探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化 及血球計(jì)數(shù)板的構(gòu)造和使用 ppt課件

1、探求培育液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化探求培育液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化 探求培育液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化是一項(xiàng)有著多方面探求培育液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化是一項(xiàng)有著多方面意義和價(jià)值的探求活動(dòng)。在這個(gè)探求活動(dòng)中用到了意義和價(jià)值的探求活動(dòng)。在這個(gè)探求活動(dòng)中用到了4個(gè)科學(xué)方個(gè)科學(xué)方法：法：1數(shù)學(xué)模型法；數(shù)學(xué)模型法；2抽樣檢測法；抽樣檢測法；3顯微察看法；顯微察看法；4微生物培育法。此外，學(xué)生經(jīng)過親身研討一個(gè)真實(shí)的種微生物培育法。此外，學(xué)生經(jīng)過親身研討一個(gè)真實(shí)的種群，加深了對種群數(shù)量變化知識(shí)的了解，并且培育了搜集、群，加深了對種群數(shù)量變化知識(shí)的了解，并且培育了搜集、整理、分析數(shù)據(jù)的才干。整理、

2、分析數(shù)據(jù)的才干。1.基基 礎(chǔ)礎(chǔ) 回回 扣扣1酵母菌酵母菌 酵母菌是單細(xì)胞真核生物。酵母菌是單細(xì)胞真核生物。 生長周期短，增殖速度快，生長周期短，增殖速度快， 還可以用酵母菌作為實(shí)驗(yàn)資料研討探求還可以用酵母菌作為實(shí)驗(yàn)資料研討探求酵母菌的呼吸方式，判別細(xì)胞的死活探求膜的酵母菌的呼吸方式，判別細(xì)胞的死活探求膜的透性透性2種群數(shù)量的變化種群數(shù)量的變化 種群數(shù)量的變化包括增長、動(dòng)搖、穩(wěn)定、下降種群數(shù)量的變化包括增長、動(dòng)搖、穩(wěn)定、下降等等 “S型曲線有一個(gè)型曲線有一個(gè)K值，即環(huán)境包容量。值，即環(huán)境包容量。 種群數(shù)量的增長也遭到許多環(huán)境要素如溫度、種群數(shù)量的增長也遭到許多環(huán)境要素如溫度、培育液的培育液的pH

3、、培育液的營養(yǎng)種類和濃度、代謝產(chǎn)物、培育液的營養(yǎng)種類和濃度、代謝產(chǎn)物等的影響。等的影響。3血球計(jì)數(shù)板血球計(jì)數(shù)板 血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物的一血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物的一種儀器。種儀器。 計(jì)數(shù)時(shí)，常采用樣方法。計(jì)數(shù)時(shí)，常采用樣方法。4探求性實(shí)驗(yàn)探求性實(shí)驗(yàn) 探求實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要遵照的原那么：科探求實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要遵照的原那么：科學(xué)性原那么、可行性原那么、對照原那么、學(xué)性原那么、可行性原那么、對照原那么、單一變量原那么和平行反復(fù)原那么。單一變量原那么和平行反復(fù)原那么。培育液中酵母菌種群數(shù)量與時(shí)間的變化關(guān)系培育液中酵母菌種群數(shù)量與時(shí)間的變化關(guān)系1實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理： 種

4、群的數(shù)量變化有一定的規(guī)律。在理想條件下，種種群的數(shù)量變化有一定的規(guī)律。在理想條件下，種群呈群呈“J型增長，在有限的環(huán)境下，種群呈型增長，在有限的環(huán)境下，種群呈“S型增長。型增長。 酵母菌生長周期短，增殖速度快且世代間不重疊，酵母菌生長周期短，增殖速度快且世代間不重疊，在實(shí)驗(yàn)室條件下，用液體培育基培育酵母菌，可以察看在實(shí)驗(yàn)室條件下，用液體培育基培育酵母菌，可以察看酵母菌種群數(shù)量隨時(shí)間變化的情況。酵母菌種群數(shù)量隨時(shí)間變化的情況。對于壓在小方格界限上的酵母菌應(yīng)取相鄰兩邊及頂角對于壓在小方格界限上的酵母菌應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)。 2引出培育液配制、滅菌、接種和培育等步驟引出培育液配制、滅菌、接種

