艾滋病實(shí)驗(yàn)室檢查學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1艾滋病實(shí)驗(yàn)室檢查艾滋病實(shí)驗(yàn)室檢查(jinch)第一頁，共20頁。2第1頁/共19頁第二頁，共20頁。3第2頁/共19頁第三頁，共20頁。4第3頁/共19頁第四頁，共20頁。5血清學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)(jin c)（）（）第4頁/共19頁第五頁，共20頁。6測(cè)定測(cè)定(cdng)p24(cdng)p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特異性稍差（可有假陽性）特異性稍差（可有假陽性）第5頁/共19頁第六頁，共20頁。7 核酸定量技術(shù)原理PCRPCR：高溫：高溫(gown)(gown)變性變性(94)(94)低溫退低溫退火火(55)(55)適溫延伸適溫延伸(

2、72)(72)；經(jīng)；經(jīng)25302530個(gè)循環(huán)，成倍數(shù)擴(kuò)增個(gè)循環(huán)，成倍數(shù)擴(kuò)增熒光定量熒光定量PCRPCR：比常規(guī)：比常規(guī)PCRPCR多一個(gè)寡聚核多一個(gè)寡聚核苷酸探針（帶一個(gè)熒光發(fā)光分子和一苷酸探針（帶一個(gè)熒光發(fā)光分子和一個(gè)熒光淬滅分子）個(gè)熒光淬滅分子）應(yīng)用：應(yīng)用：PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA；RT-PCRRT-PCR查查血漿中的病毒血漿中的病毒RNARNA第6頁/共19頁第七頁，共20頁。8淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞HIV RNAHIV RNA檢測(cè)檢測(cè)(jin c)(jin c)NorthernNorthern印跡雜交印跡雜交(Northern blot)(Northern

3、 blot) 原理原理(yunl)(yunl)： RNA RNA片段經(jīng)電泳分片段經(jīng)電泳分離，從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾離，從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜，再用探針雜交膜，再用探針雜交第7頁/共19頁第八頁，共20頁。9 原理：核酸擴(kuò)增時(shí)，核苷酸在某原理：核酸擴(kuò)增時(shí)，核苷酸在某一固定點(diǎn)開始，隨機(jī)在某一特一固定點(diǎn)開始，隨機(jī)在某一特定的堿基處終止，產(chǎn)生定的堿基處終止，產(chǎn)生A、T、C、G四組不同長(zhǎng)度的一系列核四組不同長(zhǎng)度的一系列核苷酸，通過在尿素苷酸，通過在尿素(nio s)變變性的性的PAGE膠上電泳，獲得膠上電泳，獲得DNA序列序列第8頁/共19頁第九頁，共20頁。10第9頁/共19頁第十頁，共20

4、頁。11第10頁/共19頁第十一頁，共20頁。12染。染。第11頁/共19頁第十二頁，共20頁。13第12頁/共19頁第十三頁，共20頁。14第13頁/共19頁第十四頁，共20頁。15 HIV抗體陽性抗體陽性 CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)淋巴細(xì)胞數(shù)200/mm3 無上述表現(xiàn)無上述表現(xiàn)(bioxin)或癥狀或癥狀第14頁/共19頁第十五頁，共20頁。16第15頁/共19頁第十六頁，共20頁。17第16頁/共19頁第十七頁，共20頁。18第17頁/共19頁第十八頁，共20頁。19第18頁/共19頁第十九頁，共20頁。NoImage內(nèi)容(nirng)總結(jié)會(huì)計(jì)學(xué)。HIV抗原檢測(cè)ELISA夾心法。PCR：高溫變性(94)低溫退火(55)適溫延伸(72)。熒光(ynggung)定量PCR：比常規(guī)PCR多一個(gè)寡聚核苷酸探針（帶一個(gè)熒光(ynggung)發(fā)光分子和一個(gè)熒光(ynggung)淬滅分子）。原理： RNA片段經(jīng)電泳分離，從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜，再用探針雜交。HIV變