抗 藥 性 監(jiān) 測

1、甘肅省疾病預(yù)防控制中心甘肅省疾病預(yù)防控制中心 丁小全 抗藥性是影響全球公共衛(wèi)生、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、抗藥性是影響全球公共衛(wèi)生、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、畜牧業(yè)等領(lǐng)域中有害生物控制的重要問題，是畜牧業(yè)等領(lǐng)域中有害生物控制的重要問題，是影響媒介生物性傳染病疾病預(yù)防控制的關(guān)鍵因影響媒介生物性傳染病疾病預(yù)防控制的關(guān)鍵因素。抗藥性的產(chǎn)生和發(fā)展與藥劑的使用有非常素?？顾幮缘漠a(chǎn)生和發(fā)展與藥劑的使用有非常密切的關(guān)系。開展和加強重要病媒生物抗藥性密切的關(guān)系。開展和加強重要病媒生物抗藥性監(jiān)測，可以指導(dǎo)化學(xué)藥劑的合理使用，提高控監(jiān)測，可以指導(dǎo)化學(xué)藥劑的合理使用，提高控制效果，延緩抗藥性發(fā)展速度，減少人畜中毒制效果，延緩抗藥性發(fā)展速度，減

2、少人畜中毒事件的發(fā)生，保護有益生物，維持生態(tài)平衡。事件的發(fā)生，保護有益生物，維持生態(tài)平衡。主主 要要 內(nèi)內(nèi) 容容第一部分第一部分：抗藥性概況及基本知識抗藥性概況及基本知識 一、背景一、背景 二、抗藥性的基本概念二、抗藥性的基本概念 三、害蟲對殺蟲劑產(chǎn)生抗藥性的機制三、害蟲對殺蟲劑產(chǎn)生抗藥性的機制 四、影響抗性發(fā)展的因素四、影響抗性發(fā)展的因素第二部分：第二部分：抗藥性監(jiān)測方法抗藥性監(jiān)測方法第三部分：第三部分：抗性治理抗性治理 第四部分：第四部分：全國重要病媒生物抗藥性監(jiān)測（試行）方案全國重要病媒生物抗藥性監(jiān)測（試行）方案第一部分第一部分 抗藥性的基本知識抗藥性的基本知識一、背景一、背景v 抗藥性

3、監(jiān)測在疾病預(yù)防控制中的重要性抗藥性監(jiān)測在疾病預(yù)防控制中的重要性v 抗藥性概況抗藥性概況v 抗藥性監(jiān)測的基礎(chǔ)條件抗藥性監(jiān)測的基礎(chǔ)條件 疫情控制的需要疫情控制的需要 人民生活和社會與經(jīng)濟的需要人民生活和社會與經(jīng)濟的需要v 當前抗藥性監(jiān)測中存在的問題當前抗藥性監(jiān)測中存在的問題 專業(yè)技術(shù)人員缺乏專業(yè)技術(shù)人員缺乏 測定方法不統(tǒng)一測定方法不統(tǒng)一 抗藥性監(jiān)測結(jié)果的利用率低抗藥性監(jiān)測結(jié)果的利用率低抗藥性：抗藥性：某一昆蟲的一個品系中，形成了對某一劑量某一昆蟲的一個品系中，形成了對某一劑量毒物的耐受能力，而這一劑量對同種正常種群的大多毒物的耐受能力，而這一劑量對同種正常種群的大多數(shù)仍然是敏感的為抗藥性。數(shù)仍然是

4、敏感的為抗藥性。 交互抗性：交互抗性：是指一種害蟲對某種藥劑產(chǎn)生抗藥性后，是指一種害蟲對某種藥劑產(chǎn)生抗藥性后，對其它化學(xué)結(jié)構(gòu)類似或具有相同作用機制的農(nóng)藥品種，對其它化學(xué)結(jié)構(gòu)類似或具有相同作用機制的農(nóng)藥品種，雖然不曾使用過也產(chǎn)生抗性。雖然不曾使用過也產(chǎn)生抗性。二、抗藥性的基本概念和特點二、抗藥性的基本概念和特點 負交互抗性：負交互抗性：一種昆蟲對某一藥劑產(chǎn)生抗性后，對另一一種昆蟲對某一藥劑產(chǎn)生抗性后，對另一種藥劑的敏感性增強。種藥劑的敏感性增強。 多抗性：多抗性：一種害蟲體內(nèi)存在一種或多種不同的抗性基因一種害蟲體內(nèi)存在一種或多種不同的抗性基因或抗性等位基因，能對幾種不同作用機制的農(nóng)藥同時產(chǎn)或抗性

