醫(yī)院檢驗科檢驗技術(shù)操作規(guī)程1

1、醫(yī)院檢驗科檢驗技術(shù)操作規(guī)程目 錄第一節(jié) 全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程第三節(jié) 自動凝血儀操作規(guī)程第四節(jié) 半自動生化分析儀操作規(guī)程第五節(jié) 血常規(guī)檢驗操作規(guī)程第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程第七節(jié) 肝功能檢驗操作規(guī)程 第八節(jié) 腎功能檢驗操作規(guī)程 第九節(jié) 血脂檢驗操作規(guī)程第十節(jié) 血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程 第十一節(jié) 凝血四項檢驗操作規(guī)程第十二節(jié)AB0血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程 第一節(jié) 全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程1、樣品分析前準備1.1開機前的檢查、準備在開啟分析儀電源之前，操作者須按以下要求進行檢查:1.1.1檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足，有無過期; 試劑管路是否彎折，

2、連接是否可靠。1.1.2 電源線是否正確連接。1.1.3 廢液桶是否清空。1.1.4 UPS電是否足夠，打印紙安裝是否正確，是否足夠。1.1.5 確保鍵盤正確連接到鍵盤接口上。1.2.開機1.2.1 打開分析儀后面的電源開關(guān),電源指示燈亮，屏幕上顯示“Initializing”.1.2.2 分析儀進行初始化，整個初始化過程持續(xù)約47分鐘。1.2.3 初始化過程結(jié)束后，系統(tǒng)自動進入“計數(shù)”界面。1.3 動物類型選擇1.3.1 按菜單鍵，移動光標，選擇“動物”，按確認進入“動物”界面。1.3.2 操作者根據(jù)測量的動物類型，選擇需要分析的動物類型。2.1.1 按菜單鍵，選擇“計數(shù)”，進入“計數(shù)”界面

3、。再按模式鍵，將當前模式設(shè)置為“全血”模式。2.1.2 確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“全血”。2.1.3 將準備好的全血樣本放到采樣針下，使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。2.1.4 按計數(shù)鍵，啟動樣本分析過程。此時，狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。2.1.5 采樣針自動吸取13ul的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。2.1.6 分析完成后，按F4鍵進入“樣本信息編輯”界面。按F9鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換，輸入樣本信息 ，輸入完成后，點擊“確認”，保存輸入的內(nèi)容并返回到“計數(shù)”界面。2.1.7 按打印鍵打印樣本

4、分析報告。2.1.8 按照此操作過程進行其余樣本的分析。2.2 預(yù)稀釋樣本分析2.2.1 按菜單鍵，選擇“計數(shù)”，進入“計數(shù)”界面。再按模式鍵，將當前模式設(shè)置為“預(yù)稀釋”模式。按稀釋鍵，屏幕彈出“加稀釋液”對話框，取一個干凈的樣本杯放在采樣針下，按計數(shù)鍵，微傾斜樣本杯一定角度讓分析儀自動排出的1.6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中，避免產(chǎn)生氣泡或濺出。2.2.2 加完稀釋液后，按確認鍵，“加稀釋液”對話框關(guān)閉，分析儀自動清洗采樣針。2.2.3 采集20ul血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。2.2.4 確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“預(yù)稀釋”。2.2.5將準備好的預(yù)稀釋樣本放到采

5、樣針下，使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。2.2.6 按計數(shù)鍵，啟動樣本分析過程。此時，狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。2.2.7 采樣針自動吸取0.7ml的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。2.2.8分析完成后，按F4鍵進入“樣本信息編輯”界面。按F9鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換，輸入樣本信息 ，輸入完成后，點擊“確認”，保存輸入的內(nèi)容并返回到“計數(shù)”界面。2.2.9按打印鍵打印樣本分析報告。2.2.10按照此操作過程進行其余樣本的分析。3、樣品分析結(jié)束后3.1 按菜單鍵，彈出系統(tǒng)菜單，選擇“關(guān)機”。3.2界面彈出“關(guān)機”對話框，

