第三章+藥物的雜質(zhì)檢查

1、第三章第三章 藥物的雜質(zhì)檢查藥物的雜質(zhì)檢查藥藥物分析物分析一般雜質(zhì)的檢查3藥物雜質(zhì)與限量1雜質(zhì)檢查方法2特殊雜質(zhì)的檢查特殊雜質(zhì)的檢查4一、藥物的雜質(zhì)與純度一、藥物的雜質(zhì)與純度1.純度（純度（Purities） 藥物的純凈程度藥物的純凈程度2.雜質(zhì)雜質(zhì) (Impurities) 藥物中存在的藥物中存在的無治療作用無治療作用或或影響影響藥物的藥物的穩(wěn)定性穩(wěn)定性和和療療效效，甚至對人體健康甚至對人體健康有害有害的物質(zhì)。的物質(zhì)。 簡言之簡言之: :任何影響藥品純度的物質(zhì)。任何影響藥品純度的物質(zhì)。3.3.藥物純度與試劑純度藥物純度與試劑純度共同點均規(guī)定所含雜質(zhì)均規(guī)定所含雜質(zhì)的的種類種類和和限量限量. .

2、不同點藥物純度從用藥藥物純度從用藥安全安全、有效有效和對藥物和對藥物穩(wěn)定性穩(wěn)定性等方面考慮等方面考慮, ,只有合只有合格品和不合格品格品和不合格品. . 試劑純度是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對使用的影響以及試劑試劑純度是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對使用的影響以及試劑的使用范圍和使用目的加以規(guī)定的使用范圍和使用目的加以規(guī)定, ,它不考慮雜質(zhì)對生物體的它不考慮雜質(zhì)對生物體的生理作生理作用用及及毒副作用毒副作用. .化學(xué)試劑一般分為4個等級基準試劑、優(yōu)級純或特種試劑(光譜純、色譜純、農(nóng)藥殘留檢測級)、分析純和化學(xué)純化學(xué)試劑不化學(xué)試劑不能代替藥品！能代替藥品！二、雜質(zhì)的來源二、雜質(zhì)的來源雜質(zhì)的來源生產(chǎn)過程

3、儲藏過程合成過程中，原料不純或反應(yīng)不完全，中間體、合成過程中，原料不純或反應(yīng)不完全，中間體、 副產(chǎn)物在精制中未除盡副產(chǎn)物在精制中未除盡制劑過程制劑過程 試劑、溶劑、還原劑殘留試劑、溶劑、還原劑殘留 異構(gòu)體、多晶體異構(gòu)體、多晶體使用的金屬器皿、裝置、工具引入的金屬雜質(zhì)使用的金屬器皿、裝置、工具引入的金屬雜質(zhì)在溫度、濕度、日光、空氣等外界條件影響下，或在溫度、濕度、日光、空氣等外界條件影響下，或因微生物的作用，引起藥物發(fā)生水解、氧化、分解、因微生物的作用，引起藥物發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等變化異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等變化n生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)例子生產(chǎn)過程中

4、引入雜質(zhì)例子: 雙氯非那胺雙氯非那胺ClClClClSO2ClSO2NH2ClClSO2ClSO2ClClClSO2NH2SO2NH2氯磺化ClSO3H胺化NH4OH胺化NH4OH（反應(yīng)不完全引入鄰二氯苯）（分解產(chǎn)生氯化銨）（未洗凈引入氯化物） 主要用于治療各型青光眼（開角型、閉角型及繼發(fā)性青光眼），尤其適用于對乙酰唑胺有耐藥性的患者。 7例：例： 阿斯匹林由水楊酸乙酰化制得阿斯匹林由水楊酸乙?；频肙HCOOH(CH3CO)2O+COOHOCOCH3CH3COOHH2S O47 0 7 5 C+乙?；煌耆阴；煌耆?水楊酸水楊酸(雜質(zhì)雜質(zhì))+8n貯藏過程中引入的雜質(zhì)例子貯藏過程中引入的雜

5、質(zhì)例子麻醉乙醚在日光、空氣及濕氣作用下麻醉乙醚在日光、空氣及濕氣作用下, 易氧化易氧化分解為分解為醛醛及有毒的及有毒的過氧化物過氧化物。CH3CH2OCH2CH3 CH3CHO + CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3 （二羥乙基過氧化物二羥乙基過氧化物）藥典規(guī)定藥典規(guī)定:起封后起封后24小時內(nèi)小時內(nèi)使用使用n生產(chǎn)、貯藏過程中都引入的雜質(zhì)例子生產(chǎn)、貯藏過程中都引入的雜質(zhì)例子:n抗甲狀腺藥卡比馬唑抗甲狀腺藥卡比馬唑CHOC2H5ClCH2OC2H5CHOC2H5CH2OC2H5H3CHNNNCH3SHNNCH3SCOOC2H5NNSCOOC2H5CH3胺化CH3NH2，CH3OH環(huán)合K

6、SCN縮合ClCOOC2H5,C5H5N重排（甲巰咪唑）按毒性分類雜質(zhì)的種類毒性雜質(zhì)和信號雜質(zhì)按來源分類按理化性質(zhì)分類工藝雜質(zhì)、降解雜質(zhì)、反應(yīng)物和試劑中混入的雜質(zhì)有機雜質(zhì)、無機雜質(zhì)、殘留溶劑一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)自然界分布廣泛，在多自然界分布廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過種藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)，程中容易引入的雜質(zhì)，它們含量的高低與生產(chǎn)它們含量的高低與生產(chǎn)工藝水平密切相關(guān)。所工藝水平密切相關(guān)。所以也常稱為信號雜質(zhì)。以也常稱為信號雜質(zhì)。是指在特定的藥物生產(chǎn)和是指在特定的藥物生產(chǎn)和貯藏過程中引入的雜質(zhì)，貯藏過程中引入的雜質(zhì)，也稱有關(guān)物質(zhì)。這類雜質(zhì)也稱有關(guān)物質(zhì)。這類雜質(zhì)隨藥物不同則不同。隨