5、等位基因，能對幾種不同作用機制的農(nóng)藥同時產(chǎn)生抗性。生抗性。 耐藥性：耐藥性：有些昆蟲對某些殺蟲藥劑表現(xiàn)出先天性的抗有些昆蟲對某些殺蟲藥劑表現(xiàn)出先天性的抗藥能力，或昆蟲的某些發(fā)育時期或某些生理狀態(tài)下對藥藥能力，或昆蟲的某些發(fā)育時期或某些生理狀態(tài)下對藥劑的敏感性降低，稱為耐藥性。劑的敏感性降低，稱為耐藥性?？顾幮缘奶攸c抗藥性的特點抗藥性是一個抗藥性是一個種群特征種群特征：u 普遍普遍性：殺蟲劑普遍有抗性產(chǎn)生殺蟲劑普遍有抗性產(chǎn)生u 廣泛性：廣泛性：全球現(xiàn)象，分布很廣全球現(xiàn)象，分布很廣u 區(qū)域性：區(qū)域性：抗性發(fā)展程度的高低與當?shù)氐乃巹┻x擇壓力抗性發(fā)展程度的高低與當?shù)氐乃巹┻x擇壓力 是正相關(guān)?？顾幮缘陌l(fā)

6、展過程是月點是正相關(guān)?？顾幮缘陌l(fā)展過程是月點面面片。片。u 遺傳性遺傳性u 衛(wèi)生害蟲更易衛(wèi)生害蟲更易產(chǎn)生抗藥性產(chǎn)生抗藥性u 害蟲對新的殺蟲劑抗性的產(chǎn)生有害蟲對新的殺蟲劑抗性的產(chǎn)生有加快加快的趨勢的趨勢 三、昆蟲對殺蟲劑產(chǎn)生抗藥性的機制三、昆蟲對殺蟲劑產(chǎn)生抗藥性的機制 殺蟲劑經(jīng)昆蟲表皮、跗節(jié)、口器等途徑進入體內(nèi)殺蟲劑經(jīng)昆蟲表皮、跗節(jié)、口器等途徑進入體內(nèi)直至引起死亡的過程直至引起死亡的過程: : 昆蟲對殺蟲劑產(chǎn)生抗性的原因昆蟲對殺蟲劑產(chǎn)生抗性的原因老鼠嘴巴越來越刁老鼠嘴巴越來越刁蟑螂、蚊子練就蟑螂、蚊子練就“不壞金身不壞金身” v 行為機制行為機制 昆蟲通過改變自身行為習(xí)性而避免或昆蟲通過改變自身

7、行為習(xí)性而避免或減少與藥劑接觸，使其不被殺死。減少與藥劑接觸，使其不被殺死。 v 表皮穿透性降低表皮穿透性降低 由于表皮穿透性的降低而造成由于表皮穿透性的降低而造成的抗性倍數(shù)很低，然而如果和其他抗性機制結(jié)合，將會的抗性倍數(shù)很低，然而如果和其他抗性機制結(jié)合，將會產(chǎn)生極高水平的抗藥性。產(chǎn)生極高水平的抗藥性。v 代謝作用增強代謝作用增強 與害蟲對有機氯、有機磷、氨基與害蟲對有機氯、有機磷、氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯類等重要藥劑的抗性有關(guān)。甲酸酯和擬除蟲菊酯類等重要藥劑的抗性有關(guān)。v 靶標敏感性降低靶標敏感性降低 靶標是各類殺蟲劑重要的毒殺靶標是各類殺蟲劑重要的毒殺作用場所。作用場所。 殺蟲劑殺蟲劑與抗藥

8、性有關(guān)的作用靶標或代謝酶與抗藥性有關(guān)的作用靶標或代謝酶DDTDDTNaNa+ +通道，多功能氧化酶，通道，多功能氧化酶，DDT-DDT-脫氫酶脫氫酶六六六六六六氯離子通道，多功能氧化酶氯離子通道，多功能氧化酶有機磷有機磷乙酰膽堿酯酶、多功能氧化酶、酯酶、谷胱甘肽乙酰膽堿酯酶、多功能氧化酶、酯酶、谷胱甘肽-s-s-轉(zhuǎn)移酶系轉(zhuǎn)移酶系氨基甲酸酯氨基甲酸酯多功能氧化酶、酯酶多功能氧化酶、酯酶擬除蟲菊酯擬除蟲菊酯神經(jīng)不敏感、多功能氧化酶、酯酶、表皮穿透性神經(jīng)不敏感、多功能氧化酶、酯酶、表皮穿透性煙堿、吡蟲啉煙堿、吡蟲啉乙酰膽堿酯酶受體乙酰膽堿酯酶受體環(huán)戊二烯類、勁銳特環(huán)戊二烯類、勁銳特-氨基丁酸（氨基丁

