第16章超敏反應(yīng)及其檢測(cè)1

1、第第1616章章 超敏反應(yīng)性疾病與免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病與免疫學(xué)檢驗(yàn)（hypersensitivity and immunoassays） 教學(xué)內(nèi)容教學(xué)內(nèi)容前前 言言 第一節(jié)第一節(jié) 型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)第二節(jié)第二節(jié) 型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng) 第三節(jié)第三節(jié) 型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)第四節(jié)第四節(jié) 型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)目的要求目的要求1 1掌握超敏反應(yīng)的概念、特點(diǎn)、分型；各型的發(fā)生機(jī)制。掌握超敏反應(yīng)的概念、特點(diǎn)、分型；各型的發(fā)生機(jī)制。2 2熟悉各型超敏反應(yīng)的免疫學(xué)檢測(cè)及臨床常見(jiàn)疾病。熟悉各型超敏反應(yīng)的免疫學(xué)檢測(cè)及臨床常見(jiàn)疾病。變態(tài)反應(yīng)變態(tài)反應(yīng)( (allergy) ) 超敏反應(yīng)超敏反應(yīng)( (hyperse

2、nsitivity) ) ： 是機(jī)體受抗原是機(jī)體受抗原持續(xù)刺激持續(xù)刺激或或再次再次受到相同抗受到相同抗原刺激后發(fā)生的一種原刺激后發(fā)生的一種異?；虿±硇援惓；虿±硇缘拿庖邞?yīng)答。的免疫應(yīng)答。變應(yīng)原變應(yīng)原(allergen )及及變應(yīng)原性質(zhì)變應(yīng)原性質(zhì) 類(lèi)型類(lèi)型：見(jiàn)下圖見(jiàn)下圖 I I型型( (速發(fā)型速發(fā)型) ) 最常見(jiàn)最常見(jiàn) 型型( (細(xì)胞毒型或細(xì)胞溶解型細(xì)胞毒型或細(xì)胞溶解型) ) 型型( (免疫復(fù)合物型或血管炎型免疫復(fù)合物型或血管炎型) ) 型型( (遲發(fā)型遲發(fā)型) )特點(diǎn)特點(diǎn)：特異性，記憶性，病理性，可轉(zhuǎn)移性。：特異性，記憶性，病理性，可轉(zhuǎn)移性。類(lèi)型類(lèi)型（1963年年Gell和和Coombs） I

3、 I型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)速發(fā)型超敏反應(yīng)IIII型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)IIIIII型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)細(xì)胞毒型超敏反應(yīng)免疫復(fù)合物型超敏反應(yīng)遲發(fā)型超敏反應(yīng)第一節(jié)第一節(jié) I型超敏反應(yīng)性疾病與免疫學(xué)檢驗(yàn)型超敏反應(yīng)性疾病與免疫學(xué)檢驗(yàn) 特點(diǎn)：特點(diǎn)：主要由主要由IgE抗體介導(dǎo)，發(fā)作迅速、強(qiáng)烈，但消退亦快；抗體介導(dǎo)，發(fā)作迅速、強(qiáng)烈，但消退亦快；常引起機(jī)體生理功能紊亂，但無(wú)嚴(yán)重的組織細(xì)胞損傷；常引起機(jī)體生理功能紊亂，但無(wú)嚴(yán)重的組織細(xì)胞損傷；有明顯的個(gè)體差異，與機(jī)體的遺傳素質(zhì)有關(guān)；有明顯的個(gè)體差異，與機(jī)體的遺傳素質(zhì)有關(guān)；效應(yīng)器官：平滑肌，粘膜，毛細(xì)血管，皮膚等。效應(yīng)器官：平滑肌，粘膜，毛細(xì)血管，

4、皮膚等。 特應(yīng)性素質(zhì)個(gè)體：特應(yīng)性素質(zhì)個(gè)體： 過(guò)程：速發(fā)相和遲發(fā)相。過(guò)程：速發(fā)相和遲發(fā)相。一、發(fā)生機(jī)制一、發(fā)生機(jī)制( (一一) )致敏階段致敏階段1 1變應(yīng)原變應(yīng)原 如圖如圖 吸人性變應(yīng)原吸人性變應(yīng)原 食入性變應(yīng)原食入性變應(yīng)原 某些藥物某些藥物 動(dòng)物免疫血清動(dòng)物免疫血清 2 2特異性特異性IgE抗體的產(chǎn)生抗體的產(chǎn)生 3 3IgE與效應(yīng)細(xì)胞表面與效應(yīng)細(xì)胞表面FcR結(jié)合結(jié)合 效應(yīng)細(xì)胞的致敏，機(jī)體致敏狀態(tài)形成。效應(yīng)細(xì)胞的致敏，機(jī)體致敏狀態(tài)形成。 嗜酸粒細(xì)胞作用：雙重性。嗜酸粒細(xì)胞作用：雙重性。能夠誘導(dǎo)變態(tài)反應(yīng)的抗能夠誘導(dǎo)變態(tài)反應(yīng)的抗原性物質(zhì)。原性物質(zhì)。( (二二) )發(fā)敏階段發(fā)敏階段 1 1效應(yīng)細(xì)胞活

