第2章細(xì)菌農(nóng)藥

1、1第二章第二章 細(xì)菌農(nóng)藥細(xì)菌農(nóng)藥2第二章第二章 細(xì)菌農(nóng)藥細(xì)菌農(nóng)藥細(xì)菌農(nóng)藥包括：細(xì)菌殺蟲劑和細(xì)菌殺菌劑細(xì)菌殺蟲劑目前大約有100多種，被開發(fā)的主要有：蘇蘇云金芽孢桿菌云金芽孢桿菌、日本金龜子芽孢桿菌、球形芽孢桿菌和緩死芽孢桿菌細(xì)菌殺菌劑包括革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌研究較多的主要是熒光假單孢桿菌和芽孢桿菌3第一節(jié) 細(xì)菌農(nóng)藥概述o 一、細(xì)菌農(nóng)藥的分類o 細(xì)菌農(nóng)藥：是一類由細(xì)菌或其代謝產(chǎn)物組成的殺蟲或殺菌制劑o 其分類可按用途或防治對(duì)象和是否產(chǎn)芽孢進(jìn)行分類41、按用途或防治對(duì)象分類o A、細(xì)菌殺蟲劑o 是最早的微生物農(nóng)藥，主要是從昆蟲病體上分離得到的病原菌。o 致病菌有：蘇云金芽孢桿菌（Bt）、金龜

2、子芽孢桿菌、緩死芽孢桿菌、球形芽孢桿菌、天幕蟲梭菌、銅綠假單胞菌和金龜子立克次氏菌等o Bt殺蟲晶體蛋白對(duì)鱗、雙、鞘、膜、同、直翅目、食毛目及線蟲、螨類、原生動(dòng)物等有殺蟲活性。5B、細(xì)菌殺菌劑o 早期研究的多為革蘭氏陰性菌：假單孢菌、放射形土壤桿菌、歐氏桿菌等。o 近年來革蘭氏陽性菌得到重視，特別是芽孢桿菌應(yīng)用潛力大。o 枯草芽孢桿菌對(duì)鐮刀菌屬和絲核菌屬防治效果很好，且兼具防病和促進(jìn)作物生長的作用o 蠟狀芽孢桿菌用于苜蓿猝倒病、大豆猝倒病和根腐病6C、細(xì)菌殺線蟲劑o 是一類可防治植物線蟲的細(xì)菌。o 其中穿刺巴斯德氏柄菌是植物線蟲最重要的生物防治因子之一。7D、細(xì)菌殺鼠劑o 細(xì)菌及其代謝產(chǎn)物在鼠

3、類防治上取得了滿意的效果o 目前主要的細(xì)菌殺鼠劑有肉毒梭菌產(chǎn)生的毒素，其中C型肉毒梭菌生物殺鼠素已得到一定范圍的應(yīng)用。8E、微生態(tài)制劑o 又叫活菌制劑、生菌劑、益生素，是在微生態(tài)理論指導(dǎo)下，由乳酸桿菌、芽孢桿菌、光合細(xì)菌和酵母菌等有益微生物經(jīng)復(fù)合培養(yǎng)、發(fā)酵、干燥、加工等特殊工藝生產(chǎn)出的生物制劑或活菌制劑。o 作用：改善腸道菌群失調(diào)、維持腸道微生態(tài)平衡、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、提高機(jī)體搞應(yīng)激能力。92、按是否產(chǎn)芽孢分類o A、芽孢桿菌類細(xì)菌農(nóng)藥o 主要有：蘇云金芽孢桿菌、金龜子芽孢桿菌、緩死芽孢桿菌、球形芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌o B、非芽孢桿菌類細(xì)菌農(nóng)藥o 主要有：銅綠假單孢菌、金龜子立