9、酸（GABA)GABA)受體受體蘇云金桿菌蘇云金桿菌中腸受體中腸受體常見殺蟲劑的作用靶標或代謝酶常見殺蟲劑的作用靶標或代謝酶 四、影響抗性發(fā)展的因素四、影響抗性發(fā)展的因素u 遺傳因子遺傳因子 抗性的發(fā)展是基因突變、基因流動及隨機遺抗性的發(fā)展是基因突變、基因流動及隨機遺傳漂移等因素間復(fù)雜的相互作用，而引起基因頻率的改變。傳漂移等因素間復(fù)雜的相互作用，而引起基因頻率的改變。 抗性等位基因的起始頻率抗性等位基因的起始頻率 抗性等位基因數(shù)量抗性等位基因數(shù)量 顯性等位基因顯性等位基因 抗性基因的外顯率抗性基因的外顯率 農(nóng)藥的使用歷史農(nóng)藥的使用歷史 抗性個體的適合度抗性個體的適合度 u 生物學(xué)因子生物學(xué)因

10、子 世代周期和繁殖力世代周期和繁殖力 單配偶、多配偶和孤雌生殖單配偶、多配偶和孤雌生殖 種群流動性種群流動性 昆蟲的食性昆蟲的食性 抗性個體的生存競爭力和庇護抗性個體的生存競爭力和庇護 其中主要涉及農(nóng)藥的使用次數(shù)和使用量。其中主要涉及農(nóng)藥的使用次數(shù)和使用量。 農(nóng)藥的使用次數(shù)越多、劑量越大，其持效期越長，農(nóng)藥的使用次數(shù)越多、劑量越大，其持效期越長，對害蟲的選擇時間越長。昆蟲對藥劑產(chǎn)生抗性的速度對害蟲的選擇時間越長。昆蟲對藥劑產(chǎn)生抗性的速度越快，反之則慢。越快，反之則慢。u 操作因子操作因子 藥劑對昆蟲的選擇壓力對害蟲抗性產(chǎn)生有十分重要藥劑對昆蟲的選擇壓力對害蟲抗性產(chǎn)生有十分重要的作用，它是受人類

11、活動直接影響的。這類影響因素的作用，它是受人類活動直接影響的。這類影響因素屬于人為抗性因子。屬于人為抗性因子。 第二部分第二部分 抗藥性的監(jiān)測方法抗藥性的監(jiān)測方法 抗性監(jiān)測方法有生測法、生理生化測定方法抗性監(jiān)測方法有生測法、生理生化測定方法和分子生物測定方法。和分子生物測定方法。 一、生測法一、生測法 該類方法測定出抗藥性的表現(xiàn)型，不能發(fā)現(xiàn)早該類方法測定出抗藥性的表現(xiàn)型，不能發(fā)現(xiàn)早期抗性基因頻率的變化。期抗性基因頻率的變化。 區(qū)分劑量法區(qū)分劑量法 毒力回歸線測定方法毒力回歸線測定方法 生測的注意事項生測的注意事項試驗方法的標準化、試蟲標準化、藥劑標準化試驗方法的標準化、試蟲標準化、藥劑標準化;

12、 根據(jù)藥劑的作用方式選擇生測方法，觸殺作用：根據(jù)藥劑的作用方式選擇生測方法，觸殺作用：a)點滴法點滴法;b)噴霧法噴霧法;c)藥膜法藥膜法;d)浸漬法。胃毒作用浸漬法。胃毒作用多用飼料喂食法；內(nèi)吸作用多用寄主局部施藥法多用飼料喂食法；內(nèi)吸作用多用寄主局部施藥法或寄主喂食法等?；蚣闹魑故撤ǖ取?二、生物化學(xué)監(jiān)測二、生物化學(xué)監(jiān)測 生化監(jiān)測方法可以使用酶標儀監(jiān)測到每個個體靶標生化監(jiān)測方法可以使用酶標儀監(jiān)測到每個個體靶標酶或代謝酶的變化，一般用酶或代謝酶的變化，一般用I50( (藥劑對酶的抑制中濃度藥劑對酶的抑制中濃度) )表示藥劑對離體酶的抑制能力；表示藥劑對離體酶的抑制能力；Ki表示酶與底物的結(jié)合

13、表示酶與底物的結(jié)合能力的大小。乙酰膽堿酯酶和羧酸酯酶的測定方法見附能力的大小。乙酰膽堿酯酶和羧酸酯酶的測定方法見附錄錄2，谷胱甘肽，谷胱甘肽- -s- -轉(zhuǎn)移酶的測定方法見附錄轉(zhuǎn)移酶的測定方法見附錄3。 生物化學(xué)測定的缺陷只能測定一種酶的變化，抗藥生物化學(xué)測定的缺陷只能測定一種酶的變化，抗藥性的產(chǎn)生常常是多種酶共同參與的結(jié)果。性的產(chǎn)生常常是多種酶共同參與的結(jié)果。 乙酰膽堿酯酶基因乙酰膽堿酯酶基因 鈉離子通道基因鈉離子通道基因 - -氨基丁酸受體突變與抗性的關(guān)系氨基丁酸受體突變與抗性的關(guān)系 酯酶擴增與抗藥性的關(guān)系酯酶擴增與抗藥性的關(guān)系 多功能氧化酶多功能氧化酶- -P450與抗藥性的關(guān)系與抗藥性

