高效液相色譜儀器維護(hù)和保養(yǎng)

1、溶劑過濾頭的清洗溶劑過濾頭的清洗1.取下過濾頭放在取下過濾頭放在(1:4,V/V)的硝酸溶液燒杯中的硝酸溶液燒杯中超聲清洗超聲清洗15分鐘分鐘;2.取出后用蒸餾水超聲清洗取出后用蒸餾水超聲清洗10分鐘分鐘;3.用吸球吹出過濾頭中的液體用吸球吹出過濾頭中的液體;4.再用蒸餾水超聲清洗再用蒸餾水超聲清洗10分鐘分鐘;5.用吸球吹凈過濾頭中的水份用吸球吹凈過濾頭中的水份;6.將過濾頭重新插入溶劑瓶中將過濾頭重新插入溶劑瓶中(正相系統(tǒng)注意將正相系統(tǒng)注意將過濾頭烘干過濾頭烘干)流程何時(shí)需要使用在線脫氣機(jī)何時(shí)需要使用在線脫氣機(jī)使用在線脫氣機(jī)須知使用在線脫氣機(jī)須知溶劑溶劑棕色玻璃瓶會(huì)避免藻類的生長(zhǎng)。棕色玻璃

2、瓶會(huì)避免藻類的生長(zhǎng)。經(jīng)常過濾溶劑以免其中微粒永久性阻塞毛細(xì)管。經(jīng)常過濾溶劑以免其中微粒永久性阻塞毛細(xì)管。避免使用下述可腐蝕鋼鐵的避免使用下述可腐蝕鋼鐵的 溶劑：溶劑：堿金屬鹵化物及其酸溶液(如：碘化鋰、氯化鉀等)。高濃度無機(jī)酸，如硝酸、硫酸.可能含有過氧化物的色譜純醚(如THF、二氧六環(huán)、二丙基乙醚)。這些在 使用前必須用干燥氧化鋁過濾除去過氧化物。含強(qiáng)絡(luò)合劑的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。四氯化碳與2-異丙醇或四氫呋喃的混合液。防止堵塞溶劑過濾器防止堵塞溶劑過濾器污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長(zhǎng)將會(huì)縮短溶劑過濾器的使用壽命，并且影 響泵的運(yùn)行。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液 (pH4 至 7)

3、中尤其如此。下 列建議將會(huì)延長(zhǎng)溶劑過濾器的使用壽命并維持泵的運(yùn)行。 使用滅過菌的溶劑瓶來減緩藻類生長(zhǎng)。使用新鮮配制的流動(dòng)相，特別是水溶劑或鹽緩沖液 建議不超過兩天。如果應(yīng)用許可，在溶劑中加人0.00010.001M的疊氮化鈉。避免溶劑瓶暴露在直射陽光下。用氬氣置換流動(dòng)相上層的空氣。 在線脫氣機(jī)日常維護(hù)在線脫氣機(jī)日常維護(hù),故障診斷故障診斷在線脫氣機(jī)日常維護(hù)在線脫氣機(jī)日常維護(hù),故障診斷故障診斷檢查溶劑過濾器檢查溶劑過濾器擰開脫氣機(jī)出口或比例閥入口管線，并使液面高于出口擰開脫氣機(jī)出口或比例閥入口管線，并使液面高于出口30cm此時(shí)溶劑會(huì)因?yàn)榇藭r(shí)溶劑會(huì)因?yàn)橹亓α鞒觯摎鈾C(jī)或溶劑過濾頭堵塞時(shí)，溶劑會(huì)流出不

4、暢或不流出重力流出，脫氣機(jī)或溶劑過濾頭堵塞時(shí)，溶劑會(huì)流出不暢或不流出。查看過濾器是否變色查看過濾器是否變色臨時(shí)取下過濾器，檢查柱前壓力是否正常臨時(shí)取下過濾器，檢查柱前壓力是否正常清潔溶劑過濾器清潔溶劑過濾器將堵塞的溶劑過濾器從瓶頭組件中拿下。先用水沖洗殘留之溶劑然后將過濾器放在裝有濃硝酸 （35）的燒杯里浸一小時(shí)。用二次蒸餾水徹底沖洗過濾器。建議不使用超聲波清洗機(jī)清洗。將過濾器重新裝好。建議定期清洗溶劑過濾器及溶劑瓶，每三個(gè)月至少清洗一次。注意：注意：不要使用沒有安裝溶劑過濾器的系統(tǒng)不要使用沒有安裝溶劑過濾器的系統(tǒng)可能會(huì)嚴(yán)重堵塞系統(tǒng)可能會(huì)嚴(yán)重堵塞系統(tǒng)在線脫氣機(jī)日常維護(hù)在線脫氣機(jī)日常維護(hù)Ques