4、克次氏體、熒光假單孢桿菌、放射型土壤桿菌、歐氏桿菌、穿刺巴斯德氏柄菌、肉毒梭菌、乳酸桿菌、光合細(xì)菌和酵母菌10二、細(xì)菌農(nóng)藥的特點(diǎn)o 選擇性強(qiáng)、對(duì)人畜等生物比較安全、對(duì)環(huán)境相容性高o 通常對(duì)害蟲天敵安全、不容易產(chǎn)生抗性o 容易培養(yǎng)、培養(yǎng)時(shí)間短、生產(chǎn)工藝比較簡單o 產(chǎn)芽孢的細(xì)菌農(nóng)藥抗逆性強(qiáng)、易于貯存和運(yùn)輸o 開發(fā)和登記費(fèi)用低于化學(xué)農(nóng)藥11第二節(jié) 蘇云金芽孢桿菌殺蟲劑o 一、特征和分類1、形態(tài)和培養(yǎng)特征12芽孢囊o 芽孢著生于細(xì)胞的一端或偏一端，另一端或兩端形成一個(gè)、兩個(gè)或多個(gè)不同形態(tài)的伴孢晶體。o 當(dāng)芽孢囊成熟時(shí)，通常芽孢與伴孢晶體分離o 但有些亞種當(dāng)芽孢破裂時(shí)芽孢和伴孢晶體卻包裹在芽孢外壁內(nèi)13

5、芽孢和伴孢晶體o 芽孢的形狀和大小較固定o 伴孢晶體的形狀和大小與菌株本身的特征、培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的差異而不同o 有些菌株的伴孢晶體是由S層蛋白形成的o Bt的24個(gè)亞種及其33個(gè)菌株的伴孢晶體大小：長度為0.6-1.8um，寬為0.3-0.9umo 形狀為：菱形、長菱形、圓或橢圓形、鑲嵌形、無定形、三角形等。14培養(yǎng)特征1：菌落o 培養(yǎng)特征是微生物固有的特征，但Bt的培養(yǎng)特征卻依培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件和培養(yǎng)時(shí)間的不同而不同o Bt在蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基中30度培養(yǎng)24h，形成針尖大小的小點(diǎn)，邊緣平滑。72h后為圓盤狀，直徑約1cm，淡黃色而濕潤，邊緣不整齊，略呈放射狀皺紋。o Bt在2%的葡萄糖瓊脂培

6、養(yǎng)基中30度培養(yǎng)24h，可見黃色小菌落，48h后成厚圓環(huán)形，直徑約3mm，中央有一較深的圓環(huán)，表面為暗白色，邊緣有復(fù)片如卷發(fā)，72h后直徑達(dá)2cm15培養(yǎng)特征2：菌苔o Bt在斜面上的菌苔呈凸突狀，乳白色或淡黃色，光滑或有皺紋o 蠟螟亞種在牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面培養(yǎng)基中30度培養(yǎng)14-16h，菌苔稀薄，為乳白色帶黃，表面無光澤；72小時(shí)后，菌苔豐滿，有光澤，有時(shí)有皺紋162、分類o 亞種劃分鑒定方法歸納為以下幾種： 1、鞭毛抗原的血清型（H抗原） 一個(gè)細(xì)胞的鞭毛往往有一到多個(gè)抗原，含有抗體的血清能與抗原發(fā)生特異性反應(yīng) 2、營養(yǎng)細(xì)胞的脂酶型 根據(jù)酯酶帶的數(shù)量、特征和E1值的不同，把Bt分為24個(gè)酯

7、酶型 3、O-血清型H型鑒定方法所制備的抗原為OH抗原17二、作用機(jī)制o Bt產(chǎn)生的毒素有：伴孢晶體（殺蟲晶體蛋白：伴孢晶體（殺蟲晶體蛋白：晶體蛋白和溶細(xì)胞蛋白）、蘇云金素、營養(yǎng)期晶體蛋白和溶細(xì)胞蛋白）、蘇云金素、營養(yǎng)期殺蟲蛋白殺蟲蛋白、幾丁質(zhì)酶、卵磷脂酶、腸毒素等 1、晶體蛋白（Cry）的作用機(jī)制 作用過程：昆蟲腸道溶解酶解活化與受體結(jié)合膜孔形成細(xì)胞裂解18o 昆蟲腸道溶解：伴孢晶體溶解釋放出晶體蛋白o(hù) 毒素釋放和激活：晶體蛋白Cry1Ac的C末端切除7個(gè)8-10k短肽，N末端切除28個(gè)氨基酸得到抗蛋白酶的60k毒素核心片段o 毒素與受體結(jié)合：穿過圍食膜到達(dá)中腸上皮柱狀細(xì)胞，與刷狀緣上特異性

