加速度不同），從而消除了血清中未結(jié)合的球蛋白中和球蛋白中和AHGAHG的可能性，因而，在抗人球試驗(yàn)的可能性，因而，在抗人球試驗(yàn)中，不用清洗紅細(xì)胞中，不用清洗紅細(xì)胞凝膠凝集試驗(yàn) 凝膠抗人球試驗(yàn)新技術(shù)新技術(shù)卡式檢測(cè)法：卡式檢測(cè)法： 19861986年法國(guó)年法國(guó)Dr.Yves LappierreDr.Yves Lappierre發(fā)明了用于分離凝發(fā)明了用于分離凝集紅細(xì)胞的凝膠卡式檢測(cè)法。經(jīng)過(guò)不斷改進(jìn)和臨床的集紅細(xì)胞的凝膠卡式檢測(cè)法。經(jīng)過(guò)不斷改進(jìn)和臨床的大量應(yīng)用，目前在發(fā)達(dá)國(guó)家已作為大量應(yīng)用，目前在發(fā)達(dá)國(guó)家已作為臨床常規(guī)的紅細(xì)胞臨床常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測(cè)新技術(shù)血型血清學(xué)檢測(cè)新技術(shù)。 1994

8、 1994年凝膠卡式檢測(cè)法用于臨床常規(guī)的紅細(xì)胞血年凝膠卡式檢測(cè)法用于臨床常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測(cè)，已得到美國(guó)型血清學(xué)檢測(cè)，已得到美國(guó)FDAFDA權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)證。權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)證。凝膠酶試驗(yàn)酶法：酶法： 利用木瓜酶或菠蘿酶來(lái)破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸，利用木瓜酶或菠蘿酶來(lái)破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸，使細(xì)胞膜表面失去電荷，減少紅細(xì)胞間的排斥；同時(shí)暴使細(xì)胞膜表面失去電荷，減少紅細(xì)胞間的排斥；同時(shí)暴露某些隱蔽抗原，增強(qiáng)凝集反應(yīng)。主要用于一些不完全露某些隱蔽抗原，增強(qiáng)凝集反應(yīng)。主要用于一些不完全抗體的檢測(cè)?？贵w的檢測(cè)。凝膠凝集試驗(yàn) - 原理(2)w 標(biāo)準(zhǔn)化的孵育時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)化的孵育時(shí)間w 標(biāo)準(zhǔn)化的離心時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)化的離

9、心時(shí)間w 標(biāo)準(zhǔn)化的判讀標(biāo)準(zhǔn)化的判讀 - - 消除主觀因素對(duì)弱反應(yīng)結(jié)消除主觀因素對(duì)弱反應(yīng)結(jié)果的判讀果的判讀w 結(jié)果穩(wěn)定保存結(jié)果穩(wěn)定保存凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué)凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué)w 血型實(shí)驗(yàn)室中的一次革命血型實(shí)驗(yàn)室中的一次革命w 在全世界許多發(fā)達(dá)國(guó)家已被公認(rèn)為是常規(guī)在全世界許多發(fā)達(dá)國(guó)家已被公認(rèn)為是常規(guī)免疫血液學(xué)實(shí)驗(yàn)的免疫血液學(xué)實(shí)驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)金標(biāo)準(zhǔn)”。 19901990年，卡式檢測(cè)法的發(fā)明人年，卡式檢測(cè)法的發(fā)明人Dr. Yves LapierreDr. Yves Lapierre等用等用低離子強(qiáng)度鹽水法（試管法）、聚凝胺試驗(yàn)（試管法）和低離子強(qiáng)度鹽水法（試管法）、聚凝胺試驗(yàn)（試管法）和卡式檢測(cè)

10、法（凝膠）研究了卡式檢測(cè)法（凝膠）研究了400400例已知抗體的樣本。血清與例已知抗體的樣本。血清與細(xì)胞的比例是按照試管法標(biāo)準(zhǔn)配置。結(jié)果為：細(xì)胞的比例是按照試管法標(biāo)準(zhǔn)配置。結(jié)果為：卡式檢測(cè)法檢出卡式檢測(cè)法檢出359359例（檢出率為例（檢出率為90%90%）低離子強(qiáng)度鹽水法檢出低離子強(qiáng)度鹽水法檢出243243例（檢出率為例（檢出率為61%61%）聚凝胺試驗(yàn)檢出聚凝胺試驗(yàn)檢出301301例（檢出率為例（檢出率為75%75%）凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué)凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué)結(jié)果判斷模式結(jié)果判斷模式凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué)凝膠試驗(yàn)應(yīng)用于血型血清學(xué)4+ 紅細(xì)胞復(fù)合物（凝集）位于凝膠表面紅細(xì)胞復(fù)合物（凝

11、集）位于凝膠表面3+ 大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面，少部分位于凝膠中部大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面，少部分位于凝膠中部2+ 大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中部，少部分位于凝膠中上部大部分紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中部，少部分位于凝膠中上部1+ 紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中下部紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠中下部 與同一卡中陰性管結(jié)果對(duì)照，如與陰性結(jié)果有差別，即為與同一卡中陰性管結(jié)果對(duì)照，如與陰性結(jié)果有差別，即為 紅細(xì)胞完全沉積在凝膠管尖底部紅細(xì)胞完全沉積在凝膠管尖底部完全溶血完全溶血 凝膠和液體無(wú)凝集或未凝集的紅細(xì)胞，液體出現(xiàn)透明清澈紅色凝膠和液體無(wú)凝集或未凝集的紅細(xì)胞，液體出現(xiàn)透明清澈紅色不完全溶血不完全溶血 殘

12、留紅細(xì)胞在膠表面、膠中或膠底部，液體出現(xiàn)透明清澈紅色殘留紅細(xì)胞在膠表面、膠中或膠底部，液體出現(xiàn)透明清澈紅色混合凝集混合凝集 紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面和凝膠底部紅細(xì)胞復(fù)合物位于凝膠表面和凝膠底部反應(yīng)強(qiáng)度反應(yīng)強(qiáng)度現(xiàn)象及說(shuō)明現(xiàn)象及說(shuō)明 完全完全 不完全不完全 混混合凝集合凝集凝膠抗人球試驗(yàn)新技術(shù)新技術(shù)卡式檢測(cè)法：卡式檢測(cè)法： 19861986年法國(guó)年法國(guó)Dr.Yves LappierreDr.Yves Lappierre發(fā)明了用于分離凝發(fā)明了用于分離凝集紅細(xì)胞的凝膠卡式檢測(cè)法。經(jīng)過(guò)不斷改進(jìn)和臨床的集紅細(xì)胞的凝膠卡式檢測(cè)法。經(jīng)過(guò)不斷改進(jìn)和臨床的大量應(yīng)用，目前在發(fā)達(dá)國(guó)家已作為大量應(yīng)用，目前在發(fā)達(dá)國(guó)家已作為臨床常規(guī)的紅細(xì)胞臨床常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測(cè)新技術(shù)血型血清學(xué)檢測(cè)新技術(shù)。 1994 1994年凝膠卡式檢測(cè)法用于臨床常規(guī)的紅細(xì)胞血年凝膠卡式檢測(cè)法用于臨床常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測(cè)，已得到美國(guó)型血清學(xué)檢測(cè)，已得到美國(guó)FDAFDA權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)證。權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)證。凝膠酶試驗(yàn)酶法：酶法： 利用木瓜酶或菠蘿酶來(lái)破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸，利用木瓜酶或菠蘿酶來(lái)破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸，使細(xì)胞膜表面失去電荷，減少紅細(xì)胞間的排