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文檔簡介
1、第四章蛋白質化學知識點:一、氨基酸蛋白質的生物學功能氨基酸:酸水解:破壞全部色氨酸以及部分含羥基氨基酸。堿水解:所有氨基酸產生外消旋。氨基酸的分類:非極性氨基酸(8種):Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Met、Phe、Trp;極性氨基酸(12種):帶正電荷氨基酸Lys、Arg、His;帶負電荷氨基酸Asp和Glu;不帶電荷氨基酸Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Cys、Gly。非蛋白質氨基酸:氨基酸的酸堿性質:氨基酸的等電點,氨基酸的可解離基團的pK值,pI的概念及計算,高于等電點的任何pH值,氨基酸帶有凈負電荷,在電場中將向正極移動。氨基酸的光吸收性:芳香族側鏈有紫外吸收,28
2、0nm,氨基酸的化學反應:”-氨基酸與水合苛三酮試劑共熱,可發(fā)生反應,生成藍紫化合物??寥c脯氨酸和羥脯氨酸反應則生成黃色化合物。二、結構與性質肽:基本概念;肽鍵;肽;氨基酸殘基;谷胱甘肽;肽鍵不能自由轉動,具有部分雙鍵性質;肽平面蛋白質的分子結構:一級結構,N-末端分析,異硫氟酸苯酯法;C-末端分析,腫解法蛋白質的二級結構:是指蛋白質分子中多肽鏈骨架的折疊方式,包括a螺旋、3折疊和3轉角超二級結構:超二級結構是指二級結構的基本結構單位(“螺旋、3折疊等)相互聚集,形成有規(guī)律的二級結構的聚集體。結構域:蛋白質的三級結構:蛋白質的三級結構指多肽鏈中所有氨基酸殘基的空間關系,其具有二級結構或結構
3、域。球狀蛋白質分子的三級結構特點:大多數非極性側鏈(疏水基團)總是埋藏在分子內部,形成疏水核;大多數極性側鏈(親水基團),總是暴露在分子表面,形成一些親水區(qū)。蛋白質的四級結構:蛋白質的四級結構是由兩條或兩條以上各自獨立具有三級結構的多肽鏈(亞基)通過次級鍵相互締合而成的蛋白質結構。變構蛋白、變構效應;血紅蛋白氧合曲線。維持蛋白質分子構象的化學鍵:氫鍵,疏水鍵,范德華力,鹽鍵,二硫鍵等三、蛋白質的分子結構與功能的關系蛋白質的分子結構與功能的關系:一級結構決定高級結構,核糖核酸酶的可逆變性;變性、復性、鐮刀型紅細胞貧血癥的生化機理;四、蛋白質的性質及分離純化膠體性質:雙電層,水化層;1.透析;2,
4、鹽析;3.凝膠過濾;酸堿性質:1.等電點沉淀;2,離子交換層析;3.電泳蛋白質的變性:蛋白質變性后,二、三級以上的高級結構發(fā)生改變或破壞,但共價鍵不變,一級結構沒有破壞。一、氨基酸蛋白質的生物學功能氨基酸:酸水解:破壞全部色氨酸以及部分含羥基氨基酸。堿水解:所有氨基酸產生外消旋。氨基酸的分類:非極性氨基酸(8種):Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Met、Phe、Trp;極性氨基酸(12種):帶正電荷氨基酸Lys、Arg、His;帶負電荷氨基酸Asp和Glu;不帶電荷氨基酸Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Cys、Gly。非蛋白質氨基酸:氨基酸的酸堿性質:氨基酸的等電點,氨基酸的可
5、解離基團的pK值,pI的概念及計算,高于等電點的任何pH值,氨基酸帶有凈負電荷,在電場中將向正極移動。氨基酸的光吸收性:芳香族側鏈有紫外吸收,280nm,氨基酸的化學反應:”-氨基酸與水合苛三酮試劑共熱,可發(fā)生反應,生成藍紫化合物??寥c脯氨酸和羥脯氨酸反應則生成黃色化合物。填空題1 .構成蛋白質的氨基酸有種,一般可根據氨基酸側鏈(R)的大小分為側鏈氨基酸和側鏈氨基酸兩大類。其中前一類氨基酸側鏈基團的共同特怔是具有性;而后一類氨基酸側鏈(或基團)共有的特征是具有性。堿性氨基酸(pH67時荷正電)有兩種,它們分別是氨基酸和氨基酸;酸性氨基酸也有兩種,分別是氨基酸和氨基酸。2 .紫外吸收法(28