5、化和脫顆粒效應(yīng)細(xì)胞活化和脫顆粒 2 2活性介質(zhì)釋放活性介質(zhì)釋放 (1)(1)預(yù)存介質(zhì)：預(yù)存介質(zhì)： 組胺組胺(histamine) 激肽原酶激肽原酶(kininogenase) 嗜酸粒細(xì)胞趨化因子嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(eosinophil chemotactic factor of anaphylaxis，ECF-A)( (三三) )效應(yīng)階段效應(yīng)階段 (2)(2)新合成的介質(zhì)：新合成的介質(zhì)： 前列腺素前列腺素D2(prostaglandin D2，PGD2)： 白三烯白三烯(1eukotriene，LT)： 血小板活化因子血小板活化因子( (platelet activating factor，

6、PAF)： 細(xì)胞因子：細(xì)胞因子：IL-4、 IL-13等，可促進(jìn)等，可促進(jìn)Th2細(xì)胞應(yīng)答和細(xì)胞應(yīng)答和B 細(xì)胞向細(xì)胞向IgE類(lèi)型類(lèi)型轉(zhuǎn)換。轉(zhuǎn)換。靜息肥大細(xì)胞靜息肥大細(xì)胞激活后激活后5 5分鐘分鐘激活后激活后6060分鐘分鐘型超敏反應(yīng)的發(fā)生過(guò)程和發(fā)生機(jī)制型超敏反應(yīng)的發(fā)生過(guò)程和發(fā)生機(jī)制二、臨床常見(jiàn)疾病二、臨床常見(jiàn)疾病( (一一) )過(guò)敏性休克過(guò)敏性休克 1 1藥物過(guò)敏性休克藥物過(guò)敏性休克 2 2血清過(guò)敏性休克血清過(guò)敏性休克 ( (二二) )呼吸道過(guò)敏反應(yīng)呼吸道過(guò)敏反應(yīng) 1 1支氣管哮喘支氣管哮喘 2 2過(guò)敏性鼻炎過(guò)敏性鼻炎 ( (三三) )消化道過(guò)敏反應(yīng)消化道過(guò)敏反應(yīng)( (四四) )皮膚過(guò)敏反應(yīng)皮膚

7、過(guò)敏反應(yīng)三、免疫學(xué)檢驗(yàn)三、免疫學(xué)檢驗(yàn)型超敏反應(yīng)性疾病的診斷型超敏反應(yīng)性疾病的診斷 詳盡的病史、體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)詳盡的病史、體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)。 （一）皮膚試驗(yàn)（一）皮膚試驗(yàn)( (skin test) ) 原理、部位、類(lèi)型、方法及結(jié)果判定原理、部位、類(lèi)型、方法及結(jié)果判定 (1) (1)皮內(nèi)試驗(yàn)皮內(nèi)試驗(yàn)( (intracutaneous test) ) 注意：注意： 設(shè)置陽(yáng)性及陰性對(duì)照。設(shè)置陽(yáng)性及陰性對(duì)照。 搶救準(zhǔn)備，藥物及儀器。搶救準(zhǔn)備，藥物及儀器。 假性現(xiàn)象。假性現(xiàn)象。相同超敏原不同稀釋度相同超敏原不同稀釋度 速發(fā)型速發(fā)型151530min30min內(nèi)觀(guān)察內(nèi)觀(guān)察 遲發(fā)型遲發(fā)型484872h7