14、的關(guān)系 三、分子監(jiān)測方法三、分子監(jiān)測方法殺蟲藥劑對靶標生物毒力的表示方法殺蟲藥劑對靶標生物毒力的表示方法半數(shù)致死量半數(shù)致死量LD50:受試生物死亡一半需要的劑量值受試生物死亡一半需要的劑量值 單位：單位：mg/kg，ug/g等，有時用等，有時用ug/頭頭LC50:受試生物死亡一半需要的濃度值受試生物死亡一半需要的濃度值 單位：單位：mg/L,g/m2等等LT50:在固定濃度下，受試生物死亡一半需要的時間在固定濃度下，受試生物死亡一半需要的時間 單位：分鐘（單位：分鐘（min）或小時（）或小時（hr）擊倒中時或中量擊倒中時或中量KT50：擊倒受試生物一半需要的時間，單位擊倒受試生物一半需要的時間

15、，單位:min或或hrKD50：擊倒受試生物一半需要的劑量，單位擊倒受試生物一半需要的劑量，單位:mg/kg， ug/g等，有時用等，有時用ug/頭頭奔出效應(yīng)奔出效應(yīng)FT50：使蜚蠊跑出一半需要的時間，單位使蜚蠊跑出一半需要的時間，單位:min或或hrFD50或或FC50：使蜚蠊跑出一半需要的劑量，單位使蜚蠊跑出一半需要的劑量，單位:mg/L, g/m2等等時間濃度積時間濃度積CT50：受試生物死亡一半需要的時間濃度積，即藥劑濃受試生物死亡一半需要的時間濃度積，即藥劑濃 度和接觸時間的乘積，單位是度和接觸時間的乘積，單位是ming/L半數(shù)有效量半數(shù)有效量ED50：受試生物一半產(chǎn)生所希望的反應(yīng)，

16、需要的劑量值。受試生物一半產(chǎn)生所希望的反應(yīng)，需要的劑量值。 單位：單位：mg/kg，ug/g，有時用，有時用ug/頭頭EC50：受試生物一半產(chǎn)生所希望的反應(yīng)，需要的濃度值。受試生物一半產(chǎn)生所希望的反應(yīng)，需要的濃度值。 單位：單位： mg/L，g/m2等等第三部分第三部分 抗性治理抗性治理 抗藥性問題中面臨的最主要的難題抗藥性問題中面臨的最主要的難題 克服或延緩抗性的產(chǎn)生和發(fā)展，以及延長殺蟲克服或延緩抗性的產(chǎn)生和發(fā)展，以及延長殺蟲劑的有效使用壽命。劑的有效使用壽命。 依賴于害蟲的抗性遺傳及種群生態(tài)學(xué)，通過選依賴于害蟲的抗性遺傳及種群生態(tài)學(xué)，通過選擇相應(yīng)的防治策略，來達到這一目的抗性治理便擇相應(yīng)的

17、防治策略，來達到這一目的抗性治理便應(yīng)運而生。應(yīng)運而生。一、抗性治理的一般概念一、抗性治理的一般概念 在抗性產(chǎn)生的選擇過程中，目標蟲種的敏感性及在抗性產(chǎn)生的選擇過程中，目標蟲種的敏感性及施加于改蟲種的選擇壓力（即殺蟲劑等），是抗性施加于改蟲種的選擇壓力（即殺蟲劑等），是抗性形成的主要因素。形成的主要因素?？剐灾卫碜罨镜某霭l(fā)點抗性治理最基本的出發(fā)點: :v 降低殺蟲劑的選擇壓；降低殺蟲劑的選擇壓；v 利用抗性個體在停止用藥后的繁殖劣勢；利用抗性個體在停止用藥后的繁殖劣勢；v 敏感個體的稀釋作用。敏感個體的稀釋作用。 抗性治理的實質(zhì)抗性治理的實質(zhì) 根據(jù)群體遺傳學(xué)的原理，綜合影響目標蟲種，根據(jù)群體遺

18、傳學(xué)的原理，綜合影響目標蟲種，抗性變化的遺傳學(xué)和生物學(xué)因子，使用不同的殺抗性變化的遺傳學(xué)和生物學(xué)因子，使用不同的殺蟲劑選擇壓，以達到阻止或延緩抗性的發(fā)展，同蟲劑選擇壓，以達到阻止或延緩抗性的發(fā)展，同時又將目標種群的為害控制在經(jīng)濟閾值之下。也時又將目標種群的為害控制在經(jīng)濟閾值之下。也就是說，在控制目標種群的為害在經(jīng)濟閾值之下就是說，在控制目標種群的為害在經(jīng)濟閾值之下的前提下，保持該種群的敏感性。的前提下，保持該種群的敏感性。 v 盡可能將目標害蟲的抗性等位基因頻率控制在最低水盡可能將目標害蟲的抗性等位基因頻率控制在最低水平，以防止或延緩抗性發(fā)展平，以防止或延緩抗性發(fā)展 v 根據(jù)各類殺蟲劑的作用機

