植物生理學(xué)試驗(yàn)考試試題

1、植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)考試試題一、名詞解釋：1、標(biāo)準(zhǔn)曲線：用標(biāo)準(zhǔn)溶液制成的曲線。先配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在溶液吸收最大波長(zhǎng)下，逐一測(cè)定吸光度，然后用坐標(biāo)紙以溶液濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖若被測(cè)物質(zhì)對(duì)光的吸收符合光的吸收定律，必然得到一條通過(guò)原點(diǎn)的直線，即標(biāo)準(zhǔn)曲線。4、氮素代謝：氮素及含氮的活體物質(zhì)的同化異化和排泄，總稱為氮素代謝。5、淀粉酶：是水解淀粉和糖原的酶類總稱。6、真空滲入：指將葉片打孔放入注射器中，加水浸沒(méi)，排出空氣后用手指堵住前端小孔，同時(shí)把活塞向外抽拉，即可造成減壓而排出組織中的空氣，輕放活塞，水液即進(jìn)入組織的方法。7、離心技術(shù)：是根據(jù)物質(zhì)顆粒在一個(gè)離心場(chǎng)中的沉降行為而發(fā)展

2、起來(lái)的。它是分離細(xì)胞器和生物分子大分子物質(zhì)必備的手段之一，也是測(cè)定某些純品物質(zhì)的部分性質(zhì)的一種方法。8、電泳：各種生物大分子在一定pH條件下，可以解離成帶電荷的顆粒，這種帶電顆粒在電場(chǎng)的作用下向相反電極移動(dòng)的現(xiàn)象稱為電泳。9、同工酶：凡能催化同一種化學(xué)反應(yīng)但其分子結(jié)構(gòu)和帶電性質(zhì)不同的一組酶稱為同工酶10、遷移率：指帶電顆粒在單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的泳動(dòng)速度。11、聚丙烯酰胺凝膠：是一種人工合成凝膠，是以丙烯酰胺為單位，由甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián)成的，經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀，控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號(hào)的凝膠。20、超氧化物歧化酶（SOD）:普遍存在動(dòng)植物體內(nèi)的一種清除超氧陰離子自由基O2的酶。21、

3、硝酸還原還原酶：是植物氮素同化的關(guān)鍵酶，它催化植物體內(nèi)的硝酸鹽還原為亞硝酸。22、誘導(dǎo)酶：又稱適應(yīng)酶，指植物體內(nèi)本來(lái)不含有，但在特定外來(lái)物質(zhì)的誘導(dǎo)下誘導(dǎo)生成的酶。如硝酸還原酶可為NO3-所誘導(dǎo)生成。二、填空：1、測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)含量時(shí)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線是標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)濃度為橫坐標(biāo).以吸光值為縱坐標(biāo)。2、常用的測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)含量的方法有：Folin-酚試劑法（Lowry法）、雙縮胭法、考馬斯亮藍(lán)法和紫外吸收法。4Vc含量時(shí)，若樣品本身帶有顏色，則需先將樣品用草酸處理。5、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，3,5二硝基水楊酸試劑（DNS）的作用是與還原糖顯色生成棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸和終止酶活性。6、

4、在測(cè)定淀粉酶的活性時(shí)：a淀粉酶不耐一酸_,B淀粉酶不耐一熱_。7、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過(guò)氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中，電泳存在三大效應(yīng)，分別是濃縮效應(yīng)、分子篩效應(yīng)和電荷效應(yīng)。9、用活體法測(cè)定硝酸還原酶的材料，取樣前葉子需進(jìn)行一段時(shí)間的光合作用，以積累光合產(chǎn)物，產(chǎn)生更多NADH加速硝酸鹽的還原。11、葉綠素吸收光譜有紅光和藍(lán)紫光區(qū)兩個(gè)最強(qiáng)吸收區(qū)。12、類胡蘿卜素吸收光譜最強(qiáng)吸收區(qū)在綠素的作用。13、葉綠素溶液在透射光下呈|支色，在反射光下呈暗紅色。15、水培時(shí)要選用黑色容器裝營(yíng)養(yǎng)，這是為了防止藻類滋生16、常用水溶液培養(yǎng)法確定植物生長(zhǎng)的必需元素。三、選擇1當(dāng)植物細(xì)胞水勢(shì)小于外界溶液水勢(shì)時(shí)，植物細(xì)胞A外液

5、濃度變DA吸水B失水C小D大2用紅菜苔做植物組織原生質(zhì)透性的觀察時(shí)，學(xué)生20分鐘后觀察到有紅色色素出現(xiàn)，下面那種處理方式不可能出現(xiàn)這種情況AA清水浸泡B清水煮沸1minC30%的醋酸D70%酒精3希爾反應(yīng)實(shí)驗(yàn)常用植物材料為新鮮菠菜，選用菠菜葉出于B方面考慮A葉綠素含量高B易于碾磨C營(yíng)養(yǎng)豐富D顏色漂亮4植物生理實(shí)驗(yàn)時(shí)，在碾磨植物材料時(shí)經(jīng)常會(huì)用的石英砂，其主要作用為AA增加粗糙度B保護(hù)葉綠體或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)C易于過(guò)濾D使溶液分層5植物組織中的水分主要有自由水和束縛水兩種形式存在，有同學(xué)通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)定某一植物的自由水和束縛水的比值比較大，可推斷該植物處于AA旺盛生長(zhǎng)時(shí)期B衰退狀態(tài)C病蟲(chóng)危害狀態(tài)D干旱狀態(tài)6蛋

