熟悉水稻苗期稻瘟病癥狀特征ppt課件

1、實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定1 1、熟悉水稻苗期稻瘟病的癥狀特征。、熟悉水稻苗期稻瘟病的癥狀特征。2 2、學(xué)習(xí)水稻苗期稻瘟病的鑒定方法。、學(xué)習(xí)水稻苗期稻瘟病的鑒定方法。一、目的 實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定二、內(nèi)容說明 水稻稻瘟病水稻稻瘟病Pyricularia oryzae是是水稻生產(chǎn)上的主要病害之一。它是一種水稻生產(chǎn)上的主要病害之一。它是一種真菌病害，分布范圍及廣，遍及世界及真菌病害，分布范圍及廣，遍及世界及我國各個稻區(qū)，流行速度極快，對水稻我國各個稻區(qū)，流行速度極快，對水稻的危害極大。根據(jù)稻瘟病發(fā)生的時期和的危害極大。根據(jù)稻

2、瘟病發(fā)生的時期和部位，可分為苗瘟、葉瘟、節(jié)瘟、頸瘟部位，可分為苗瘟、葉瘟、節(jié)瘟、頸瘟和粒瘟。以葉瘟發(fā)生最早，在秧苗時期和粒瘟。以葉瘟發(fā)生最早，在秧苗時期就可以發(fā)生，并可以進行鑒定。就可以發(fā)生，并可以進行鑒定。實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定 雖然有些品種具有高度抗稻瘟病的特雖然有些品種具有高度抗稻瘟病的特性，但是由于病源菌的生理小種變異頻性，但是由于病源菌的生理小種變異頻繁，抗病品種的抗性容易喪失，很快會繁，抗病品種的抗性容易喪失，很快會變?yōu)楦胁⌒汀＿@些并非是品種抗病性的變?yōu)楦胁⌒?。這些并非是品種抗病性的改變，而是由于病源菌生理小種的頻繁改變，而是由于病源菌生理小種

3、的頻繁變化所致。必須不斷了解病原菌的變化，變化所致。必須不斷了解病原菌的變化，并不斷選育出新的抗病品種用于生產(chǎn)，并不斷選育出新的抗病品種用于生產(chǎn)，才能有效地控制病害。才能有效地控制病害。實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定 稻瘟病發(fā)生和流行的環(huán)境條件，溫度以稻瘟病發(fā)生和流行的環(huán)境條件，溫度以25-28最為適宜，空氣相對濕度為最為適宜，空氣相對濕度為96%以上最為以上最為適宜。這時菌絲發(fā)育和分生孢子形成均有利。適宜。這時菌絲發(fā)育和分生孢子形成均有利。分生孢子的萌發(fā)還要求有水滴存在。光照對孢分生孢子的萌發(fā)還要求有水滴存在。光照對孢子的形成、萌發(fā)、浸入都有抑制作用。分生孢子的

4、形成、萌發(fā)、浸入都有抑制作用。分生孢子萌發(fā)后，浸入組織，經(jīng)四天的潛育期就可出子萌發(fā)后，浸入組織，經(jīng)四天的潛育期就可出現(xiàn)病班，稻株易感病的生育時期是四葉期、分現(xiàn)病班，稻株易感病的生育時期是四葉期、分蘗期和穗期。偏施氮肥和排灌不良易導(dǎo)至稻瘟蘗期和穗期。偏施氮肥和排灌不良易導(dǎo)至稻瘟病的發(fā)生和流行。稻瘟病的鑒定方法分為人工病的發(fā)生和流行。稻瘟病的鑒定方法分為人工接種鑒定和自然鑒定兩種。前者常用于苗瘟和接種鑒定和自然鑒定兩種。前者常用于苗瘟和葉瘟的鑒定，后者可用于苗瘟、葉瘟、枝梗瘟葉瘟的鑒定，后者可用于苗瘟、葉瘟、枝梗瘟和頸病等的鑒定。和頸病等的鑒定。 實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟

5、病抗性鑒定三、所需用品和操作方法三、所需用品和操作方法 （一所需用品（一所需用品1、資料：、資料：（1抗感稻瘟病特性不同的水稻品種材料數(shù)個。抗感稻瘟病特性不同的水稻品種材料數(shù)個。（2供試稻瘟病菌種。從當?shù)厥占植紡V、致供試稻瘟病菌種。從當?shù)厥占植紡V、致病力強的主要稻瘟菌代表性生理小種，將不同病力強的主要稻瘟菌代表性生理小種，將不同小種分別進行培養(yǎng)繁殖，接種時混合使用。小種分別進行培養(yǎng)繁殖，接種時混合使用。實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定2、儀器和用品、儀器和用品 高壓滅菌鍋、超凈工作臺，酒精燈、恒溫培高壓滅菌鍋、超凈工作臺，酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱，三角瓶、培養(yǎng)皿、接種

6、環(huán)、搪瓷盤、顯養(yǎng)箱，三角瓶、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、搪瓷盤、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、紗布、普通噴霧器或微鏡、載玻片、蓋玻片、紗布、普通噴霧器或醫(yī)用噴頭噴霧器、注射器、橡膠管、保溫保濕醫(yī)用噴頭噴霧器、注射器、橡膠管、保溫保濕遮陽用品等。遮陽用品等。3、藥品、藥品 可溶性淀粉、酵母、瓊脂、大麥或高梁種可溶性淀粉、酵母、瓊脂、大麥或高梁種子、無菌水等。子、無菌水等。 本實驗將涉及到以下的器具本實驗將涉及到以下的器具: 實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定（二操作方法（二操作方法1 1、人工接種鑒定法、人工接種鑒定法（1 1制備菌種采用酵母淀粉瓊脂培養(yǎng)基制備菌種采用酵母淀粉瓊脂培養(yǎng)基

7、將瓊脂將瓊脂10-15g10-15g放入放入1000ml1000ml水中加熱溶化，水中加熱溶化，再加入可容性淀粉或蔗糖再加入可容性淀粉或蔗糖10g10g，酵母，酵母2g2g，分裝，分裝入試管中，進行高壓滅菌。取出后制成斜面，接入試管中，進行高壓滅菌。取出后制成斜面，接入所采集的稻瘟菌菌種，放在入所采集的稻瘟菌菌種，放在26-2826-28恒溫箱中培恒溫箱中培養(yǎng)養(yǎng)3-43-4天后，搖動三角瓶中的大麥粒，使菌絲均勻天后，搖動三角瓶中的大麥粒，使菌絲均勻生長。待菌絲體長滿大麥粒并變黑時，用自來水生長。待菌絲體長滿大麥粒并變黑時，用自來水沖洗大麥粒上的菌絲，再將大麥粒薄攤于搪瓷盤沖洗大麥粒上的菌絲，再

8、將大麥粒薄攤于搪瓷盤中，用中，用1-21-2層紗布覆蓋以保濕，置于層紗布覆蓋以保濕，置于25-2825-28下培下培養(yǎng)養(yǎng)4848小時，即可產(chǎn)生出大量孢子，可供接種之用。小時，即可產(chǎn)生出大量孢子，可供接種之用。應(yīng)注意在擴大繁殖時搪瓷盤內(nèi)的濕度不宜保持過應(yīng)注意在擴大繁殖時搪瓷盤內(nèi)的濕度不宜保持過高，否則只長大量菌絲，而產(chǎn)孢子很少。高，否則只長大量菌絲，而產(chǎn)孢子很少。實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定 病病原原菌菌的的一一級級培培養(yǎng)養(yǎng)繁繁殖殖實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定 病病原原菌菌的的二二級級培培養(yǎng)養(yǎng)繁繁殖殖實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實

9、驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定（2 2育秧育秧 將各供試水稻材料的種子進行粒選，各取將各供試水稻材料的種子進行粒選，各取30-4030-40粒種子，經(jīng)消毒、沖洗、催芽后，在盛粒種子，經(jīng)消毒、沖洗、催芽后，在盛有肥沃泥土的搪瓷盤中育秧。每個盤中最好同有肥沃泥土的搪瓷盤中育秧。每個盤中最好同時安排有感病和抗病品種作對照。在幼苗時安排有感病和抗病品種作對照。在幼苗2 2葉葉期定株，每個材料選留期定株，每個材料選留1010株生長一致的秧苗。株生長一致的秧苗。定株后酌施定株后酌施2-32-3次氮肥，最后一次施氮肥應(yīng)在次氮肥，最后一次施氮肥應(yīng)在接種前接種前3-43-4天施用，使幼苗生長嫩綠。一般在天施用，使