7、藥物不同則不同。三、雜質(zhì)的種類三、雜質(zhì)的種類如重金屬、如重金屬、砷鹽砷鹽一般無毒，一般無毒，但其含量的但其含量的多少可反映多少可反映出藥物的純出藥物的純度情況。度情況。四、雜質(zhì)的限量四、雜質(zhì)的限量( (Limit Test) )藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。通常用百分之幾（%）或百萬分之幾 (ppm )三種檢查方法三種檢查方法比較法靈敏度法標準對照法限量檢查法限量檢查法操作操作: :平行試驗平行試驗比較兩比較兩比色管的顏色或濁比色管的顏色或濁度度, ,判斷雜質(zhì)限量是判斷雜質(zhì)限量是否符合規(guī)定。否符合規(guī)定。管管2（對照管）（對照管）管管1（樣品管）（樣品管） 取限度量被檢雜質(zhì)的對照溶液取限度量被檢雜

8、質(zhì)的對照溶液,與一與一定量供試品溶液在相同條件下處理定量供試品溶液在相同條件下處理, 比較反比較反應(yīng)結(jié)果應(yīng)結(jié)果, 判斷供試液中所含雜質(zhì)限度是否符判斷供試液中所含雜質(zhì)限度是否符合規(guī)定。合規(guī)定。對對照照法法供試品量雜質(zhì)最大允許量雜質(zhì)限量100(%)供試品量標準溶液的體積標準溶液的濃度100%100SVC(%)L注意單位統(tǒng)一！限量計算公式限量計算公式610SCV)ppm(L 若用若用ppm表示雜質(zhì)限量則：表示雜質(zhì)限量則：注意注意: 單位是否統(tǒng)一單位是否統(tǒng)一 供試品是否有稀釋供試品是否有稀釋 表示方法表示方法%或或ppm 在供試品溶液中加入試劑在供試品溶液中加入試劑, ,在試驗在試驗條件下反應(yīng)條件下反

9、應(yīng), ,不得出現(xiàn)正反應(yīng)不得出現(xiàn)正反應(yīng). . 靈靈敏敏度度法法比比較較法法 取一定量供試品取一定量供試品,在規(guī)定條件下在規(guī)定條件下測定待檢雜質(zhì)的參數(shù)測定待檢雜質(zhì)的參數(shù), 與規(guī)定限量比較與規(guī)定限量比較, 判斷供試品中雜質(zhì)限量判斷供試品中雜質(zhì)限量.示例一 茶苯海明中氯化物檢查取本品取本品0.30g 置置200 ml量瓶中，加水量瓶中，加水50ml、氨試液、氨試液3ml和和10%硝酸硝酸銨溶液銨溶液6ml，置水浴上加熱，置水浴上加熱5min，加硝酸銀試液，加硝酸銀試液25ml，搖勻，再置，搖勻，再置水浴上加熱水浴上加熱15min，并時時振搖，放冷，加水稀釋至刻度，搖勻，并時時振搖，放冷，加水稀釋至刻度

10、，搖勻，放置放置15min，濾過，取續(xù)濾液，濾過，取續(xù)濾液25ml置置50ml50ml納氏比色管中，加稀硝酸納氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水稀釋至，加水稀釋至50ml，搖勻，在暗處放置，搖勻，在暗處放置5min，與標準氯化鈉，與標準氯化鈉溶液溶液( (10g Cl-/ml)1.5 ml制成的對照液比較，求氯化物的限量制成的對照液比較，求氯化物的限量。C=10 g/mlV=1.5 mlS=?L=CVS100% =10 1.510-60.3025200 100% = 0.04%（標準溶液濃度）（標準溶液體積）（供試品量）示例二 腎上腺素中酮體的檢查取本品取本品0.2g, ,置置100ml量瓶中

11、，加鹽酸溶液量瓶中，加鹽酸溶液(9-2000)溶解并稀釋溶解并稀釋至刻度，搖勻，在至刻度，搖勻，在310nm處測定吸光度不得超過處測定吸光度不得超過0.05，酮體的，酮體的百分吸收系數(shù)為百分吸收系數(shù)為435，求酮體的限量，求酮體的限量V樣品=100 mlC酮體=?S樣品=0.2 gA= bcE1%1cm= bc= 11100= 100 E1%1cm1%： g/ml,b=1cm（）C酮體 =A=A100 E1%1cm=0.05435=1.15 10-6100C樣品=0.2100=2.010-3g/mlL=C酮體C樣品 100%=1.15 10-610-32.0=0.06%g/ml示例三 對乙酰氨

12、基酚中氯化物的檢查n取對乙酰氨基酚取對乙酰氨基酚2.0g，加水，加水100mL加熱溶解后冷卻，加熱溶解后冷卻，濾過，取濾液濾過，取濾液25mL，依法檢查氯化物，發(fā)生的渾濁，依法檢查氯化物，發(fā)生的渾濁與標準氯化鈉溶液與標準氯化鈉溶液5.0mL（每（每1mL相當(dāng)于相當(dāng)于10 g的的Cl）制成的對照液比較，不得更濃。求氯化物的限量是多制成的對照液比較，不得更濃。求氯化物的限量是多少？少？0.01%1001000000100252510%100(%)SVCL示例四 谷氨酸鈉中重金屬的檢查n 取本品取本品1.0g，加水，加水23mL溶解后，加醋酸鹽緩沖溶解后，加醋酸鹽緩沖液（液（pH3.5)2mL，依法

