聚維酮碘操作規(guī)程

1、山東裕欣藥業(yè)有限公司文件文件名稱聚維酮碘檢驗操作規(guī)程文件編碼：02SOP014-01文件級別：出級起草人：日期：審核人：日期：批準(zhǔn)人：日期：生效日期：頒發(fā)部門：質(zhì)量保證部制作備份：2發(fā)文號：分發(fā)部門：QC1份，存檔1份1、目的：依據(jù)中國藥典2010年版二部，內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【YL-QS-004-01，制定聚維酮碘檢驗操作規(guī)程，確保操作人員依法檢驗。2、范圍：適用于聚維酮碘分子式【C6H9I2NO】，分子量364.95檢驗。3、職責(zé)：3.1 QC檢驗人員：負責(zé)本規(guī)程的嚴格執(zhí)行。3.2 QC管理人員：負責(zé)本規(guī)程的監(jiān)督實施。4、內(nèi)容4.1 性狀：黃棕色至紅棕色無定形粉末。4.2 鑒別：4.2.1 鑒別（

2、1）:4.2.1.1 試藥與試液：淀粉指示液。4.2.1.2 檢驗方法：取本品約0.5g,加水5ml溶解后取溶液一滴，加水9ml與淀粉指示液1ml,即顯深藍色。4.2.1.3 結(jié)果判定：內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)：顯深藍色；法定標(biāo)準(zhǔn)：顯深藍色。4.2.2 鑒別（2）4.2.2.1 儀器與用具：分析天平。4.2.2.2 檢驗方法：取本品約0.5g,加水5ml溶解后，取溶液0.5ml,涂布在面積約為7.5cm*2.6cm的玻璃板上，與低濕度室溫下放置過夜使干燥。4.2.2.3 結(jié)果判定：內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)：形成一棕色、干燥的薄膜，易溶于水。法定標(biāo)準(zhǔn)：形成一棕色、干燥的薄膜，易溶于水。4.3 檢查4.3.1 干燥失重4.3.1

3、.1 儀器與用具：分析天平、電熱恒溫干燥箱。4.3.1.2 檢驗方法：取本品約5g,精密稱定，在105c干燥4個小時，稱重，以后各次均在干燥1小時后稱重，直到連續(xù)兩次干燥后的重量差異不超過5.0mgo4.3.1.3 結(jié)果判定：內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)：8.0%。法定標(biāo)準(zhǔn)：8.0%。4.3.2 熾灼殘渣：4.3.2.1 儀器與用具：分析天平、高溫爐。4.3.2.2 試藥與試液：硫酸。4.3.2.3 檢驗方法：取本品1.0g,置已于500C600c熾灼至恒重的培竭中，精密稱定，緩緩熾灼至完全炭化，放冷至室溫；加硫酸0.5-1ml使?jié)駶?，低溫加熱至硫酸蒸汽除盡后，放在500C600c熾灼至恒重，即得。4.3.2.4

4、 結(jié)果判定：內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)：W0.1%。法定標(biāo)準(zhǔn)：W0.1%。4.3.3 重金屬4.3.3.1 儀器與用具：量筒。4.3.3.2 檢驗方法：供試品溶液：取熾灼殘渣項下的殘渣，用加硝酸0.5ml,蒸干至氧化氮蒸汽除盡，加鹽酸2ml,置水浴上蒸干后，加水15ml,滴加氨試液至對酚吹指示液顯中性微粉紅色，加醋酸鹽緩沖溶液（pH3.5）2ml,微熱使溶解，移置25ml納氏比色管中加水稀釋成25ml。對照溶液：取配制供試品溶液的試劑，置瓷培竭中蒸干后，加醋酸鹽緩沖溶液（pH3.5）2ml,加水15ml,微熱使溶解，移置25ml納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2ml,加水稀釋成25ml。再在兩管中分別加硫代乙酰胺試液