10、幼苗生長嫩綠。一般在3-43-4葉期接種。如采用注射接種鑒定法，可在葉期接種。如采用注射接種鑒定法，可在秧田中育秧，移植于大田后進行接種鑒定。秧田中育秧，移植于大田后進行接種鑒定。 要注意以下幾點：要注意以下幾點： 實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定適時播種適時播種 既要考慮到在自然條件下的濕度和溫度，最利既要考慮到在自然條件下的濕度和溫度，最利于病菌的浸入，發(fā)病與流行，又要使供試材料正是最易于病菌的浸入，發(fā)病與流行，又要使供試材料正是最易感病的生育時期，一般在感病的生育時期，一般在3 34 4葉期，日平均氣溫葉期，日平均氣溫252528 28 和陰雨高濕，葉面長時間

11、和陰雨高濕，葉面長時間1212小時以上常有水小時以上常有水珠的時期，最有利于發(fā)病。珠的時期，最有利于發(fā)病。育秧方式育秧方式 采用育秧盤育秧，每盤中最好都安排感病品種采用育秧盤育秧，每盤中最好都安排感病品種對照，整個鑒定材料中還應(yīng)安排品種對照。采用注射接對照，整個鑒定材料中還應(yīng)安排品種對照。采用注射接種方法，可以在秧田育秧，后移植于本田。種方法，可以在秧田育秧，后移植于本田。苗床要增施氮肥接種前苗床要增施氮肥接種前4 45 5天），以利于發(fā)病。天），以利于發(fā)病。實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定（3 3接種接種噴霧接種：當秧苗達噴霧接種：當秧苗達3-43-4葉期時，先按

12、病菌小種葉期時，先按病菌小種分別配制孢子懸浮液，用分別配制孢子懸浮液，用100100倍顯微鏡檢孢子倍顯微鏡檢孢子密度，平均每個視野應(yīng)有孢子密度，平均每個視野應(yīng)有孢子20-2520-25個孢密個孢密度則為度則為20-2520-25萬個萬個/ml/ml）。然后將不同生理小種）。然后將不同生理小種的孢子懸浮液混合，用于接種。采用專用噴霧的孢子懸浮液混合，用于接種。采用專用噴霧器噴霧接種。噴霧時要將葉片充分均勻濕潤。器噴霧接種。噴霧時要將葉片充分均勻濕潤。接種后，在接種后，在26-2826-28下，用薄膜覆蓋保濕下，用薄膜覆蓋保濕2424小小時。然后移至室外，在時。然后移至室外，在20-3020-30

13、下保持高濕，下保持高濕，培養(yǎng)培養(yǎng)7 7天，進行病情鑒定。天，進行病情鑒定。實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定【孢子懸浮液的配制】將上述產(chǎn)生孢子的大麥粒放入盛【孢子懸浮液的配制】將上述產(chǎn)生孢子的大麥粒放入盛有自來水的燒杯中經(jīng)攪拌制成孢子懸浮液，其孢子濃有自來水的燒杯中經(jīng)攪拌制成孢子懸浮液，其孢子濃度在度在100100倍顯微鏡下觀察，平均每個視野倍顯微鏡下觀察，平均每個視野20202525個個mlml，隨后將不同小種的孢子懸浮液混合成混合孢子懸浮液。隨后將不同小種的孢子懸浮液混合成混合孢子懸浮液。 【接種】用專用的普通噴霧器或醫(yī)用喉頭噴霧器噴霧接【接種】用專用的普通噴霧器

14、或醫(yī)用喉頭噴霧器噴霧接種。噴霧時要使葉片上布滿均勻的霧點。接種最好是種。噴霧時要使葉片上布滿均勻的霧點。接種最好是在專用接種室內(nèi)進行，便于保濕保溫。在專用接種室內(nèi)進行，便于保濕保溫?！颈亍⒈窈驼趶姽狻颈?、保濕和遮強光 】噴霧接種后，秧苗應(yīng)在】噴霧接種后，秧苗應(yīng)在26262828和保持葉片上有水珠的濕度條件下和保持葉片上有水珠的濕度條件下2424小時，而后小時，而后移于室外移于室外, ,在在20203030下，經(jīng)下，經(jīng)4 4天左右即可見發(fā)病。天左右即可見發(fā)病。實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定注射接種：注射接種：【孢子懸浮液的配制】與【孢子懸浮液的配制】與“噴霧接