8、的受體高親和性地結(jié)合。殺蟲特異性與親和力大小相關(guān)晶體蛋白（Cry）的作用過程19晶體蛋白（Cry）的作用過程o 細(xì)胞膜孔的形成：與特異性受體結(jié)合后，毒素會(huì)快速而不可逆地插入細(xì)胞質(zhì)膜中o 細(xì)胞裂解：形成孔洞后，維持細(xì)胞膜功能的離子梯度破壞，不能滲透細(xì)胞內(nèi)外的一些大分子和水分子，導(dǎo)致柱狀細(xì)胞吸水膨脹，最后裂解202、溶細(xì)胞蛋白（Cyt）的作用機(jī)制o CytA的大小和結(jié)構(gòu)與Cry蛋白完全不同，作用機(jī)制也不同。o CytA在細(xì)胞膜上沒有專一的受體蛋白o(hù) 它首先與膜中的不飽和脂肪酸親和而與膜結(jié)合，而且是通過多個(gè)毒素分子寡聚合形成跨膜的-桶式結(jié)構(gòu)，最后造成膜穿孔213、營養(yǎng)期殺蟲蛋白（VIPs）作用機(jī)制o

9、 主要通過與敏感昆蟲中腸上皮細(xì)胞受體結(jié)合，使中腸潰爛而產(chǎn)生昆蟲致死現(xiàn)象o 致病作用與殺蟲晶體蛋白相似，但作用機(jī)制完全不同224、蘇云金素的殺蟲機(jī)理o A、是RNA聚合酶的特殊抑制劑，及抑制RNA合成過程，但不影響蛋白質(zhì)和DNA合成o B、可能是與ATP競(jìng)爭(zhēng)酶的結(jié)合位置，影響靶標(biāo)生物的ATP代謝作用o C、真核生物DNA依賴的RNA聚合酶對(duì)蘇云金素更敏感o D、對(duì)真核生物的代謝作用產(chǎn)生干擾，影響腸道合成核糖體的RNA核聚合酶23三、基因工程菌o 1、Bt殺蟲晶體蛋白基因 1981年第一次克隆了Bt殺蟲晶體蛋白基因cryl1Aa1 除部分殺蟲晶體蛋白基因可能定位于染色體上外，絕大多數(shù)的殺蟲晶體蛋白

10、基因定位于質(zhì)粒上。 在1995年成立了cry基因命名委員會(huì)，根據(jù)晶體蛋白氨基酸序列的同源性差異，將已知的基因分為 4個(gè)等級(jí)241、Bt殺蟲晶體蛋白基因o A、鱗翅目昆蟲特異性的cry1Aa 、cry1Ab、cry1Ac殺蟲晶體蛋白o(hù) B、基因cry1C:用于防治灰翅夜蛾、甜菜夜蛾o C、基因cry9C：與其它殺蟲晶體蛋白相比具有不同的結(jié)合位點(diǎn)o D、人工基因： cry1Ab/1C、cry1Ac、 cry4B、 cry3A、 cry1Ab等基因的誘變產(chǎn)物可提高毒力2.5-32倍 251、Bt殺蟲晶體蛋白基因o E、基因cry3A：對(duì)鞘翅目昆蟲有特異性毒力o F、殺蚊毒素蛋白基因：主要存在于以色列

11、亞種，至少含有：Cry11A、Cry4B、Cry4A、Cyt1A晶體蛋白o(hù) G、對(duì)動(dòng)植物寄生線蟲有毒的基因： cry5、 cry6、 cry7、 cry8、 cry12、 cry13、 cry14、 cry21（來自美國），作用對(duì)象有短體線蟲、原生動(dòng)物、螨類、吸蟲、虱等262、Bt重組殺蟲菌o A、基因轉(zhuǎn)移的策略o 質(zhì)粒轉(zhuǎn)移：通過質(zhì)粒的結(jié)合轉(zhuǎn)移可以實(shí)現(xiàn)殺蟲基因的重新組合，從而獲得所需的重組殺蟲菌o 整合到染色體上：通過同源重組或轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)而整合在染色體上o 遺傳穩(wěn)定的質(zhì)粒載體：用一個(gè)目標(biāo)殺蟲基因替換Bt同源質(zhì)粒中與質(zhì)粒復(fù)制無關(guān)的DNA片斷272、Bt重組殺蟲菌o B、蘇云金桿菌殺蟲工程菌o 廣