6、0nm)定量測定蛋白質時其主要依據是因為大多數可溶性蛋白質分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。3 .絲氨酸側鏈特征基團是;半胱氨酸的側鏈基團是;組氨酸的側鏈基團是:。這三種氨基酸三字母代表符號分別是、。4 .氨基酸與水合印三酮反應的基團是,除脯氨酸以外反應產物的顏色是;因為脯氨酸是一亞氨基酸,它與水合印三酮的反應則顯示色。5 .當氨基酸溶液的pH=pI時,氨基酸(主要)以離子形式存在;當pH>pI時,氨基酸(主要)以離子形式存在;當pHvpI時,氨基酸(主要)以離子形式存在。6 .側鏈含一OH的氨基酸有、和三種。側鏈含一SH的氨基酸是氨基酸。7 .Edman反應的主要試劑是;在寡肽或多肽序
7、列測定中,Edman反應的主要特點是。選擇題1 .側鏈含有咪陛基的氨基酸是(A、甲硫氨酸B、半胱氨酸C、精氨酸D、組氨酸2 .PH為8時,荷正電的氨基酸為(A、GluB、LysC、SerD、Asn3.精氨酸的Pk1=2.17、Pk2=9.04-NH3)Pk3=12.48(月瓜基)PI=(A、1/2(2.17+9.04)C、1/2(9.04+12,48)B、1/2(2.17+12.48)D、1/3(2.17+9。04+12。48)4.谷氨酸的Pk1=2.19(-COOH)、pk2=9.67(-NH3)、pk3=4.25(-COOH)pl=()A、1/2(2.19+9。67)B、1/2(9.67+
8、4.25)C、1/2(2.19+4.25)D、1/3(2.17+9.04+9.67)5 .氨基酸不具有的化學反應是()A、腫反應B、異硫氟酸苯酯反應C、苛三酮反應D、雙縮月尿反應6 .氨基酸與亞硝酸反應所釋放的N2氣中,氨基酸的貢獻是()A、25%B、50%C、80%D、100%是非題1.苯丙氨酸疏水性比繳氨酸強.2、蛋白質經過堿水解,可活動所有的天然氨基酸。3、蛋白質經酸水解可破壞全部色氨酸以及部分含羥基氨基酸。4、酶水解蛋白質反應條件溫和,不破壞色氨酸也不產生外消旋,但副產物多。5、氨基酸在水溶液中或在晶體狀態(tài)時主要時以兩性離子的形式存在。6、組成蛋白質的二十種氨基酸都有旋光性。7 .由于
9、靜電作用,在等電點時氨基酸的溶解度最小。8 .構成天然蛋白質的氨基酸,其D-構型和L-型普遍存在。問答題1、一溶液中含有氨基酸Asp和Lys,通入強酸性離子交換層析柱,若原溶液的PH為7,則哪一種氨基酸先被洗脫?2.肌肉中氧攜帶者是肌球蛋白,下列哪些氨基酸最可能位于該分子內部?Leu,Asp,Phe,Met,Val,Ala極性氨基酸通常位于分子表面,但一些氨基酸如Ser和Asn通常位于分子內部,為什么?二、結構肽:基本概念;肽鍵;肽;氨基酸殘基;谷胱甘肽;肽鍵不能自由轉動,具有部分雙鍵性質;肽平面蛋白質的分子結構:一級結構,N-末端分析,異硫氟酸苯酯法;C-末端分析,腫解法蛋白質的二級結構:是
10、指蛋白質分子中多肽鏈骨架的折疊方式,包括“螺旋、3折疊和3轉角等。超二級結構:超二級結構是指二級結構的基本結構單位(a螺旋、3折疊等)相互聚集,形成有規(guī)律的二級結構的聚集體。結構域:蛋白質的三級結構:蛋白質的三級結構指多肽鏈中所有氨基酸殘基的空間關系,其具有二級結構或結構域。球狀蛋白質分子的三級結構特點:大多數非極性側鏈(疏水基團)總是埋藏在分子內部,形成疏水核;大多數極性側鏈(親水基團),總是暴露在分子表面,形成一些親水區(qū)。蛋白質的四級結構:蛋白質的四級結構是由兩條或兩條以上各自獨立具有三級結構的多肽鏈(亞基)通過次級鍵相互締合而成的蛋白質結構。變構蛋白、變構效應;血紅蛋白氧合曲線。維持蛋白