5、各2ml,搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視4.3.3.3結(jié)果判定：內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)：20ppm。法定標(biāo)準(zhǔn)：20ppm。4.3.4 種鹽4.3.4.1 試藥與試液：醋酸鉛棉花、澳化汞試紙、氫氧化鈣、鹽酸。4.3.4.2 檢驗方法：測試時，于導(dǎo)氣管中裝入醋酸鉛棉花60mg（裝管高度為6080mm）,再于旋塞的頂端平面上放一片澳化汞試紙（試紙大小以能覆蓋孔徑而不露出平面外為宜），蓋上旋塞蓋并旋緊，即得。取本品1.3g,加氫氧化鈣0.5g,混勻，加水適量（約2ml）,攪拌均勻，干燥后，先用小火燒灼使炭化，再在600°C熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸5ml與水23ml。對照溶液：取標(biāo)準(zhǔn)種溶液1

6、ml,加氫氧化鈣0.5g混勻，加水適量（約2ml）,攪拌均勻，干燥后，先用小火燒灼使炭化，再在6000C熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸5ml與水23ml。再在A、B瓶中分別用5ml刻度吸管加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g,立即將照上法裝妥的導(dǎo)氣管密塞于A、B瓶上，并將其瓶置2540c水浴中,反應(yīng)45分鐘，取出澳化汞紙試，比較，即得。4.3.4.3 結(jié)果判定：內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)：0.00015%法定標(biāo)準(zhǔn)：0.00015%4.3.5 含氮量4.3.5.1 儀器與用具：分析天平。4.3.5.2 試藥與試液：硫酸鉀、硫酸、40%氫氧化鈉溶液。4.3.5.3 檢驗方法：取本

7、品約0.5g,精密稱定，置于干燥的500ml凱氏燒瓶中；然后依次加入硫酸鉀（或無水硫酸鈉）10g和硫酸銅0.5g,再沿瓶壁緩緩用20ml量筒加硫酸20ml；在凱氏燒瓶口放一小漏斗并使凱氏燒瓶成45。斜置，用直火緩緩加熱，使溶液的溫度保持在沸點以下，等泡沸停止，強熱至沸騰，待溶液成澄明的綠色后，繼續(xù)加熱30分鐘，放冷。沿瓶壁緩緩加水250ml,振搖使混合，放冷后，用100ml量筒加40%氫氧化鈉溶液75ml,注意使沿瓶壁流至瓶底，自成一液層。加鋅粒數(shù)粒，用氮氣球?qū)P氏燒瓶與冷凝管連接；另用50ml量筒取2%硼酸溶液50ml,置500ml錐形瓶中，加甲基紅澳甲酚綠混合指示液10滴；將冷凝管的下端插

8、入硼酸溶液的液面下，輕輕擺動凱氏燒瓶，使溶液混合均勻，加熱蒸儲，至接受液的總體積為250ml時，將冷凝管尖端提出液面，使蒸汽沖洗約1分鐘，用水淋洗尖端后停止蒸儲；儲出液用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定至溶液由藍綠色變?yōu)榛易仙⒌味ńY(jié)果用空白試驗校正。每1ml硫酸滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于1.401mg的N。4.3.5.4 結(jié)果判定：內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)：9.5%-11.5%;法定標(biāo)準(zhǔn)：9.5%11.5%。4.3.6 碘離子4.3.6.1 儀器與用具：分析天平。4.3.6.2 試藥與試液：硝酸銀滴定液（0.1mol/L）、亞硫酸氫鈉試液。4.3.6.3 檢驗方法：本品約0.50g,精密稱定

9、,置250ml錐形瓶中，加水100ml溶解后，滴加亞硫酸氫鈉試液數(shù)滴使溶液顏色消失，加硝酸10ml,精密加入硝酸銀滴定液（0.1mol/L）25ml,搖勻后，加硫酸鐵俊指示液0.5ml,用硫氟酸俊滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯淡磚紅色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正，每1ml硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于12.69mg的I。計算得總碘的百分含量減去含量測定項下有效碘的百分含量，即得碘離子的百分含量。4.3.6.4 結(jié)果判定：內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)：6.6%;法定標(biāo)準(zhǔn)：6.6%。4.3.7 微生物限度檢查4.3.7.1 簡述微生物限度檢查法系檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法