8、2h內(nèi)觀(guān)察內(nèi)觀(guān)察0.010.010.03ml/0.03ml/針針4mm/針針?lè)椒ńY(jié)果皮內(nèi)試驗(yàn)皮內(nèi)試驗(yàn)l 比皮內(nèi)試驗(yàn)敏感性稍低，但假陽(yáng)性較少；比皮內(nèi)試驗(yàn)敏感性稍低，但假陽(yáng)性較少；l 皮試液濃度要比皮內(nèi)試驗(yàn)高皮試液濃度要比皮內(nèi)試驗(yàn)高1010100100倍。倍。將試驗(yàn)抗原與對(duì)照液分別將試驗(yàn)抗原與對(duì)照液分別滴于試驗(yàn)部位的皮膚上滴于試驗(yàn)部位的皮膚上用針尖透過(guò)液滴輕挑一下用針尖透過(guò)液滴輕挑一下以刺破皮膚而不出血為度以刺破皮膚而不出血為度1min后拭（吸）去試驗(yàn)抗原液后拭（吸）去試驗(yàn)抗原液點(diǎn)刺試驗(yàn)點(diǎn)刺試驗(yàn)速發(fā)型皮膚試驗(yàn)的結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)分級(jí) 皮皮 內(nèi)內(nèi) 試試 驗(yàn)驗(yàn) 點(diǎn)點(diǎn) 刺刺 試試 驗(yàn)驗(yàn)-無(wú)風(fēng)團(tuán)或小于陰性對(duì)

9、照無(wú)風(fēng)團(tuán)反應(yīng)或小于陰性對(duì)照+風(fēng)團(tuán)35mm、紅暈20mm無(wú)風(fēng)團(tuán),陰性對(duì)照紅暈20mm+風(fēng)團(tuán)69mm伴紅暈無(wú)風(fēng)團(tuán)，紅暈20mm+風(fēng)團(tuán)1015mm伴紅暈風(fēng)團(tuán)伴紅暈+風(fēng)團(tuán)15mm伴紅暈和偽足風(fēng)團(tuán)伴紅暈和偽足遲發(fā)型皮試結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)程度反應(yīng)程度 結(jié)果判定結(jié)果判定 -無(wú)反應(yīng)或小于陰性對(duì)照 +僅有紅腫 +紅腫伴硬結(jié) +紅腫、硬結(jié)、小皰 +大皰或/和潰瘍l第一次讀：第一次讀：4848小時(shí)打開(kāi)斑試器小時(shí)打開(kāi)斑試器, ,間隔間隔3030min待斑試器待斑試器 壓痕消失后判定結(jié)果。壓痕消失后判定結(jié)果。l第二次讀：第第二次讀：第3 3天或第天或第4 4天。天。l如懷疑光過(guò)敏，在斑貼試驗(yàn)的基礎(chǔ)上給予紫外線(xiàn)照如懷疑光過(guò)

10、敏，在斑貼試驗(yàn)的基礎(chǔ)上給予紫外線(xiàn)照 射，操作過(guò)程相似。射，操作過(guò)程相似。 斑貼試驗(yàn)斑貼試驗(yàn)斑貼試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)程度結(jié)果判定 無(wú)反應(yīng)或小于陰性對(duì)照 +輕度紅腫、搔癢 +明顯紅腫、時(shí)有紅斑 +紅腫伴皮疹、水皰 +紅腫、水皰伴潰瘍（三）結(jié)果分析及注意事項(xiàng)（三）結(jié)果分析及注意事項(xiàng) l假陽(yáng)性出現(xiàn)的常見(jiàn)原因： 皮試液含有非特異性刺激物； 患者患有皮膚劃痕征； 操作手法較重； 注入量較大或濃度過(guò)高； 注入少量空氣等。l詢(xún)問(wèn)病史詢(xún)問(wèn)病史陽(yáng)性對(duì)照l(shuí)必備搶救藥品和設(shè)施必備搶救藥品和設(shè)施如何避免假性結(jié)果的出現(xiàn)如何避免假性結(jié)果的出現(xiàn)：適應(yīng)證陰性對(duì)照皮試液濃度應(yīng)用與評(píng)價(jià)應(yīng)用與評(píng)價(jià) l預(yù)防藥物或疫苗等過(guò)敏預(yù)防藥物或疫

11、苗等過(guò)敏 l防治防治型超敏反應(yīng)性疾病型超敏反應(yīng)性疾病 l結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)核菌素試驗(yàn)l評(píng)估機(jī)體細(xì)胞免疫功能評(píng)估機(jī)體細(xì)胞免疫功能 l預(yù)防皮膚接觸過(guò)敏預(yù)防皮膚接觸過(guò)敏假陽(yáng)性：假陽(yáng)性：皮試液不純，含有非特異性刺激物；皮試液不純，含有非特異性刺激物；患者皮膚反應(yīng)過(guò)強(qiáng)，如患者皮膚劃痕癥陽(yáng)性；患者皮膚反應(yīng)過(guò)強(qiáng)，如患者皮膚劃痕癥陽(yáng)性；操作者手法較重，注射量較大或濃度過(guò)高、注入少量空操作者手法較重，注射量較大或濃度過(guò)高、注入少量空 氣等。氣等。假陰性：假陰性：皮試液抗原性低或失效；皮試液抗原性低或失效；患者皮膚反應(yīng)性差如老年人，或疾病大發(fā)作后；患者皮膚反應(yīng)性差如老年人，或疾病大發(fā)作后；皮試前使用過(guò)抗組胺藥物或免疫