11、質分子構象的化學鍵:氫鍵,疏水鍵,范德華力,鹽鍵,二硫鍵等名詞解釋:1.二面角2.蛋白質一級結構3.蛋白質二級結構4 .蛋白質三級結構5 .蛋白質四級結構6 .超二級結構7.別構效應8.結構域9.寡聚蛋白10.構象11.構型12.肽單位13.肽平面14.-螺旋15.-折疊或-折疊片16.超二級結構17.-轉角18.業(yè)基填空題1 .蛋白質結構中主鍵稱為鍵,次級鍵有、;次級鍵中屬于共價鍵的是鍵。2 .蛋白質二級結構的基本類型有、和。其中維持前三種二級結構穩(wěn)定鍵的次級鍵為鍵。有關。而當多肽鏈中出現殘基的時候,多肽鏈的-螺旋往往會被破壞。3 .蛋白質水溶液是一種比較穩(wěn)定的親水膠體,其穩(wěn)定性主要因素有兩
12、個,分別是和選擇題1 .下列敘述中不屬于蛋白質一級結構內容的是()A、多肽鏈中氨基酸殘基的種類、數目、排列次序B、多肽鏈中氨基酸殘基的鍵鏈方式C、多肽鏈中主肽鏈的空間走向,如-螺旋D、胰島分子中A鏈與B鏈間含有兩條二硫鍵,分別是A7-S-S-B7,A20-S-S-B192 .下列敘述中哪項有誤()A、蛋白質多肽鏈中氨基酸殘基的種類、數目、排列次序在決定它的二級結構、三級結構乃至四級結構中起重要作用。B、主肽鏈的折疊單位肽平面之間相關一個C碳原子。C、蛋白質變性過程中空間結構和一級結構被破壞,因而喪失了原有生物活性。D、維持蛋白質三維結構的次級鍵有氫鍵、鹽鍵、二硫鍵、疏水力和范德華力。3 .下列
13、因素中主要影響蛋白質-螺旋形成的是()A、堿性氨基酸的相近排列B、酸性氨基酸的相近排列C、脯氨酸的存在D、甘氨酸的存在4 .蛋白質中多肽鏈形成-螺旋時,主要靠哪種次級鍵維持()A、疏水鍵B、肽鍵C、氫鍵D、二硫鍵5 .關于蛋白質結構的敘述,哪項不恰當()A、胰島素分子是由兩條肽鏈構成,所以它是多亞基蛋白,具有四級結構B、蛋白質基本結構(一級結構)中本身包含有高級結構的信息,所以在生物體系中,它具有特定的三維結構C、非級性氨基酸側鏈的疏水性基團,避開水相,相互聚集的傾向,對多肽鏈在二級結構基礎上按一定方式進一步折疊起著重要作用D、亞基間的空間排布是四級結構的內容,亞基間是非共價締合的6 .有關亞
14、基的描述,哪一項不恰當()A、每種亞基都有各自的三維結構B、亞基內除肽鍵外還可能會有其它共價鍵存在C、一個亞基(單位)只含有一條多肽鏈D、亞基單位獨立存在時具備原有生物活性7 .關于可溶性蛋白質三級結構的敘述,哪一項不恰當(A、疏水性氨基酸殘基盡可能包裹在分子內部B、親水性氨基酸殘基盡可能位于分子內部C、竣基、氨基、月瓜基等可解離基團多位于分子表面D、苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸等殘基盡可能位于分子內部8 .蛋白質三級結構形成的驅動力是()A、范德華力B、疏水作用力9 .以下蛋白質中屬寡聚蛋白的是(A、胰島素B、Rnase10 .關于二級結構敘述哪一項不正確(C、氫鍵D、離子鍵C、血紅蛋白D、肌
15、紅蛋白A、右手-螺旋比左手-螺旋穩(wěn)定,因為左手-螺旋中L-構型氨基酸殘基側鏈空間位阻大,不穩(wěn)定;B、一條多肽鏈或某多肽片斷能否形成-螺旋,以及形成的螺旋是否穩(wěn)定與它的氨基酸組成和排列順序有極大關系;C、多聚的異亮氨基酸R基空間位阻大,因而不能形成-螺旋;D、-折疊在蛋白質中反平行式較平行式穩(wěn)定,所以蛋白質中只有反平行式。11.蛋白質三維結構的構象特征主要取決于()A、氨基酸的組成、順序和數目B、氫鍵、鹽鍵、范德華力和疏水力C、溫度、pH和離子強度等環(huán)境條件D、肽鏈間或肽鏈內的二硫鍵是非題1 .胰島素分子中含有兩條多肽鏈,所以每個胰島素分子是由兩個亞基構成。2 .蛋白質多肽鏈中氨基酸的種類數目、