19、制，制定科學(xué)合理的用藥防根據(jù)各類殺蟲劑的作用機制，制定科學(xué)合理的用藥防治方案治方案 v 根據(jù)殺蟲劑的特點和為害習(xí)性施藥，盡可能在低的選根據(jù)殺蟲劑的特點和為害習(xí)性施藥，盡可能在低的選擇壓力下，得到較好的防治效果擇壓力下，得到較好的防治效果 v 害蟲抗性治理與害蟲綜合治理相結(jié)合害蟲抗性治理與害蟲綜合治理相結(jié)合抗性治理的基本原抗性治理的基本原則則敏感性資源的意義敏感性資源的意義 殺蟲劑的使用殺蟲劑的使用v 減少害蟲數(shù)量的同時，增加了抗性基因頻率。減少害蟲數(shù)量的同時，增加了抗性基因頻率。v 消耗了一部分害蟲的敏感性。害蟲對殺蟲劑的敏感消耗了一部分害蟲的敏感性。害蟲對殺蟲劑的敏感 性，在多次重復(fù)的使用一

20、種藥劑的過程中逐步喪失。性，在多次重復(fù)的使用一種藥劑的過程中逐步喪失。 敏感性消失后，再想恢復(fù)基本不可能。敏感性消失后，再想恢復(fù)基本不可能。 v 抗性的發(fā)展通常是在它開始出現(xiàn)后的很短時間內(nèi)抗性的發(fā)展通常是在它開始出現(xiàn)后的很短時間內(nèi)遍及整個地區(qū)遍及整個地區(qū)v 敏感性資源的再分配問題敏感性資源的再分配問題 使用敏感性資源，必須考慮兩點使用敏感性資源，必須考慮兩點 代別間和年度間的敏感性分配，取決于一代別間和年度間的敏感性分配，取決于一定時間內(nèi)害蟲為害和殺蟲劑的費用以及抗性定時間內(nèi)害蟲為害和殺蟲劑的費用以及抗性發(fā)生的代價。發(fā)生的代價。 二、抗性治理策略二、抗性治理策略 有害生物綜合治理有害生物綜合治

21、理（IPM）的防治策略，通過以的防治策略，通過以下措施下措施降低藥劑的選擇壓降低藥劑的選擇壓： 只有把只有把IPM和化學(xué)防治有機的相結(jié)合才能真和化學(xué)防治有機的相結(jié)合才能真正控制抗性的發(fā)展。正控制抗性的發(fā)展。 v 天敵的引入和培育天敵的引入和培育v 昆蟲疾病的利用昆蟲疾病的利用v 殺蟲植物的栽培殺蟲植物的栽培v 其它非化學(xué)防治其它非化學(xué)防治 v 保護性治理保護性治理 即在昆蟲對藥劑產(chǎn)生抗性以前就實施抗性治理策略。即在昆蟲對藥劑產(chǎn)生抗性以前就實施抗性治理策略。 v 治療性治理治療性治理 即監(jiān)測到害蟲已經(jīng)對某些藥劑產(chǎn)生抗藥性或防治即監(jiān)測到害蟲已經(jīng)對某些藥劑產(chǎn)生抗藥性或防治 效果下降時實施抗性治理。效

22、果下降時實施抗性治理?？顾幮灾卫矸譃榭顾幮灾卫矸譃榭剐灾卫砜剐灾卫磉m度治理適度治理飽和治理飽和治理復(fù)合作用復(fù)合作用治理治理抗性治理的三個基本策略抗性治理的三個基本策略從化學(xué)防治的角度從化學(xué)防治的角度【Georghiou(1983) 】 “復(fù)合作用”這個術(shù)語用來表示長期或短期的多種作用的化學(xué)選擇壓。 “適度”和“飽和”主要是指防治時所用藥劑的劑量而言。適度治理適度治理飽和治理飽和治理復(fù)合作用治理復(fù)合作用治理限制藥劑使用次數(shù)、用藥時間限制藥劑使用次數(shù)、用藥時間及用藥量，降低藥劑總的選擇壓及用藥量，降低藥劑總的選擇壓力；應(yīng)用殘效期短的藥劑；避免力；應(yīng)用殘效期短的藥劑；避免使用緩釋劑；定向選擇成蟲；在

23、使用緩釋劑；定向選擇成蟲；在不用藥階段，利用種群中抗性個不用藥階段，利用種群中抗性個體適合度低的特點，使敏感個體體適合度低的特點，使敏感個體的繁殖快于抗性個體，以降低整的繁殖快于抗性個體，以降低整個種群的抗性基因頻率。阻止或個種群的抗性基因頻率。阻止或延緩抗性的發(fā)展。延緩抗性的發(fā)展。某一代或留下一部分種群不處某一代或留下一部分種群不處理；保持理；保持“庇護所庇護所”；提高防治；提高防治限閾。限閾。當抗性基因為隱當抗性基因為隱性時，使用高劑量的性時，使用高劑量的殺蟲劑施于靶標害蟲，殺蟲劑施于靶標害蟲，殺死抗性雜合子和敏殺死抗性雜合子和敏感純合子個體，并有感純合子個體，并有敏感個體遷入，以稀敏感個