5、tion?1.如何簡(jiǎn)單判斷脫氣機(jī)脫氣是否正常？如何簡(jiǎn)單判斷脫氣機(jī)脫氣是否正常？2.如何簡(jiǎn)單判斷脫氣機(jī)腔體或溶劑過濾頭是否如何簡(jiǎn)單判斷脫氣機(jī)腔體或溶劑過濾頭是否堵塞？堵塞？Question?1.如何簡(jiǎn)單判斷脫氣機(jī)脫氣是否正常？如何簡(jiǎn)單判斷脫氣機(jī)脫氣是否正常？ 打開打開Purge閥，設(shè)定泵的流速閥，設(shè)定泵的流速2ml/min，提，提起當(dāng)前所使用溶劑瓶?jī)?nèi)的溶劑過濾頭，使之脫起當(dāng)前所使用溶劑瓶?jī)?nèi)的溶劑過濾頭，使之脫離液面一小段時(shí)間，此時(shí)溶劑傳送管內(nèi)會(huì)產(chǎn)生離液面一小段時(shí)間，此時(shí)溶劑傳送管內(nèi)會(huì)產(chǎn)生一小段氣泡，放下過濾頭，讓此段氣泡通過脫一小段氣泡，放下過濾頭，讓此段氣泡通過脫氣機(jī)，如果脫氣機(jī)正常，氣泡應(yīng)消

6、失或縮小。氣機(jī)，如果脫氣機(jī)正常，氣泡應(yīng)消失或縮小。2.如何簡(jiǎn)單判斷脫氣機(jī)腔體或溶劑過濾頭是否如何簡(jiǎn)單判斷脫氣機(jī)腔體或溶劑過濾頭是否堵塞？堵塞？ 關(guān)閉泵，擰開脫氣機(jī)出口或比例閥入口管線關(guān)閉泵，擰開脫氣機(jī)出口或比例閥入口管線,此時(shí)溶劑會(huì)因?yàn)橹亓α鞒?，脫氣機(jī)或溶劑過濾此時(shí)溶劑會(huì)因?yàn)橹亓α鞒?，脫氣機(jī)或溶劑過濾頭堵塞時(shí)，溶劑會(huì)流出不暢或不流出。頭堵塞時(shí)，溶劑會(huì)流出不暢或不流出。Holding/Lock Screw (PEEK)1234567123如何更換溶劑出口過濾芯如何更換溶劑出口過濾芯嚴(yán)重污染的溶劑出口過濾芯嚴(yán)重污染的溶劑出口過濾芯如何更換活塞桿密封圈如何更換活塞桿密封圈多通道梯度閥（多通道梯度閥（

7、MCGV）操作要點(diǎn)操作要點(diǎn) 當(dāng)鹽溶液和有機(jī)溶劑混合時(shí)，鹽溶液可能與有機(jī)溶劑完全混溶，而不會(huì)出現(xiàn) 沉淀。但是在梯度閥的混合點(diǎn)，但是在梯度閥的混合點(diǎn)，重力作用使鹽顆粒 沉淀下來。通常，閥的A通道用于水相/鹽溶液，而泵的B通道用于有機(jī)溶 劑。如果使用的是這樣的配置，鹽將落回到鹽溶液中，并被溶解。當(dāng)泵使用 的不同配置（例如，D-鹽溶液，A-有機(jī)溶劑）時(shí)，鹽可能會(huì)落到有機(jī)溶劑 中，從而出現(xiàn)問題。 Agilent 1100四元泵中使用鹽溶液和有機(jī)溶劑時(shí)，建議將鹽溶液接到下面的 口上，有機(jī)溶劑接到上面的梯度閥口上。有機(jī)溶劑通道最好直接在鹽溶液通 道的上面。建議定期用水沖洗所有MCGV通道，以去除在閥口上可能

8、出現(xiàn)的鹽 沉淀。更好更好地使用四元泵地使用四元泵將裝有溶劑瓶的溶劑箱放在泵上面(或較高處)。當(dāng)在四元泵上使用鹽溶液或有機(jī)溶劑時(shí)，建議將鹽溶液接 在底部得梯度閥口上，將有機(jī)溶劑接在上面得梯度閥口上。有機(jī)通道最好 在鹽溶液通道得上面。建議用水定期沖洗所有MCGV通道除去可能在 閥口析出得鹽結(jié)晶。操作泵之前，用至少兩個(gè)體積（標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)30ml，對(duì)微脫氣機(jī)10ml）沖洗 真空脫氣機(jī),特別是當(dāng) 泵關(guān)閉了一段時(shí)間后（例如，過夜），以及在通道中使用揮發(fā)性混合溶劑 時(shí)。防止溶劑過濾器堵塞及長(zhǎng)菌 ，當(dāng)慮器表面有黑色或黃色污染層說明慮器發(fā)生了堵塞，請(qǐng)立即清洗或更換之。定期檢查排液閥的慮芯。檢查方法：擰開排液閥，以