13、檢查，與標準鉛溶液（，依法檢查，與標準鉛溶液（10 gPb/1mL）所呈顏色比較，不得更深，重金屬限）所呈顏色比較，不得更深，重金屬限量為百萬分之十，求所取標準鉛溶液多少量為百萬分之十，求所取標準鉛溶液多少mL？)(0 . 11000000/1100 . 11000000/10,mLCSLVSVCL習(xí)題一 磷酸可待因中嗎啡的檢查取本品取本品0.10 g, ,加鹽酸溶液加鹽酸溶液(9-1000)使溶解成使溶解成5ml，加亞硝酸鈉試，加亞硝酸鈉試液液2ml，放置，放置15min，加氨試液，加氨試液3ml，所顯顏色與嗎啡試液，所顯顏色與嗎啡試液 取無取無水嗎啡水嗎啡2.0mg，加鹽酸溶液，加鹽酸溶液

14、(9-1000)使溶解成使溶解成100ml 5.0ml用同用同一方法制成的對照液比較，不得更深。問限量是多少？一方法制成的對照液比較，不得更深。問限量是多少？%1 . 0%10010. 00 . 5100102SVCL3習(xí)題二 苯巴比妥鈉中重金屬的檢查取本品取本品2.0g, ,加水加水32ml，溶解后緩緩加入，溶解后緩緩加入1mol/L鹽酸溶液鹽酸溶液8ml，充分振搖，靜置數(shù)分鐘，濾過，取濾液充分振搖，靜置數(shù)分鐘，濾過，取濾液20ml，加酚酞指示液，加酚酞指示液1 1滴滴與氨試液恰顯粉紅色，加醋酸鹽緩沖液與氨試液恰顯粉紅色，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量成與水適量成25ml，依法檢

15、查，含重金屬不得超過，依法檢查，含重金屬不得超過10ppm。試計算應(yīng)取得標。試計算應(yīng)取得標準鉛溶液準鉛溶液( (每每1ml相當(dāng)于相當(dāng)于10g Pb) )的體積。的體積。ml0 . 11010101040202CLSV66 一、雜質(zhì)的研究規(guī)范一、雜質(zhì)的研究規(guī)范（一）有機雜質(zhì)在質(zhì)量標準中的項目名稱（一）有機雜質(zhì)在質(zhì)量標準中的項目名稱 1.1.以雜質(zhì)的名稱作為項目名稱以雜質(zhì)的名稱作為項目名稱25 中國藥典（中國藥典（2010）收載硝苯地平有關(guān)物質(zhì)）收載硝苯地平有關(guān)物質(zhì)中雜質(zhì)中雜質(zhì)、雜質(zhì)、雜質(zhì)262.以某類雜質(zhì)的總稱作為項目名稱以某類雜質(zhì)的總稱作為項目名稱雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不明確，如硝酸毛果蕓香堿中的雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不

16、明確，如硝酸毛果蕓香堿中的“其他生物堿其他生物堿”3.以檢測方法作為項目名稱以檢測方法作為項目名稱雜質(zhì)結(jié)構(gòu)未知，也沒有具體類別；如雜質(zhì)吸光度、雜質(zhì)結(jié)構(gòu)未知，也沒有具體類別；如雜質(zhì)吸光度、溶液透光率溶液透光率27(二）雜質(zhì)檢查項目的確定二）雜質(zhì)檢查項目的確定 由質(zhì)量研究和穩(wěn)定性研究中檢出的，并在由質(zhì)量研究和穩(wěn)定性研究中檢出的，并在批量生產(chǎn)中出現(xiàn)的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物。批量生產(chǎn)中出現(xiàn)的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物。 根據(jù)其起始原料、生產(chǎn)工藝及穩(wěn)定性情況根據(jù)其起始原料、生產(chǎn)工藝及穩(wěn)定性情況確定。確定。 28（三）雜質(zhì)限度的確定293031二、雜質(zhì)的常用檢查法二、雜質(zhì)的常用檢查法（二）（二）色譜方法色譜方法（一）（一）化

17、學(xué)方法化學(xué)方法（三）（三）光譜方法光譜方法（四）（四）其他方法其他方法ClOHCONO2NHCl雜質(zhì)：5-氯水楊酸雜質(zhì)：2-氯-4-硝基苯胺藥物：氯硝柳胺ClOHOHOClOOOFe/3+FeCl3紫色配合物雜質(zhì)：5-氯水楊酸1.1.顯色反應(yīng)：顯色反應(yīng)：雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色生產(chǎn)原料殺鰻劑、滅螺劑殺鰻劑、滅螺劑 O2NNH2ClO2NN2ClClO2NNClNNHCH2CH2NH2+NaNO2+2HCl+NaCl2H2ONHCH2CH2NH2+雜質(zhì)：2-氯-4-硝基苯胺重氮化-偶合反應(yīng)芳伯氨基2.2.沉淀反應(yīng)：沉淀反應(yīng)：雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)

18、產(chǎn)生沉淀 n鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查: :生成沉淀生成沉淀H2NNH2+CHOOHHCOHNNH2+ H2O雜質(zhì)：游離肼NNNHNH2HClCHOCNH2NNH2H2OHCl鹽酸肼屈嗪治療高血壓、心力衰竭。治療高血壓、心力衰竭。 水楊醛腙3. 3. 生成氣體或者滴定法生成氣體或者滴定法n生成氣體生成氣體:NH:NH3 3n滴定法滴定法: :如硫酸亞鐵中的如硫酸亞鐵中的高鐵鹽高鐵鹽檢查檢查2Fe3+2KI2Fe2+I22K+I22Na2S2O32NaINa2S4O6碘的顯色碘的顯色36 1.1.薄層色譜法薄層色譜法(TLC)(TLC) 2. 2.高效液相色譜法高效液相色譜