10、。檢查項目包括需氧菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌檢查。微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度C級背景下的局部潔凈度A級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行。檢驗全過程必須嚴格遵守?zé)o菌操作，防止再污染。單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進行潔凈度驗證。4.3.7.2 儀器與用具：a凈化工作臺、生化培養(yǎng)箱（30-35C）生化培養(yǎng)箱（20-25C）,數(shù)顯恒溫水浴鍋、電熱鼓風(fēng)干燥箱、電冰箱、立式壓力蒸汽滅菌器、分析天平、酸度計等b玻璃器皿錐形瓶（250-300ml）、培養(yǎng)皿、量筒（100ml,500ml）、吸管（1ml分度0.01,10ml分度0.1）玻

11、璃器皿用前應(yīng)洗滌干凈，無殘留抗菌物質(zhì)，若用振蕩器制備混懸液時，尚用玻璃紙包裹瓶塞，以免振蕩時供試液污染瓶塞，再用牛皮紙包扎。玻璃器皿，均于180c干燥滅菌2h或高壓蒸汽121c滅菌30min,烘干備用。4.3.7.3 消毒齊1J75%乙醇等。4.3.7.4 對照菌液：試驗菌金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003、大腸埃希菌CMCC（B）44102銅綠假單胞菌CMCC（B）10104等，取相應(yīng)的營養(yǎng)瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物1白金耳，接種至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基內(nèi)，培養(yǎng)1824小時后，用pH7.0氯化鈉蛋白凍緩沖液制成每1ml含菌數(shù)為不大于100cfu的菌懸液。4.3.7.5 稀釋劑D/E中和肉湯、吐溫80。4

12、.3.7.6 培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂、沙氏瓊脂培養(yǎng)基、膽鹽乳糖培養(yǎng)基、曙紅亞甲基藍瓊脂、乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基，葡萄糖肉湯、營養(yǎng)肉湯等。4.3.7.7 試驗準(zhǔn)備a培養(yǎng)基的準(zhǔn)備一般采用商品干燥培養(yǎng)基，臨用時按照使用說明書進行配制，需注意培養(yǎng)基的pH值應(yīng)符合規(guī)定，否則必須校正后，在121c蒸汽滅菌15min備用。b將滅菌的瓊脂培養(yǎng)基，置45c水浴中，備用。4.3.7.8 用具的洗滌與滅菌a培養(yǎng)皿使用過的培養(yǎng)基均須經(jīng)規(guī)定條件滅菌后再用洗滌劑溶液浸泡洗刷，用水及純化水沖洗干凈，培養(yǎng)皿配對，分別置不銹鋼筒內(nèi)，于電熱鼓風(fēng)干燥箱180c干熱滅菌2小時。b量筒、三角瓶等浸泡在洗滌劑溶液中，洗刷，用水沖洗干凈，再用純化水沖

13、洗干凈，晾干，凡無菌操作過程中所用器皿，都應(yīng)滅菌后使用。c使用過的吸管，用水沖洗干凈，經(jīng)重銘酸鉀洗液浸泡，再分別用水及純化水沖洗干凈，裝入不銹鋼筒內(nèi)，放烘箱180c滅菌2小時。d進入無菌室的供試品容器外部消毒處理：用75%酉精等消毒劑擦拭4.3.7.9 供試品的制備：取原液5g,置250ml的滅菌三角瓶中，加入45mlD/E中和肉湯和30%的吐溫80作用10分鐘后，作為供試品溶液。a需氧菌菌落總數(shù)：吸取上述供試品溶液1ml,置直徑90mm的無菌平皿中，注入1520ml溫度不超過45c熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。平行制備5個平板。b真菌菌落總數(shù)：吸取上述供試品溶液1ml,置直徑9

14、0mm的無菌平皿中，注入1520ml溫度不超過45c熔化的沙氏瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。平行制備5個平板。c需氧菌陰性對照的制備：同需氧菌培養(yǎng)平板制備方法不加供試品作陰性對照。d真菌陰性對照的制備：同真菌培養(yǎng)平板制備方法不加供試品作陰性對照。e培養(yǎng)：需氧菌計數(shù)平板倒置于3035c培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天,逐日觀察菌落生長情況，真菌計數(shù)平板倒置于25C±2C培養(yǎng)7大。分別3d、5d、7d觀察，點計菌落數(shù)。4.3.7.10 需氧菌菌數(shù)報告：a當(dāng)總菌落數(shù)在100以內(nèi)，按實有數(shù)報告，大于100時采用二位有效數(shù)字。如果樣品菌落總數(shù)超過標(biāo)準(zhǔn)值，按下述方法進行復(fù)檢和結(jié)果報告。b復(fù)檢方法，取復(fù)檢樣品