16、排列次序決定它的二級、三級結構,即一級結構含有高級結構的結構信息。3 .肽鍵中相關的六個原子無論在二級或三級結構中,一般都處在一個剛性平面內。4 .具有四級結構的蛋白質,當它的每個亞基單獨存在時仍能保持蛋白質有的生物活性。5 .胰島素分子中含有A7-S-S-B7,A20-S-S-B19和A6-S-S-A11三個二硫鍵,這些屬于二級結構的內容。6 .-折疊是主肽鏈相當伸展的結構,因此它僅存在于某些纖維狀蛋白質中。7 .蛋白質的亞基(或稱為亞單位)和肽是同義詞。三、蛋白質的分子結構與功能的關系蛋白質的分子結構與功能的關系:一級結構決定高級結構,核糖核酸酶的可逆變性;變性、復性、鐮刀型紅細胞貧血癥的
17、生化機理;名詞解釋:變構效應,等電點填空題:1 .蛋白質處于等電點時,所具有的主要特征是、。2 .在適當濃度的-疏基乙醇和8M月尿溶液中,RNase(牛)喪失原有活性。這主要是因為RNA酶的被破壞造成的。其中-疏基乙醇可使RNA酶分子中的鍵破壞。而8M月尿可使鍵破壞。當用透析方法去除-疏基乙醇和月尿的情況下,RNA酶又恢復原有催化功能,這種現象稱為。3 .蛋白質變性的主要原因是被破壞;蛋白質變性后的主要特征是;變性蛋白質在去除致變因素后仍能(部分)恢復原有生物活性,表明沒被破壞。這是因為一級結構含有的結構信息,所以蛋白質分子構象恢復后仍能表現原有生物功能。4 .鐮刀狀貧血癥是最早認識的一種分子
18、病,患者的血紅蛋白分子亞基的第六位氨酸被氨酸所替代,前一種氨基酸為性側鏈氨基酸,后者為性側鏈氨基酸,這種微小的差異導致紅血蛋白分子在氧分壓較低時易于聚集,氧合能力下降,而易引起溶血性貧血。選擇題1 .蛋白質變性過程中與下列哪項無關()A、理化因素致使氫鍵破壞B、疏水作用破壞C、蛋白質空間結構破壞D、蛋白質一級結構破壞,分子量變小2 .加入下列試劑不會導致蛋白質變性的是()A、尿素(月尿)B、鹽酸月瓜C、十二烷基磺酸SDSD、硫酸俊3 .血紅蛋白的氧合動力學曲線呈S形,這是由于()A、氧可氧化Fe(n),使之變?yōu)镕e(出)B、第一個亞基氧合后構象變化,引起其余亞基氧合能力增強C、這是變構效應的顯
19、著特點,它有利于血紅蛋白質執(zhí)行輸氧功能的發(fā)揮D、亞基空間構象靠次級鍵維持,而亞基之間靠次級鍵締合,構象易變4 .寡肽或多肽測序時下列試劑中最好的是()A、2,4-二硝基氟苯B、腫C、異硫氟酸苯酸D、丹酰氯是非題:1 .變構效應是蛋白質及生物大分子普遍的性質,它有利于這些生物大分子功能的調節(jié)。2 .功能蛋白質分子中,只要個別氨基酸殘基發(fā)生改變都會引起生物功能的喪失。3 .變性后的蛋白質電泳行為不會改變。4 .沉降系數S是蛋白質以及核酸分子量大小常用的表示單位。16.同源蛋白質中,保守性較強的氨基酸殘基在決定蛋白質三維結構與功能方面起重要作用,因此致死性突變常常與它們的密碼子突變有關。四、蛋白質的
20、性質及分離純化膠體性質:雙電層,水化層;1.透析;2,鹽析;3.凝膠過濾;酸堿性質:1.等電點沉淀;2,離子交換層析;3.電泳蛋白質的變性:蛋白質變性后,二、三級以上的高級結構發(fā)生改變或破壞,但共價鍵不變,一級結構沒有破壞。名詞解釋:鹽析,分段鹽析,凝膠過濾層析,蛋白質的變性與復性,填空題1 .鹽析作用是指;鹽溶作用是指。2 .當外界因素(介質的pH>pI、電場電壓、介質中離子強度、溫度等)確定后,決定蛋白質在電場中泳動速度快慢的主要因素是3 .細胞色素C,血紅蛋白的等電點分別為10和7.1,在pH8.5的溶液中它們分別荷的電性是選擇題:1 .引起蛋白質變性原因主要是(B、肽鍵破壞A、三維結構破壞C、膠體穩(wěn)定性因素被破壞D、亞基的解聚2 .變構效應是多亞基功能蛋白、寡聚酶及多酶復合體的作用特征,下列動力學曲線中哪種般是別構酶
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