19、法(HPLC)(HPLC) 3. 3.氣相色譜法氣相色譜法(GC)(GC)色譜法色譜法是雜質(zhì)檢查的首選方法是雜質(zhì)檢查的首選方法37 根據(jù)藥物與雜質(zhì)對吸附劑的吸附或?qū)φ垢鶕?jù)藥物與雜質(zhì)對吸附劑的吸附或?qū)φ归_劑的解析能力不同開劑的解析能力不同( (R Rf f值的差異值的差異), ), 加以分加以分離和檢查。離和檢查。1.1.薄層色譜法薄層色譜法(TLC)(TLC)38我國藥典我國藥典20052005年版增加了年版增加了TLCTLC系統(tǒng)適用性試驗。系統(tǒng)適用性試驗。1.1.檢測靈敏度：對照品溶液稀釋若干倍，應(yīng)顯檢測靈敏度：對照品溶液稀釋若干倍，應(yīng)顯示清晰的斑點。示清晰的斑點。2.2.比移值：供試品主斑

20、點與對照品溶液主斑點。比移值：供試品主斑點與對照品溶液主斑點。3.3.分離效能分離效能39薄層色譜法應(yīng)用薄層色譜法應(yīng)用(1)雜質(zhì)對照法雜質(zhì)對照法:取供試品溶液和一定濃度雜質(zhì)對照品溶取供試品溶液和一定濃度雜質(zhì)對照品溶液，分別點樣于同一薄層板上展開，進行斑點定位。液，分別點樣于同一薄層板上展開，進行斑點定位。將雜質(zhì)斑點進行對應(yīng)比較判斷。將雜質(zhì)斑點進行對應(yīng)比較判斷。(2)供試品溶液自身稀釋法供試品溶液自身稀釋法:將一定濃度供試品溶液進行將一定濃度供試品溶液進行稀釋并作為對照溶液，然后與供試品溶液在同一板上稀釋并作為對照溶液，然后與供試品溶液在同一板上展開比較。展開比較。(3)雜質(zhì)對照品與供試品溶液自

21、身稀釋對照并用法雜質(zhì)對照品與供試品溶液自身稀釋對照并用法。(4)對照藥物法對照藥物法:采用與供試品相同藥物作為對照，比較采用與供試品相同藥物作為對照，比較斑點、顏色。并進行對比控制。斑點、顏色。并進行對比控制。40 根據(jù)供試品與雜質(zhì)的對照品根據(jù)供試品與雜質(zhì)的對照品保留時間保留時間相同相同測定各雜質(zhì)峰面積測定各雜質(zhì)峰面積. .2.2.高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)(HPLC)411.1.外標法外標法（有對照品雜質(zhì)）（有對照品雜質(zhì)）2.2.加校正因子的主成分自身對照法加校正因子的主成分自身對照法3.3.不加校正因子的主成分自身對照法不加校正因子的主成分自身對照法（無雜（無雜質(zhì)對照品）質(zhì)對

22、照品）4.4.峰面積歸一化法峰面積歸一化法（粗略測量雜質(zhì)的含量）（粗略測量雜質(zhì)的含量）423.3.氣相色譜法氣相色譜法(GC)(GC)檢查方法檢查方法: :同高效液相色譜法同高效液相色譜法. .用于藥物中揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查用于藥物中揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查, , 如藥物中殘留溶劑、農(nóng)藥殘留量等如藥物中殘留溶劑、農(nóng)藥殘留量等. .標準溶液加入法（標準溶液加入法（P110P110）434.4.毛細管電泳法毛細管電泳法檢查方法檢查方法: :同高效液相色譜法同高效液相色譜法. .用于酶類藥物中酶類雜質(zhì)的檢查。用于酶類藥物中酶類雜質(zhì)的檢查。44 1. 1.可見可見- -紫外分光光度法紫外分光光度法 2.2.紅外分

23、光光度法紅外分光光度法 3.3.原子吸收原子吸收分光光度法分光光度法45紫外分光光度法紫外分光光度法利用藥物和待檢雜質(zhì)對光選擇吸收性質(zhì)利用藥物和待檢雜質(zhì)對光選擇吸收性質(zhì)的差異進行的差異進行. .46 例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查 310nmA2.0mg/mlHCl 0.05mol/L測的溶液溶液樣品規(guī)定：規(guī)定：A A310nm310nm0.050.0547紅外分光光度法紅外分光光度法 主要用于藥物中無效或低效晶型的檢查。某些多晶型藥物由于其晶型結(jié)構(gòu)不同，一些化學(xué)鍵的鍵長、鍵角等發(fā)生不同程度的變化，從而導(dǎo)致紅外吸收光譜中某些特征峰的頻率、峰形和強度出現(xiàn)顯著差異。48

24、在程序控制溫度的情況下在程序控制溫度的情況下, ,測定物質(zhì)的物測定物質(zhì)的物理、化學(xué)變化與溫度關(guān)系的一類儀器分析方理、化學(xué)變化與溫度關(guān)系的一類儀器分析方法法. . 1.1 1.1 熱重分析法熱重分析法 1.2 1.2 差示熱分析法差示熱分析法 1.3 1.3 差示掃描量熱法差示掃描量熱法1.熱分析法熱分析法1.1.熱重分析法熱重分析法 ( (TGA) )T TW W供試品TGA熱重曲線WT TW WW結(jié)晶水失重臺階 應(yīng)用熱天平在程序控溫的條件下測量物質(zhì)的質(zhì)應(yīng)用熱天平在程序控溫的條件下測量物質(zhì)的質(zhì)量隨溫度變化的熱分析技術(shù)量隨溫度變化的熱分析技術(shù), ,可計算出樣品在相應(yīng)可計算出樣品在相應(yīng)溫度范圍內(nèi)減

25、失質(zhì)量的百分率。溫度范圍內(nèi)減失質(zhì)量的百分率。 特 點分析樣品用量少, 適用于貴重藥材或在空氣中容易氧化藥物干燥失重測定.靈敏度高,可達1 g以下 測定速度快 可用于判斷結(jié)晶水或吸附水,并推斷結(jié)晶水含量。2.2.差熱分析法差熱分析法 ( (DTA) )在程序控制溫度下，在程序控制溫度下，測量供試品和惰性測量供試品和惰性參比物參比物( (常用石英常用石英砂、煅制砂、煅制MgOMgO) )之間之間的的溫度差溫度差與與溫度溫度( (或時間或時間) ) 關(guān)系的關(guān)系的熱分析技術(shù)熱分析技術(shù)T TT供試品發(fā)生吸熱反應(yīng)溫度低于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生吸熱峰參比物質(zhì)參比物質(zhì)供試品發(fā)生放熱反應(yīng)溫度高于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生放熱峰