24、體遷入，以稀釋存活的少數(shù)抗性純釋存活的少數(shù)抗性純合子。降低抗性等位合子。降低抗性等位基因頻率，延緩抗性基因頻率，延緩抗性發(fā)展。發(fā)展。用增效劑抑制解用增效劑抑制解毒機制。毒機制。藥劑混用；藥藥劑混用；藥劑輪用；藥劑鑲劑輪用；藥劑鑲嵌式交替防治。嵌式交替防治。這些藥劑因作這些藥劑因作用于不同的靶標用于不同的靶標、無交互抗性，、無交互抗性，使各種藥劑在低使各種藥劑在低的選擇壓力下，的選擇壓力下，取得較好的殺蟲取得較好的殺蟲效果，從而延緩效果，從而延緩抗性的發(fā)展?？剐缘陌l(fā)展。換用改變靶標的新藥劑；殺蟲劑的劑型工藝。換用改變靶標的新藥劑；殺蟲劑的劑型工藝。 衛(wèi)生害蟲防治中飽和治理和衛(wèi)生害蟲防治中飽和治理

25、和復(fù)合作用治理的應(yīng)用較多復(fù)合作用治理的應(yīng)用較多適度適度治理治理飽和飽和治理治理復(fù)合復(fù)合作用作用治理治理 以上三種策略并以上三種策略并非完全孤立，在同非完全孤立，在同一個防治計劃中，一個防治計劃中，這些措施可相互滲這些措施可相互滲透。這完全取決于透。這完全取決于所處的實際情況。所處的實際情況。v 設(shè)計抗性治理方案的依據(jù)設(shè)計抗性治理方案的依據(jù) 通過抗性監(jiān)測可以及時準確地知道抗性水平及其分通過抗性監(jiān)測可以及時準確地知道抗性水平及其分布，尤其是早期抗性監(jiān)測，對及時實施抗性治理可爭布，尤其是早期抗性監(jiān)測，對及時實施抗性治理可爭得時間上的主動。得時間上的主動。 一般抗性恢復(fù)所用的時間比抗性產(chǎn)生要慢的多。一

26、般抗性恢復(fù)所用的時間比抗性產(chǎn)生要慢的多。v 明確重點應(yīng)治理保護的藥劑類別及品種明確重點應(yīng)治理保護的藥劑類別及品種抗性監(jiān)測在抗性治理中的作用抗性監(jiān)測在抗性治理中的作用v 評估抗性治理的實際效果評估抗性治理的實際效果 通過監(jiān)測害蟲抗性水平的變化，對整個治理方案通過監(jiān)測害蟲抗性水平的變化，對整個治理方案或不同階段抗性治理效果提供評估，也為抗性治理方或不同階段抗性治理效果提供評估，也為抗性治理方案的修訂補充提供依據(jù)。案的修訂補充提供依據(jù)。 為了達到將昆蟲控制在危害的閥值以下，保護害蟲對藥劑為了達到將昆蟲控制在危害的閥值以下，保護害蟲對藥劑的敏感性和延緩藥劑的有效使用壽命的目的，抗性治理在綜的敏感性和延

27、緩藥劑的有效使用壽命的目的，抗性治理在綜合治理策略原則的指導(dǎo)下，強調(diào)采取非化學(xué)方法，化學(xué)農(nóng)藥合治理策略原則的指導(dǎo)下，強調(diào)采取非化學(xué)方法，化學(xué)農(nóng)藥使用應(yīng)科學(xué)合理，盡可能降低農(nóng)藥對昆蟲的選擇壓力，延緩使用應(yīng)科學(xué)合理，盡可能降低農(nóng)藥對昆蟲的選擇壓力，延緩抗性發(fā)展，減少環(huán)境污染及破壞生態(tài)平衡等問題抗性發(fā)展，減少環(huán)境污染及破壞生態(tài)平衡等問題。第四第四部分部分 全國重要病媒生物全國重要病媒生物 抗藥性監(jiān)測（試行）方抗藥性監(jiān)測（試行）方案案1.方案方案背景背景 2. 監(jiān)測目的監(jiān)測目的2.1 掌握抗藥性水平，指導(dǎo)防制掌握抗藥性水平，指導(dǎo)防制 2.2 制定控制預(yù)案，提高疾控能力制定控制預(yù)案，提高疾控能力 3.監(jiān)