6、點擊“確認”進入關(guān)機界面。3.3 將E-Z清洗液放到采樣針下，按計數(shù)鍵，采樣針將自動吸取E-Z清洗液，執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。3.4 按照界面提示信息，將E-Z清洗液放到采樣針下，按計數(shù)鍵，采樣針將再次自動吸取E-Z清洗液，執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。3.5 執(zhí)行完成后，界面提示“請關(guān)閉電源”是，關(guān)閉分析儀的電源開關(guān)。3.6 關(guān)閉電源后檢查分析儀是否有滲漏，并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈。第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程本測試儀是一項精密儀器，為了更好的維護和使用本儀器必須遵照以下操作規(guī)程。一、操作步驟1. 尿液分析儀的通訊電纜與電腦背面的通訊端口相連，接通電源，先打開電腦，再打開分析儀；儀器啟動，風(fēng)

7、扇轉(zhuǎn)動，推進器移動，屏幕顯示 “系統(tǒng)正在測試”，此時系統(tǒng)正在自檢，顯示屏顯示主菜單，工作臺檢條區(qū)有紅色光交替閃爍，用戶可以開始測試2. 點擊電腦桌面尿液分析軟件；3. 將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出，將試紙條的側(cè)邊沿尿樣容器的管壁刮去多余尿液；4. 將蘸有尿液的試紙平放在工作臺的檢條區(qū)，確保試紙同工作臺前壁接觸；5. 儀器檢測到試紙存在后，推進器將試紙推到測試區(qū)進行測試；6. 當推進器退回原位，放下一條試紙，這樣實現(xiàn)連續(xù)測試；7. 當工作臺上所有的試紙條測試完畢，打印結(jié)果輸出結(jié)束后，按菜單鍵進入儀器設(shè)置，將電源開關(guān)撥到 “ 斷（）”位置，關(guān)閉儀器電源。二、儀

8、器維護1. 不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器；2. 不要用汽油、油漆稀釋劑、苯化合物等可能腐蝕儀器的有機溶劑擦拭儀器；3. 不要用水清洗液晶屏，不要用任何會擦傷工作臺和白基準的物質(zhì)擦拭工作臺；4. 不要用任何溶劑清潔白基準，如果白基準有明顯劃痕或損壞，請與供應(yīng)商聯(lián)系；5. 用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器，保持儀器清潔；6. 用柔軟、無磨損的布擦拭液晶屏；7. 為使儀器正常運行并提供準確的測試結(jié)果，必須定期從儀器中取下推進器、工作臺、步進板、用清水沖洗，用軟布依次擦干保持工作臺的清潔。三、注意事項1. 測試時不要將儀器放置在陽光直射的地方,以免影響測試精度；2. 請在測試前核對尿液分析試紙

9、型號，避免因使用的尿液分析試紙型號不正確而導(dǎo)致測試結(jié)果錯誤；3. 請勿使用過有效期或變質(zhì)的尿液分析試紙；4. 尿樣本中血的濃度高時，可影響測試的準確性，儀器能夠識別出高濃度血尿并打印出 “結(jié)果無效”的提示；5. 必須在推進器動作前，將待測試紙條放好；6. 在放置試紙條時應(yīng)確保試紙條前端接觸工作臺前壁；7. 如果儀器測試頭下發(fā)生故障導(dǎo)致紙條運行受阻。關(guān)掉儀器，拉出工作臺，取出受阻試紙條后，重新安裝工作臺。開機自檢后，對未得出結(jié)果的樣本重測。第三節(jié) 自動凝血儀操作規(guī)程1、儀器的常規(guī)操作1.1打開電源開關(guān)前的檢查。 檢查廢液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面過低，請用蒸餾水或去離子水將罐充滿。清空廢

10、液瓶。 管道連接 檢查各種管線的連接。確保沒有管子脫落或扭結(jié)，電源線被安全的插入交流插座。確保打印機中有足夠的紙張以供打印當天所需處理的所有樣本結(jié)果。 補充反應(yīng)杯 丟棄用過的反應(yīng)杯，加入適量的干凈的反應(yīng)杯。 1.2打開電源 開機順序：打印機 壓力單元電源單元和主單元（右側(cè)）。 打開電源后，儀器自動進入自檢。 將病人樣本，質(zhì)控與試劑分別按要求準備就緒，進入分析過程： 試劑準備 Set Reagent 輸入確認試劑體積 補充反應(yīng)杯 安放樣本架 1.3樣本分析: Work List ID No.Entry 輸入樣本號 ENTER 選擇所需檢測的項目(變?yōu)?,確認所有的設(shè)置結(jié)束后 ENTER 按屏幕右