26、DTA用途用途(1) 熔點測定熔點測定熔程熔程T T=0(2) 定性和純度檢定定性和純度檢定根據(jù)峰的數(shù)目、形狀、位置對根據(jù)峰的數(shù)目、形狀、位置對供試品進行純度判別供試品進行純度判別T供試品對照品G1G2G310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T()草酸鈣(CaC2O4H2O)的熱重曲線在溫度在溫度T1時時 CaC2O4H2O CaC2O4+H2O在溫度在溫度T2時時 CaC2O4 CaCO3+CO在溫度在溫度T3時時 CaCO3 CaO+CO2三個失重峰，相應(yīng)產(chǎn)生兩個吸熱峰和一個放熱峰。三個失重峰，相應(yīng)產(chǎn)生兩個吸熱峰和一個放熱峰。3.3.差示掃描

27、量熱法差示掃描量熱法 ( (DSC) ) 測量保持供試品和惰性參比物的溫度相同, 系統(tǒng)所需輸給供試品或參比物的能量差隨溫度(或時間)變化的熱分析技術(shù).樣品樣品參比參比加熱爐至信號放大器加熱器導(dǎo)線爐溫控制器 用于待測物質(zhì)的用于待測物質(zhì)的鑒別鑒別、晶型鑒別晶型鑒別、純度純度檢查檢查以及以及熔點熔點和和水分水分等的測定，更適合于測等的測定，更適合于測量物質(zhì)在物理變化或化學(xué)變化中量物質(zhì)在物理變化或化學(xué)變化中焓焓的變化。的變化。應(yīng)用熱分析法檢查藥物純度的條件樣品純度在98.0%以上雜質(zhì)不與主成分反應(yīng)雜質(zhì)不與主成分形成共晶或固熔體雜質(zhì)與熔融試樣有化學(xué)相似性藥物在熔融過程中化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定藥物如存在多晶現(xiàn)象則必

28、須全部轉(zhuǎn)變成某一晶型58藥品檢驗操作標準藥品檢驗操作標準規(guī)定規(guī)定1. 1. 遵循遵循平行操作平行操作原則原則（1 1）儀器的配對性）儀器的配對性 如納氏比色管應(yīng)配對，刻度線高低相差不如納氏比色管應(yīng)配對，刻度線高低相差不超過超過2mm2mm，砷鹽檢查時導(dǎo)氣管長度及孔的大小要一致，砷鹽檢查時導(dǎo)氣管長度及孔的大小要一致（2 2）對照品與供試品的同步操作）對照品與供試品的同步操作2. 2. 正確的取樣及供試品的正確的取樣及供試品的稱量范圍稱量范圍 1g1g不超過不超過2%2%，1g1g不不超過超過1% 1% 3. 3. 正確的正確的比色比色、比濁比濁方法方法 4. 4. 檢查結(jié)果檢查結(jié)果不符合規(guī)定不符

29、合規(guī)定或在或在限度邊緣限度邊緣時應(yīng)對供試管和對照管各時應(yīng)對供試管和對照管各復(fù)查復(fù)查二份二份 591. 1. 原理原理 利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應(yīng)利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應(yīng), , 生成氯化銀白色渾濁液生成氯化銀白色渾濁液, , 與一定量與一定量標準氯化鈉溶液標準氯化鈉溶液在相同條件下產(chǎn)生的氯化銀渾濁程度比較在相同條件下產(chǎn)生的氯化銀渾濁程度比較, , 判定供判定供試品中氯化物是否符合限量規(guī)定。試品中氯化物是否符合限量規(guī)定。一、氯化物檢查法一、氯化物檢查法白色渾濁藥物：AgClAgNOCl3HNO3白色渾濁）（對照：AgClAgNO,NaCl3HNO3Vc供試品稀稀HNO31

30、0mlH2OAgNO31ml標準溶液稀稀HNO310mlH2OAgNO31ml 暗處放置5min(避免AgCl分解)條件：硝酸酸性條件（稀硝酸條件：硝酸酸性條件（稀硝酸10ml10ml）反應(yīng)試劑：硝酸銀試液反應(yīng)試劑：硝酸銀試液 1.0ml1.0ml雜質(zhì)對照：雜質(zhì)對照：NaClNaCl (10 (10 g/ml)g/ml)靈敏度范圍：靈敏度范圍： 50-80 50-80 g/50ml g/50ml 可避免弱酸銀鹽，如碳酸可避免弱酸銀鹽，如碳酸銀、磷酸銀及氧化銀沉淀銀、磷酸銀及氧化銀沉淀的干擾，且可加速氯化銀的干擾，且可加速氯化銀沉淀的生成并產(chǎn)生較好的沉淀的生成并產(chǎn)生較好的乳濁乳濁。討論：選擇稀硝

31、酸反應(yīng)條件的意義。討論：選擇稀硝酸反應(yīng)條件的意義。1. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。2. 平行操作原則。3. 若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。 注注 意：意：干擾及排除 （1）外消色法（2）內(nèi)消色法：倍量法供試品有色處理方法供試品有色處理方法 供試品溶液如帶顏色，可按中國藥典附錄所規(guī)定的方法處理。即取兩份供試品溶液，于其中一份中先加入硝酸銀試液，搖勻，放置10min，如顯渾濁，可反復(fù)濾過，至濾液澄清，即得無氯化物雜質(zhì)又具有相同顏色的澄清溶液，再在其中加入規(guī)定量的標準氯化鈉溶液與水適量使成50ml，作為對照溶液；另一份中加入硝酸銀試液與水適量使成50ml，作為供試溶液，將兩液在暗

