酶工程各章試題

1、酶工程第一章測(cè)試試題卷一 填空 (每空1分,共20分)1. 1878年,_首次將酵母中酒精發(fā)酵的物質(zhì)稱為酶.2. 1913年,Michaelis 和Menten根據(jù)中間產(chǎn)物學(xué)說,推導(dǎo)出酶催化反應(yīng)的基本動(dòng)力學(xué)方程-米氏方程,可用公式表示為_.3. 1982年Thomas Cech等人發(fā)現(xiàn)四膜蟲的rRNA可以在沒有蛋白質(zhì)存在的情況下自身催化切除內(nèi)含子,完成加工過程.這一具有催化活性的RNA的發(fā)現(xiàn)改變了傳統(tǒng)的酶的化學(xué)本質(zhì)是_的概念。4. 對(duì)同一種酶可同時(shí)采用系統(tǒng)命名和_命名兩種方法.5. 乳酸脫氫酶可標(biāo)識(shí)為EC1.1.1.2,其中EC代表_.6. 催化L-谷氨酸 D谷氨酸的酶屬于_酶.7. 核酸類酶

2、的基本組成單位是_.8. 酶的有機(jī)輔助因子在催化過程中起_的作用.9. 在酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)片狀折疊中,_式結(jié)構(gòu)更穩(wěn)定.10. 酶的絕對(duì)專一性又稱為_專一性.11. PH對(duì)酶的影響主要是影響到了氨基酸的_狀態(tài).12. 在測(cè)酶活力時(shí),為了使酶反應(yīng)速度不受底物濃度底限制,反應(yīng)系統(tǒng)應(yīng)使用足夠高的底物濃度,一般要求:_.13. 酶分離純化整個(gè)工作包括三個(gè)基本環(huán)節(jié):抽取 純化和_.14. 工業(yè)應(yīng)用的三大酶制劑是蛋白酶 _和脂肪酶.15 核酸類酶催化反應(yīng)的類型,可以將R-酶分為三類:剪切酶,剪接酶和_酶.16、具有不同分子形式但卻催化相同反應(yīng)的酶稱為_.17、每毫克蛋白或RNA中所具有的酶活力數(shù)稱為酶的_.用u

3、/mg表示.18、酶制劑可分為液體酶制劑,固體酶制劑,純酶制劑和_酶制劑.二. 選擇題 (每題2分,共10分)1. 谷氨酸脫氫酶可有以下四種底物,由Km推斷它的最適底物是( ).A. 谷氨酸Km= 0.12 B. -酮戊二酸Km=2.0 C. NAD氧化形 Km=0.025 D. NAD 還原形 Km=0.0182. D EA B C F G圖示抑制模式屬于:()A累積反饋抑制無分支途徑中酶活性反饋抑制C 順序反饋抑制 D 協(xié)調(diào)反饋抑制3有A.B兩種蛋白酶樣品,A樣品32mg,酶活力單位數(shù)為180U.B樣品52mg ,酶活力單位數(shù)為190U,則兩樣品純度為:A A > B B. A &l

4、t; B C. A = B D. 不能斷定.4某酶四種底物的Km 如下,與酶親和力最大的底物是: ( )A 2.5 ×10-2 B 4.4× 10-1 C 8.8×10-2 D 5.0×10-65從世界范圍看,酶制劑在哪一行業(yè)中的應(yīng)用占比例最高?( )A 淀粉業(yè) B 乳制品 C 洗滌劑業(yè) D 制酒業(yè)三. 名詞解釋 (每題3分,共12分)1. 調(diào)節(jié)酶 2.別構(gòu)效應(yīng) 3.固定化酶 四. 判斷題(每題1分,共7分)2. 1/Km越大,酶與底物親和力越大.3. 酶的最適溫度是一個(gè)固定不變的常數(shù),其數(shù)值不受底物的種類.作用時(shí)間而改變.4. 鹽析法分離蛋白質(zhì)時(shí),應(yīng)將

5、溶液PH調(diào)至蛋白質(zhì)等電點(diǎn)附近.5. 酶濃度越高,酶結(jié)晶越大.6. 調(diào)節(jié)酶就是別構(gòu)酶.7. 大腸桿菌丙酮酸脫氫酶是多酶復(fù)合體.五. 說明題(共6分)1. 圖示并說明競(jìng)爭(zhēng)性抑制和非競(jìng)爭(zhēng)性抑制的區(qū)別.(6分)六. 簡(jiǎn)答題 (共21分)1. 簡(jiǎn)介酶分子中氨基酸殘基種類及作用.(8分)2請(qǐng)比較說明吸附層析、離子交換層析、凝膠層析、親和層析的原理.(8分)3、固定化酶的制備原則是什么?(5分)酶工程第一章 測(cè)試參考答案一 填空 (每空1分,共18分)1.庫(kù)尼 2.v=vmaxS/Km+S 3.酶是具有生物催化功能的蛋白質(zhì).4.習(xí)慣 5.國(guó)際酶學(xué)委員會(huì) 6.異構(gòu)酶7.核糖核苷酸8.傳遞電子原子和基團(tuán)的作用.

6、9.反平行 10.立體異構(gòu)11.解離 12.S>5Km 13.制劑. 14淀粉酶 15多功能酶16同工酶 17酶的比活力.18固定化酶制劑二. 選擇題 (每題3分,共15分)1.D 2.D 3.A. 4D 5.C三. 名詞解釋 (每題5分,共15分)1. 調(diào)節(jié)酶: 在代謝途徑和物質(zhì)轉(zhuǎn)化體系中起調(diào)節(jié)作用的關(guān)鍵酶. 2. 別構(gòu)效應(yīng):一種化合物與酶的活性中心以外的部位結(jié)合,引起酶的構(gòu)象發(fā)生變化的現(xiàn)象. 3. 固定化酶:在一定空間內(nèi)呈閉鎖狀態(tài)存在的酶,能連續(xù)地進(jìn)行反應(yīng),反應(yīng)后酶可以回收重復(fù)使用.四. 判斷題(每題2分,共14分)1. 正確 2.錯(cuò)誤 3. 正確 4. 錯(cuò)誤 5. 錯(cuò)誤 6. 正確