6、白質(zhì)含量的測(cè)定常用“考馬斯藍(lán)G-250”方法，其主要原理：考馬斯藍(lán)G-250燃料在游離狀態(tài)下稱紅色，當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后呈青色。其結(jié)合物在光波B下吸光值與蛋白質(zhì)含量成正比，故用分光光度計(jì)比色法測(cè)定A668nmB595nmC250nmD320nm7在綠豆芽蛋白質(zhì)含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)儀器用到了離心機(jī)，其作用主要為BA使蛋白質(zhì)與水分離B使殘?jiān)c浸出液分離C使色素與水分離D使蛋白質(zhì)與水混合8葉綠素不能溶液以下哪種溶液BA乙醇B水C丙酮D氯仿9環(huán)形層析法分離葉綠體中的各色素，色素種類從里向外的順序?yàn)锽A葉綠素a、葉綠素b、葉黃素、胡蘿卜素B葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、胡蘿卜素C葉綠素b、葉綠素a、胡蘿卜

7、素、葉黃素D胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素b、葉綠素a10紅外線CO分析儀測(cè)環(huán)境中CO的含量具有易操作、高效率等優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)用同一臺(tái)儀器對(duì)武生院不同地點(diǎn)進(jìn)行CO測(cè)定時(shí)，發(fā)現(xiàn)林下與餐廳CO濃度相差不太明顯，據(jù)推測(cè)主要原因?yàn)镃A儀器誤差B人為操作不當(dāng)C風(fēng)的影響D光線的影響11植物的生長(zhǎng)發(fā)育需要大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)才能完成，現(xiàn)代無(wú)土栽培方法主要通過(guò)配制一定的比例的營(yíng)養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)園藝花卉或農(nóng)作物，而植物缺乏某一種營(yíng)養(yǎng)元素都會(huì)產(chǎn)生不正常的外在表現(xiàn)，我們稱之為“缺素癥”。當(dāng)我們對(duì)海桐枝條進(jìn)行缺素培養(yǎng)時(shí)，同學(xué)們發(fā)現(xiàn)海桐枝條用缺素液培養(yǎng)與完全營(yíng)養(yǎng)液、純水培養(yǎng)等幾種方法培養(yǎng)，其外在表現(xiàn)上沒(méi)有差別，其主要原因有可能是CA肥料失效B

8、稱量誤差C海桐對(duì)缺素不敏感D光照影響13植物細(xì)胞膜對(duì)維持細(xì)胞的微環(huán)境和正常代謝起著重要作用。在正常情況下細(xì)胞膜對(duì)物質(zhì)具有選擇透性能力。為了測(cè)定植物的抗逆性，實(shí)驗(yàn)中我們常用不同溫度處理，通過(guò)測(cè)溶液導(dǎo)電性，來(lái)判斷植物對(duì)高溫的抗性大小。如果有兩種植物，用相同的溫度處理，發(fā)現(xiàn)植物a的電導(dǎo)率為，植物b的電導(dǎo)率為，那么那種植物可能更耐高溫一些JA植物aB植物b14TTC法測(cè)種子生命力，通過(guò)溫水浸泡過(guò)的健康玉米種子，B不會(huì)染色A胚芽B胚乳C胚軸D胚根15植物呼吸強(qiáng)度的測(cè)定實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，用廣口瓶中加入一定量的Ba（OH2,并懸掛植物材料，則植物材料呼吸放出的CO被容器中Ba（OH2所吸收，然后用草酸溶液滴定殘留

9、Ba（OH2,根據(jù)和空白樣本對(duì)比本可以計(jì)算出植物的呼吸速率。如果空白滴定所有草酸量為樣品滴定所用草酸量為V,有同學(xué)做實(shí)驗(yàn)滴定的草酸量M為，V1為，那么該同學(xué)所滴定的結(jié)果BA正確B錯(cuò)誤2、進(jìn)行酶活力測(cè)定時(shí)：A）A、底物濃度必須極大于酶濃度B、酶濃度必須極大于底物濃度C、與底物濃度無(wú)關(guān)D、酶能提高反應(yīng)的平衡點(diǎn)4、Folin-酚試劑法（Lowry法）測(cè)定蛋白質(zhì)濃度時(shí)，用（B）波長(zhǎng)比色，測(cè)定光密度值。A、260nmB、650nmC、540nmD、280nm5、不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳比一般電泳的分辨率高，是因?yàn)榫哂邢铝心姆N效應(yīng)？（ABC）A、濃縮效應(yīng)B、電荷效應(yīng)C、分子篩效應(yīng)D、粘度效應(yīng)6.硝酸還原酶