15、依前法復(fù)測2次，2次結(jié)果平均值都達到標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定者，則判定被檢樣品合格，如其中仍有1次結(jié)果平均值超過標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則判定被檢樣品不合格。4.3.7.11 真菌菌數(shù)報告：a菌落呈片狀生長的平板不宜采用，計數(shù)符合要求的平板上的菌落，按Xf=(Nt/5)*k式中Xf為樣品真菌菌落總數(shù)，Nt為5塊沙氏瓊脂培養(yǎng)基平板上的真菌菌落總數(shù)；k為稀釋度b當(dāng)總菌落數(shù)在100以內(nèi)，按實有數(shù)報告，大于100時采用二位有效數(shù)字。如果樣品菌落總數(shù)超過標(biāo)準(zhǔn)值，按下述方法進行復(fù)檢和結(jié)果報告。c復(fù)檢方法，取復(fù)檢樣品依前法復(fù)測2次，2次結(jié)果平均值都達到標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定者，則判定被檢樣品合格，如其中仍有1次結(jié)果平均值超過標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則判定被檢樣品不

16、合格。4.3.7.12 大腸菌群檢查取樣品5ml接種50ml的乳糖膽鹽發(fā)酵管，置35c±2C培養(yǎng)24小時，若不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報告為大腸菌群陰性。若產(chǎn)酸產(chǎn)氣，應(yīng)將發(fā)酵管中的培養(yǎng)物分別劃線接種于曙紅亞甲基藍瓊脂培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)18-24小時。若平板上無菌落生長，或生長的菌落與表1所列的菌落形態(tài)特征不符或為非革蘭氏陰性無芽抱桿菌，判該管未檢出大腸菌群。若平板上生長的菌落與表1所列的菌落形態(tài)特征相符或疑似，且為革蘭氏陰性無芽抱桿菌，應(yīng)進行確證實驗。表1大腸菌群菌落形態(tài)特征/口加小菌落形態(tài)曙紅亞甲基曲瓊脂紫黑色、紫紅色、紅色或粉紅色，圓形，扁平或稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤。確證試驗

17、從上述分離平板上挑選4-5個疑似菌落，分別接種于乳糖發(fā)酵管中，培養(yǎng)24-48小時。若產(chǎn)酸產(chǎn)氣，判斷乳糖膽鹽發(fā)酵管檢出大腸菌群，否則判未檢出大腸菌群。4.3.7.13 銅綠假單胞菌檢查拉曾菌培養(yǎng)：取膽鹽乳糖培養(yǎng)基3份，每份各50ml。1份加入供試液5m1,1份加入供試液及陽性對照菌，1份加入與供試液等量的稀釋劑作陰性對照。培養(yǎng)1824小時，必要時可延長至48小時。陰性對照應(yīng)無菌生長。b分離培養(yǎng)：輕輕搖動上述增菌培養(yǎng)液，以接種環(huán)沾取1-2環(huán)培養(yǎng)液（如有菌膜應(yīng)挑選之），劃線接種于澳化十六烷基三甲俊瓊脂培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)1824小時。銅綠假單胞菌在該培養(yǎng)基平板上的典型菌落呈扁平、無定形、周邊擴散、表

18、面濕潤，灰白色，在菌落相鄰處常有融合現(xiàn)象。周圍時有藍綠色素擴散。但亦有不產(chǎn)生色素的菌株。菌落還有粗糙型和粘液型等，應(yīng)注意挑選。c純培養(yǎng):如平板上無菌落生長或生長的菌落與上述菌落形態(tài)特征不符，判供試品未檢出銅綠假單胞菌。如平板生長的菌落與上述菌落形態(tài)特征相符或疑似，應(yīng)挑選23個菌落，分別接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面上，培養(yǎng)1824小時。取斜面培養(yǎng)物進行鏡檢、氧化酶試驗、硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗、明膠液化試驗、42C生長試驗。d氧化酶試驗：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無菌玻棒挑取可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對苯二胺試液，30s內(nèi)出現(xiàn)粉紅色或紫紅色，為氧化酶試驗陽性