32、處放置5min后比較，即可消除顏色的干擾。此法又稱為內(nèi)消色法。 外消色法：加入一定的有色物，如稀焦糖等，或經(jīng)處理降低色度，不干擾測定。如高錳酸鉀中氯化物的檢測，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。65 依法檢查揮去2I2O4322ClIPOH,OHClI依法檢查揮散（除)Br2O3222 ClBrHNO,OHClBr碘化物、溴化物中氯化物的檢查碘化物、溴化物中氯化物的檢查 66 a a 溶于水的有機藥物溶于水的有機藥物直接檢查直接檢查. . c c 溶于稀乙醇或丙酮的有機藥物溶于稀乙醇或丙酮的有機藥物 用該溶劑溶解后依法檢查用該溶劑溶解后依法檢查. .例：三氯叔丁醇例：三氯叔丁醇CClC

33、Cl3 3C(CHC(CH3 3 ) ) 2 2 OH OH 取濾液依法檢查過濾水，水藥物除去不溶物使所含氯化物溶解or b b 不溶于水的有機藥物不溶于水的有機藥物d d 雜質(zhì)中鹵素原子連接于苯環(huán)上雜質(zhì)中鹵素原子連接于苯環(huán)上 先進行有機破壞先進行有機破壞, ,使分解后再檢查使分解后再檢查. .后依法檢查無機適當(dāng)?shù)挠袡C破壞方法藥物機氯轉(zhuǎn)變?yōu)閷⒂袡C分子破壞，使有Cl 有機藥物中氯化物的檢查有機藥物中氯化物的檢查二、硫酸鹽檢查法二、硫酸鹽檢查法)(BaSOBaClSO4HCl224白色 2ml40mLd.HCl25%BaCl25mlH2O50mlH2O 樣樣品品標準溶液標準溶液濃度范圍濃度范圍 0

34、.1mg0.5mgSO42-/50ml硫酸鉀溶液硫酸鉀溶液0.1mg/ml681. 反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進行，且以50mL供試溶液中含稀鹽酸2mL為宜。 (鹽酸酸性條件防止BaCO3，BaPO4沉淀生成，pH約=1)2. 供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀。 3. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。4. 供試液帶色應(yīng)先處理。測定條件測定條件三、鐵鹽檢查法三、鐵鹽檢查法1.硫氰酸鐵法 (Ch.P 和USP采用) 36HCl3SCNFeSCN6Fe紅色 原理：鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配離子,與一定量標準鐵溶液用同法處理后所呈的顏

35、色進行比較。供試品顯色，立即與同法制成的對照溶液比較加水溶解25ml稀HCl 4ml過硫酸銨 50mg加水稀釋35ml30%硫氰酸銨溶液3ml加水定容既可氧化供試品Fe2+變成Fe3+,同時可防止由于光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。最佳比色濃度最佳比色濃度a. 儀器分析線性范圍儀器分析線性范圍5 90 g Fe3+ /50mlb. 目視比色濃度范圍目視比色濃度范圍1050 g Fe3+ /50ml2.巰基醋酸法 (BP采用)OH2COOSCHFeCOOHSCHFeHCOOHSCHFeCOOHHSCH2FeH2CO

36、OHSCHFe2COOHHSCH2Fe22222OH222222222223紅色紅色藥物：巰基醋酸巰基醋酸枸櫞酸OHNH22%20FeFe2332Feml枸櫞酸的作用：使枸櫞酸與鐵離子形成配位離子，以免枸櫞酸的作用：使枸櫞酸與鐵離子形成配位離子，以免在氨堿性溶液中產(chǎn)生氫氧化鐵沉淀。在氨堿性溶液中產(chǎn)生氫氧化鐵沉淀。巰基醋酸：還原劑巰基醋酸：還原劑本法靈敏度較高，但試劑較貴本法靈敏度較高，但試劑較貴 74 重金屬重金屬是指在實驗條件下能與硫代乙是指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬，重金屬存酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬，重金屬存在影響藥物的穩(wěn)定性及安全性在影響藥物的穩(wěn)定性及安全性. .

37、 鉛易在體內(nèi)積蓄中毒鉛易在體內(nèi)積蓄中毒, ,以以PbPb為代表為代表. . 四、重金屬檢查法四、重金屬檢查法第一法第四法重金屬含量低的藥物(25g)第三法使用范圍微孔濾膜法硫化鈉法溶于堿性水溶液而難于溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物方法硫代乙酰胺法溶于水、稀酸、乙醇的藥物熾灼后的硫代乙酰胺法含芳環(huán)、雜環(huán)以及難溶于水、稀酸、乙醇的藥物第二法重金屬檢查法重金屬檢查法1. 1.第一法第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法SHCONHCH5 . 3pHOHCSNHCH223223 H2PbSHSHPb22黃色至棕黑色混懸液 硫代乙酰胺在弱酸性 (pH3.5 醋酸鹽緩沖液)條件下水解,產(chǎn)生H2S,與微量重金屬

38、離子(以Pb2+為代表)生成黃色到棕黑色的硫化物混懸液, 與一定量標準鉛溶液經(jīng)同法處理后所呈顏色比較, 不得更深。77操作方法操作方法比色放置硫代乙酰胺水22ml TS25ml2ml )buff(pH3.5水、醋酸鹽樣品樣品管同上標準液（一定量） 對照管78 標準鉛溶液濃度？標準鉛溶液濃度？ 硫代乙酰胺試液？硫代乙酰胺試液？ 溶液的溶液的pH？ 供試品溶液有顏色時的處理？供試品溶液有顏色時的處理？ 干擾物的排除方法？干擾物的排除方法？討論：討論：79 標準鉛溶液濃度標準鉛溶液濃度適宜目視比色的濃度范圍適宜目視比色的濃度范圍 Pb2+標準溶液標準溶液10 g/ml 12ml80 硫代乙酰胺試液硫