28、測的組織、分工和職責監(jiān)測的組織、分工和職責 3.1 監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)監(jiān)測網(wǎng)絡(luò) 以中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所媒介生以中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所媒介生物控制室為依托，物控制室為依托， 以各省以各省( (自治區(qū)，直轄市自治區(qū)，直轄市) )為監(jiān)測試為監(jiān)測試點單位，監(jiān)測點由監(jiān)測試點單位設(shè)立。點單位，監(jiān)測點由監(jiān)測試點單位設(shè)立。3.2 分工和職責分工和職責 3.2.1 中國疾病預(yù)防控制中心傳染病所中國疾病預(yù)防控制中心傳染病所 3.2.1 省省( (自治區(qū)，直轄市自治區(qū)，直轄市) )疾病預(yù)防控制部門疾病預(yù)防控制部門 4. 監(jiān)測內(nèi)容和方法監(jiān)測內(nèi)容和方法 4.1 靶標昆蟲（監(jiān)測對象）靶標昆蟲（監(jiān)測對象

29、）v 淡色庫蚊淡色庫蚊/ /致倦庫蚊的幼蟲和成蟲致倦庫蚊的幼蟲和成蟲v 家蠅成蟲家蠅成蟲4.2 監(jiān)測點的選擇監(jiān)測點的選擇 監(jiān)測點要考慮地理分布（經(jīng)緯度、生境），每省選監(jiān)測點要考慮地理分布（經(jīng)緯度、生境），每省選兩個有代表性的監(jiān)測點進行。兩個有代表性的監(jiān)測點進行。 監(jiān)測點要相對固定。監(jiān)測點要相對固定。監(jiān)測點的選擇必須考慮以下幾點：監(jiān)測點的選擇必須考慮以下幾點：v 當?shù)孛浇樯镄詡魅静〉陌l(fā)生情況當?shù)孛浇樯镄詡魅静〉陌l(fā)生情況v 相關(guān)疾病媒介生物的種類和發(fā)生強度相關(guān)疾病媒介生物的種類和發(fā)生強度v 病媒生物對人的騷擾程度等選擇病媒生物對人的騷擾程度等選擇4.3 監(jiān)測時間監(jiān)測時間 在當?shù)氐陌l(fā)生高峰期，每

30、在當?shù)氐陌l(fā)生高峰期，每兩兩年進行一次，不同監(jiān)年進行一次，不同監(jiān)測年份測定時間相對固定。測年份測定時間相對固定。 4.4 試蟲采集試蟲采集 試蟲的采集以居民區(qū)（城市或農(nóng)村）及人活動頻繁試蟲的采集以居民區(qū)（城市或農(nóng)村）及人活動頻繁的區(qū)域（公園、綠化帶、村莊周圍的區(qū)域（公園、綠化帶、村莊周圍500米內(nèi)等）為主。米內(nèi)等）為主。 在其東、西、南、北、中在其東、西、南、北、中5個方位采集樣本，按接個方位采集樣本，按接近近等比例混合等比例混合后進行抗藥性測定。后進行抗藥性測定。 抗藥性監(jiān)測，在采集試蟲的當代或室內(nèi)飼養(yǎng)的抗藥性監(jiān)測，在采集試蟲的當代或室內(nèi)飼養(yǎng)的12代代進行。進行。4.5 監(jiān)測藥劑監(jiān)測藥劑4.5

31、.1 淡色庫蚊淡色庫蚊/ /致倦庫蚊的監(jiān)測藥劑致倦庫蚊的監(jiān)測藥劑 高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、雙硫磷、仲丁威高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、雙硫磷、仲丁威4.5.2 家蠅的監(jiān)測藥劑家蠅的監(jiān)測藥劑 溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、敵敵畏、殘殺威。溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、敵敵畏、殘殺威。 其它藥劑根據(jù)當?shù)赜盟幥闆r進行選擇監(jiān)測。其它藥劑根據(jù)當?shù)赜盟幥闆r進行選擇監(jiān)測。4.6 設(shè)施和器材設(shè)施和器材 養(yǎng)蟲室養(yǎng)蟲室吸蚊磁吸蚊磁通風(fēng)櫥通風(fēng)櫥光照培養(yǎng)箱光照培養(yǎng)箱 點滴器點滴器 誘蚊燈誘蚊燈 吸蟲器吸蟲器 捕蟲網(wǎng)捕蟲網(wǎng) 防蚊帽防蚊帽 移液器移液器 電子天平電子天平 磁力攪拌器磁力攪拌器 4.7 監(jiān)測方法監(jiān)測方法 4.7.1 蚊蟲幼蟲