7、 7. 正確五、圖示說明題(共12分)2. 圖示并說明競(jìng)爭(zhēng)性抑制和非競(jìng)爭(zhēng)性抑制的區(qū)別.(6分)競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑結(jié)構(gòu)往往與正常底物非常相似,從而與底物競(jìng)爭(zhēng)酶分子上同一個(gè)結(jié)合部位(活性中心),阻止底物和酶的結(jié)合.因而酶不能與抑制劑和底物同時(shí)結(jié)合.ESI復(fù)合物缺乏反應(yīng)活性基團(tuán)不能繼續(xù)分解成產(chǎn)物,形成死端復(fù)合物.(圖4分,解釋2分)不論底物分子是否與酶結(jié)合, 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑都能與酶分子結(jié)合產(chǎn)生死端復(fù)合物. 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑與活性中心以外的基團(tuán)結(jié)合,其結(jié)構(gòu)肯與底物分子毫無相關(guān)之處,兩者沒有競(jìng)爭(zhēng)作用,但ESI不能進(jìn)一步分解成產(chǎn)物. (圖4分,解釋2分)七. 簡(jiǎn)答題 (共26分)1. 請(qǐng)比較說明吸附層析、離子交換

8、層析、凝膠層析、親和層析分離酶的原理.(16分)層析類型原理吸附層析利用吸附劑對(duì)不同物質(zhì)的吸附力不同而使混合物各組分分離離子交換層析利用離子交換劑上的可解離基團(tuán)對(duì)各種離子的親和力不同而達(dá)到分離目的.凝膠層析是以各種多孔凝膠位固定相,利用溶液中各組分的相對(duì)分子質(zhì)量不同而進(jìn)行分離的技術(shù).親和層析利用生物分子與培基之間所具有的專一而又可逆的親和力使酶等生物大分子分離純化.2. 固定化酶的制備原則是什么?(10分)(1)維持酶的催化活性和專一性.(2)應(yīng)有利于生產(chǎn)自動(dòng)化.連續(xù)化.(3)與載體牢固結(jié)合(4)載體不與底物.產(chǎn)物和反應(yīng)物發(fā)生化學(xué)反應(yīng).(5)成本要低,利于工業(yè)使用.第二、 三章 酶的生物合成法

9、生產(chǎn) 測(cè)試題填空題1、SOD是_酶，具有_的功效。2、依據(jù)在體外培養(yǎng)時(shí)對(duì)生長(zhǎng)基質(zhì)依賴性差異，動(dòng)物細(xì)胞可分為兩類：_、_。3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的PH應(yīng)控制在_；溫度控制在_,允許波動(dòng)_。判斷題谷草芽孢桿菌是應(yīng)用最廣泛的產(chǎn)酶微生物。大多數(shù)產(chǎn)酶微生物采用淀粉或其水解產(chǎn)物為碳源,植物細(xì)胞一般以蔗糖為碳源。植物細(xì)胞培養(yǎng)要求的氮源一般為有機(jī)氮源。×動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)主要用于各種功能蛋白質(zhì)的生產(chǎn)。動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)可以用胃蛋白酶分散細(xì)胞。×簡(jiǎn)答題：1、固定化原生質(zhì)體產(chǎn)酶有何特點(diǎn)？2、植物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)酶的工藝流程？3、酶的生物合成有哪幾種模式？各有何特點(diǎn)？P36-384、影響酶生物合成的主要因素有哪些

10、？結(jié)合酶的生物合成模式，分析說明怎樣提高產(chǎn)酶效率。P39答案：填空題1、抗輻射、抗氧化、抗衰老 2、貼壁依賴型細(xì)胞，非貼壁依賴型細(xì)胞 3、7.07.4 微堿性，36.5 ，允許波動(dòng)范圍在0.25簡(jiǎn)答題1、(1)、變胞內(nèi)產(chǎn)物為胞外產(chǎn)物 固定化黑曲霉原生質(zhì)體生產(chǎn)葡萄糖氧化酶，使細(xì)胞內(nèi)葡萄糖氧化酶的90以上分泌到細(xì)胞外。(2)、提高產(chǎn)酶率 固定化枯草芽孢桿菌原生質(zhì)體生產(chǎn)堿性磷酸酶，使原來存在于細(xì)胞間質(zhì)中的堿性磷酸酶全部分泌到發(fā)酵液中，產(chǎn)酶率提高36。(3)、穩(wěn)定性好(4)、易于分離純化2、外植體 誘導(dǎo)愈傷組織 細(xì)胞培養(yǎng) 分離純化 酶第四章 酶的提取與分離純化 測(cè)試題填空題1、酶在結(jié)晶之前，酶液必須經(jīng)

11、過純化達(dá)到一定的純度。通常酶的純度應(yīng)當(dāng)在_以上，方能進(jìn)行結(jié)晶。2、酶結(jié)晶的主要方法有：_、_、_、_。3、酶的劑型有：_、_、_和固定化酶制劑；通常用作分析試劑或用作醫(yī)療藥物的酶制劑要求是_。4、注射用的醫(yī)用酶應(yīng)設(shè)法除去_。判斷題1、一般采用稀鹽溶液進(jìn)行酶的提取，鹽的濃度一般控制在0.020.5 molL 。2、常用硫酸銨鹽析沉淀酶蛋白。3、鹽析沉淀酶蛋白時(shí)，溶液的pH值應(yīng)調(diào)節(jié)到遠(yuǎn)離酶的等電點(diǎn)。×4、等電點(diǎn)結(jié)晶是通過緩慢改變濃酶液的pH值，使之逐漸遠(yuǎn)離酶的等電點(diǎn)，而使酶析出結(jié)晶的過程。×名詞解釋：1、選擇性變性沉淀法 2、酶的提取3、親和層析簡(jiǎn)答題：1、酶的分離純化工作的基

12、本原則？2、舉例說明細(xì)胞破碎的幾種方法及原理。 3、穩(wěn)定酶的方法有哪些？答案：填空題1、50。2、鹽析結(jié)晶法、有機(jī)溶劑結(jié)晶法、透析平衡結(jié)晶法、等電點(diǎn)結(jié)晶法。3、固體酶制劑、液體酶制劑、純酶制劑、固定化酶制劑；純酶制劑。4、熱源物質(zhì)名詞解釋1、選擇性變性沉淀法：選擇一定的條件使酶液中存在的某些雜蛋白等雜質(zhì)變性沉淀，而不影響所需的酶，這種分離方法稱為選擇性變性沉淀法2、酶的提取是指在一定的條件下，用適當(dāng)?shù)娜軇┨幚砗冈希姑赋浞秩芙獾饺軇┲械倪^程，也稱為酶的抽提。3、親和層析是利用生物分子與配基之間所具有的專一而又可逆的親和力，使酶等生物分子分離純化的技術(shù)。簡(jiǎn)答題1、（1）、防止酶變性失效 凡用