12、抑制劑等。皮試前使用過(guò)抗組胺藥物或免疫抑制劑等。(2)(2)點(diǎn)刺試驗(yàn)點(diǎn)刺試驗(yàn)( (prick test) )：方法：方法：注意：注意： 設(shè)置陽(yáng)性及陰性對(duì)照。設(shè)置陽(yáng)性及陰性對(duì)照。 搶救準(zhǔn)備。搶救準(zhǔn)備。 假性現(xiàn)象。假性現(xiàn)象。 2 2應(yīng)用與評(píng)價(jià)應(yīng)用與評(píng)價(jià) 真實(shí)、客觀(guān)，與其他檢測(cè)相關(guān)性強(qiáng)。真實(shí)、客觀(guān)，與其他檢測(cè)相關(guān)性強(qiáng)。預(yù)防原則：尋找變應(yīng)原，避免接觸。預(yù)防原則：尋找變應(yīng)原，避免接觸。 (1)(1)尋找變應(yīng)原：尋找變應(yīng)原： (2) (2)預(yù)防藥物或疫苗過(guò)敏：預(yù)防藥物或疫苗過(guò)敏：( (二二) )粘膜激發(fā)試驗(yàn)粘膜激發(fā)試驗(yàn)( (provocation test) ) 是模擬自然途徑，使變應(yīng)原進(jìn)人體內(nèi)，引起是模

13、擬自然途徑，使變應(yīng)原進(jìn)人體內(nèi)，引起一一 次輕微的發(fā)作，用以確定變應(yīng)原的試驗(yàn)。次輕微的發(fā)作，用以確定變應(yīng)原的試驗(yàn)。 注意：注意：嚴(yán)格的對(duì)照；搶救措施。嚴(yán)格的對(duì)照；搶救措施。1 1支氣管激發(fā)試驗(yàn)支氣管激發(fā)試驗(yàn) (1) (1)非特異性激發(fā)試驗(yàn)：非特異性激發(fā)試驗(yàn)： 常用指標(biāo)：常用指標(biāo)：第第1s1s用力呼氣量用力呼氣量( (FEV-1) )和肺活量；和肺活量； 1520min后復(fù)查后復(fù)查FEV-1； 陽(yáng)性：陽(yáng)性： 明顯自覺(jué)癥狀，如胸部緊迫感和喘息等；明顯自覺(jué)癥狀，如胸部緊迫感和喘息等； 肺部聞及哮鳴音；肺部聞及哮鳴音； FEV-1下降下降2020以上。以上。 目的：目的： (2) (2)變應(yīng)原激發(fā)試驗(yàn)：

14、變應(yīng)原激發(fā)試驗(yàn)： (3) (3)應(yīng)用評(píng)價(jià)：特異性高，與患者的病史、癥狀和應(yīng)用評(píng)價(jià)：特異性高，與患者的病史、癥狀和 過(guò)敏原吸附試驗(yàn)的相關(guān)性較強(qiáng)。過(guò)敏原吸附試驗(yàn)的相關(guān)性較強(qiáng)。 2其他激發(fā)試驗(yàn)其他激發(fā)試驗(yàn) (1)鼻黏膜激發(fā)試驗(yàn)：鼻黏膜激發(fā)試驗(yàn)： (2)食物和藥物激發(fā)試驗(yàn)：食物和藥物激發(fā)試驗(yàn)： (3)結(jié)膜激發(fā)試驗(yàn)：結(jié)膜激發(fā)試驗(yàn)： ( (三三) )血清血清IgEIgE的檢測(cè)的檢測(cè)1 1血清總血清總IgEIgE的測(cè)定的測(cè)定 (1)ELISA：雙抗體夾心法。：雙抗體夾心法。 (2)放射免疫吸附試驗(yàn)放射免疫吸附試驗(yàn)(radioimmunosorbent test，RIST)； (3)化學(xué)發(fā)光法：化學(xué)發(fā)光法：