10、與亞硝酸還原酶（D）A.都是誘導(dǎo)酶B.硝酸還原酶不是誘導(dǎo)酶，而亞硝酸還原酶是C.都不是誘導(dǎo)酶D.硝酸還原酶是誘導(dǎo)酶，而亞硝酸還原酶不是7、酶的分離提純過(guò)程中，不正確的操作是（C）A、需在低溫下進(jìn)行，一般在05c之間B、酶制劑制成干粉后可保存于4c冰箱中C、需經(jīng)常使用琉基乙醇以防止酶蛋白二硫鍵發(fā)生還原D、提純時(shí)間盡量短8、在提取葉綠素時(shí)，研磨葉片時(shí)加入少許CaCO3,其目白是（D）A.使研磨更充分B.加速葉綠素溶解C.使葉綠素a、b分離D.保護(hù)葉綠素10、一般而言，正常植物葉片的葉綠素與類胡蘿卜素的比值為（B）:1:1:2:311、測(cè)定葉綠素總量時(shí)，分光光度計(jì)選用的波長(zhǎng)是（D.652nm四、問(wèn)答

11、題1.試述植物種子萌發(fā)的三個(gè)階段以及各階段的代謝特點(diǎn)？答：吸脹吸水階段：為依賴原生質(zhì)膠體吸脹作用的物理吸水階段，無(wú)論種子是否通過(guò)休眠還是有無(wú)生命力，均具有此階段；緩慢吸水階段：種子吸水受種皮的束縛，原生質(zhì)的水合度達(dá)到飽和，酶促反應(yīng)與呼吸作用增強(qiáng)，貯藏物質(zhì)開(kāi)始分解，胚細(xì)胞的吸水力提高；生長(zhǎng)吸水階段：在貯藏物質(zhì)加快轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)上，胚根、胚芽中的核酸、蛋白質(zhì)等原生質(zhì)組分合成加快，細(xì)胞吸水加強(qiáng)。當(dāng)胚根突破種皮后，有氧呼吸增強(qiáng)，種子吸水與鮮重持續(xù)增加。2、什么叫質(zhì)壁分離現(xiàn)象？研究質(zhì)壁分離有什么意義？答：植物細(xì)胞由于液泡失水而使原生質(zhì)體和細(xì)胞壁分離的現(xiàn)象稱為質(zhì)壁分離。在剛發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí)，原生質(zhì)與細(xì)胞壁之間若

12、接若離。稱為初始質(zhì)壁分離。把已發(fā)生質(zhì)壁分離的細(xì)胞置于水勢(shì)較高的溶液和純水中，則細(xì)胞外的水分向內(nèi)滲透，使液泡體積逐漸增大因而原生質(zhì)層與細(xì)胞壁相接觸，恢復(fù)原來(lái)的狀態(tài)，這一現(xiàn)象叫質(zhì)壁分離復(fù)原。研究質(zhì)壁分離可以鑒定細(xì)胞的死活，活細(xì)胞的原生質(zhì)層才具半透膜性質(zhì)，產(chǎn)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象，而死細(xì)胞無(wú)比現(xiàn)象；可測(cè)定細(xì)胞水勢(shì)，在初始質(zhì)壁分離時(shí)，此時(shí)細(xì)胞的滲透勢(shì)就是水勢(shì)（因?yàn)榇藭r(shí)壓力勢(shì)為零）：還可用以測(cè)定原生質(zhì)透性、滲透勢(shì)及粘滯性等。3、小籃子法測(cè)定萌發(fā)的小麥種子呼吸強(qiáng)度，以Ba（OH2吸收呼吸時(shí)放出的CO2#子重5g,反應(yīng)進(jìn)行20分鐘，用草酸滴定剩余的Ba（OH2,用去草酸18ml,空白滴定用去草酸20ml,計(jì)算萌發(fā)小

13、麥種子的呼吸強(qiáng)度。答：小麥種子呼吸強(qiáng)度（鮮重小時(shí)）=（mgCo2/g-FWh）4、農(nóng)諺講“旱長(zhǎng)根，水長(zhǎng)苗”是什么意思？道理何在？答：這是指水分供應(yīng)狀況對(duì)植物根冠比調(diào)節(jié)的一個(gè)形象比喻。植物地上部生長(zhǎng)和消耗的大量水分，完全依靠根系供應(yīng)，土壤有效水的供應(yīng)量直接影響枝葉的生長(zhǎng)，因此凡是能增加土壤有效水的措施，必然有利地上部生長(zhǎng)；而地上部生長(zhǎng)旺盛，消耗耗大量光合產(chǎn)物，使輸送到根系扔機(jī)物減少，又會(huì)削弱根系的生長(zhǎng)，加之如果水分過(guò)多，通氣不良，也會(huì)限制根系活動(dòng)，這些都將使根冠比減少。干旱時(shí)，由于根系的水分環(huán)境比地上部好，根系仍能較好地生長(zhǎng)；而地上部則由于抽水，枝葉生長(zhǎng)明顯受阻，光合產(chǎn)物就可輸入根系，有利根系生