39、代乙酰胺試液 H H2 2S S試液：惡臭和毒性試液：惡臭和毒性；不穩(wěn)定；不穩(wěn)定；易被空氣氧化而析出硫；濃度難以控制易被空氣氧化而析出硫；濃度難以控制. . 改用硫代乙酰胺為顯色劑，硫代改用硫代乙酰胺為顯色劑，硫代乙酰胺在實驗條件下水解產(chǎn)生乙酰胺在實驗條件下水解產(chǎn)生H H2 2S,S,與與重金屬離子反應(yīng)重金屬離子反應(yīng). .81pHpH在在3.0-3.53.0-3.5時時, , 呈色較完全呈色較完全. .酸度增大酸度增大, , 呈色變淺甚至不呈色呈色變淺甚至不呈色. . 溶液的溶液的pHpH對于金屬離子與硫化氫對于金屬離子與硫化氫呈色影響較大呈色影響較大. . 溶液的溶液的pHpH82 供試品溶

40、液有顏色時的處理供試品溶液有顏色時的處理a.外消色法外消色法 b.內(nèi)消色法內(nèi)消色法稀焦糖溶液調(diào)節(jié)稀焦糖溶液調(diào)節(jié)指示劑調(diào)節(jié)指示劑調(diào)節(jié) 與氯化物檢查時的處理方法類似與氯化物檢查時的處理方法類似83 干擾物的排除方法干擾物的排除方法干擾：干擾：弱酸性溶液中弱酸性溶液中FeFe3+3+氧化氧化H H2 2S S析出析出S S, ,產(chǎn)產(chǎn)生混濁影響檢查。生混濁影響檢查。a.a.供試品中微量高價供試品中微量高價FeFe3+3+存在存在如：如：葡萄糖酸亞鐵中重金屬的檢查葡萄糖酸亞鐵中重金屬的檢查. .排除：排除：加入加入抗壞血酸抗壞血酸或或鹽酸羥胺鹽酸羥胺使使FeFe3+3+還原為還原為FeFe2+2+。84

41、b.b.藥物本身能生成不溶性硫化物藥物本身能生成不溶性硫化物加入掩蔽劑消除干擾加入掩蔽劑消除干擾加掩蔽劑加掩蔽劑KCN,KCN,使使銻銻、鋅鋅形成穩(wěn)定的形成穩(wěn)定的配合配合物物后后, , 用第三法檢查用第三法檢查. .如：葡萄酸銻鈉中重金屬的檢查如：葡萄酸銻鈉中重金屬的檢查1.1.原理原理 供試品先熾灼破壞后供試品先熾灼破壞后, ,使有機結(jié)合的重金屬使有機結(jié)合的重金屬游離游離, , 再按再按第一法第一法檢查檢查. .2.2.第二法第二法 熾灼后的熾灼后的硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法86 2. 2. 操作操作 緩緩熾灼緩緩熾灼 放冷放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供試品供試品 炭化炭化 加熱加熱

42、HNO3 500-600H2SO4 除盡除盡 放冷放冷 完全灰化完全灰化 蒸干蒸干HCl 2ml 水水15ml 中性中性 按第一法檢查按第一法檢查 蒸干蒸干 氨試液氨試液a. HNO3處理后，必須蒸干除盡NO.b. 熾灼溫度嚴格控制：熾灼溫度嚴格控制：500-600注意：注意：做空白試驗做空白試驗3.3.第三法第三法 硫化鈉法硫化鈉法PbSSNaPbNaOH22原理：在堿性介質(zhì)中,以Na2S為顯色劑, 使Pb2+與S2-作用生成PbS 的混懸液, 與一定量標準鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較, 不得更深。88 適用于難溶于稀酸但能溶解于堿性溶液的藥物中重金屬的檢查。 如：磺胺類與巴比妥類藥物。注意

43、： Na2S 對玻璃有腐蝕性,久置產(chǎn)生絮狀物,應(yīng)臨用新配。4.4.第四法第四法 微孔濾膜法微孔濾膜法 當(dāng)重金屬含量低(2-5g) 時, 在比色管中難于目視觀察,采用本法。原理原理：同第一法 使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上(鉛斑)提高檢查的靈敏度。 90 2.白田道夫法白田道夫法 1.古蔡氏法古蔡氏法 3.Ag-DDC法法 4.次磷酸法次磷酸法五、砷鹽檢查法五、砷鹽檢查法 ( (一一) )古蔡氏法古蔡氏法 ( (Gutzeit) ) OH3Zn3AsHH9Zn3AsO22333323AsHZn3H3Zn3As棕色（量大）323As(HgBr)3HBr3HgBrAsH黃色（量少）223)Hg

44、Br(AsHHBr2HgBr2AsH32333)(HgAsHBrAsHHgBrAs黃色棕色黑色溴化汞試紙溴化汞試紙1. 1. 原原 理理新生態(tài)氫H 2ZnH2Zn2233HH 2 AsHAs進而促進進而促進AsH3不斷不斷生成生成 古古蔡蔡氏氏法法檢檢砷砷器器8cm有孔玻有孔玻璃旋塞璃旋塞導(dǎo)氣管導(dǎo)氣管AsH3發(fā)生瓶發(fā)生瓶溴化汞試紙醋酸鉛棉花(60mg)HCl Zn 粒碘化鉀試液酸性氯化亞錫試液生成砷斑吸收硫化氫氣體a. KI的作用的作用還原劑：還原劑：As5+As3+b. 酸性酸性SnCl2的作用的作用 還原劑還原劑( (表現(xiàn)在表現(xiàn)在3 3方面方面) ). . 將五價砷還原為三價砷將五價砷還原