15、種一樣。噴霧接種一樣?！窘臃N】一般在水稻【接種】一般在水稻6 67 7葉期分蘗進行，接葉期分蘗進行，接種的分蘗必須有一張未展開的嫩心葉，使用種的分蘗必須有一張未展開的嫩心葉，使用醫(yī)用皮下注射器從葉鞘外側(cè)注入孢子懸浮液，醫(yī)用皮下注射器從葉鞘外側(cè)注入孢子懸浮液，直到多余菌液從心葉中冒出為止。接種后直到多余菌液從心葉中冒出為止。接種后7 7天調(diào)查植株的發(fā)病情況。天調(diào)查植株的發(fā)病情況?！咀⒁狻窟@種方法把菌液直接注射到葉鞘內(nèi)，【注意】這種方法把菌液直接注射到葉鞘內(nèi)，使心葉較長時間處于浸漬狀態(tài)，保證了濕度，使心葉較長時間處于浸漬狀態(tài)，保證了濕度，因而，發(fā)病往往較噴霧法重，一般條件的情因而，發(fā)病往往較噴霧法

16、重，一般條件的情況下采用。況下采用。實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定2、自然誘發(fā)法、自然誘發(fā)法 選擇稻瘟病重病區(qū)，在多霧天氣和陰選擇稻瘟病重病區(qū)，在多霧天氣和陰雨的條件下，種植鑒定材料，采用自發(fā)誘雨的條件下，種植鑒定材料，采用自發(fā)誘發(fā)抗病鑒定。發(fā)抗病鑒定。實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定 將鑒定材料種植在重病區(qū)肥沃土壤上，施氮水將鑒定材料種植在重病區(qū)肥沃土壤上，施氮水平略高于當?shù)刎S產(chǎn)田。如有必要可進行人工田間平略高于當?shù)刎S產(chǎn)田。如有必要可進行人工田間接種，以誘導(dǎo)發(fā)病。每個鑒定材料一般栽植接種，以誘導(dǎo)發(fā)病。每個鑒定材料一般栽植10-20叢，

17、可移栽或直播，重復(fù)三次。以當?shù)乜埂⒏衅穮?，可移栽或直播，重?fù)三次。以當?shù)乜埂⒏衅贩N作對照。在鑒定區(qū)周圍應(yīng)種植若干行咸感病的種作對照。在鑒定區(qū)周圍應(yīng)種植若干行咸感病的品種作誘發(fā)行，以增加感染強度。保持高濕條件。品種作誘發(fā)行，以增加感染強度。保持高濕條件。實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定 對于數(shù)量較大的世代材料，每個株系對于數(shù)量較大的世代材料，每個株系種植種植2-5行，每行行，每行10株叢），每隔株叢），每隔10個株個株系種植一個抗、感病品種作對照。當感病系種植一個抗、感病品種作對照。當感病品種達到高度發(fā)病時，即可進行病情鑒定。品種達到高度發(fā)病時，即可進行病情鑒定。 實

18、驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定3 3、病情鑒定、病情鑒定 一般在接種后一般在接種后7 7天左右進行病情鑒定。天左右進行病情鑒定。 病情鑒定的方法可按全國稻瘟病鑒定分級病情鑒定的方法可按全國稻瘟病鑒定分級標準下表逐株進行，分別記錄每株鑒定標準下表逐株進行，分別記錄每株鑒定的結(jié)果，然后計算各品種的病情指數(shù)。的結(jié)果，然后計算各品種的病情指數(shù)。 最高病級數(shù)鑒定總株數(shù)各相應(yīng)病級數(shù)各級病株數(shù)病情指數(shù) 也可供參考國際水稻所將稻瘟病的抗性分級標準分為也可供參考國際水稻所將稻瘟病的抗性分級標準分為10級下表）。級下表）。 實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性鑒定苗瘟和葉瘟抗性分級標準苗瘟和葉瘟抗性分級標準 實驗四、水稻苗期稻瘟病抗性