14、長(zhǎng)，使根冠比增大。所以水稻栽培中，適當(dāng)落干曬田，可對(duì)促進(jìn)根系生長(zhǎng)，增加根冠比。6、簡(jiǎn)述氣孔開(kāi)閉的主要機(jī)理。答：氣孔開(kāi)閉取決于保衛(wèi)細(xì)胞及其相鄰細(xì)胞的水勢(shì)變化以及引起這些變化的內(nèi)、外部因素，與晝夜交替有關(guān)。在適溫、供水充足的條件下，把植物從黑暗移向光照，保衛(wèi)細(xì)胞的滲透勢(shì)顯著下降而吸水膨脹，導(dǎo)致氣孔開(kāi)放。反之，當(dāng)日間蒸騰過(guò)多，供水不足或夜幕布降臨時(shí)，保衛(wèi)細(xì)胞因滲透勢(shì)上升，失水而縮小，導(dǎo)致氣孔關(guān)閉。氣孔開(kāi)閉的機(jī)理復(fù)雜，至少有以下三種假說(shuō)：（1）淀粉一一糖轉(zhuǎn)化學(xué)說(shuō)，光照時(shí)，保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)的葉綠體進(jìn)行光合作用，消耗CO2使細(xì)胞內(nèi)PH值升高，促使淀粉在磷酸化酶催化下轉(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸葡萄糖，細(xì)胞內(nèi)的葡萄糖濃度高，水

15、勢(shì)下降，副衛(wèi)細(xì)胞的水進(jìn)入保衛(wèi)細(xì)胞，氣孔便張開(kāi)。在黑暗中，則變化相反。（2）無(wú)機(jī)離子吸收學(xué)說(shuō)，保衛(wèi)細(xì)胞的滲透系統(tǒng)亦可由鉀離子（K+）所調(diào)節(jié)。光合磷酸化產(chǎn)生ATPATP使細(xì)胞質(zhì)膜上的鉀一氫離子泵作功，保衛(wèi)細(xì)胞便可逆著與其周圍表皮細(xì)胞之間的離子濃度差而吸收鉀離子，降低保衛(wèi)細(xì)胞水勢(shì)，氣孔張開(kāi)。（3）有機(jī)酸代謝學(xué)說(shuō)，淀粉與蘋(píng)果酸存在著相互消長(zhǎng)的關(guān)系。氣孔開(kāi)放時(shí)，葡萄糖增加，再經(jīng)過(guò)糖酵解等一系列步驟，產(chǎn)生蘋(píng)果酸，蘋(píng)果酸解離的H+可與表皮細(xì)胞的K+交換，蘋(píng)果酸根可平衡保衛(wèi)細(xì)胞所吸入的K+。氣孔關(guān)閉時(shí)，此過(guò)程可逆轉(zhuǎn)?？傊O(píng)果酸與K+在氣孔開(kāi)閉中起著互相配合的作用。7、呼吸代謝的多條途徑對(duì)植物生存有何適應(yīng)意義

16、？答：植物代謝受基因的控制，而代謝（包括過(guò)程、產(chǎn)物等）又對(duì)基因表達(dá)具控制作用，基因在不同時(shí)空的有序即表現(xiàn)為植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程，高等植物呼吸代謝的多條途徑（不同底物、呼吸途徑、呼吸鏈及末端氧化等）使其能適應(yīng)變化多端的環(huán)境條件。如植物遭病菌浸染時(shí)，PPP曾強(qiáng)，以形成植保素，木質(zhì)素提高其抗病能力，又如水稻根在淹水缺氧條件下，乙醇酸氧化途徑和與氧親和力高的細(xì)胞色素氧化酶活性增強(qiáng)以保持根的正常生理功能。4.請(qǐng)介紹3種常用的可溶性蛋白質(zhì)的測(cè)定方法。答：目前常用的有以下幾種方法：雙縮脈法、Lowry法（Folin-酚試劑法）,Bradford法（考馬斯亮藍(lán)法）、紫外吸收法。5、簡(jiǎn)述斐林-酚試劑法測(cè)定植物可溶

17、性蛋白質(zhì)的原理。6、答：Folin-酚試劑法也稱Lowry法，斐林（Folin）一酚試劑法結(jié)合了雙縮豚試劑和酚試劑與蛋白質(zhì)的反應(yīng)，其中包括兩步反應(yīng)：第一步是在堿性條件下，蛋白質(zhì)中的肽鍵與銅試劑作用生成紫紅色的蛋白質(zhì)一銅絡(luò)合物（雙縮胭反應(yīng)）；第二步是此絡(luò)合物以及蛋白質(zhì)中酪氨酸和苯丙氨酸等芳香族氨基酸的殘基使磷鋁酸-磷鴇酸試劑（Folin試劑）還原，產(chǎn)生磷鋁藍(lán)和磷鴇藍(lán)的深藍(lán)色混合物質(zhì)，在一定的條件下，顏色深淺與蛋白含量成正相關(guān)。因此，可利用其在650nm波長(zhǎng)下的特定吸收進(jìn)行比色測(cè)定。6、植物組織可溶性蛋白質(zhì)含量的測(cè)定中，斐林-酚試劑法、考馬斯亮藍(lán)法兩種方法各有何優(yōu)缺點(diǎn)？答：斐林酚試劑法其優(yōu)點(diǎn)是：由

