紫外分光光度法測(cè)定飲料中的苯甲酸

1、實(shí)驗(yàn)三 紫外分光光度法測(cè)定飲料中的防腐劑苯甲酸1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器1.1 試劑苯甲酸（AR），雪碧汽水1.2 儀器日立 UV-3010 紫外-可見(jiàn)光譜儀， 1cm 石英比色皿2 實(shí)驗(yàn)原理與方法為了防止食品在儲(chǔ)存、運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生腐敗、變質(zhì)，常在食品中添加少量防腐劑。防 腐劑使用的品種和用量在食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中都有嚴(yán)格的規(guī)定，苯甲酸及其鈉鹽、鉀鹽是食品 衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)允許使用的主要防腐劑之一。我國(guó)規(guī)定了苯甲酸（鹽）在碳酸飲料中最大使用量 為0.2g/kg。苯甲酸具有芳香結(jié)構(gòu)，在波長(zhǎng) 225nm和272nm處有強(qiáng)吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同時(shí)食品中其它成分也可能產(chǎn)生干擾，因此一般需要預(yù) 先將苯甲酸與其它成分

2、分離。從食品中分離防腐劑常用的方法有蒸餾法和溶劑萃取法等。 本實(shí)驗(yàn)測(cè)定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味劑等，但一般在紫外區(qū)無(wú)吸收，故不 干擾測(cè)定，樣品不用處理，苯甲酸（鈉）在 225nm 處有最大吸收，可在 225nm 波長(zhǎng)處測(cè)定 標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品溶液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線法，可求出樣品中苯甲酸的含量。3 實(shí)驗(yàn)步驟3.1 苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制稱取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加適量蒸餾水定容，配制成1mg/mL溶液，吸 取此液 5mL 于 50mL 容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，每毫升溶液相當(dāng)于苯甲酸100ug。3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制取苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.00、1.00、2.00、

3、4.00、6.00mL,分別置于50mL容量瓶中，用 蒸餾水溶液稀釋至刻度。以水為對(duì)照液，測(cè)定其中 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)溶液的紫外可見(jiàn)吸收光譜（測(cè) 定波長(zhǎng)范圍為200350nm）,找出入max，然后在入max處測(cè)定五個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度 A。3.3 樣品處理和測(cè)定雪碧飲料除二氧化碳后，準(zhǔn)確移取 2.5mL于100mL容量瓶中，用蒸餾水定容，在入max處 測(cè)定吸光度。4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)得苯甲酸在227nm波長(zhǎng)處有最大吸光值表1標(biāo)準(zhǔn)液吸光度測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)液（卩g/ml）024812吸光度0.0000.1390.2830.6830.887圖1苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得雪碧樣品的苯甲酸吸光度為0.357從曲線上找出相應(yīng)的苯甲

4、酸濃度Cx=4.612卩g/mlVi :樣品定容后體積 為100mlV2 :所取樣品體積 為25ml因?yàn)檠┍痰拿芏燃s等于 1kg/m ,故4.612卩g/ml4.612卩g/g=4.612mg/kg根據(jù)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)一對(duì)汽水類食品中苯甲酸的 最大使用量做了規(guī)定：苯甲酸<=0.2g/Kg，本實(shí)驗(yàn)使用的雪碧樣品苯甲酸濃度 4.612mg/Kg<0.2g/Kg,即低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。5實(shí)驗(yàn)分析本實(shí)驗(yàn)的R2=0.988在實(shí)驗(yàn)線性回歸的范圍內(nèi)，但是有待提高。1. 可以在苯甲酸定容的時(shí)候注意操作來(lái)提高。2. 可以在配置標(biāo)準(zhǔn)曲線的時(shí)候注意移液的規(guī)范操作。3.

5、 在上機(jī)對(duì)比色皿的表面的擦洗。要用擦鏡紙。6思考題1. 舉例說(shuō)明日常生活中遇到的哪些食品中有防腐劑？答：低鹽醬菜、醬類、蜜餞、葡萄酒、果酒、軟糖、醬油、食醋、果醬2. 用什么方法從樣品中把苯甲酸分離出來(lái)？答：(1)蒸餾法，加入無(wú)水硫酸鈉、磷酸和水，加熱蒸餾出樣品中的苯甲酸。(2)加入鹽酸酸化，然后用乙醚提取3. 食品中苯甲酸檢測(cè)還有哪些方法？答：氣相色譜法，液相色譜法，衍生后比色分析法4. 苯甲酸通過(guò)什么排泄？答：口服迅速?gòu)南牢眨c甘氨酸在肝內(nèi)結(jié)合形成馬尿酸，后者在12小時(shí)內(nèi)迅速?gòu)哪蛑信懦?，在最?小時(shí)內(nèi)即達(dá)用量97%。如口服劑量大，部分可以偶合的苯甲?；?糖醛酸從尿中排泄。5. 如何利用一元線性回歸法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線及計(jì)算樣品中苯甲酸含量？答：先分別配出濃度為 0卩g/ml、2 ii g/ml、4卩g/ml、8卩g/ml、12卩g/ml的苯甲酸標(biāo)準(zhǔn) 溶液