12、譜殺蟲工程菌：將cry1C導(dǎo)入cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac，擴(kuò)充后三者對(duì)甜菜夜蛾等昆蟲的殺蟲活性；將cry3A導(dǎo)入庫斯塔克亞種，擴(kuò)充其對(duì)鞘翅目昆蟲的毒力等28B、蘇云金桿菌殺蟲工程菌o 提高殺蟲活性的工程菌：o 1、轉(zhuǎn)錄水平-利用基因cry3A的啟動(dòng)子表達(dá)基因cry1Ac和cry1C可達(dá)到提高表達(dá)量；o 2、轉(zhuǎn)錄后水平-基因cry1Ac的終止子和cry3A的STAB-SD序列可用于提高mRNA的穩(wěn)定性；o 3、翻譯后水平利用幫助蛋白提高晶體蛋白的表達(dá)量和穩(wěn)定性o 4、協(xié)同殺蟲活性利用幾丁質(zhì)酶基因增強(qiáng)對(duì)蓮紋夜蛾、小菜蛾和蚊蟲的殺蟲活性。29B、蘇云金桿菌殺蟲工程菌o 延緩抗性的工程菌

13、：cyt1A基因被認(rèn)為與蚊蟲對(duì)Bt以色列亞種不易產(chǎn)生抗性有關(guān)，cry9c也被考慮用于克服抗性的研究o 延長持效期的工程菌：以含有基因cry1Ac且sink-缺陷的Bt菌作受體，一方面具有較高的殺蟲活性，另一方面在芽孢形成的晚期受阻，不能完成芽孢形成過程，但并不影響晶體蛋白基因的表達(dá)30四、制劑生產(chǎn)工藝和應(yīng)用o 1、制劑生產(chǎn)工藝：液體發(fā)酵和固體發(fā)酵o A、液體發(fā)酵工藝：菌種的制備、培養(yǎng)基的選擇和滅菌、發(fā)酵、后期處理o 發(fā)酵控制難題： a、有機(jī)體的內(nèi)在活動(dòng)是非線性的過程 b、幾乎不能用動(dòng)力學(xué)模型精確描述其復(fù)雜的生化過程 c、模型參數(shù)具有不可預(yù)測(cè)性 d、可靠的可用來探測(cè)細(xì)胞內(nèi)部活動(dòng)的生物傳感器幾乎沒

14、有31選種育種砂土管菌種斜面菌種種子罐發(fā)酵罐濃 縮 噴霧干燥制劑化質(zhì)量檢驗(yàn)成 品蘇云金芽胞桿菌制劑生產(chǎn)工藝流程圖蘇云金芽胞桿菌制劑生產(chǎn)工藝流程圖 32四、制劑生產(chǎn)工藝和應(yīng)用o B、固體發(fā)酵：是利用小顆粒載體表面吸附的營養(yǎng)物質(zhì)來培養(yǎng)所需要的微生物o 固體發(fā)酵是高濃度和高黏度發(fā)酵技術(shù)的極限o 可克服液體發(fā)酵對(duì)技術(shù)要求高、設(shè)備投資大、商品制劑成本高等缺點(diǎn)o 工藝流程：Bt優(yōu)質(zhì)菌粉網(wǎng)盤薄層固體發(fā)酵干燥粉碎包裝3334四、制劑生產(chǎn)工藝和應(yīng)用o Bt固體發(fā)酵分4個(gè)階段： 第一階段：發(fā)酵初期（6-10h） 第二階段：發(fā)酵高峰（10-24h） 第三階段：穩(wěn)定期（24-34h） 第四階段：后熟期（34h-發(fā)酵結(jié)

15、束）352、應(yīng)用 o a、防治蔬菜害蟲o b、防治水稻害蟲o c、防治棉花害蟲o d、防治玉米害蟲o e、防治園林及果茶害蟲o f、防治醫(yī)學(xué)害蟲：蚊蟲、蚋等o g、防治倉貯害蟲o h、防治動(dòng)物寄生蟲36第三節(jié) 其它細(xì)菌殺蟲劑o 一、球形芽孢桿菌（Bs）o 1904年確定其做為一個(gè)獨(dú)立的種，1965年發(fā)現(xiàn)Bs Kellen菌株對(duì)蚊幼蟲有毒殺作用o 20世紀(jì)70年代后各國學(xué)者對(duì)其進(jìn)行深入研究371、形態(tài)特征和分類o Bs是革蘭氏染色可變的、形成內(nèi)生芽孢的一種桿菌，其培養(yǎng)體的形態(tài)隨其發(fā)育階段的不同而變化Bs菌株的營養(yǎng)細(xì)胞381、形態(tài)特征和分類o Bs的營養(yǎng)細(xì)胞由細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞質(zhì)、原核、間體、