32、浸漬法蚊蟲幼蟲浸漬法 以以4齡初幼蟲為測試對象，以丙酮將原藥稀釋，將待測齡初幼蟲為測試對象，以丙酮將原藥稀釋，將待測藥劑配置藥劑配置57個系列濃度，即在個系列濃度，即在250毫升的燒杯（或白瓷毫升的燒杯（或白瓷碗等）中加入碗等）中加入200毫升脫氯水和毫升脫氯水和0.5毫升相應(yīng)的藥液，加入毫升相應(yīng)的藥液，加入2030頭試蟲，以頭試蟲，以200mL脫氯水為對照。脫氯水為對照。 試蟲在試蟲在251、相對濕度為、相對濕度為7010、光照、光照 黑暗黑暗16 8的條件下，的條件下，24小時調(diào)查并記錄各處理的死亡數(shù)。死小時調(diào)查并記錄各處理的死亡數(shù)。死亡判斷標準，用銳器觸動不能動的幼蟲為死亡，只是震亡判斷

33、標準，用銳器觸動不能動的幼蟲為死亡，只是震顫也視為死亡。試驗重復(fù)顫也視為死亡。試驗重復(fù)3次。對照死亡率超過次。對照死亡率超過20，試，試驗視為無效。驗視為無效。 4.7.2 成蚊接觸桶法成蚊接觸桶法 藥紙的制備藥紙的制備 將白油和乙醚將白油和乙醚(AR)按按 1 2 比例混合作為溶比例混合作為溶劑。劑。 殺蟲劑按需要量溶解其中，配成一定濃度殺蟲劑按需要量溶解其中，配成一定濃度附錄附錄 2，吸取，吸取 2.14 毫升均勻滴于毫升均勻滴于 16 厘米厘米12.5 厘米的新華厘米的新華1號濾紙或其號濾紙或其他質(zhì)量相近的濾紙上。他質(zhì)量相近的濾紙上。 2小時后待乙醚完全揮發(fā)即可應(yīng)用。小時后待乙醚完全揮發(fā)

34、即可應(yīng)用。 藥紙制備后應(yīng)在藥紙制備后應(yīng)在 6 小時內(nèi)使用，如需要可以把小時內(nèi)使用，如需要可以把 l020 張張藥紙用大小相同的玻璃板夾緊，用橡皮膏把間縫封實，再藥紙用大小相同的玻璃板夾緊，用橡皮膏把間縫封實，再裝入黑紙袋中，在較低溫下大約可以存放一個月，但一經(jīng)裝入黑紙袋中，在較低溫下大約可以存放一個月，但一經(jīng)開啟即不能儲存，必須在開啟即不能儲存，必須在 23 天內(nèi)用完，如果已經(jīng)裝入接天內(nèi)用完，如果已經(jīng)裝入接觸筒，就只能用一次。觸筒，就只能用一次。 先把恢復(fù)筒安裝在放隔板的一面，先把恢復(fù)筒安裝在放隔板的一面， 用吸蚊器吸取用吸蚊器吸取 2025 只雌蚊（羽化后只雌蚊（羽化后 2448 小時，未吸

35、血）吹入筒內(nèi)，然小時，未吸血）吹入筒內(nèi)，然后關(guān)閉隔板，在隔板另一面裝上已襯貼藥紙的接觸筒，后關(guān)閉隔板，在隔板另一面裝上已襯貼藥紙的接觸筒，把隔板抽開，將恢復(fù)筒內(nèi)蚊蟲輕吹入接觸筒，迅速關(guān)上把隔板抽開，將恢復(fù)筒內(nèi)蚊蟲輕吹入接觸筒，迅速關(guān)上隔板，將筒平放，即開始計算接觸時間，接觸隔板，將筒平放，即開始計算接觸時間，接觸 60 分鐘，分鐘，完畢后再抽開隔板將蚊蟲再吹入恢復(fù)筒，關(guān)上隔板，完畢后再抽開隔板將蚊蟲再吹入恢復(fù)筒，關(guān)上隔板， 將將筒直放，筒直放， 用浸有用浸有 5葡萄糖水的棉花團置于尼龍網(wǎng)上。葡萄糖水的棉花團置于尼龍網(wǎng)上。 室溫室溫 252，從接觸完畢后，從接觸完畢后 24 小時計算死亡率。為了小時計算死亡率。為了便于蚊蟲在恢復(fù)筒內(nèi)停留，可用白紙襯貼在筒內(nèi)上端便于蚊蟲在恢復(fù)筒內(nèi)停留，可用白紙襯貼在筒內(nèi)上端 l2 或或 23，空出下端，以便于觀察死亡掉下的蚊蟲。在，空出下端，以便于觀察死亡掉下的蚊蟲。在 45次重復(fù)中，每劑量應(yīng)至少測次重復(fù)中，每劑量應(yīng)至少測 100 只蚊。只蚊。4.7.3 家蠅的監(jiān)測方法家蠅的監(jiān)測方法 用丙酮（分析純）將原藥配成用丙酮（分析純）將原藥配成 57 個系列濃度。取個系列濃度。取37日齡，體重為日齡，體重為1820mg的家蠅成蟲。的家蠅成蟲。 把含有乙醚（分析純）的棉球?qū)⒅感喂芸诙氯?、輕度麻把含有乙醚（分析純）的棉球?qū)⒅感喂芸诙氯⑤p度麻醉