11、上方“Start”鍵,執(zhí)行分析。 分析完畢,儀器進入準備狀態(tài)。 1.4關(guān)機前的工作 每日清潔所有樣本針和試劑針： 在主菜單屏上按下【Rinse probe】鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【Excute】鍵。 1.5關(guān)機 關(guān)閉電源。 2. 儀器保養(yǎng)2.1每日保養(yǎng)清洗樣品針每次做完試驗都必須清洗樣品針，主要是預(yù)防堵針，執(zhí)行Rinse ProbeExcute清空垃圾箱2.2清空廢液查看儀器后面防逆流瓶Trap Chamber有無水，防止因為有水而導(dǎo)致真空泵不能抽真空在洗液瓶中注蒸餾水，最高不要超過上面的凹槽，防止因水過滿，工作時水回流到壓力泵和壓力傳感器上導(dǎo)致人為破壞。2.3每周保養(yǎng)做一次管路清潔，執(zhí)行S

12、pecial Operate Rinse&Prepare清潔儀器2.4每半年保養(yǎng)清洗洗液瓶內(nèi)部，清洗洗液瓶出水管上的過濾網(wǎng)一次。2.5每三或六個月保養(yǎng)清潔傳動滑軌(X軸、Y軸)并上潤滑油。防止因積塵而使樣品針運行不到位，向下扎錯位置造成樣品針彎曲或斷裂第四節(jié) 半自動生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】1.開機之前檢查電源線是否連接無誤，電源要求接地良好;連接打印機電源線，接通打印機電源開關(guān);將廢液管插入廢液容器內(nèi);接通顯示器開關(guān)及主機背部電源開關(guān)。2.開機自檢后鍵入Enter，確定已設(shè)定測試參數(shù)鍵入Enter，進入編制工作表在設(shè)置欄，開啟聯(lián)機打印儀器預(yù)熱20分鐘后，調(diào)用已設(shè)定測試項目進行樣品

13、測定打印結(jié)果清洗儀器關(guān)機。3.吸液口由不銹鋼保護管和鋼管內(nèi)聚四氟乙烯吸液管組成，應(yīng)注意保護，不要碰彎。4.切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口。【儀器的保養(yǎng)與維護】1.日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動比色皿，每天工作結(jié)束后，要用蒸餾水清洗。具體方法如下：將吸液管插入蒸餾水中，向上扳動吸液開關(guān)，反復(fù)沖洗流動比色皿，直到蒸餾水的吸光度值正常為止。2.每周要用專門的清洗劑清洗一次流動比色皿，清洗時，讓清洗劑停留在比色皿中約半小時，然后排掉，再用蒸餾水沖洗干凈，最后注入蒸餾水。3.不使用儀器時，流動比色皿內(nèi)一定要保證充滿蒸餾水。4.更換打印機色帶時，嚴格遵照打印機操作手冊，避免不規(guī)范操作。5.光源燈更換時一定要先

14、切斷儀器的電源，手不可觸摸光源燈的玻璃部分，萬一光源燈的玻璃部分弄臟了，可用無水乙醇將污物除去。6.更換的蠕動泵管尺寸材料應(yīng)與原泵管一致，如不一致則要重新調(diào)整吸液量。第五節(jié) 血常規(guī)檢驗操作規(guī)程 【 標 本 】 抗凝靜脈血（有些儀器也可用末梢血）。 【 方 法 】 血液細胞自動分析儀測定法。 【 試 劑 】 血液細胞自動分析儀配套試劑。 【 操 作 】 詳見血液細胞自動分析儀使用手冊。 【 附 注 】 1. 血常規(guī)包括白細胞計數(shù)及分類、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細胞比積、血小板計數(shù)等項目。這些項目亦有相應(yīng)的手工方法，詳見有關(guān)資料。 2. 半自動及全自動血液細胞分析儀從設(shè)計上均要求用抗凝靜脈血。

