基因工程藥物概述

1、會(huì)計(jì)學(xué)1基因工程藥物概述基因工程藥物概述第1頁/共124頁第2頁/共124頁主要參考資料：湯仲明.生物技術(shù)藥物（第1版）.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2008.第3頁/共124頁第4頁/共124頁第5頁/共124頁第6頁/共124頁參考文獻(xiàn)： 美國(guó)食品藥物管理局網(wǎng)站：/DragsFDA： http:/www.accessdata.F/scripts/cder/drugsatfda中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）網(wǎng)站胡顯文在“基因工程藥物與抗體藥物研發(fā)與質(zhì)量控制關(guān)鍵技術(shù)研討會(huì)”上的報(bào)告。第7頁/共124頁第8頁/共124頁常用種類：常用種類：蛋白多肽

2、類激素、細(xì)胞因子、抗體、酶、可溶性受體、亞單位疫苗、血漿蛋白等 第9頁/共124頁由機(jī)體多種細(xì)胞分泌的具有調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)分化、調(diào)節(jié)免疫功能等生理活性并參與病理反應(yīng)的小分子蛋白質(zhì)。第10頁/共124頁第11頁/共124頁外源治療性可溶性受體可與相應(yīng)的膜受體競(jìng)爭(zhēng)配體而起到抑制作用，借此發(fā)揮治療作用。第12頁/共124頁傳統(tǒng)疫苗：完整病原體制備的滅活疫苗（死疫苗）、減毒活疫苗（弱毒疫苗）和細(xì)菌外毒素經(jīng)一定濃度甲醛處理后生產(chǎn)的類毒素（toxiod)疫苗。第13頁/共124頁DNA疫苗（ DNA vaccine ）：是把編碼病原體保護(hù)性抗原的基因連接到真核表達(dá)載體上，用重組載體制成的疫苗。又稱為基因疫苗（

3、genetic vaccine）、核酸疫苗（nucleic acid immunizaiton）等。第14頁/共124頁第15頁/共124頁治療疾?。禾悄虿　⒉挥Y、矮小癥、骨質(zhì)疏松第16頁/共124頁第17頁/共124頁治療疾病：糖尿病、矮小癥、不育癥第18頁/共124頁第19頁/共124頁功能：刺激免疫細(xì)胞增殖、免疫調(diào)節(jié)（抑制或增強(qiáng)）、促進(jìn)炎癥等作用。第20頁/共124頁分類：根據(jù)穩(wěn)定性（耐熱耐酸性）、天然來源細(xì)胞、氨基酸組成和序列差異，分為不同的型（ 型和型）、類（、）、亞類（ 1 25、 1 4、 1 4）及次亞類（如 2a 2c） 。生物活性：不同種類IFN生物活性相似，具有抗病毒和

4、免疫調(diào)節(jié)活性（干擾病毒復(fù)制、增強(qiáng)細(xì)胞免疫、抑制體液免疫）。型（主要為和類）穩(wěn)定性較好。第21頁/共124頁第22頁/共124頁第23頁/共124頁分類： TNF- 和TNF-功能：抗腫瘤作用（引起腫瘤細(xì)胞凋亡、腫瘤組織壞死）、免疫調(diào)節(jié)作用、炎癥介質(zhì)。第24頁/共124頁第25頁/共124頁第26頁/共124頁第27頁/共124頁種類：種類： 表皮生長(zhǎng)因子（epidermal growth factor，EGF）； 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（fibroblast growth factor， FGF）；血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor， VEG

5、F）；神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nerve growth factor， NGF）；血小板衍生的生長(zhǎng)因子（platelet derived growth factor，PDGF）；肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatic growthfactor，HGF ） 第28頁/共124頁趨化作用（chemotaxis） ：是指化學(xué)刺激物（趨化因子）刺激細(xì)胞沿濃度上升梯度向著化學(xué)刺激物定向移動(dòng)的作用（移動(dòng)的速度為每min520m）第29頁/共124頁IL-2：T細(xì)胞生長(zhǎng)因子，刺激T細(xì)胞增殖。IL-11：血小板刺激因子，促進(jìn)血小板產(chǎn)生。第30頁/共124頁第31頁/共124頁第32頁/共124頁第33頁/共124頁第34頁/共