13、于預(yù)防蛋白質(zhì)變性失效的方法與措施都應(yīng)考慮用于酶的分離純化。A、除少數(shù)例外外，所有操作都必須在低溫條件下進(jìn)行，特別是在有機(jī)溶劑存在的情況下更應(yīng)小心。B、大多數(shù)酶在PH<4或PH>10的情況下穩(wěn)定，應(yīng)控制整個(gè)系統(tǒng)不要過酸、過堿，同時(shí)要避免在調(diào)整PH時(shí)局部過酸或過堿。C、重金屬能使酶失效，有機(jī)溶劑能使酶變性，微生物污染以及蛋白酶的存在都能使酶分解破壞，所有這些都應(yīng)周全考慮?？梢约尤氲鞍酌敢种箘?，殺菌劑，穩(wěn)定蛋白質(zhì)構(gòu)象和酶活性的還原劑。（2）、酶活性測(cè)定貫串純化過程的始終也就是說，從原理開始，整個(gè)過程的每一步都要進(jìn)行比活力與總活力的檢測(cè)與比較，以便知道每一步驟中可采用什么方法與什么條件，分

14、別使酶的純度提高了多少，回收了多少酶，從而決定其取舍。（3）、選擇有效的純化方法凡用于蛋白質(zhì)純化的一切方法同樣適用于酶。應(yīng)根據(jù)目的酶的物理、化學(xué)性質(zhì)選取。（4）、原料來源要方便，成本要低2、舉例說明細(xì)胞破碎的幾種方法及原理 方法舉例原理酶降解溶菌酶處理細(xì)菌消化細(xì)胞壁化學(xué)破碎甲苯抽提酵母化學(xué)溶解細(xì)胞壁細(xì)胞溶解紅細(xì)胞滲透破碎細(xì)胞膜手動(dòng)勻漿器肝組織迫使細(xì)胞通過窄縫撕開細(xì)胞膜超聲波細(xì)胞懸浮液破壞細(xì)胞膜3、穩(wěn)定酶的某些方法（1）、添加底物、抑止劑和輔酶（2）、添加SH保護(hù)劑 如谷胱甘肽、二巰基乙醇（3）、低溫（04）（4）、添加某些低分子無機(jī)離子 Ca2保護(hù)淀粉酶，Mn2+能穩(wěn)定溶菌酶，CL能穩(wěn)定透明質(zhì)

15、酸酶等（5）、固體酶制劑穩(wěn)定性高 可保存數(shù)月或幾年以上；熱敏性酶多用冷凍干燥法，例如注射用酶等。（6）、固定化酶也是提高酶的穩(wěn)定性的好方法。第四章 酶的提取與分離純化 測(cè)試題填空題1、酶在結(jié)晶之前，酶液必須經(jīng)過純化達(dá)到一定的純度。通常酶的純度應(yīng)當(dāng)在_以上，方能進(jìn)行結(jié)晶。2、酶結(jié)晶的主要方法有：_、_、_、_。3、酶的劑型有：_、_、_和固定化酶制劑；通常用作分析試劑或用作醫(yī)療藥物的酶制劑要求是_。4、注射用的醫(yī)用酶應(yīng)設(shè)法除去_。判斷題1、一般采用稀鹽溶液進(jìn)行酶的提取，鹽的濃度一般控制在0.020.5 molL 。2、常用硫酸銨鹽析沉淀酶蛋白。3、鹽析沉淀酶蛋白時(shí)，溶液的pH值應(yīng)調(diào)節(jié)到遠(yuǎn)離酶的等

16、電點(diǎn)。×4、等電點(diǎn)結(jié)晶是通過緩慢改變濃酶液的pH值，使之逐漸遠(yuǎn)離酶的等電點(diǎn)，而使酶析出結(jié)晶的過程。×名詞解釋：1、選擇性變性沉淀法 2、酶的提取3、親和層析簡(jiǎn)答題：1、酶的分離純化工作的基本原則？2、舉例說明細(xì)胞破碎的幾種方法及原理。 3、穩(wěn)定酶的方法有哪些？答案：填空題1、50。2、鹽析結(jié)晶法、有機(jī)溶劑結(jié)晶法、透析平衡結(jié)晶法、等電點(diǎn)結(jié)晶法。3、固體酶制劑、液體酶制劑、純酶制劑、固定化酶制劑；純酶制劑。4、熱源物質(zhì)名詞解釋1、選擇性變性沉淀法：選擇一定的條件使酶液中存在的某些雜蛋白等雜質(zhì)變性沉淀，而不影響所需的酶，這種分離方法稱為選擇性變性沉淀法2、酶的提取是指在一定的條件

17、下，用適當(dāng)?shù)娜軇┨幚砗冈?，使酶充分溶解到溶劑中的過程，也稱為酶的抽提。3、親和層析是利用生物分子與配基之間所具有的專一而又可逆的親和力，使酶等生物分子分離純化的技術(shù)。簡(jiǎn)答題1、（1）、防止酶變性失效 凡用于預(yù)防蛋白質(zhì)變性失效的方法與措施都應(yīng)考慮用于酶的分離純化。A、除少數(shù)例外外，所有操作都必須在低溫條件下進(jìn)行，特別是在有機(jī)溶劑存在的情況下更應(yīng)小心。B、大多數(shù)酶在PH<4或PH>10的情況下穩(wěn)定，應(yīng)控制整個(gè)系統(tǒng)不要過酸、過堿，同時(shí)要避免在調(diào)整PH時(shí)局部過酸或過堿。C、重金屬能使酶失效，有機(jī)溶劑能使酶變性，微生物污染以及蛋白酶的存在都能使酶分解破壞，所有這些都應(yīng)周全考慮?？梢约尤氲?/p>

18、白酶抑止劑，殺菌劑，穩(wěn)定蛋白質(zhì)構(gòu)象和酶活性的還原劑。（2）、酶活性測(cè)定貫串純化過程的始終也就是說，從原理開始，整個(gè)過程的每一步都要進(jìn)行比活力與總活力的檢測(cè)與比較，以便知道每一步驟中可采用什么方法與什么條件，分別使酶的純度提高了多少，回收了多少酶，從而決定其取舍。（3）、選擇有效的純化方法凡用于蛋白質(zhì)純化的一切方法同樣適用于酶。應(yīng)根據(jù)目的酶的物理、化學(xué)性質(zhì)選取。（4）、原料來源要方便，成本要低2、舉例說明細(xì)胞破碎的幾種方法及原理 方法舉例原理酶降解溶菌酶處理細(xì)菌消化細(xì)胞壁化學(xué)破碎甲苯抽提酵母化學(xué)溶解細(xì)胞壁細(xì)胞溶解紅細(xì)胞滲透破碎細(xì)胞膜手動(dòng)勻漿器肝組織迫使細(xì)胞通過窄縫撕開細(xì)胞膜超聲波細(xì)胞懸浮液破壞細(xì)