5、和培育等步驟l 培育液配制：配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為培育液配制：配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5的葡萄糖溶液的葡萄糖溶液葡萄糖葡萄糖20g，1000 mL水，分裝到水，分裝到5個(gè)燒杯中個(gè)燒杯中200mL/燒杯燒杯l 滅菌：用高壓蒸汽滅菌鍋將培育液和取樣、計(jì)數(shù)滅菌：用高壓蒸汽滅菌鍋將培育液和取樣、計(jì)數(shù)時(shí)所用的滴管分別滅菌。貼標(biāo)簽。時(shí)所用的滴管分別滅菌。貼標(biāo)簽。l 接種：接種時(shí)要在酒精燈附近，用滅菌干凈的接種：接種時(shí)要在酒精燈附近，用滅菌干凈的1mL刻度吸管每次汲取刻度吸管每次汲取0.1mL酵母菌母液，往每個(gè)燒杯酵母菌母液，往每個(gè)燒杯中參與。留意滴加量不要太多，防止初始菌數(shù)過多。中參與。留意滴加量不要太多，防止初始菌數(shù)過多

6、。l 培育：將燒杯置于培育：將燒杯置于 28的恒溫箱中培育的恒溫箱中培育3設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：A組為實(shí)驗(yàn)組，裝培育液組為實(shí)驗(yàn)組，裝培育液10 mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度28。B組裝培育液組裝培育液10 mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度5，與，與A組構(gòu)成溫度條件對照。組構(gòu)成溫度條件對照。C組不裝培育液，只裝無菌水組不裝培育液，只裝無菌水10mL,酵母菌母液酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度28，與，與A組構(gòu)成營養(yǎng)條件對照。組構(gòu)成營養(yǎng)條件對照。4計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)：首先取樣，每計(jì)數(shù)：首先取樣，每 天取樣時(shí)間大體一致，并要遵守?zé)o天取樣時(shí)間大體一致，

7、并要遵守?zé)o菌操作規(guī)范。每次取樣前要試管振蕩搖勻，正確地運(yùn)用菌操作規(guī)范。每次取樣前要試管振蕩搖勻，正確地運(yùn)用1mL刻度吸管將刻度吸管將lmL酵母菌培育液移入酵母菌培育液移入1支干凈的試管里，支干凈的試管里，然后用滴管汲取然后用滴管汲取1滴培育液滴在已蓋在血球計(jì)數(shù)板網(wǎng)格上滴培育液滴在已蓋在血球計(jì)數(shù)板網(wǎng)格上的蓋玻片的邊緣，待培育液自行滲入并充溢網(wǎng)格后，再放的蓋玻片的邊緣，待培育液自行滲入并充溢網(wǎng)格后，再放在顯微鏡下進(jìn)展細(xì)胞計(jì)數(shù)，后立刻將數(shù)據(jù)填到記錄表格中。在顯微鏡下進(jìn)展細(xì)胞計(jì)數(shù)，后立刻將數(shù)據(jù)填到記錄表格中。如如 記數(shù)時(shí)發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞數(shù)較多，不易分辨，汲取的樣液該當(dāng)記數(shù)時(shí)發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞數(shù)較多，不易分辨，汲取的

8、樣液該當(dāng)稀釋。稀釋。參考參考1：一次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表：一次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表 參考參考2：出：出A、B、C各個(gè)處置的曲線圖各個(gè)處置的曲線圖 3.討論1在計(jì)數(shù)前，還應(yīng)有哪些步驟？需留意些什么？2針對針對“培育液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化，培育液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化，有人提出了新的問題，某同窗按下表完成了有關(guān)實(shí)驗(yàn)。有人提出了新的問題，某同窗按下表完成了有關(guān)實(shí)驗(yàn)。血球計(jì)數(shù)板的構(gòu)造和運(yùn)用血球計(jì)數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的血球計(jì)數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的.玻片玻片中有四條下凹的槽中有四條下凹的槽,構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)構(gòu)成三個(gè)平臺(tái).中間的平臺(tái)較寬中間的平臺(tái)較寬,其中間又被其中間又被一