6、124頁第35頁/共124頁IgG尚有母體胎盤結(jié)合位點(diǎn)；IgA有第36頁/共124頁第37頁/共124頁第38頁/共124頁第39頁/共124頁CVB3：柯薩奇B3病毒 中和抗體結(jié)合位點(diǎn)兩個(gè)思考題：1、能與病原表面抗原結(jié)合的抗體是否都是中和抗體？2、用來制備中和抗體的抗原應(yīng)具備什么基本條件？第40頁/共124頁一些細(xì)菌的莢膜具有抗吞噬作用第41頁/共124頁第42頁/共124頁第43頁/共124頁M ：巨噬細(xì)胞（ macrophage ）；Mo：?jiǎn)魏思?xì)胞（ monocytes） ；Eo：嗜酸性粒細(xì)胞（ eosinophilic granulocytes ，Eo）；PMN：中性粒細(xì)胞（polym

7、orphonuclear neutrophil，PMN）；NK：自然殺傷細(xì)胞。第44頁/共124頁抗體免疫原性的主要來源：抗體分子恒定區(qū)抗體免疫原性的主要來源：抗體分子恒定區(qū)第45頁/共124頁第46頁/共124頁人第47頁/共124頁人第48頁/共124頁人源化抗體也稱為改型抗體（reshaped antibody）免疫原性更低第49頁/共124頁第50頁/共124頁第51頁/共124頁滲透性增強(qiáng)，免疫原性小半衰期縮短（比全I(xiàn)gG1縮短10倍）用于腫瘤成像診斷準(zhǔn)確性達(dá)95%以上Fab段：即抗原結(jié)合片段（fragment of antigen binding，F(xiàn)ab）。第52頁/共124頁滲透

8、性更強(qiáng)，半衰期縮短（比全I(xiàn)gG1縮短10倍）對(duì)實(shí)體瘤顯像明顯強(qiáng)于傳統(tǒng)單克隆抗體和Fab片段缺點(diǎn)是抗原親和力降低。第53頁/共124頁第54頁/共124頁第55頁/共124頁第56頁/共124頁續(xù)上表第57頁/共124頁商品名商品名批準(zhǔn)時(shí)間批準(zhǔn)時(shí)間說明說明適應(yīng)癥適應(yīng)癥公司公司Simponi (golimumab)2009-4-24NS0表達(dá)的表達(dá)的anti-TNF- 人源抗人源抗體體類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，強(qiáng)直性脊柱類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，強(qiáng)直性脊柱炎，銀屑病炎，銀屑病CentocorIlaris (canakinumab)2009-6-17SP2/0表達(dá)的表達(dá)的anti-IL-1人源抗人源抗體體家族冷因性自體發(fā)炎

9、癥候和家族冷因性自體發(fā)炎癥候和穆穆-韋二氏綜合征韋二氏綜合征(CAPS)NovartisStelara (ustekinumab)2009-9-25NS0表達(dá)的表達(dá)的anti-P40(IL-12和和IL-23的亞基的亞基)人源抗體人源抗體銀屑病銀屑病CentocorArzerra (ofatumumab)2009-10-26NS0表達(dá)的表達(dá)的anti-CD20的人源抗的人源抗體體慢性淋巴細(xì)胞白血病慢性淋巴細(xì)胞白血病GlaxoSmithKlineActemra (tocilizumab)2010-1-8CHO表達(dá)的表達(dá)的anti-IL6R人源化抗人源化抗體體類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎Genente

10、ch/Roche2009年1月-2013年1月FDA批準(zhǔn)上市的治療性抗體-1第58頁/共124頁商品名商品名批準(zhǔn)時(shí)間批準(zhǔn)時(shí)間說明說明適應(yīng)癥適應(yīng)癥公司公司Prolia (denosumab)2010-6-1CHO表達(dá)的表達(dá)的anti- RANKL 人源人源抗體抗體女性絕經(jīng)后的骨質(zhì)疏松女性絕經(jīng)后的骨質(zhì)疏松AmgenBenlysta (belimumab)2011-3-10動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的anti- BlyS人源人源抗體抗體systemic lupus erythematosus (SLE)Human Genome Sciences and GSKXgeva (denosumab)201

