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1、 【實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康摹?觀察各種因素對(duì)血液凝固的影響。觀察各種因素對(duì)血液凝固的影響。 【實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理】 本實(shí)驗(yàn)采用預(yù)先去除本實(shí)驗(yàn)采用預(yù)先去除Ca2+制備抗凝的動(dòng)物制備抗凝的動(dòng)物血液,在實(shí)驗(yàn)中復(fù)血液,在實(shí)驗(yàn)中復(fù)Ca2+,觀察哪些因素可以影,觀察哪些因素可以影響血液凝固的過程,從而加深對(duì)血液凝固基響血液凝固的過程,從而加深對(duì)血液凝固基本過程的理解。本過程的理解。【實(shí)驗(yàn)對(duì)象實(shí)驗(yàn)對(duì)象】 家兔家兔【實(shí)驗(yàn)器材與藥品實(shí)驗(yàn)器材與藥品】 小試管、計(jì)時(shí)器、水浴箱、刻度吸管、棉花、冰塊、小試管、計(jì)時(shí)器、水浴箱、刻度吸管、棉花、冰塊、液體石蠟、肝素液體石蠟、肝素8U(置小試管內(nèi))、抗凝全血、(置小試管內(nèi))、抗凝全
2、血、0.18 mol/L CaCl2溶液、溶液、0.9% NaCl注射液、注射液、2%草酸鉀草酸鉀溶液、溶液、25%枸櫞酸鈉溶液。枸櫞酸鈉溶液?!緦?shí)驗(yàn)步驟和觀察項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)步驟和觀察項(xiàng)目】 1、麻醉、麻醉:1.5%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉,劑量麻醉,劑量2ml/kg體重。體重。 2、固定、備皮、固定、備皮 3、頸總動(dòng)脈插管、頸總動(dòng)脈插管 4 4、取血、取血:打開動(dòng)脈夾,經(jīng)頸動(dòng)脈插管:打開動(dòng)脈夾,經(jīng)頸動(dòng)脈插管一次性采血(多次放血可能會(huì)出現(xiàn)血液一次性采血(多次放血可能會(huì)出現(xiàn)血液凝固于插管內(nèi)而不能再放血凝固于插管內(nèi)而不能再放血) ),按照每,按照每100ml100ml血液加入血液
3、加入25%25%的枸櫞酸鈉的枸櫞酸鈉4ml4ml進(jìn)進(jìn)行體外抗凝。行體外抗凝。(1)觀察纖維蛋白原在凝血過程中的作用)觀察纖維蛋白原在凝血過程中的作用 取取2支小試管分別加入支小試管分別加入抗凝血抗凝血35 mL,再加入,再加入0. 18 mol/L CaCl2 35滴滴,輕搖試管混勻。將第一管,輕搖試管混勻。將第一管靜置靜置作為對(duì)照作為對(duì)照,第二管用,第二管用竹簽攪動(dòng)竹簽攪動(dòng)12 min后取出竹簽,后取出竹簽,用水用水輕輕漂洗輕輕漂洗,觀察竹簽上是否存在纖維蛋白絲,觀察竹簽上是否存在纖維蛋白絲,另外觀察各管內(nèi)的血液是否發(fā)生凝固并比較各管之另外觀察各管內(nèi)的血液是否發(fā)生凝固并比較各管之間有無差異。
4、間有無差異。(2)血液凝固的加速或延緩血液凝固的加速或延緩 取試管取試管6支并作好標(biāo)記,按下表準(zhǔn)備各實(shí)驗(yàn)條件,支并作好標(biāo)記,按下表準(zhǔn)備各實(shí)驗(yàn)條件,復(fù)鈣后各管應(yīng)立即混勻并開始計(jì)時(shí),記錄各管血復(fù)鈣后各管應(yīng)立即混勻并開始計(jì)時(shí),記錄各管血液凝固時(shí)間并分析其原因。液凝固時(shí)間并分析其原因。 表表 影響血液凝固的因素影響血液凝固的因素 實(shí)驗(yàn)條件實(shí)驗(yàn)條件凝血時(shí)間凝血時(shí)間影響因素影響因素血液血液Ca2+少量棉花少量棉花內(nèi)表面涂潤(rùn)滑油內(nèi)表面涂潤(rùn)滑油37水浴水浴冰浴冰浴草酸鉀草酸鉀12ml肝素肝素 8 U抗凝血抗凝血1 mL抗凝血抗凝血1 mL抗凝血抗凝血1 mL抗凝血抗凝血1 mL抗凝血抗凝血1 mL抗凝血抗凝血
5、1 mL0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴滴5.實(shí)驗(yàn)觀察實(shí)驗(yàn)觀察 每隔每隔30s將各試管輕輕傾斜一次,觀察其中的將各試管輕輕傾斜一次,觀察其中的血液是否已凝固,發(fā)現(xiàn)其中的血液已呈凝膠狀而血液是否已凝固,發(fā)現(xiàn)其中的血液已呈凝膠狀而不再流動(dòng)時(shí)記錄其時(shí)間不再流動(dòng)時(shí)記錄其時(shí)間,最后計(jì)算出各試管血液,最后計(jì)算出各試管血液凝固所需的時(shí)間凝固所需的時(shí)間(在本實(shí)驗(yàn)條件下,如超過在本實(shí)驗(yàn)條件下,如超過30分鐘分鐘血液仍未凝則視為血液仍未凝則視為“不凝不凝”)。分析討論分析討論 1、比較第、比較第1管(放棉花管)與第管(放棉花管)與第2管(石蠟油潤(rùn)管(石蠟油潤(rùn)滑管)內(nèi)血液凝固的速度,并分析產(chǎn)生區(qū)別的滑管)內(nèi)血液凝固的速度,并分析產(chǎn)生區(qū)別的原因。原因。 2、比較第、比較第3管(管(37管)與第管)與第4管(冰浴管)內(nèi)管(冰浴管)內(nèi)血液凝固的速度,并分析產(chǎn)生區(qū)別的原因。血液凝固的速度,并分析產(chǎn)生區(qū)別的原因。 3、分析第、分析第5管與第管與第6管內(nèi)血凝方面發(fā)生變化的原管內(nèi)血凝方面發(fā)生變化的原因。因?!咀⒁馐马?xiàng)注意事項(xiàng)】1.1.實(shí)驗(yàn)用的所有試管必須實(shí)驗(yàn)用的所有試管必須清洗干凈清洗
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