9、短橫槽隔為兩半一短橫槽隔為兩半,每半邊上面每半邊上面,刻有一個(gè)方格網(wǎng)刻有一個(gè)方格網(wǎng).方格網(wǎng)上刻有方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格個(gè)大方格,其中只需中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室其中只需中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室,供微生物計(jì)供微生物計(jì)數(shù)用數(shù)用.這一大方格的長和寬各為這一大方格的長和寬各為1mm,深度為深度為0.1mm,其體積為其體積為0.1mm3. 計(jì)數(shù)室通常有兩種規(guī)格計(jì)數(shù)室通常有兩種規(guī)格.一種是大方格內(nèi)分為一種是大方格內(nèi)分為16中格中格,每一中格每一中格又分為又分為25小格小格;另一種是大方格內(nèi)分為另一種是大方格內(nèi)分為25中格中格,每一中格又分為每一中格又分為16小格小格.但是不論計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造但是不論計(jì)數(shù)

10、室是哪一種構(gòu)造;它們都有一個(gè)共同的特它們都有一個(gè)共同的特點(diǎn)點(diǎn),即每一大方格都是由即每一大方格都是由1625=2516=400個(gè)小方格組成個(gè)小方格組成,見圖見圖.以計(jì)數(shù)酵母菌為例以計(jì)數(shù)酵母菌為例(1)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個(gè)數(shù)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個(gè)數(shù).(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計(jì)數(shù)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計(jì)數(shù),以每小以每小方格內(nèi)含有方格內(nèi)含有4-5個(gè)酵母細(xì)胞為宜個(gè)酵母細(xì)胞為宜,普通稀釋普通稀釋10倍即可倍即可. (3)將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計(jì)數(shù)室上加在中央的計(jì)數(shù)室上加蓋公用的厚玻片蓋公用的厚玻片.(4)將稀釋后的酵

11、母菌懸液將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管汲取一滴置于蓋玻用吸管汲取一滴置于蓋玻片的邊緣片的邊緣,使菌液漸漸滲入使菌液漸漸滲入,多余的菌液用吸水紙汲取多余的菌液用吸水紙汲取,捎待片刻捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計(jì)數(shù)室內(nèi)使酵母菌全部沉降到血球計(jì)數(shù)室內(nèi).血球計(jì)數(shù)板的運(yùn)用血球計(jì)數(shù)板的運(yùn)用(5)計(jì)數(shù)時(shí)計(jì)數(shù)時(shí),假設(shè)運(yùn)用假設(shè)運(yùn)用16格格25格規(guī)格的計(jì)數(shù)室格規(guī)格的計(jì)數(shù)室,要按要按對角線位對角線位,取左上取左上,右上右上,左下左下,右下右下4個(gè)中格個(gè)中格(即即100個(gè)個(gè)小格小格)的酵母菌數(shù)的酵母菌數(shù).假設(shè)規(guī)格為假設(shè)規(guī)格為25格格16格的計(jì)數(shù)板格的計(jì)數(shù)板,除了取其除了取其4個(gè)對角方位外個(gè)對角方位外,還需再數(shù)中央的

12、一個(gè)中格還需再數(shù)中央的一個(gè)中格(即即80個(gè)小方格個(gè)小方格)的酵母菌數(shù)的酵母菌數(shù). (6)當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌,普通只計(jì)數(shù)大方普通只計(jì)數(shù)大方格的上方和右方線上的酵母細(xì)胞格的上方和右方線上的酵母細(xì)胞(或只計(jì)數(shù)下方和左或只計(jì)數(shù)下方和左方線上的酵母細(xì)胞方線上的酵母細(xì)胞).(7)對每個(gè)樣品計(jì)數(shù)三次對每個(gè)樣品計(jì)數(shù)三次,取其平均值取其平均值,按以下公式計(jì)按以下公式計(jì)算每算每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù). 3.計(jì)算公式計(jì)算公式(1)16格格25格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式:酵母細(xì)胞數(shù)酵母細(xì)胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/100400104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)(2)25格格x16格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式格的血球計(jì)數(shù)板計(jì)算公式:酵母細(xì)胞數(shù)酵母細(xì)胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/80400104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)4.血球計(jì)數(shù)板的清潔血球計(jì)數(shù)板的清潔血球汁數(shù)板運(yùn)用后血球汁