15、其優(yōu)點為： （1）靜脈血能正確地反映病人實際情況，重復(fù)性好； （2）利于延長儀器的使用壽命； （3）解決了采血盤的交叉感染問題等。 3. 血細胞計數(shù)應(yīng)用EDTAK2：為抗凝劑（EDTAK22 H2O 1.52.2mg可抗凝1ml血）。 4. 貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管?？鼓杉笤谑覝刂匈A存應(yīng)不超過6h；如需制作血涂片應(yīng)在2h內(nèi)完成。 5. 測定前必須將EDTAK2抗凝血充分混勻。 6. 血細胞分析儀測定最適溫度為1822，低于15或高于30，均可使細胞體積發(fā)生改變，影響各參數(shù)的結(jié)果。7. 血細胞分析儀用于白細胞分類只能當作一種過篩手段，當白細胞、紅細胞、血紅蛋白和血小板的任何一項有明顯升高或

16、降低；白細胞分類出現(xiàn)異常結(jié)果（中間細胞群百分率8.0%）；紅細胞、白細胞和血小板的任何一個直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況，須用顯微鏡檢查及分類。第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程 【 標 本 】 新鮮尿液。 【 方 法 】 化學(xué)試帶法。 【 試 劑 】 各型號尿液化學(xué)分析儀配套試帶。 【 操 作 】 詳見尿液化學(xué)分析儀使用手冊。 【 附 注 】 1. 尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀，目前能進行810項檢測（PH、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細胞）。這些項目亦有相應(yīng)的手工方法，詳見有關(guān)資料。 2. 必須了解所用試帶各膜塊注意事項、藥物干擾。 3. 要注意尿液化學(xué)分析儀測定結(jié)果

17、與手工法的差異，必要時用手工法復(fù)查。 4. 尿液化學(xué)分析儀檢測僅是一個過篩手段，當?shù)鞍住㈦[血、白細胞等出現(xiàn)異常結(jié)果（如尿蛋白“”或以上）時，應(yīng)進行鏡檢。5. 尿液顏色、透明度等一般性狀異常時也應(yīng)報告。第七節(jié) 肝功能檢驗操作規(guī)程血清總膽紅素（TBIL）和結(jié)合膽紅素（DBIL）測定 改良JG法 【 試 劑 】 參照書刊文獻（如全國臨床檢驗操作規(guī)程第二版）自配，配制標準液的膽紅素應(yīng)符合如下標準，純膽紅素的氯仿溶液在25當光徑1.000±0.001Cm,波長453nm條件下其摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在60700±1600范圍內(nèi)，偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在74380±866范圍內(nèi)，

18、配制標準液的稀釋劑須含白蛋白，可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白。標準液應(yīng)貯於棕色瓶中避光保存，在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特異性高。 【 操 作 】 按試劑盒說明書或相應(yīng)書刊文獻規(guī)程手工操作，比色測定，波長600nm.制作準曲線。血樣測定，從標準曲線上求TBIL及DBIL的含量以umo1/L報告。 也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說明書的要求將相應(yīng)的程序及參數(shù)設(shè)入，用自動生化分析儀測定。 【 標 本 】 血清，空腹血為宜，脂血、脂溶性色素及嚴重溶血干擾此測定，暫不能測定的標本應(yīng)避光保存，室溫可穩(wěn)定8h，28可保存48h。 含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此法測定膽紅素。 膽紅素氧

19、化酶（BOD）法 【 試 劑 】 市售成套試劑。BOD試劑復(fù)溶后28可保存一周。 【 操 作 】 按廠家提供的試劑及儀器說明書要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動生化分析儀測定。波長450或460nm。 【 標 本 】 血清要求與改良J一G法相似。 二甲亞楓（DMSO）法 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。 【 操 作 】 按試劑盒說明書手工操作比色測定或用自動生化儀測定。波長560nm。 【 標 本 】 血清、輕度脂血，溶血標本對結(jié)果無明顯影響、重度脂血、溶血標本須作標本空白進行較正。血氨測定 【 方 法 】 酶兩點法。 【 試 劑 】 市售成套試劑。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求，設(shè)入相應(yīng)