16、鞭毛等組成o Bs對(duì)蚊幼蟲有有毒菌株和無毒菌株之分o 大部分無毒菌株?duì)I養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞壁外層具有正方形的、對(duì)稱而有規(guī)則的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)（T層）39孢子囊40芽孢的結(jié)構(gòu)由外到內(nèi)：芽孢外膜、外衣、片狀中衣、內(nèi)衣、皮層41菌落的形態(tài)o Bs的菌落成圓形、一般微突起、表面光滑、油脂樣有閃光、有整齊的邊緣、呈白色、淺黃色或微棕褐色，少數(shù)為粉紅色，顏色隨時(shí)間由淺到深42分類o Bs做為一個(gè)新的獨(dú)立種主要依據(jù)是形態(tài)學(xué)和它的表形特征，除此外還有DNA同源性、脂肪酸組成、生化特征o Bs種內(nèi)的鑒定采用DNA同源性分析、H-抗原分析、對(duì)噬菌體的敏感性、血清型，將Bs菌株分為5個(gè)DNA同源型、48個(gè)H-血清型、8個(gè)噬菌體型

17、、10個(gè)血清型432、活性譜及活性成分o Bs生長發(fā)育過程中產(chǎn)生兩類不同的蛋白：晶體毒素蛋白和Mtx毒素蛋白o(hù) 所有高毒力株和部分中毒力株在芽孢形成過程中能形成位于芽孢外膜內(nèi)的伴孢晶體，該晶體由51k和42k（p51和p42）多肽組成，其合成于芽孢形成期，并在芽孢形成III期通過兩蛋白的相互作用和折疊而組裝成晶體443、作用機(jī)制o Bs對(duì)各種蚊蟲有高毒效的菌株屬于血清型H5a5b、H25、H6o Bs的毒素對(duì)蚊蟲的作用機(jī)制十分復(fù)雜，晶體毒素對(duì)敏感幼蟲的作用主要包括以下各階段： a、芽孢晶體復(fù)合物被幼蟲吞食，b、伴孢晶體在中腸堿性環(huán)境下溶解，c、51k和42k原毒素蛋白質(zhì)被胰蛋白酶和糜蛋白酶降解

18、成43k和39k的多肽，d、毒性肽與胃盲囊和中腸后段結(jié)合，e、通過某種方式實(shí)現(xiàn)其毒性作用45BS對(duì)蚊子幼蟲的毒性大小中463、作用機(jī)制o 毒素與尖音庫蚊中腸細(xì)胞的結(jié)合很強(qiáng)烈，具有高度特異性和親和性，而與按蚊細(xì)胞的結(jié)合是微弱的，具有非特異性和低親和性。毒素與埃及伊蚊細(xì)胞不結(jié)合。o 這說明：蚊幼蟲對(duì)毒素敏感性的差別是由于它們與毒素結(jié)合的受點(diǎn)不同所致。474、編碼毒素基因o Bs與Bt另一個(gè)重要的不同點(diǎn)是：它的毒素基因位于細(xì)胞的染色體上而不是質(zhì)粒上o 迄今為止，毒素蛋白基因的DNA序列和氨基酸序列已經(jīng)被確定的Bs菌株有2362菌株、1593菌株、IAB59菌株、2317-3菌株和SS-1菌株等。o

19、除SS-1菌株的晶體毒素蛋白是1個(gè)100k的多肽外，其它菌株均由42k和51k二個(gè)多肽組成，且其堿基序列很相似485、基因工程菌o 天然的殺蚊蛋白的缺點(diǎn)：持續(xù)期較短、殺蚊譜較窄、不能有效地分布于目標(biāo)昆蟲的取食范圍如水體表面。o 可通過DNA重組技術(shù)對(duì)天然毒素蛋白基因進(jìn)行修飾和改進(jìn)，并通過殺蚊基因在不同宿主中的表達(dá)研究，獲得殺蚊活性增強(qiáng)、持續(xù)期延長、殺蚊譜拓寬、不易產(chǎn)生抗性的新型殺蚊工程菌495、基因工程菌o a、Bs殺蚊毒素基因在大腸桿菌和其它芽孢桿菌中的表達(dá)：以無蛋白酶活性的突變株為宿主會(huì)大大提高毒素的表達(dá)水平o b、柄細(xì)菌工程：將殺蚊基因轉(zhuǎn)入柄細(xì)菌中o c、滅蚊工程藍(lán)藻：將殺蚊基因轉(zhuǎn)入藍(lán)藻