15、參考值參考值：成人血清：成人血清IgE水平在水平在20200IUml (1IU=24ng)。意義：疾病。意義：疾病。注意：注意：總總IgE高不一定是超敏反應(yīng)；高不一定是超敏反應(yīng)； 而過(guò)敏者總而過(guò)敏者總IgE也不一定升高。也不一定升高。 2 2特異性特異性IgEIgE測(cè)定測(cè)定 (specific IgE，sIgE) (1)放射性變應(yīng)原吸附試驗(yàn)放射性變應(yīng)原吸附試驗(yàn)(radioallergosorbent test， RAST)： 1967年由年由Wide建立建立 原理：固相載體原理：固相載體-變應(yīng)原變應(yīng)原-sIgE-125I標(biāo)記的抗人標(biāo)記的抗人IgE (2)ELISA (3)CAP變應(yīng)原檢測(cè)系統(tǒng)變

16、應(yīng)原檢測(cè)系統(tǒng)(CAP system)： 瑞典瑞典Pharmacia公司推出公司推出 原理：熒光固相免疫檢測(cè)系統(tǒng)。其載體為原理：熒光固相免疫檢測(cè)系統(tǒng)。其載體為CAP。 單價(jià)變應(yīng)原單價(jià)變應(yīng)原CAP， 多價(jià)變應(yīng)原多價(jià)變應(yīng)原CAP。（4）免疫芯片）免疫芯片意義：專(zhuān)一性檢測(cè)變應(yīng)原。意義：專(zhuān)一性檢測(cè)變應(yīng)原。 (5)吸入物變應(yīng)原過(guò)篩試驗(yàn)吸入物變應(yīng)原過(guò)篩試驗(yàn)(Phadiatop)：原理：原理： Sample CAP，變應(yīng)原吸附，將空氣中，變應(yīng)原吸附，將空氣中95 以上的氣傳變應(yīng)原吸附到以上的氣傳變應(yīng)原吸附到1個(gè)個(gè)CAP上，患者上，患者 血清中只要有針對(duì)這些變應(yīng)原其中之一的血清中只要有針對(duì)這些變應(yīng)原其中之一的

17、sIgE，即可呈陽(yáng)性反應(yīng)。，即可呈陽(yáng)性反應(yīng)。用途：過(guò)篩試驗(yàn)。用途：過(guò)篩試驗(yàn)。 ( (四四) )嗜酸粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白測(cè)定嗜酸粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白測(cè)定 (eosinophil cationic protein，ECP) 作用：作用： 標(biāo)本：肺泡灌洗液和標(biāo)本：肺泡灌洗液和空腹血清空腹血清ECP 測(cè)定方法：測(cè)定方法：CAP system雙抗體夾心法。雙抗體夾心法。 ELISA ( (五五) )嗜酸粒細(xì)胞涂片檢查嗜酸粒細(xì)胞涂片檢查 標(biāo)本：分泌物，排泄物。標(biāo)本：分泌物，排泄物。 ( (六六) )嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒試驗(yàn)嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒試驗(yàn)原理：原理： 方法：方法：外周血分離嗜堿粒細(xì)胞外周血分離嗜堿粒細(xì)胞+變應(yīng)原變

18、應(yīng)原 染色染色判定：與對(duì)照比較，嗜堿粒細(xì)胞數(shù)減少判定：與對(duì)照比較，嗜堿粒細(xì)胞數(shù)減少 30以上時(shí)為陽(yáng)以上時(shí)為陽(yáng) 性。性。 評(píng)價(jià)；與評(píng)價(jià)；與RAST和皮膚試驗(yàn)的符合率較高，可用于和皮膚試驗(yàn)的符合率較高，可用于 尋找過(guò)敏原及判斷脫敏治療的療效。尋找過(guò)敏原及判斷脫敏治療的療效。第二節(jié)第二節(jié) 型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng) 特點(diǎn)：特點(diǎn)：抗體抗體(主要為主要為IgG或或IgM類(lèi)類(lèi))，補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞和，補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞和 NK細(xì)胞，導(dǎo)致靶細(xì)胞損傷或破壞。細(xì)胞，導(dǎo)致靶細(xì)胞損傷或破壞。 細(xì)胞溶解型或細(xì)胞毒性超敏反應(yīng)。細(xì)胞溶解型或細(xì)胞毒性超敏反應(yīng)。一、發(fā)生機(jī)制一、發(fā)生機(jī)制 (一一)抗原刺激抗原刺激 1細(xì)胞膜固有抗原細(xì)胞膜固有抗原 血細(xì)胞表面同種異型抗原血細(xì)胞表面同種異