20、的程序及各項參數(shù)、用自動生化分析儀測定。波長340nm。 【 標 本 】 EDTA.Na2抗凝血漿。靜脈采血后與EDTA.Na2混勻，立即置冰水中盡快分離出血漿，加塞置24保存，在23h內(nèi)分析，-20可穩(wěn)定24h。溶血標本忌用。第八節(jié) 腎功能檢驗操作規(guī)程尿素氮1.檢測目的：檢測血清、血漿或尿液中尿素的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。2.標本要求：2.1病人準備：空腹12小時。2.2標本類型：血清、肝素化的血漿或24小時尿。3.設(shè)備和試劑：3.1儀器設(shè)備：邁瑞半自動生化分析儀3.2試劑材料：試劑3.3試劑的貯存：3.3.

21、1 28密閉避光貯存至標簽所注失效期。3.3.2開蓋上機28避光穩(wěn)定30天。3.3.3變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值<1.000時，不能繼續(xù)使用。3.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。3.5試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。4.操作步驟：見生化分析儀操作流程。5.質(zhì)量控制：5.1質(zhì)控物：RANDOX多項人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施：5.2.1室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進行。5.2.2室間質(zhì)控：參加北京臨床檢

22、驗中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評。6.干擾因素：總膽紅素40mg/dL，血紅蛋白450mg/dL，抗壞血酸400mg/dL對本法無干擾。7.參考區(qū)間及可報區(qū)間：7.1參考范圍：血清/血漿 2.868.20mmol/L24小時尿 1535g/24h7.2可報范圍：0.0035.00mmol/L。樣品Urea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。8.異常結(jié)果處理：結(jié)果異常、與臨床診斷不符，應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。肌酐1.檢測目的：檢測血清、血漿或尿液中肌酐的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。3.標本要求：3.1病人準備：

23、空腹12小時。3.2標本類型：血清、肝素化的血漿或尿液。4.設(shè)備和試劑：4.1儀器設(shè)備：邁瑞半自動生化分析儀4.2試劑材料：試劑4.3試劑的貯存：4.3.1 28密閉避光貯存至標簽所注失效期。4.3.2開蓋上機28避光穩(wěn)定30天。4.3.3變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值>0.050時，不能繼續(xù)使用。4.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。5.操作步驟：見半自動生化

24、分析儀操作流程。6.質(zhì)量控制：6.1質(zhì)控物：RANDOX多項人基質(zhì)血清6.2質(zhì)控措施：6.2.1室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進行。6.2.2室間質(zhì)控：參加臨床化學(xué)室間質(zhì)評。7.干擾因素：直接膽紅素257mol/L，血紅蛋白0.5g/L，抗壞血酸3mmol/L,甘油三酯15.0mmol/L,肝素50KU/L，枸櫞酸鈉10g/L對本法無干擾。8.參考區(qū)間及可報區(qū)間：8.1參考范圍：血清/血漿53.0123.0mol/L (男性)44.0106.0mol/L (女性)首次晨尿 153015320mol/L24小時尿 6.615.0mmol/24h8.2可報范圍：0.08840.0mol/L。樣品Crea

25、含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。9.異常結(jié)果處理：結(jié)果異常、與臨床診斷不符，應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。9.危急值及處理方法：>177mol/L。及時與臨床聯(lián)絡(luò)。10.實驗室解釋：增高：嚴重腎功能不全、各種腎障礙、肢端肥大癥等。降低：營養(yǎng)不良、多尿等。第九節(jié) 血脂檢驗操作規(guī)程標本采集與處理 1受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的飲食習(xí)慣，近期體重穩(wěn)定無外傷，手術(shù)等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥，-受體阻滯劑，免疫抑制劑，激素藥物等，則應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類檢測。 2空腹抽血，TG，脂蛋白，載脂蛋白測定應(yīng)至少禁食12小時（僅作膽固醇測定不必

26、強求空腹）24小時內(nèi)不作劇烈運動。抽血前不要久站立。至少應(yīng)靜坐5分鐘。抽血時止血帶使用不可超過1分鐘。 3標本用血清，也可用肝素或EDTA.Na2抗凝之血漿。EDTA.Na2濃度不宜太高。 4血標本室溫放置不得超過3h，放置3045分鐘后應(yīng)即時分離出血清（漿）蓋封於4冰箱中可穩(wěn)定至少4天，如需長期保存，應(yīng)於-70中冰凍存放，不可反復(fù)凍融。血清總膽固醇（TC）測定 酶法（CHODPAP法） 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求設(shè)定程序，輸入?yún)?shù)用自動或半自動生化分析儀測定（速率法）終點法可手工操作，用普通分光光度計比色測定。波長500nm或520nm。 【