18、于加入了Folin-酚試劑后使蛋白質(zhì)肽鍵顯色效果增強(qiáng)，從而減少了因蛋白質(zhì)種類引起的偏差。其靈敏度比雙縮豚法高100倍。此法操作簡(jiǎn)便，適于蛋白質(zhì)含量較微小的樣品測(cè)定?？蓹z測(cè)的最低蛋白質(zhì)含量達(dá)5ug,通常測(cè)定范圍5100ug。mL蛋白質(zhì)，也可用于酪氨酸和色氨酸的定量測(cè)定。缺點(diǎn)是操作煩瑣，耗時(shí)較長(zhǎng)，要精確控制操作時(shí)間，標(biāo)準(zhǔn)曲線不是嚴(yán)格的直線形式，且專一性差，干擾物質(zhì)（酚類、檸檬酸、Tris緩沖液、甘氨酸、糖類、甘油等）較多。考馬斯亮藍(lán)法是靈敏度更高的一種方法，優(yōu)點(diǎn)有：靈敏度高，比lowry法高4倍左右，最低檢測(cè)達(dá)1-5微克；測(cè)定快速、簡(jiǎn)便，染色穩(wěn)定；干擾物質(zhì)少。缺點(diǎn)是用于不同蛋白質(zhì)測(cè)定時(shí)有較大的偏差

19、；仍有干擾，如SDS、去污劑、Tritonx100等；標(biāo)準(zhǔn)曲線有輕微的非線性。7、Folin-酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)時(shí)受哪些因素的干擾？答：Folin-酚試顯色反應(yīng)是由絡(luò)氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起的，因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和疏基類化合物均有干擾作用。止匕外，不同蛋白質(zhì)音絡(luò)氨酸、色氨酸含量的不同而使顯色強(qiáng)度稍有差異。8、用苗三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí)，加入Vc的作用是什么？答：由于該反應(yīng)的第一步是苗三酮的還原，而還原型苗三酮在含氧量高的情況下很容易再氧化，對(duì)反應(yīng)有干擾，因此，常在反應(yīng)體系中加入還原劑，以阻止還原型苗三酮的再氧化。9、苗三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí)為什么要除去蛋白

20、質(zhì)？用10%乙酸除去蛋白質(zhì)的原理是什么？答：由于蛋白質(zhì)和多肽中的游離氨基酸也會(huì)產(chǎn)生同樣反應(yīng)，因此，對(duì)于含大量蛋白質(zhì)和多肽的樣品，應(yīng)先用蛋白質(zhì)沉淀劑將其除去。常用的蛋白質(zhì)沉淀劑有10%乙酸、磺基水楊酸（SSA）、三氯乙酸（TCA）、過(guò)氯酸（PCA）等，其中以乙酸提取總氨基酸的效果較好。原理：10%乙酸和蛋白質(zhì)反應(yīng)使之沉淀下來(lái)（）10、用苗三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí)，為什么要用無(wú)氨蒸儲(chǔ)水？答：氨基酸與苗三酮反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是還原型苗三酮與另一分子苗三酮和一分子氨的縮合脫水反應(yīng)。故，若蒸儲(chǔ)水中含有氨將使氨基酸含量增大。帶來(lái)誤差。11、測(cè)定植物組織中游離氨基酸總量有何生理意義？答:測(cè)定植物體內(nèi)游離氨基酸

21、含量對(duì)研究植物在不同條件下及不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期氮代謝變化、植物對(duì)氮素的吸收、運(yùn)輸、同化及營(yíng)養(yǎng)狀況等有重要意義。12、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，3,5二硝基水楊酸試劑（DNS）的作用是什么？答：淀粉酶水解淀粉生成的麥芽糖，可用3,5-二硝基水楊酸試劑測(cè)定。由于麥芽糖能將后者還原生成3-氨基-5-硝基水楊酸的顯色基團(tuán)，在一定范圍內(nèi)其顏色的深淺與糖的濃度成正比，故可求出麥芽糖的含量。13、測(cè)定（a+B）-淀粉酶總活力時(shí)，為什么要將淀粉酶原液稀釋成淀粉酶稀釋液后進(jìn)行反應(yīng)。答：淀粉酶原液主要是用于鈍化伏淀粉酶，從而測(cè)定a標(biāo)粉酶的活力。而淀粉酶稀釋液主要是用于測(cè)出（“十B”淀粉酶總活力，從而可得出伏淀粉酶的活力。1