19、胞膜3、穩(wěn)定酶的某些方法（1）、添加底物、抑止劑和輔酶（2）、添加SH保護(hù)劑 如谷胱甘肽、二巰基乙醇（3）、低溫（04）（4）、添加某些低分子無機(jī)離子 Ca2保護(hù)淀粉酶，Mn2+能穩(wěn)定溶菌酶，CL能穩(wěn)定透明質(zhì)酸酶等（5）、固體酶制劑穩(wěn)定性高 可保存數(shù)月或幾年以上；熱敏性酶多用冷凍干燥法，例如注射用酶等。（6）、固定化酶也是提高酶的穩(wěn)定性的好方法。第五章 酶分子的修飾與應(yīng)用 測(cè)試題填空題1、酶分子修飾的意義是：_,_,_。名詞解釋1、酶分子修飾通過各種方法使酶分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生某些改變，從而改變酶的某些特性和功能的過程稱為酶分子修飾。2、金屬離子置換修飾3、酶分子的物理修飾簡(jiǎn)答題：1、什么是酶分子的

20、側(cè)鏈修飾？酶分子側(cè)鏈修飾有何意義？2、請(qǐng)舉例說明酶分子修飾的應(yīng)用答案填空題：1、提高酶的活力；增強(qiáng)酶的穩(wěn)定性；降低或消除酶的抗原性。名詞解釋1、酶分子修飾：通過各種方法使酶分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生某些改變，從而改變酶的某些特性和功能的過程稱為酶分子修飾。2、把酶分子中的金屬離子換成另一種金屬離子，使酶的功能和特性發(fā)生改變的修飾方法稱為金屬離子置換修飾。3、通過各種物理方法使酶分子的空間構(gòu)象發(fā)生某些改變，從而改變酶的某些特性和功能的方法稱為酶分子的物理修飾。簡(jiǎn)答題1、采用一定的方法（一般為化學(xué)法）使酶的側(cè)鏈基團(tuán)發(fā)生改變，從而酶分子的特性和功能的修飾方法稱為側(cè)鏈基團(tuán)修飾。意義：（1）、通過酶分子側(cè)鏈基團(tuán)修飾

21、，可以研究各種基團(tuán)在酶分子中的作用及其對(duì)酶的結(jié)構(gòu)、特性和功能的影響，并可以用于研究酶的活性中心的必須基團(tuán)。如果某基團(tuán)修飾后不引起酶活力的顯著變化，則可以認(rèn)為此基團(tuán)屬于非必須基團(tuán)。（2）、通過酶分子側(cè)鏈基團(tuán)修飾，可以測(cè)定某一種基團(tuán)在酶分子中的數(shù)量，例如，采用三硝基苯磺酸測(cè)定氨基的數(shù)量；用對(duì)汞苯甲酸測(cè)定巰基的數(shù)量；用碳二亞胺測(cè)定羧基的數(shù)量；用四唑重氮鹽測(cè)定咪唑基的數(shù)量等。（3）、酶分子側(cè)鏈基團(tuán)修飾，在酶工程方面可以提高酶的活力、增加酶的穩(wěn)定性、降低酶的抗原性，并且可以引起酶催化特性和催化功能的改變，以提高酶的使用價(jià)值。（4）、酶分子側(cè)鏈基團(tuán)修飾，還可以獲得自然界原來不存在的新酶種，例如，某些抗體酶

22、和人工改造的核酸類酶。第六章 酶、細(xì)胞、原生質(zhì)體固定化與應(yīng)用測(cè)試題填空題1、固定化酶的制備方法主要有：_、_、_、_。2、 交聯(lián)法常用的雙功能試劑是：_。判斷題1、酶經(jīng)固定化后，其作用的最適pH值往往會(huì)發(fā)生一些變化。2、固定化酶的最適作用溫度與游離酶相比沒有變化。×3、一般來說，用帶負(fù)電荷的載體制備的固定化酶，其最適pH值比游離酶的最適pH值為高（即向堿性一側(cè)移動(dòng)）；用帶正電荷載體制備的固定化酶的最適pH值比游離酶的最適PH為低（即向酸性一側(cè)移動(dòng)）4、一般說來，催化反應(yīng)的產(chǎn)物為酸性時(shí)，固定化酶的最適pH值要比游高酶的最適PH低一些；產(chǎn)物為堿性時(shí)，固定化酶的最適pH值要比游離酶的最適p

23、H值高一些。×5、固定化酶的底物特異性變化與底物分子量的大小有一定關(guān)系。名詞解釋1、交聯(lián)法2、載體活化3、固定化細(xì)胞。簡(jiǎn)答題1、 什么是固定化酶？有何顯著優(yōu)點(diǎn)？2、 請(qǐng)舉例說明固定化（酶、細(xì)胞、原生質(zhì)體）技術(shù)的應(yīng)用答案填空題1、吸附法、包埋法、結(jié)合法、交聯(lián)法和熱處理法等。名詞解釋1、交聯(lián)法：借助雙功能試劑使酶分子之間發(fā)生交聯(lián)作用，制成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的固定化酶的方法稱為交聯(lián)法。2、載體活化：要使載體與酶形成共價(jià)鍵對(duì)酶進(jìn)行固定化，必須首先使載體活化，即借助于某種方法，在載體上引進(jìn)一活潑基團(tuán)。然后此活潑基團(tuán)再與酶分子上的某一基團(tuán)反應(yīng)，形成共價(jià)鍵。3、固定在載體上并在一定的空間范圍內(nèi)進(jìn)行生命活動(dòng)的

24、細(xì)胞稱為固定化細(xì)胞。簡(jiǎn)答題1、什么是固定化酶？有何顯著優(yōu)點(diǎn)？固定化酶是指固定在一定載體上并在一定的空間范圍內(nèi)進(jìn)行催化反應(yīng)的酶。固定化酶既保持了酶的催化特性，又克服了游離酶的不足之處，具有增加穩(wěn)定性、可反復(fù)或連續(xù)使用以及易于和反應(yīng)產(chǎn)物分開等顯著優(yōu)點(diǎn)。2、略第七章 酶非水相催化 測(cè)試題判斷題1、有機(jī)溶劑往往會(huì)使酶變性失活，因此只有在水溶液中酶才有催化活性。2、在有機(jī)介質(zhì)中，由于酶分子活性中心的結(jié)合部位與底物之間的結(jié)合狀態(tài)發(fā)生某些變化，致使酶的底物特異性發(fā)生改變。3、許多酶在有機(jī)介質(zhì)中的熱穩(wěn)定性比在水溶液中的熱穩(wěn)定性更好。4、目前世界上化學(xué)合成藥物中的40左右屬于手性藥物。在這些手性藥物中，大多數(shù)仍