11、0-11-18CHO表達(dá)的表達(dá)的anti- RANKL 人源人源抗體抗體Osteolytic Bone Metastases of Solid TumorsAmgenYervoy (ipilimumab)2011-3-25CHO表達(dá)的表達(dá)的anti-CTLA-4人源抗人源抗體體Melanoma - MetastaticBristol-Myers SquibbNulojix (belatacept) Injection2011-6-15CHO(CTLA4-Ig )突變體突變體 (L104 to E; A29 to Y)，F(xiàn)c融合蛋白融合蛋白抗移植排斥抗移植排斥Bristol-Myers Squi

12、bbAdcetris (brentuximab vedotin) Injection2011-8-19anti-CD30的抗體，與毒素偶聯(lián)的抗體，與毒素偶聯(lián)主要用于霍奇金淋巴瘤的主要用于霍奇金淋巴瘤的治療治療Seattle Genetics, Inc.2009年1月-2013年1月FDA批準(zhǔn)上市的治療性抗體-2第59頁/共124頁商品名商品名批準(zhǔn)時(shí)間批準(zhǔn)時(shí)間說明說明適應(yīng)癥適應(yīng)癥公司公司Adcetris (brentuximab vedotin) Injection2011-8-19anti-CD30的抗體，與毒素偶聯(lián)的抗體，與毒素偶聯(lián)主要用于霍奇金淋巴瘤的主要用于霍奇金淋巴瘤的治療治療Seat

13、tle Genetics, Inc.Eylea (aflibercept) Injection 2011-11-18CHO表達(dá)的表達(dá)的VEGFR-Fc融合蛋融合蛋白，相當(dāng)于白，相當(dāng)于anti-VEGF抗體抗體用于黃斑變性，與用于黃斑變性，與Lucentis相似相似Regeneron/BayerPerjeta (pertuzumab)2012-6-8CHO表達(dá)的另一種表達(dá)的另一種anti-Her2的的產(chǎn)品，與產(chǎn)品，與Herceptin聯(lián)用聯(lián)用治療乳腺癌治療乳腺癌GenentechZaltrap (ziv-aflibercept) Injection2012-8-3和和Eylea (afliber

14、cept) Injection是同一種產(chǎn)品是同一種產(chǎn)品用于治療結(jié)直腸癌用于治療結(jié)直腸癌Regeneron/sanofiABthrax， 2012-12-14anti-PA抗體抗體炭疽防治炭疽防治GlaxoSmithKline2009年1月-2013年1月FDA批準(zhǔn)上市的治療性抗體-3第60頁/共124頁種類有限，主要依賴進(jìn)口第61頁/共124頁第62頁/共124頁作業(yè)：查閱上述治療靶點(diǎn)的生物學(xué)意義及與對(duì)應(yīng)抗體作業(yè)：查閱上述治療靶點(diǎn)的生物學(xué)意義及與對(duì)應(yīng)抗體所治療疾病的關(guān)系。所治療疾病的關(guān)系。第63頁/共124頁第64頁/共124頁第65頁/共124頁第66頁/共124頁第67頁/共124頁產(chǎn)品種

15、類少，適應(yīng)癥少（僅限于溶栓）第68頁/共124頁第69頁/共124頁第70頁/共124頁根據(jù)主要傷及的器官，分為肝型、心臟型、骨骼肌型等，引起肝肥大、心臟肥大、骨骼肌無力等癥狀。第71頁/共124頁該病主要累及腎臟及心臟。第72頁/共124頁問題：除了血栓性疾病，F(xiàn)DA用酶治療的一些代謝性疾病在我國(guó)是否發(fā)生？我國(guó)臨床對(duì)這些疾病是如何治療的？第73頁/共124頁第74頁/共124頁病因尚未完全明確。但目前認(rèn)為，最終引起病理變化的主要機(jī)制是：自身變性IgG與其誘發(fā)的IgM類抗體（類風(fēng)濕因子，類風(fēng)濕因子，RF）形成的復(fù)合物沉積于小關(guān)節(jié)處引起機(jī)體損傷。第75頁/共124頁第76頁/共124頁病因尚未完