22、4、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，為什么要將酶提取液和淀粉溶液分別放在40c水浴中預(yù)保溫？答:因?yàn)閍旋粉酶的最適溫度在40c50c之間，在這一溫度范圍內(nèi)a標(biāo)粉酶的活性最強(qiáng)，催化淀粉的能力最強(qiáng)。因此，將酶提取液和淀粉溶液分別放在40c水浴中預(yù)保溫,有利于淀粉酶活性的測(cè)定，減少誤差。15、測(cè)定硝酸還原酶活性的離體法和活體各有何特點(diǎn)？16、答：活體法步驟簡(jiǎn)單，適合快速、多組測(cè)定，重復(fù)性不好，應(yīng)在4C離體法步驟復(fù)雜，但重復(fù)性較好。需要在低溫和NADH的條件下進(jìn)行。17、16、為什么用活體法測(cè)定硝酸還原酶的材料，在取樣前要進(jìn)行一段時(shí)間的光合作用？答：因?yàn)闇y(cè)定前材料在進(jìn)行光合作用，會(huì)積累能量物質(zhì)，可促進(jìn)硝酸還原酶的產(chǎn)

23、生。17、活體法測(cè)植物體內(nèi)硝酸還原酶活力實(shí)驗(yàn)中，硝酸鹽還原過(guò)程為何在黑暗中進(jìn)行？答：硝酸鹽還原過(guò)程應(yīng)在黑暗中進(jìn)行，以防亞硝酸鹽還原為氨。18、活體法測(cè)植物體內(nèi)硝酸還原酶活力實(shí)驗(yàn)中，如何判斷真空抽氣的終點(diǎn)？答：真空抽氣時(shí)，葉片完全軟化沉入杯底，則代表葉片組織間隙的氣體得以全部排除，那么就是真空抽氣的終點(diǎn)。19、用2,6-二氯酚靛酚滴定7fe測(cè)定維生素C含量時(shí)，為什么強(qiáng)調(diào)滴定時(shí)間不超過(guò)2分鐘答：維生素C具有很強(qiáng)的還原性，如果滴定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，維生素C就會(huì)被空氣中的氧氣氧化，從而減少維生素C的含量，最終影響到維生素C含量的測(cè)定。20、為什么用2,6-二氯酚靛酚滴定7fe測(cè)定維生素C含量時(shí)，要在測(cè)定的同時(shí)

24、進(jìn)行2,6-二氯酚靛酚溶液的標(biāo)定答：是為了知道此時(shí)2,6-D染料的滴定度（每ml染料相當(dāng)于抗壞血酸的mg數(shù)）。是因?yàn)?,6-D染料很不穩(wěn)定，隨著時(shí)間的推移，其滴定度一直在變化中，因此只能現(xiàn)測(cè)現(xiàn)用。21、簡(jiǎn)述滴定法測(cè)定Vc含量的實(shí)驗(yàn)原理。22、答：還原型抗壞血酸還原染料2,6-二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原后紅色消失。還原型抗壞血酸還原2,6-二氯靛酚后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒(méi)有雜質(zhì)干擾時(shí)，一定量的樣品提取液還原標(biāo)準(zhǔn)2,6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。23、22.為了準(zhǔn)確測(cè)定果蔬的抗壞血酸含量，在測(cè)定過(guò)程應(yīng)注意些什么？24、答：實(shí)驗(yàn)所用的蒸儲(chǔ)水必須是無(wú)氨水。濾必須

25、用干燥濾紙。格掌握加入抗壞血酸的含量。準(zhǔn)曲線應(yīng)在測(cè)定樣品的同時(shí)做，以減少操作及反應(yīng)條件的誤差。定要水沸騰后才能將試管放入加熱，而且水浴鍋的水位一定要高于試管內(nèi)試劑的高度。管從沸水浴中取出，一定要冷水迅速冷卻后才能加入乙醇。（因加熱時(shí)形成的紅色還原型苗三銅，在冷卻過(guò)程被空氣的氧氧化而褪色，而苗三銅和氨基酸的藍(lán)紫色反應(yīng)物仍留著，并變得更加明顯。）銅和氨基酸反應(yīng)生成的顏色在1小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定，所以要抓緊時(shí)間比色。靈敏度在很大程度上與H離子濃度有關(guān)，最適，應(yīng)嚴(yán)格控制。25、23.簡(jiǎn)述“過(guò)氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳”實(shí)驗(yàn)中所用的過(guò)硫酸鏤、四甲基乙二胺、蔗糖、澳酚藍(lán)、H2O2等試劑的作用是什么？答：過(guò)

26、硫酸鏤的作用：使丙烯酰胺（Acr）和交聯(lián)劑甲叉丙烯酰胺（Bis）聚合成聚丙烯酰胺凝膠。四甲基乙二胺（TEMED）的作用：作為丙烯酰胺（Acr）和交聯(lián)劑甲叉丙烯酰胺（Bis）聚合的加速劑。蔗糖的作用：使同工酶沉在點(diǎn)樣孔底部，防止同工酶漂浮。澳酚藍(lán)的作用：可以作為電泳進(jìn)度的指示分子，起指示作用。H2O2的作用：作為氧化物，使過(guò)氧化物酶同工酶催化H2O2分解，從而來(lái)進(jìn)行植物過(guò)氧化物酶同工酶的測(cè)定。24.什么叫同工酶？測(cè)定同工酶有什么意義？答：同工酶：能催化同一種化學(xué)反應(yīng)但其分子結(jié)構(gòu)和帶電性質(zhì)不同的一組酶。（由于同一種酶可分布于多種臟器組織，它們之中的任何一個(gè)發(fā)生病變，都可引起酶在血清中的活力變化。除