25、然以外消旋體形式使用。5、常用的消炎解熱鎮(zhèn)痛藥萘普生(Neproxen)的兩種對(duì)映體中，S (+)-萘普生的療效是R-()-萘普生療效的28倍。6、鎮(zhèn)靜劑反應(yīng)停的S-構(gòu)型有鎮(zhèn)靜作用，R-構(gòu)型也有鎮(zhèn)靜作用，但療效甚微。7、一些消旋體藥物可以在有機(jī)介質(zhì)體系中用酶法進(jìn)行拆分，獲得單一對(duì)映體。 名詞解釋1、酶的對(duì)映體選擇性2、手性化合物第八章 酶定向進(jìn)化 復(fù)習(xí)題一、填空題：酶基因隨機(jī)突變的方法有：_、_、_。二、名詞解釋：酶定向進(jìn)化 易錯(cuò)PCR技術(shù)三、簡(jiǎn)答題：1酶定向進(jìn)化的特點(diǎn)？ 2.酶隨機(jī)突變的三種方法是什么？請(qǐng)解釋并比較分析。3.舉例說明酶定向進(jìn)化技術(shù)的應(yīng)用。第九章 酶反應(yīng)器 復(fù)習(xí)題各種酶反應(yīng)器及

26、其特點(diǎn)反應(yīng)器類型適用的操作方式適用的酶特點(diǎn)攪拌罐式反應(yīng)器分批式,流加分批式連續(xù)式,游離酶固定化酶反應(yīng)比較完全，反應(yīng)條件容易調(diào)節(jié)控制。填充床式反應(yīng)器連續(xù)式固定化酶密度大，可以提高酶催化反應(yīng)的速度。在工業(yè)生產(chǎn)中普遍使用。流化床反應(yīng)器分批式流加分批式連續(xù)式固定化酶流化床反應(yīng)器具有混合均勻，傳質(zhì)和傳熱效果好，溫度和pH值的調(diào)節(jié)控制比較容易，不易堵塞，對(duì)粘度較大反應(yīng)液也可進(jìn)行催化反應(yīng)。鼓泡式反應(yīng)器分批式流加分批式連續(xù)式游離酶固定化酶鼓泡式反應(yīng)器的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，操作容易，剪切力小，混合效果好，傳質(zhì)、傳熱效率高,適合于有氣體參與的反應(yīng)。膜反應(yīng)器連續(xù)式游離酶固定化酶清洗比較困難 噴射式反應(yīng)器連續(xù)式游離酶通入高壓噴

27、射蒸汽，實(shí)現(xiàn)酶與底物的混合，進(jìn)行高溫短時(shí)催化反應(yīng)，適用于某些耐高溫酶的反應(yīng)簡(jiǎn)答題：P240復(fù)習(xí)題1、2、5第十章 1 酶在醫(yī)藥方面的應(yīng)用 測(cè)試題一、 填空題1、指示肝功能異常的常用酶有：_、_、_。2、_酶可以檢測(cè)癌細(xì)胞。3、治療消化不良、食欲不振的酶有：_、_、_。4、具有抗癌作用的酶有：_、_、_、_。5、_酶可以治療各種出血。6、_酶可以治療齲齒。7、_酶可以溶血栓。8、_酶可以治療白血病。9、_酶用于制造抗腫瘤人參皂苷。10、_酶可用于制造人胰島素。二、判斷題1、乳酸脫氫酶廣泛存在于各種組織以及紅細(xì)胞中，在正常情況下，血清中乳酸脫氫酶的含量很低，但是在肝癌、急性肝炎、心肌梗塞等疾病的患

28、者血清中，該酶活力顯著升高。2、蛋白酶可用于治療多種疾病，是在臨床上使用最早、用途最廣的藥用酶之一，它可作為消化劑、消炎劑并可用于治療高血壓。三、請(qǐng)寫出以下藥品的酶法生產(chǎn)反應(yīng)式6氨基青霉烷酸（6-APA）多巴四、分析說明題1、 請(qǐng)分析說明尿糖試紙檢測(cè)尿糖的原理2、 繪圖并說明血液透析裝置及裝置中酶法除去尿素的原理。3、 舉兩例分析說明酶在藥物制造方面的應(yīng)用價(jià)值。4、 請(qǐng)分析說明溶菌酶的應(yīng)用價(jià)值5、 請(qǐng)分析說明SOD的應(yīng)用價(jià)值答案 填空題1、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、膽堿酯酶2、端粒酶3、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶4、L-精氨酸酶、L-組氨酸酶、L蛋氨酸酶、谷氨酰胺酶5、凝血酶 6、右旋糖酐酶 7、溶

29、纖酶 8、L- 天冬酰胺酶 9、D葡萄糖苷酶 10、無色桿菌蛋白酶請(qǐng)寫出以下藥品的酶法生產(chǎn)反應(yīng)式1、6氨基青霉烷酸（6-APA）青霉素 青霉素?；?6氨基青霉烷酸（6-APA）2、多巴酪氨酸 酪氨酸酶 多巴鄰苯二酚丙酮酸氨 酪氨酸酶 多巴分析說明題4、溶菌酶主要從蛋清、植物和微生物中分離得到。作用機(jī)理：溶菌酶作用于細(xì)菌的細(xì)胞壁，可使病原菌、腐敗性細(xì)菌等溶解消滅，對(duì)抗生素有耐藥性的細(xì)菌同樣起溶菌作用，具有顯著療效而對(duì)人體的副作用很小，是一種較為理想的藥用酶。應(yīng)用價(jià)值：臨床上主要用于治療各種炎癥，溶菌酶與抗生素聯(lián)合使用，可顯著提高抗生素的療效，常用于難治的感染病癥的治療；還可用于食品保鮮；在護(hù)膚

30、品中添加可以消除皮膚表面黏附的細(xì)菌，起到殺菌消炎的作用。5、SOD即超氧化物歧化酶，具有抗氧化、抗衰老、抗輻射的功效，添加到護(hù)膚品中可以有效防治紫外線對(duì)人體的傷害，消除自由基的影響，減少色素沉著。在醫(yī)療領(lǐng)域，用于預(yù)防輻射損傷，治療紅斑狼瘡，皮肌炎，結(jié)腸炎，氧中毒。第十章 2 酶在食品方面的應(yīng)用測(cè)試題 填空題1、_酶和_酶可用于食品保鮮。2、_酶可將蔗糖原料中的棉子糖分解成蔗糖與半乳糖，提高蔗糖的收得率。3、果膠酶(pectinase)是催化果膠質(zhì)分解的一類酶的總稱，主要包括_和_。4、_酶可用于呈味核苷酸的酶法生產(chǎn)。判斷題1、糊精是淀粉低程度水解的產(chǎn)物，廣泛應(yīng)用于食品增稠劑、填充劑和吸收劑。2