27、標 本 】 血清（漿）參看本節(jié)的標本采集與處理。 【 附 注 】 本法為中華醫(yī)學(xué)會檢驗學(xué)會推薦的TC測定常規(guī)方法（中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志，1995、18：185）。 膽固醇標準液以定值參考血清為宜，而不宜用Chol的水溶液作標準。Chol定值質(zhì)控血清亦不應(yīng)用作標準液。 主要技術(shù)指標：終點法批內(nèi)CV1.5%、批間CV2.5%。靈敏度：顯色劑用酚時，TC5.2mmo1/L(200mg/dl)時的吸光度（A 500nm）約0.300.35，故A 500nm=0.005時TC濃度約為0.08mmo1/L(3mg/dL)。測定范圍：當血清與試劑用量之比為1:100時其測定的上界為13mmo1/L(500ng/

28、dL)。血清甘油三酯（TG）測定 酶法（GPOPAP法） 【 試 劑 】 市售現(xiàn)成試劑。有兩種。 一步酶法單一試劑，二步酶法雙試劑。 標準液（參考物）一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液，也可用甘油，但甘油不適用於二步酶法。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求設(shè)定程序和參數(shù)，用自動或半自動生化分析儀測定，終點法可用普通分光光度計手工操作，比色測定。波長500nm。 【 標 本 】 血清（漿）參看本節(jié)標本采集與處理。 【 附 注 】 本法在操作程序上分為一步酶法與二步酶法，二步酶法為中華醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)會的推薦方法（中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志1995、18：249）?，F(xiàn)階段允許二法并存，要求逐步過渡到統(tǒng)一采用

29、二步酶法，在方法尚未統(tǒng)一前，實驗室報告TG測定結(jié)果時應(yīng)注明“除FG值”或“未除FG值”。 主要枝術(shù)指標：酶試劑用緩沖液配制后，2025應(yīng)穩(wěn)定1天，4可穩(wěn)定37天，試劑空白為A500nm0.05；顯色后穩(wěn)定30min：測定上界11.3mmo1/L(100mg/dL)；精密度：批內(nèi)CV3%，批間CV5%：靈敏度：2mmo1/L TG A 500nm0.2。血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)測定 磷鎢酸鎂沉淀法 【 試 劑 】 市售成套試劑，沉淀劑，酶試劑（同TG測定）。 【 操 作 】 按試劑盒說明書操作。 1沉淀含apoB的脂蛋白。 2測定上清液（只含HDL）的膽固醇含量（方法同酶法TC測定）

30、。 【 標 本 】 血清（漿）。 硫酸葡聚糖一鎂沉淀法 【 試 劑 】 市售成套試劑：總HDL試劑，HDL3試劑，酶試劑（同TC試劑）。 【 操 作 】 按試劑說明書操作： 1沉淀含apoB的脂蛋白，（總HDL試劑）； 2沉淀含apoB的脂蛋白及HDL2（HDL3試劑）； 3測定總HDLC及HDL3C（同酶法TC測定），并計算出HDL2C量。 【 標 本 】 血清（漿）血樣在室溫中不宜久放，應(yīng)即時測定，原則應(yīng)低溫保存。 直接HDLC測定法 【 試 劑 】 市售專門的試劑，無沉淀劑。酶試劑同TC測定。（如日本第一化學(xué)藥品株式會社的產(chǎn)品）。 【 操 作 】 按試劑盒及儀器使用說明書要求設(shè)置程序，輸

31、入?yún)?shù)直接用自動或半自動生化分析儀測定，無須沉淀離心分離出HDL步驟。 【 標 本 】 血清（漿）。血清低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測定 1Friedwald工式計算法： （1）LDL-C=TCHDL-CTG/5（以mg/dl為單位計）； （2）LDL-C=TCHDL-CTG/2.2 (以mmo1/L為單位計)； （3）只有當血TG4.52mmo/L結(jié)果才較準確； （4）只有TC、TG、HDL-C三項測定都準確且符合標準化要求時，才可計算出LDL-C的近似值。 2聚乙烯硫酸沉淀法 【 試 劑 】 沉淀劑市售，酶試劑同TC測定。 【 操 作 】 1TC測定。 2選擇性沉淀血清中LDL，測定上