27、了少數(shù)組織專一性的酶以外，大多數(shù)血清酶不能特異地反映某個(gè)特定組織的病變。）而不同臟器或組織的同工酶譜型不同，當(dāng)其發(fā)生病變后，釋放到血清中的各種同工酶的比例也不一致，所以血清酶的同工酶譜型的改變能精確地反映出患病的部位和損傷的程度，提高了血清酶測(cè)定在反映組織病變上的專一性。25、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過(guò)氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中，電泳結(jié)束后如何進(jìn)行染色？電泳完畢，將電泳槽取出，倒去緩沖液，取下凝膠管，放入培養(yǎng)皿中。用一個(gè)帶有長(zhǎng)針頭的注射器，吸滿水，將針頭沿管壁插入，同時(shí)慢慢地將注射器中的水推出，并不斷轉(zhuǎn)動(dòng)凝膠管，將凝膠管擠脫出來(lái)，也可用洗耳球擠壓。取聯(lián)苯胺母液十H2O十H2O2,混勻后倒入盛有凝膠條的培

28、養(yǎng)皿。此時(shí)可以看到膠條上出現(xiàn)藍(lán)色或棕褐色環(huán)，即過(guò)氧化物酶帶，約十min后用自來(lái)水沖洗，這時(shí)藍(lán)色帶也慢慢變成棕褐色。26、簡(jiǎn)述聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)的原理聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合而成，具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其網(wǎng)孔大小可由凝膠濃度和交聯(lián)度加以調(diào)節(jié)。凝膠電泳兼有電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)。被分離物質(zhì)由于所載電荷數(shù)量、分子大小和形狀的差異，因此在電泳時(shí)產(chǎn)生不同的泳動(dòng)速率而相互分離。利用特異性的顏色反應(yīng)使待測(cè)酶著色，這樣就可在凝膠中展現(xiàn)出酶譜。過(guò)氧化物酶是植物體內(nèi)常見(jiàn)的氧化酶。植物體內(nèi)許多生理代謝過(guò)程常與它的活性及其同工酶的種類有關(guān)。利用過(guò)氧化物酶能催化H2O2把聯(lián)苯

29、胺氧化成藍(lán)色或棕褐色產(chǎn)物的原理，將經(jīng)過(guò)電泳后的凝膠置于有H2O2及聯(lián)苯胺的溶液染色，出現(xiàn)藍(lán)色或棕褐色部位即為過(guò)氧化物酶同工酶在凝膠中存在的位置，多條有色帶即構(gòu)成過(guò)氧化物酶同工酶譜。29、葉綠素a在藍(lán)光區(qū)也有吸收峰，能否用這一吸收峰波長(zhǎng)進(jìn)行葉綠素a的定量分析？為什么？不能，因?yàn)轭惡}卜素的最大吸收帶在400500的藍(lán)紫光區(qū)，不吸收紅光，為了排除類胡蘿卜素的干擾，所以選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸收峰；并且葉綠素的溶液呈綠色，易與藍(lán)紫光產(chǎn)生遮光效果，混淆實(shí)驗(yàn)效果。31、為什么提取葉綠素時(shí)干材料一定要用80%的丙酮，而新鮮的材料可以用無(wú)水丙酮提??？因?yàn)槿~綠素分子結(jié)構(gòu)的“頭部”是親水的，與蛋白質(zhì)結(jié)合很牢，

30、需經(jīng)過(guò)水解作用才可被提取出來(lái)。而干材料中沒(méi)有水分，故提取葉綠素時(shí)干材料一定要用80%丙酮或95%乙醇提取，而新鮮的材料總含有水分，可以贏無(wú)水丙酮或乙醇提取。33、影響呼吸速率測(cè)定的因素有哪些？答：1.內(nèi)部因素。不同種類植物的呼吸速率不同，凡是生長(zhǎng)快的植物呼吸速率就高，生長(zhǎng)慢的呼吸速率就低；一般旱生植物，生長(zhǎng)緩慢，呼吸速率比水生植物低；陰生植物所處的光強(qiáng)度較弱，呼吸也較弱，呼吸速率比陽(yáng)生植物低。同一種植物在不同的生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期，呼吸速率也不同，一般在幼苗期、開(kāi)花期等生長(zhǎng)旺盛期，呼吸速率增高。同一種植物的不同器官，呼吸速率也不同，一般生殖器官比營(yíng)養(yǎng)器官高，幼嫩組織器官比衰老的組織器官高，種子內(nèi)胚的呼