31、、寫出以下產(chǎn)品酶法生產(chǎn)的反應(yīng)式1、L氨基酸的生產(chǎn)2、低乳糖奶的生產(chǎn)3、L-蘋果酸的生產(chǎn)4、天苯肽的酶法生產(chǎn)寫出以下工藝過程酶法處理的反應(yīng)式1、柑橘制品脫苦處理2、果蔬制品的脫色簡(jiǎn)答題1、請(qǐng)分析說明果葡糖漿生產(chǎn)的工藝流程及條件控制2、請(qǐng)分析說明右旋糖酐酶的應(yīng)用價(jià)值3、請(qǐng)分析說明酶在啤酒發(fā)酵生產(chǎn)中的應(yīng)用答案填空題1、葡萄糖氧化酶，溶菌酶2、蜜二糖酶（半乳糖苷酶）3、果膠酯酶(PE)，聚半乳糖醛酸酶(PG) 4、5，磷酸二酯酶寫出以下產(chǎn)品酶法生產(chǎn)的反應(yīng)式1、 L氨基酸的生產(chǎn)N?；鵇L氨基酸 氨基酰化酶 L氨基酸蛋白質(zhì) 蛋白酶 L氨基酸延胡索酸氨 天冬氨酸酶 L天冬氨酸酮戊二酸NH3NAD(P)H谷氨

32、酸脫氫酶 L谷氨酸+H2ONAD(P)+a-酮戊二酸+L-氨基酸 轉(zhuǎn)氨酶 L-谷氨酸+-酮酸2、低乳糖奶的生產(chǎn)乳糖 乳糖酶（半乳糖苷酶）半乳糖葡萄糖3、L-蘋果酸 的生產(chǎn)延胡索酸水 延胡索酸酶 L蘋果酸 4、天苯肽的酶法生產(chǎn)L-Asp +L-Phe-Ome嗜熱菌蛋白酶L-Asp-L-Phe-Ome (L-天冬氨酸) (L-苯丙氨酸甲酯) (天苯肽)寫出以下工藝過程酶法處理的反應(yīng)式1、柑橘制品脫苦處理柚苷（柚配質(zhì)7蕓香糖苷）柚苷酶（鼠李糖苷酶）鼠李糖無苦味的普魯寧(柚配質(zhì)一7一葡萄糖苷)2、果蔬制品的脫色花青素 花青素酶 葡萄糖和它的配基簡(jiǎn)答題1、請(qǐng)分析說明果葡糖漿生產(chǎn)的工藝流程及條件控制工藝流

33、程：淀粉漿a-淀粉酶，Ca2，8090 液化液 糖化酶 葡萄糖（DE>96）層析去Ca2，pH值為6570，加入001 molL的硫酸鎂，在6070的溫度條件下，葡萄糖異構(gòu)酶 果葡糖漿。控制條件：（1）、鈣離子對(duì)a-淀粉酶有保護(hù)作用，在淀粉液化時(shí)需要添加，但它對(duì)葡萄糖異構(gòu)酶卻有抑制作用，所以葡萄糖溶液需用層析等方法精制。（2）、控制PH 葡萄糖異構(gòu)酶(glucose isomerase，EC 5.3.1.5)的最適pH值，根據(jù)其來源不同而有所差別。一般放線菌產(chǎn)生的葡萄糖異構(gòu)酶，其最適PH值在6.58.5的范圍內(nèi)。但在堿性范圍內(nèi)，葡萄糖容易分解而使糖漿的色澤加深，為此，生產(chǎn)時(shí)pH值一般控制

34、在6.57.0。（3）、控制溫度葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的異構(gòu)化反應(yīng)是吸熱反應(yīng)。隨著反應(yīng)溫度的升高，反應(yīng)平衡向有利于生成糖的方向變化，異構(gòu)化反應(yīng)的溫度越高，平衡時(shí)混合糖液中果糖的含量也越高。但當(dāng)溫度超過70時(shí)，葡萄糖異構(gòu)酶容易變性失活，所以異構(gòu)化反應(yīng)的溫度以6070為宜。2、請(qǐng)分析說明右旋糖酐酶的應(yīng)用價(jià)值制糖設(shè)備中存在大分子黏性葡聚糖，堵塞管道，妨礙設(shè)備清洗及蔗糖的結(jié)晶。用右旋糖酐酶（內(nèi)切1，6葡聚糖酶）處理，可使右旋糖酐分解為異麥芽糖與異麥芽三糖，黏度迅速下降。右旋糖酐酶還可用于防齲。3、請(qǐng)分析說明酶在啤酒發(fā)酵生產(chǎn)中的應(yīng)用在啤酒釀造過程中，制漿和調(diào)理兩個(gè)階段是要使用酶制劑的1、浸泡麥芽漿時(shí)，溫度約6

35、5，有利于蛋白酶，葡聚糖酶，淀粉酶，發(fā)揮作用，使麥芽中的多糖及蛋百類物質(zhì)降解為酵母可利用的合適的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。2、加啤酒花前，煮沸麥芽汁使上述酶失活。在發(fā)酵完畢后，啤酒需要加一些酶處理，以使其口味和外觀更易于為消費(fèi)者接受。蛋白酶降解使啤酒混濁的蛋白質(zhì)成分，防止啤酒的冷混濁，延長(zhǎng)啤酒的儲(chǔ)存期。糖化酶能夠降解啤酒中的殘留糊精，一方面保證了啤酒中最高的乙醇含量，另一方面不必添加濃糖液來增加啤酒的糖度。這種低糖度的啤酒糖尿病患者也可以飲用。第十章 3 酶在其他領(lǐng)域的應(yīng)用測(cè)試題填空題1、造紙業(yè)的主要用酶有：_和_。2、_酶可以水解RNA,生產(chǎn)四種5，核苷酸。3、生絲脫膠和羊毛除垢可以用_酶。4、利用_酶檢測(cè)

36、有機(jī)磷農(nóng)藥污染5、利用_酶的同工酶監(jiān)測(cè)重金屬污染6、通過_監(jiān)測(cè)大腸桿菌污染名詞解釋：酶標(biāo)記免疫反應(yīng)檢測(cè)請(qǐng)分析說明蛋白酶在輕工、化工業(yè)中的應(yīng)用。加酶洗滌劑應(yīng)該滿足什么條件？加酶洗滌劑有何優(yōu)勢(shì) ？酶法檢測(cè)必須具備什么條件？答案填空題1、木質(zhì)素酶，木聚糖酶 2、5，-磷酸二酯酶 3、蛋白酶4、膽堿酯酶5、乳酸脫氫酶 6、-葡聚糖苷酸酶名詞解釋：酶標(biāo)記免疫反應(yīng)檢測(cè)是將酶的檢測(cè)技術(shù)與免疫檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，用于測(cè)定樣品液中抗體或抗原含量的技術(shù)。簡(jiǎn)稱為酶標(biāo)免疫檢測(cè)。請(qǐng)分析說明蛋白酶在輕工、化工業(yè)中的應(yīng)用。生絲的脫膠處理天然蠶絲的主要成分是不溶于水的有光澤的絲蛋白。絲蛋白的表面有一層絲膠包裹著，在高級(jí)絲綢的制作