9、水作流動(dòng)相，流速5ml/min，若壓力大于10bar,則須立即更換。泵的使用須知泵的使用須知更好更好地使用泵地使用泵當(dāng)使用低流速時(shí)（不高于0.2ml/min）檢查所有1/16英寸接頭有無滲漏（用壓力測(cè)試或漏液測(cè)試）。每當(dāng)更換泵密封墊時(shí) 排液閥慮芯也應(yīng)更換。更換活塞密封墊時(shí)檢查活塞桿上是否有劃痕。有劃痕的活塞將導(dǎo)致輕度滲漏，并 降低密封墊的使用壽命。應(yīng)盡早更換有劃痕的活塞。使用緩沖溶液時(shí)，關(guān)泵前先用水沖洗系統(tǒng)。當(dāng)需要長(zhǎng)時(shí)間使 用0.1摩爾或更高濃度得緩沖液時(shí)，最好選用密封墊清洗附件，以減少對(duì)密封墊及活塞桿的磨損。更換活塞密封墊后應(yīng)按照密封墊安裝步驟對(duì)其進(jìn)行磨合，但磨合不適用于 正相密封墊。5 5

10、重新連接色譜柱，設(shè)定適當(dāng)流速，當(dāng)流動(dòng)相流出重新連接色譜柱，設(shè)定適當(dāng)流速，當(dāng)流動(dòng)相流出約約3030倍于色譜柱體積，并且檢測(cè)器基線平衡后，倍于色譜柱體積，并且檢測(cè)器基線平衡后，流動(dòng)相更換完畢流動(dòng)相更換完畢1 1將新流動(dòng)相置于儲(chǔ)液瓶中將新流動(dòng)相置于儲(chǔ)液瓶中2 2打開放空閥，啟動(dòng)泵使新的流動(dòng)相從入空閥出打開放空閥，啟動(dòng)泵使新的流動(dòng)相從入空閥出口流出口流出20ml20ml左右左右3 3關(guān)閉放空閥，然后將進(jìn)樣閥與色譜柱相連接端關(guān)閉放空閥，然后將進(jìn)樣閥與色譜柱相連接端卸開，用小容器放置于卸開，用小容器放置于進(jìn)進(jìn)樣閥的出口處樣閥的出口處4 4啟動(dòng)恒流泵，讓流動(dòng)相從進(jìn)樣閥出口流出啟動(dòng)恒流泵，讓流動(dòng)相從進(jìn)樣閥出口

11、流出10ml10ml左左右右流程HPLC日常維護(hù)日常維護(hù)總結(jié)總結(jié)1.定期清洗溶劑過濾頭（35濃硝酸浸泡1小時(shí)，不要使用超聲波清洗）2.流動(dòng)相應(yīng)經(jīng)過0.45um或更小孔徑的濾器過濾，如果使用濾膜，注意有機(jī)膜與水膜的區(qū)別(聚四氟乙烯能適用于所有溶劑)3.根據(jù)情況更換Purge閥內(nèi)的在線過濾頭（Purge閥打開，純水5ml/min，壓力超過10bar時(shí)需更換）4.注意清洗在線脫氣機(jī)及比例閥，尤其是長(zhǎng)期使用水相或緩沖鹽的通路，使用純水沖洗后，再使用甲醇沖洗，可以打開Purge閥，使用5ml/min的流速。污染比較嚴(yán)重時(shí)，可以使用IPA清洗。一般的流程，例如A：Buffer B: MeOH C: Wat

12、er D: CH3CN分析：A:B:D=20:30:50清洗：C 100% 30min，B 100% 30min5.安裝有seal wash組件的，無論是否使用緩沖鹽，開泵之前都應(yīng)該使之充滿流動(dòng)的液體（10%IPA水溶液）并調(diào)流速為20滴/分鐘。6.正相色譜、反相色譜切換時(shí)應(yīng)使用IPA過渡，長(zhǎng)期使用正相，應(yīng)更換正相柱塞密封墊7.樣品進(jìn)樣之前最好過濾，如果樣品量太少，可以適當(dāng)抬高進(jìn)樣針的位置8.流動(dòng)相pH大于9.5或小于2.3時(shí)，進(jìn)樣閥應(yīng)更換tefzel 轉(zhuǎn)子密封圈9.注意不同檢測(cè)器流通池耐壓?jiǎn)栴}，盡量避免使用pH9.5的流動(dòng)相，以防腐蝕流通池石英窗，避免使用可能析晶的流動(dòng)相，防止流通池堵塞10. VWD 40bar DAD 120bar MWD 120bar FLD 20bar RID 5barRID、FLD永遠(yuǎn)是最后一個(gè)檢測(cè)器11. 注意不同廠家接頭問題，防止?jié)B漏或毀壞色譜柱和接頭 0.090 i