16、全明了，但眾多研究表明，免疫因病因尚未完全明了，但眾多研究表明，免疫因素與銀屑病的發(fā)生及病理生理有密切關(guān)系。素與銀屑病的發(fā)生及病理生理有密切關(guān)系。第77頁/共124頁第78頁/共124頁第79頁/共124頁第80頁/共124頁第81頁/共124頁達(dá)，達(dá)，廈門萬泰滄海生物技術(shù)有限公司。第82頁/共124頁第83頁/共124頁第84頁/共124頁戊型肝炎是一種易發(fā)于青壯年和孕婦的病毒性肝炎戊型肝炎是一種易發(fā)于青壯年和孕婦的病毒性肝炎，通過食物、糞便污染的水源、接觸和血液傳染。臨床表現(xiàn)和甲肝類似，主要以乏力、厭油、惡心、食欲不振，并伴有肝區(qū)疼痛，皮膚、小便發(fā)黃等癥狀為主。接種對(duì)象： 16歲的易感人群

17、。如畜牧養(yǎng)殖者、餐飲業(yè)人員、學(xué)生或部隊(duì)官兵、育齡期婦女、疫區(qū)旅行者等。第85頁/共124頁第86頁/共124頁血友病為一種X性聯(lián)陰性遺傳的凝血功能障礙所致的性聯(lián)陰性遺傳的凝血功能障礙所致的出血性疾病。出血性疾病。發(fā)生于男孩，總發(fā)病率1.52/萬。發(fā)病機(jī)制：某些種類的凝血酶缺乏導(dǎo)致發(fā)病機(jī)制：某些種類的凝血酶缺乏導(dǎo)致凝血時(shí)間延長(zhǎng)。血友病A：凝血因子缺乏，占血友病人總數(shù)的85%血友病B：凝血因子缺乏，占血友病人總數(shù)的15%。第87頁/共124頁凝血因子a：在凝血酶鏈?zhǔn)狡俨贾胁淮嬖?，但促進(jìn)凝血因子和IX的活化，用于治療對(duì)因子和IX產(chǎn)生抑制物的A型或B型血友病人的自發(fā)性和手術(shù)后出血。第88頁/共124頁

18、第89頁/共124頁無國(guó)產(chǎn)重組產(chǎn)品。第90頁/共124頁優(yōu)優(yōu) 點(diǎn)點(diǎn)免疫效應(yīng)期長(zhǎng)。可同時(shí)誘發(fā)體液免疫和細(xì)胞免疫。熱穩(wěn)定性好。易于大量生產(chǎn)。表達(dá)效果及免疫原性不確切。DNA整合的風(fēng)險(xiǎn)。誘導(dǎo)產(chǎn)生抗DNA抗體，并有可能誘發(fā)自身免疫性疾病。缺缺 點(diǎn)點(diǎn)第91頁/共124頁第92頁/共124頁第93頁/共124頁第94頁/共124頁第95頁/共124頁第96頁/共124頁/druggable第97頁/共124頁（三）作為理想藥物靶點(diǎn)的主要條件：特異性。即與特定疾病關(guān)系密切并與其在正常細(xì)胞中的功能明顯區(qū)別.可藥性。能夠與藥物發(fā)生相互作用又能引起藥物效應(yīng)的基因或其產(chǎn)物

19、。第98頁/共124頁疾病模型（人、動(dòng)物、細(xì)胞）基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)差異分析藥靶鑒定基因芯片蛋白雙向電泳聯(lián)合質(zhì)譜分析生物信息學(xué)酵母雙雜交及三雜交藥靶確證RNA干擾技術(shù)基因過表達(dá)技術(shù)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因敲除動(dòng)物第99頁/共124頁例1： EPO突變體Aranesp比第一代EPO半衰期延長(zhǎng)了3倍，給藥次數(shù)從每周23次減少為1次。例2：重組IL-1 163-171位只含9個(gè)氨基酸的肽保持了完整蛋白刺激淋巴細(xì)胞增殖的功能，而去除了其導(dǎo)致機(jī)體發(fā)熱反應(yīng)的副作用。第100頁/共124頁速效胰島素突變體Novolog和長(zhǎng)效胰島素突變體Lantus的一級(jí)結(jié)構(gòu)資料來自：胡顯文在“”會(huì)議上的報(bào)告ppt第101頁/共124頁第102頁/共124頁第103頁/共124頁第104頁/共124頁第105頁/共124頁第106頁/共124頁第107頁/共