37、過程中，必須進(jìn)行脫膠處理，即將表面的絲膠除去，以提高絲的質(zhì)量。采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶或微生物蛋白酶處理，可在比較溫和的條件下催化絲膠蛋白水解，進(jìn)行生絲脫膠，從而使生絲的質(zhì)量顯著提高。 羊毛的除垢處理羊毛在染色之前需經(jīng)預(yù)處理，以除去羊毛表面的鱗垢，才能使羊毛著色。羊毛表面的鱗垢是由一些蛋白質(zhì)堆積而成的聚和體，利用枯草桿菌蛋白酶或其他適宜的蛋白酶處理，通過蛋白酶的催化作用，可以去除羊毛表面上存在的鱗垢，提高羊毛的著色率，并保持羊毛的特點(diǎn)，顯著提高羊毛制品的質(zhì)量。皮革的脫毛處理皮革是由牛、羊、豬等動(dòng)物的皮，經(jīng)過脫毛處理后鞣制而成。傳統(tǒng)的脫毛方法是采用石灰和硫酸鈉溶液浸漬，不僅時(shí)間長(zhǎng)，勞動(dòng)強(qiáng)度大，而

38、且對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重污染。現(xiàn)在普遍采用酶法脫毛處理，即采用細(xì)菌、霉菌、放線菌等微生物產(chǎn)生的堿性或中性蛋白酶，將毛與真皮連接的毛囊中的蛋白質(zhì)水解除去，從而使毛脫落。原料皮軟化 脫毛處理后得到的原料皮，還要加進(jìn)適量的蛋白酶和脂肪酶進(jìn)行處理，以除去原料皮上黏附的油脂和污垢，使皮革松軟、光滑，從而提高皮革制品的質(zhì)量。 添加到牙膏中，分解牙齒中的殘余食物；添加到洗滌劑中提高洗滌效果；加到護(hù)膚品中的彈性蛋白酶，可以水解皮膚表面老化、死亡細(xì)胞的蛋白頂，達(dá)到皮膚表面光潔、有彈性的效果。加酶洗滌劑應(yīng)該滿足的條件：（1） 堿性條件下（PH9-10）能夠有效洗滌。（2） 表面活性劑存在下，很少失活。LAS十二烷基苯磺酸

39、鈉，AOS-烯基磺酸鈉 （alpha olefin sulfonate）（3） 在熒光染料、漂白劑、香料等洗滌劑輔助成分存在下不失活（4） 在洗滌溫度下能有效發(fā)揮作用。優(yōu)勢(shì)：衣物上的有機(jī)污垢15%40%以蛋白質(zhì)與纖維素結(jié)合的方式存在，如果將酶加入洗滌劑中可以大大縮短洗滌時(shí)間，提高洗滌效果，防止衣物發(fā)黃。加酶洗滌劑已成為低磷化技術(shù)中提高去污力的一個(gè)公認(rèn)方向。（這是因?yàn)閴A性蛋白酶和表面活性劑之間有協(xié)同作用，酶能強(qiáng)化表面活性劑的溶解、分散、乳化等性能，從而彌補(bǔ)由于低磷化導(dǎo)致去污力的降低。）酶法檢測(cè)以酶的專一性為基礎(chǔ)，以酶作用后物質(zhì)的變化為依據(jù)來進(jìn)行。必須具備兩個(gè)條件：（1）高度專一性的酶（2）對(duì)酶作

40、用后的物質(zhì)變化要有可靠的檢測(cè)方法。 第一、二章知識(shí)點(diǎn) 習(xí)題1. 固定化細(xì)胞就是被限制自由移動(dòng)的細(xì)胞，既細(xì)胞受到物理化學(xué)等因素約束或限制在一定的空間界限內(nèi)，但細(xì)胞仍保留催化活性并具備能被反復(fù)或連續(xù)使用的活力。是在酶固定化基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一項(xiàng)技術(shù)。 2. 與游離細(xì)胞相比固定化細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)： （1）固定化細(xì)胞可以將微生物發(fā)酵改為連續(xù)酶反應(yīng)（2）可以獲得更高的細(xì)胞濃度；（3）細(xì)胞可以重復(fù)使用；（4）在高稀釋率時(shí)，不會(huì)產(chǎn)生洗脫現(xiàn)象；（5）單位容積的產(chǎn)率高；（6）提高遺傳穩(wěn)定性；（7）細(xì)胞不會(huì)受到剪切效應(yīng)的影響。（8）發(fā)酵液中菌體含量少，有利與產(chǎn)品的分離純化。 3. 與固定化酶相比，固定化細(xì)胞具有

41、以下優(yōu)點(diǎn)：（1）免去了破碎細(xì)胞提取酶的手續(xù) （2）酶在細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)定性較高，完整細(xì)胞固定化后酶活性損失少 （3）固定化細(xì)胞制備的成本比固定化酶低（4）無需輔酶再生 4. 雖然固定化細(xì)胞具有上述許多優(yōu)點(diǎn)，但也有不足之處，具體表現(xiàn)在：1，僅能利用胞內(nèi)酶；2，細(xì)胞膜、細(xì)胞壁和載體都存在著擴(kuò)散限制作用；3，載體形成的孔隙大小影響高分子底物的通透性；4，可能有副反應(yīng)。 5. 按固定的細(xì)胞類型不同分為三類：（1）微生物；（2）動(dòng)物；（3）植物。 6. 按細(xì)胞的生理狀態(tài)不同分為兩大類：（1）死細(xì)胞：包括完整細(xì)胞、細(xì)胞碎片、細(xì)胞器。適用于一種酶催化的反應(yīng)。（2）活細(xì)胞：包括增殖細(xì)胞、靜止細(xì)胞

42、、饑餓細(xì)胞。適用于多酶反應(yīng)，特別是需要輔酶的反應(yīng)。  7. 細(xì)胞固定化方法有：Adsorption（吸附）；covalent bonding（共價(jià)結(jié)合）；Cross linking（交聯(lián)）；Entrapment（包埋）、Encapsulation（微膠囊） 。  8. 吸附法的原理：利用載體和細(xì)胞表面所帶電荷的靜電引力（van der Walls forces），使細(xì)胞吸附于載體上。吸附法可分為物理吸附和離子吸附兩種。該法操作簡(jiǎn)單，固定化過程對(duì)細(xì)胞活性影響小。 9. 采用吸附法固定細(xì)胞，所用的載體主要有：硅藻土、木