31、吸速率比胚乳高。多年生植物的呼吸速率還表現(xiàn)出季節(jié)周期性變化，在溫帶生長(zhǎng)的植物，春天呼吸速率最高，夏天略降低，秋天又上升，以后一直下降，到冬天降到最低點(diǎn)，這種周期性變化除了外界環(huán)境的影響外，與植物體的代謝強(qiáng)度、酶活性及呼吸底物的多寡也有密切關(guān)系。2.外界因素對(duì)呼吸速率的影響。（1）溫度：溫度呼吸作用的影響主要表現(xiàn)為溫度對(duì)呼吸酶活性的影響。呼吸速率在一定范圍內(nèi)隨溫度的增高而增高，達(dá)到最高值后，繼續(xù)增高溫度，呼吸速率反而下降。一般植物在0c以下，呼吸作用很弱或幾乎停止，呼吸作用的最適溫度一般在25c35c之間，呼吸作用的最高溫度，一般在35c45C。呼吸作用的最低溫度因植物種類不同有很大差異。呼吸作

32、用的最適溫度總是比光合作用的最適溫度高。（2）氧氣：氧是有氧呼吸途徑運(yùn)轉(zhuǎn)的必要因素。從有氧呼吸來(lái)看，在氧濃度較低情況下，呼吸速率與氧濃度成正比，達(dá)到氧飽和點(diǎn)以后，則無(wú)促進(jìn)作用。氧濃度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)對(duì)植物產(chǎn)生毒害。根系缺氧會(huì)抑制根尖細(xì)胞分裂，影響根系內(nèi)物質(zhì)的運(yùn)輸，對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育造成嚴(yán)重危害。（3）二氧化碳二氧化碳是呼吸作用的最終產(chǎn)物，當(dāng)外界環(huán)境中二氧化碳濃度增高時(shí)，脫竣反應(yīng)減慢，呼吸作用受到抑制。一些植物（如豆科）的種子由于種皮限制，使呼吸作用釋放的CO2難以釋出，種皮內(nèi)積聚起高濃度的CO2抑制了呼吸作用，從而導(dǎo)致種子休眠。（4）水分植物組織的含水量與呼吸作用有密切的關(guān)系。在一定范圍內(nèi)，呼吸速率

33、隨組織含水量的增加而升高。干燥種子的呼吸作用很微弱，當(dāng)種子吸水后，呼吸速率迅速增加。因此，種子含水量是制約種子呼吸作用強(qiáng)弱的重要因素。對(duì)于整體植物來(lái)說(shuō)，接近萎意時(shí)，呼吸速率有所增加，如萎蕉時(shí)間較長(zhǎng)，細(xì)胞含水量則成為呼吸作用的限制因素。影響呼吸作用的外界因素除了溫度、氧氣、二氧化碳、水分之外，呼吸底物的含量（如可溶性糖）、機(jī)械損傷、一些礦質(zhì)元素（如磷、鐵、銅等）對(duì)呼吸也有顯著影響。此外病原菌感染可使寄主的線粒體增多，多酚氧化酶活性提高，抗鼠呼吸和PPP途徑增強(qiáng)。34、在呼吸速率測(cè)定中哪些步驟容易出現(xiàn)誤差？應(yīng)怎樣避免。1）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)該不時(shí)輕輕的搖動(dòng)，使溶液表面的BaCO薄膜破壞，有利于CO的充分

34、吸收2）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還要防止口中呼出的氣體進(jìn)入瓶?jī)?nèi)3）應(yīng)該用無(wú)CO蒸儲(chǔ)水或煮沸過(guò)的冷開(kāi)水洗滌廣口瓶35、廣口瓶橡皮塞上加一堿石灰管有何作用？37、在SOD測(cè)定中為什么設(shè)照光對(duì)照管和暗中空白管？設(shè)照光對(duì)照管為消除日光燈的光質(zhì)差異；暗中空白管用來(lái)在測(cè)定吸收峰時(shí)做空白對(duì)照的。38、影響SOD活力測(cè)定準(zhǔn)確性的主要因素是什么？應(yīng)如何克服？主要因素是：1試管，所用試管的玻璃質(zhì)量要一樣，包括厚度，直徑，質(zhì)量2光照條件，光照條件要求一致，即照光時(shí)試管放的高度，背景等各外界條件因素要一致39.植物缺鎂和缺鐵表現(xiàn)癥狀有何異同為什么？答：相同點(diǎn)：缺鎂和缺鐵都呈現(xiàn)缺綠癥。不同點(diǎn)：缺鎂出現(xiàn)的缺綠癥狀首先從下部老葉上表現(xiàn)出來(lái)，而缺鐵的缺綠癥狀首先從上部新生葉表現(xiàn)出來(lái)。原因是鎂是參與循環(huán)的元素，即可再利用元素，而鐵是不參與循環(huán)的元素，即不可再利用元素。40簡(jiǎn)要介紹測(cè)定光合速率的三種方法及原理？（1）改良半葉法：主要是測(cè)定單位時(shí)間、單位面積葉片干重的增加量；（2）紅外線CO2分析法，其