20、506、制劑生產(chǎn)工藝o 少數(shù)采用半固體發(fā)酵技術(shù)，一般采用液體深層發(fā)酵技術(shù)o Bs制劑深層發(fā)酵生產(chǎn)工藝一般采用Bt殺蟲劑的生產(chǎn)工藝：菌種制作、發(fā)酵、后處理、干燥、檢測(cè)517、應(yīng)用o 我國是Bs應(yīng)用開發(fā)較早的國家之一，1985年就研制出了Bs液劑，并在20個(gè)省市大面積使用，同時(shí)還研制出了實(shí)驗(yàn)性粉劑、緩釋顆粒劑o 1993年我國的Bs制劑產(chǎn)量近100噸，劑型也越來越多o 使用一噸Bs滅蚊劑比化學(xué)滅蚊要節(jié)省5000到10000元，且不污染環(huán)境52二、金龜子芽孢桿菌1、形態(tài)特征、形態(tài)特征532、作用機(jī)制o 感染過程分為4個(gè)時(shí)期：o a、芽孢萌發(fā)期o b、營養(yǎng)體繁殖期o c、芽孢形成期o d、芽孢成熟期5

21、43、應(yīng)用o 美國在13個(gè)州用日本金龜子芽孢桿菌制劑防治日本金龜子，面積達(dá)4萬多公頃，防治效果60-80%；美國的馬里蘭州應(yīng)用該菌后使每平方米草地上蠐螬從200-600頭減少到10-30頭，并且保持這個(gè)水平達(dá)9年之久o 問題：這種病原細(xì)菌不能在人工培養(yǎng)基中生產(chǎn)大量的侵染性芽孢，因此應(yīng)用受限。55三、嗜蟲黏質(zhì)賽氏桿菌o 通常它是水、土壤、牛奶和食品中的普通腐生菌，并能引起多種鱗翅目昆蟲如：草地螟、玉米螟、黃地老虎、棉鈴蟲、舞毒蛾等的幼蟲。o 感染后在蟲體體腔中繁殖，導(dǎo)致宿主敗血癥、使其運(yùn)動(dòng)緩慢、對(duì)外界刺激不敏感、食欲減退、經(jīng)常腹瀉，在1-3天內(nèi)迅速死亡。56四、梭狀芽孢桿菌o 毛蟲吞食后，經(jīng)16

22、-24h，芽孢在宿主體內(nèi)萌發(fā)成營養(yǎng)體、24h后形成芽孢，36h后便中出現(xiàn)營養(yǎng)和芽孢，5-6天幼蟲進(jìn)入瀕死期，4天后死亡o 特殊點(diǎn)：病原菌僅在腸道中繁殖，并不入侵體腔，蟲死后，蟲尸收縮、干燥而僵化，不腐敗。57第四節(jié) 細(xì)菌殺菌劑o 一、假單孢菌o 目前應(yīng)用的主要有熒光假單胞菌、洋蔥假單孢菌和惡臭假單孢菌581、抗菌機(jī)理o a、競(jìng)爭(zhēng)作用：包括營養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)和位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)o b、誘導(dǎo)植物系統(tǒng)抗性：一些熒光假單孢菌在概況的定殖能誘導(dǎo)植物對(duì)病原菌產(chǎn)生系統(tǒng)抗性，從而抑制微生物的侵染o c、抗生作用：熒光假單孢菌通過產(chǎn)生次生代謝物抑制植物病原物的生長592、應(yīng)用 o 熒光假單孢菌生防菌株已應(yīng)用控制一些農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中危害嚴(yán)