43、屑、多孔玻璃、活性炭、 10. 多孔陶瓷、離子交換樹脂和等。塑料 11. 影響吸附固定化的因素：（1）Z-電位 （2）細(xì)胞的性質(zhì)和細(xì)胞壁的組成（3）載體的性質(zhì)（4）pH 12. 共價(jià)結(jié)合法：利用細(xì)胞表面的反應(yīng)基團(tuán)（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）與活化的無機(jī)或有機(jī)載體反應(yīng)，形成共價(jià)鍵將細(xì)胞固定。用該法制備的固定化細(xì)胞一般為死細(xì)胞。 13. 交聯(lián)法利用雙功能或多功能試劑與細(xì)胞表面的反應(yīng)基團(tuán)（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）反應(yīng)，從而使細(xì)胞固定。常用的交聯(lián)劑包括：戊二醛、甲苯二異氰酸酯、雙重氮聯(lián)苯胺。 14. 由于交聯(lián)試劑的毒性，這一方法具有一定的局限性。 15. 包埋法是細(xì)胞固定化

44、最常用的方法。包埋法可以分為：1，微膠囊法：利用半透性聚合物薄膜將細(xì)胞包裹起來，形成微型膠囊；2，凝膠包埋法：是在無菌條件下，將生物細(xì)胞和膠溶液混合在一起，然后再經(jīng)過相應(yīng)的造粒處理，形成直徑為1-4mm的膠粒。 16. 常用的包埋劑為：聚丙烯酰胺、瓊脂、海藻酸、卡拉膠、二醋酸纖維、三醋酸纖維、明膠等。 17. 固定化方法的比較：吸附法：條件溫和、方法簡(jiǎn)便、載體可再生。但操作穩(wěn)定性差。共價(jià)法：操作穩(wěn)定性高。但由于試劑的毒性，易引起細(xì)胞的破壞。交聯(lián)法：可得到高細(xì)胞濃度，但機(jī)械強(qiáng)度低，無法再生，不適于實(shí)際應(yīng)用。包埋法：細(xì)胞和載體間沒有束縛，固定化后，細(xì)胞仍保持較高活力。但這類方法只適用于小分子底物。

45、  18. 固定化細(xì)胞由于其用途和制備方法不同，可以是顆粒狀、塊狀、條狀、薄膜狀或不規(guī)則狀等。但目前大多數(shù)制備成顆粒狀珠體。 19. 細(xì)胞經(jīng)固定化后，其最適pH因固定化方法不同而有一些調(diào)整。如，用聚丙烯酰胺包埋的大腸桿菌中的天門冬氨酸酶和產(chǎn)氨短桿菌中的延胡索酸酶的最適pH向酸性范圍偏移。但用同一方法包埋的大腸桿菌中的青霉素酰胺酶的最適pH則沒有變動(dòng)。 20. 類似與pH，細(xì)胞固定化方法不同，也有可能導(dǎo)致最適溫度產(chǎn)生不同的變化。 21. 穩(wěn)定性，一般而言，細(xì)胞經(jīng)固定化后，其穩(wěn)定性會(huì)有所提高。 22. 酶工程：應(yīng)用酶的特異性催化功能并通過為人類生產(chǎn)有用產(chǎn)品及提供有益服務(wù)的技術(shù)為酶工程。

46、23. 酶：生物體內(nèi)具有特殊催化功能的蛋白質(zhì)陳為酶。 24. 固定化酶：限制或定位于特定空間位置的酶稱為固定化酶。 25. 固定化細(xì)胞：被限制或定位于特定空間位置的細(xì)胞稱為固定化細(xì)胞。 26. 載體結(jié)合法：將細(xì)胞懸浮液直接與水不容性載體相結(jié)合的固定化方法。 27. 包埋法：將細(xì)胞定位于凝膠網(wǎng)格內(nèi)的家伙稱為包埋法。 28. 偶聯(lián)效率：偶聯(lián)固定化反應(yīng)過程中載體結(jié)合蛋白質(zhì)的能力稱為偶聯(lián)效率。 29. 酶活力：酶類催化特定化學(xué)反應(yīng)的能力稱為酶活力。 30. 酶比活：指每毫克酶蛋白所表現(xiàn)的活力。 31. 固定化反應(yīng)的酶活力回收率：固定酶所顯示的活力與加入偶聯(lián)液中酶總活力的比值稱為固定化反應(yīng)的酶活力回收率

47、。 32. 酶試劑盒：將酶、反應(yīng)試劑、激活劑、填充劑、及緩沖劑等配成檢測(cè)用的混合制劑稱酶試劑盒。 33. 酶工程主要是研究酶在工業(yè)、醫(yī)藥等各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用。 34. 酶是生物體內(nèi)具有特殊催化功能的蛋白質(zhì)。 35. 酶工程的主要內(nèi)容：酶的發(fā)酵生產(chǎn)，酶的分離純化，酶的分子修飾，酶和細(xì)胞的固定化，酶反應(yīng)器。 36. 酶在一定條件下僅能影響化學(xué)反應(yīng)速度，而不改變化學(xué)反應(yīng)平衡點(diǎn)。 37. 酶工程的核心內(nèi)容是酶和細(xì)胞的固定化技術(shù)。 38. 判斷酶固定化方法優(yōu)劣的指標(biāo)是偶聯(lián)效率及固定化酶活力。 39. 固定化酶偶聯(lián)效率的測(cè)定方法有殘留法和水解法。 40. 1972年，國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)提出新的酶活單位，稱為Ka

48、tal單位。 41. 固定化酶活力的測(cè)定方法有分批測(cè)定法和連續(xù)測(cè)定法。 42. 管狀固定化酶稱為酶管。 43. 固定化酶操作穩(wěn)定性的表示方法為半衰期。 44. 當(dāng)酶固定化后，對(duì)于高分子底物的活性明顯下降。 45. 固定化酶體外應(yīng)主要是床式反應(yīng)器。 46. 編號(hào)E.C 3.2.3.1的酶是水解酶。 47. 利用固定化黃色短桿菌可以生產(chǎn)L蘋果酸。 48. 包埋法固定酶可利用的載體是硅膠等。 49. 膠聯(lián)法可用于制備固定化酶，戊醛不能做為交聯(lián)劑。 50. 制備固定化酶的交聯(lián)法中，常用的交聯(lián)劑，己二酰亞胺二甲酯，15-二氟14二硝基苯，雙重氮聯(lián)苯胺2，2二磺酸。 51. 在制備固定化酶的過程中，加入比活1500/Uml的酶液50ml，反應(yīng)一段時(shí)間后，用緩沖液洗脫，得到比活力為50U/ml的酶緩沖液400ml，則偶聯(lián)效率為7303。 52. 1961年，國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)規(guī)定，1個(gè)酶活單位指特定條件下，1min內(nèi)轉(zhuǎn)