32、清液之HDLC與VLDLC之和的量，（同TC測定）。 3計算出LDLC的含量。 【 標 本 】血清。血清載脂蛋白A1（apoA1）測定 免疫透射比濁法。波長340nm，本法批間CV5%。 【 試 劑 】 市售試劑盒，試劑28保存，不同批號試劑不能混合使用，抗血清效價不應(yīng)低於16。 【 操 作 】 按試劑及儀器使用說明書要求，設(shè)定程序和參數(shù)用自動生化分析儀測定，也可用特定蛋白分析儀作速率法散射比濁測定，或用含340nm的分光光度計手工操作測定。 【 標 本 】 血清。血清載脂蛋白B（apoB）測定 免疫透射比濁法。波長340nm，本法批間CV5%。 【 試 劑 】 市售試劑，28保存，不同批號試

33、劑不能混合使用，抗血清效價不應(yīng)低於1：128。 【 操 作 】 參看apoA1測定。 【 標 本 】 血清。 第十節(jié) 血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程1.檢測目的：檢測血清或血漿中葡萄糖的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。3.標本要求：3.1病人準備：空腹12小時。3.2標本類型：血清或NaF抗凝的血漿。采血后及時分離，以避免血清或血漿中葡萄糖被細胞利用而降低。4.設(shè)備和試劑：4.1儀器設(shè)備：奧林巴斯AU600生化分析儀4.2試劑材料：四川邁克公司試劑參與反應(yīng)成份：R1：酚（12.0mmol/L）R2：GOD（35KU/L）、

34、POD（5KU/L）、4-AAP（1.20mmol/L）4.3試劑的貯存：4.3.1 28密閉避光貯存至標簽所注失效期。4.3.2開蓋上機28避光穩(wěn)定30天。4.3.3變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值>0.150時，不能繼續(xù)使用。4.4注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。5 質(zhì)量控制：5.1質(zhì)控物：RANDOX多項人基質(zhì)血清5.2質(zhì)控措施：5.2.1室內(nèi)質(zhì)控：每日日常

35、工作前進行。5.2.2室間質(zhì)控：參加北京臨床檢驗中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評。6.參考區(qū)間及可報區(qū)間：6.1參考范圍：空腹3.896.11mmol/L餐后1小時7.788.89mmol/L餐后2小時3.897.78mmol/L6.2可報范圍：0.0022.30mmol/L。樣品GLU含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。7.危急值及處理方法：<2.5mmol/L或>10mmol/L。及時與臨床聯(lián)絡(luò)。第十一節(jié) 凝血四項檢驗操作規(guī)程全血凝固時間檢驗（CT） 【 標 本 】 靜脈取血3ml。 【 方法與操作 】 試管法、硅管法操作參見全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）。 【 附 注

36、 】 1. 靜脈取血要一針見血，盡量減少組織液和空氣混入。 2. 水浴箱溫度要恒定，過高或過低，可影響結(jié)果?；罨糠帜蠲笗r間測定（APTT） 【 標 本 】 自靜脈取血，用109mmol/L枸椽酸鈉作1:9抗凝。 【 試 劑 】 市售成套試劑。 【 方法與操作】 按試劑及有關(guān)儀器說明書要求進行。 【 附 注 】 1. 標本應(yīng)及時檢測，最遲不超過2h。 2. 分離血漿應(yīng)在3000r/min，離心10min。 3. 本試驗較試管法全血凝血時間敏感，能檢出因子：C25輕型血友病。血漿凝血酶原時間測定（PT，一期法） 【 標 本 】 靜脈血1.8ml，用109mmol/L枸椽酸鈉0.2ml抗凝。 【 試 劑 】 1. 組織凝血活酶浸出液； 2. 0.025mol/L CaCl2液； 【 方法與操作 】 見全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）。 【 附 注 】 1. 采血后宜在1h