45、為三價砷(As(As5+5+AsAs3+3+) )OHSnAsOH2SnAsO243323494SnIISn4222. . 將將KIKI被氧化生成的被氧化生成的I I2 2再還原為再還原為I I- -. SnCl. SnCl2 2與與ZnZn粒表面形成粒表面形成Zn-Zn-SnSn齊齊 起去極化作用起去極化作用, ,使氫氣均勻而連使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生續(xù)地發(fā)生. .H2阻礙酸與鋅粒反應(yīng)阻礙酸與鋅粒反應(yīng)SnCl295c. PbAc2棉花的作用棉花的作用 排除硫化物的干擾排除硫化物的干擾(1mgS(1mgS2- 2- ) ) （黑色，干擾）HgSHgBrSHHS2222果留在棉花上，不干擾結(jié) 2H

46、AcPbSSHPbAc22注意事項 砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)干燥、避光、砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)干燥、避光、立即比較立即比較。 有機結(jié)合態(tài)的砷應(yīng)有機結(jié)合態(tài)的砷應(yīng)破壞破壞后檢查（加酸或堿），但溫度應(yīng)低于后檢查（加酸或堿），但溫度應(yīng)低于600600 C C。 供試品若為鐵鹽，能消耗碘化鉀和氯化亞錫，可加供試品若為鐵鹽，能消耗碘化鉀和氯化亞錫，可加酸性氯化酸性氯化亞錫亞錫，使高鐵離子還原后檢查。，使高鐵離子還原后檢查。供試品（硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽）若在酸性條件下生供試品（硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽）若在酸性條件下生成硫化氫或二氧化硫，與溴化汞試紙作用生成黑色硫化汞和金成硫化氫或二氧化硫，與溴化汞試紙作用生成黑

47、色硫化汞和金屬汞，可先用硝酸處理，使其氧化為硫酸鹽。屬汞，可先用硝酸處理，使其氧化為硫酸鹽。銻鹽銻鹽含量較多時，可改用含量較多時，可改用白田道夫白田道夫（Bettendorff）法檢查砷法檢查砷( (二二) ) 白田道夫法白田道夫法 對含銻藥物中砷鹽的檢查不能用古蔡氏法,需用白田道夫法。2As3+ + 3SnCl2 + 6HCl 2As + 3SnCl4 + 6H+棕褐色 原理：原理： SnCl2在HCl中能將砷鹽還原為棕褐色的膠態(tài)砷, 與一定量的標準砷溶液按同法處理后進行比較, 判斷供試品中砷鹽的限量。特點：特點：優(yōu)點：優(yōu)點：不受不受SbSb干擾干擾缺點：缺點：靈敏度低靈敏度低 2020 g

48、AsgAs2 2O O3 3/10ml/10ml 加入少量加入少量HgClHgCl2 2, ,靈敏度提高至靈敏度提高至2 2 gAsgAs2 2O O3 3（1.5 1.5 gAsgAs）/10ml./10ml.99 ( (三三) ) 二乙基二硫代氨基甲酸銀法二乙基二硫代氨基甲酸銀法 (Ag-DDC(Ag-DDC法法) USP) USP silver diethyldithiocarbamateAgSSCNC2H5C2H5 本法不僅用于砷鹽的限量檢查, 而且可用作微量砷鹽的含量測定。100原原 理理 第一步第一步：同：同古蔡氏法古蔡氏法生成砷生成砷化氫；化氫； 第二步第二步：砷化氫還原砷化氫還

49、原Ag-DDCAg-DDC溶液溶液, ,產(chǎn)生產(chǎn)生紅色紅色的的膠態(tài)銀。膠態(tài)銀。 目視比色法目視比色法 儀器分析儀器分析 510nm510nm處測吸處測吸收度。收度。101AsH3+6Ag(DDC)As(DDC)3+6Ag(紅色)+3HDDC3332AsHAsOHHClZn用有機堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的用有機堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDCHDDC有利于反應(yīng)的進行有利于反應(yīng)的進行。USPUSP用吡啶，靈敏但試劑惡臭。用吡啶，靈敏但試劑惡臭。ChPChP用三乙胺，靈敏度低。用三乙胺，靈敏度低。本法適用于含本法適用于含SbSb量小于量小于500g500g的供試品。的供試品。102Ag-DDC法的特點法的特點 a 靈敏

50、度高靈敏度高 0.5 gAs/30ml b 可儀器測定，還可定量?？蓛x器測定，還可定量。 c Sb干擾?。ǜ蓴_?。?500g ）103( (四四) ) 次磷酸法次磷酸法 BPBP 原理原理 在鹽酸酸性溶液中在鹽酸酸性溶液中, , 次磷酸還原砷次磷酸還原砷鹽為棕色的游離砷鹽為棕色的游離砷, ,與標準砷溶液同法處理后與標準砷溶液同法處理后比較顏色。比較顏色。 NaH NaH2 2POPO2 2+HCl+HClHH3 3POPO2 2+NaCl+NaCl 3H 3H3 3POPO2 2+H+H3 3AsOAsO3 33H3H3 3POPO3 3+2+2AsAs棕色棕色104特點特點不受不受S S2-

51、2-,SO,SO3 32-2-,Sb,Sb干擾干擾靈敏度較靈敏度較古蔡氏法古蔡氏法低低六、干燥失重六、干燥失重干燥失重：藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的量。 用于檢查藥物中的水分及其他揮發(fā)性物質(zhì)。恒重：供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0.3mg以下。（干燥至恒重的第二次及以后每次稱重都應(yīng)在規(guī)定的條件下繼續(xù)干燥1h后進行）溫度105C105C熱分析法熱分析法適用范圍分類受熱分解或易升華受熱分解或易升華的供試品的供試品干燥劑干燥法干燥劑干燥法60C60C常溫常溫減壓干燥法與恒減壓干燥法與恒溫減壓干燥法溫減壓干燥法常壓恒溫干燥法常壓恒溫干燥法受熱穩(wěn)定的藥物受熱穩(wěn)定的藥物熔點低或受熱分解熔點低或受熱分解的供試品的供試品七、水分測定法七、水分測定法3222SOHI2OHSOI%100WA(%)FB?A供試品消耗的Fishe