23、重的土傳作物病害： 棉花幼苗猝倒病、棉花立枯病、小麥全蝕病、馬鈴薯軟腐病、番茄青枯病、煙草根黑腐病和桃樹根癌病60二、枯草芽孢桿菌o 防治對(duì)象主要為絲狀真菌引起的植物病害： 水稻紋枯病 番茄葉霉病 大豆根腐病 蘋果霉心病 棉花立枯病 棉花枯萎病611、作用機(jī)制o a、拮抗作用：是指微生物產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，抑制有害病原菌生長或直接將病原菌殺死。o b、競(jìng)爭(zhēng)作用：以位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)為主，在植物體表、體內(nèi)、根際及土壤中定殖；營養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)只在少數(shù)菌株中發(fā)現(xiàn)o c、誘導(dǎo)植物抗性作用：誘發(fā)植物自身抗病機(jī)制從而增強(qiáng)植物的抗病能力622、生產(chǎn)工藝及應(yīng)用o 生產(chǎn)工藝：液體深層發(fā)酵和固體發(fā)酵o 應(yīng)用：玉米浸種，防治幼枯萎病、產(chǎn)量

24、提高、控制倉貯期玉米種腐；噴灑水稻秧苗，水稻紋枯病減輕50-81%，產(chǎn)量大量提高；在枝干和花葉病害的防治中有獨(dú)特效果，噴灑落葉后的蘋果枝條和修剪傷口，大大減少潰瘍病的發(fā)生；噴灑大豆植株，使大豆銹病菌的銹皰囊少了95%以上。63三、地衣芽孢桿菌o 對(duì)多種動(dòng)植物及人類病原菌有很好的抑制作用，是植物病害防治中具潛力的細(xì)菌之一o 1、作用機(jī)制：通過產(chǎn)生抗菌蛋白、多肽類、幾丁質(zhì)酶、和非蛋白類如苯乙酸等抗菌物質(zhì)發(fā)生作用。此外還具有植物體表定殖競(jìng)爭(zhēng)能力、誘導(dǎo)植物產(chǎn)生系統(tǒng)抗性能力o 2、應(yīng)用：對(duì)番茄灰霉病、煙草黑脛病、棉花枯萎病和黃萎病等均有防效64第五節(jié)、細(xì)菌殺線蟲劑和殺鼠劑o 一、穿刺巴斯德氏柄菌o 是植

25、物線蟲最重要的生物防治因子之一o 1、分類地位：至今混淆不清，區(qū)分該屬種的標(biāo)準(zhǔn)有問題o 2宿主范圍和地理分布：目前為止，已經(jīng)報(bào)告有分屬于116個(gè)屬的323個(gè)種，分布于五大洲三大洋的70個(gè)國家，全世界已有分隸于116個(gè)屬的323種線蟲可作為其宿主。653、生活史和培養(yǎng)方法o 孢子的形成分為6個(gè)階段：a、菌絲體末端的細(xì)胞拉長并完全分開，b、從內(nèi)生孢子的母細(xì)胞中分出前孢子的橫隔膜形成，c、前孢子被內(nèi)生孢子的母細(xì)胞吞沒并發(fā)生前孢子的原生質(zhì)凝聚，開始產(chǎn)生副孢纖維，de、髓質(zhì)、皮質(zhì)、外孢的形成，f、內(nèi)生孢子成熟o 現(xiàn)大量生產(chǎn)穿刺巴斯德氏柄菌的方法是在溫室植物的線蟲中繁殖這種病原菌664、殺線蟲現(xiàn)狀o 在葡萄、花生、大豆、煙草、番茄和小麥等多種作物上能壓低根結(jié)線蟲的數(shù)量o 能壓低百慕大草上的長刺線蟲、某些農(nóng)作物上的燕麥異皮線蟲和玉米異皮線蟲，水稻上的微褐異皮線蟲以及桃樹上的叉尾線蟲等蟲口675、應(yīng)用前景o 商品化生產(chǎn)的主要障礙是缺乏大規(guī)模生產(chǎn)的有效技術(shù)o 只有對(duì)穿刺巴斯德氏柄菌的營養(yǎng)需要充分了解后才能進(jìn)行大量培養(yǎng)o 為了保證充分的營養(yǎng)，需要在性質(zhì)上與線蟲假體腔液的化學(xué)成分相似的培養(yǎng)基68二、肉毒梭菌o 肉毒毒素是肉毒梭菌在生長繁殖過程中產(chǎn)生的一種細(xì)菌外毒素。肉毒梭菌是一種厭氧菌，其孢子常規(guī)在土壤中，與產(chǎn)生破傷風(fēng)毒素的細(xì)菌屬同一科