19、，不變色者為陰性。e綠膿菌素t僉：取23個可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測定用培養(yǎng)基斜面，35c±2C培養(yǎng)24小時，加入三氯甲烷35ml,充分震蕩使培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三氯甲烷呈藍色時，用吸管移到另一試管中并加入1mol/L的鹽酸1ml,震蕩后靜置片刻。如上層出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽性，表示有綠膿菌素存在。f硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗：挑取被檢菌純培養(yǎng)物接種在硝酸鹽膘水培養(yǎng)基中，置35c±2C培養(yǎng)24小時，培養(yǎng)基管中有氣者即為陽性。g明膠液化試驗：取可疑菌落純培養(yǎng)物，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內(nèi)，置35c±2C培養(yǎng)24小時，取出放于410C,如仍呈液態(tài)為陽性，凝固者

20、為陰性。h42c生長試驗：取可疑培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置42c培養(yǎng)2448小時，有銅綠假單胞菌生長為陽性。結(jié)果報告：被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，證實為革蘭陰性桿菌，氧化酶及綠膿菌素試驗均為陽性者，即可報告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌，如綠膿菌素試驗陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42C生長試驗三者均為陽性時，仍可報告檢出銅綠假單胞菌。4.3.7.14 金黃色葡萄球菌的檢查a增菌培養(yǎng)：取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基3份，每份各50ml。1份加入5ml供試液，1份加入供試液及陽性對照菌；1份加入與供試液等量的稀釋劑作陰性對照。培養(yǎng)1824小時，必要時可延長至48小時。陰性對照應(yīng)無菌生長。b分離培養(yǎng)：將

21、上述增菌培養(yǎng)液，以接種環(huán)沾取1-2環(huán)培養(yǎng)液，劃線接種于血瓊脂平板上，置35C±2C培養(yǎng)2448小時。在血平板上該菌菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。若平板上無菌落生長或生長的菌落不同于表所列特征，可報告未檢出金黃色葡萄球菌。若平板上生長的菌落與表所列的菌落特征相符或疑似，應(yīng)挑選23個菌落，涂片作革蘭染色鏡檢，符合菌落特征的應(yīng)進行下列試驗。c甘露醇發(fā)酵試驗：取上述菌落接種甘露醇培養(yǎng)液，置35c±2C培養(yǎng)24小時，發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸者為陽性。d血漿凝固酶試驗：取滅菌小試管3支，各加入血漿和無菌水混合液（1：1）0.5ml,再分別加入可疑菌株的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)

22、物（或由營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)物制備的濃菌懸液）0.5ml、金黃色葡萄球菌營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物（或由營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)物制備的濃菌懸液）0.5ml、營養(yǎng)肉湯或0.9%無菌氯化鈉溶液0.5ml,即為試驗管、陽性對照管和陰性對照管。將3管同時培養(yǎng)，3小時后開始觀察直至24小時。陰性對照管的血漿應(yīng)流動自如，陽性對照管血漿應(yīng)凝固，若試驗管血漿凝固者為血漿凝固酶試驗陽性，否則為陰性。如陽性對照管或陰性對照管不符合規(guī)定時，應(yīng)另制備血漿，重新試驗。若上述疑似菌為非革蘭陽性球菌、血漿凝固酶試驗陰性，判供試品未檢出金黃色葡萄球菌。結(jié)果報告：凡在瓊脂平板上有可疑菌落生長，鏡檢為革蘭陽性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗陽性者，可報告被檢樣品中檢出金黃色葡萄球菌。4.3.7.15 溶血性鏈球菌檢查a取50ml葡萄糖肉湯培養(yǎng)基3份，1份加入5ml供試液，1份加入供試液及陽性對照菌；1份加入與供試液等量的稀釋劑作陰性對照。35C±2c培養(yǎng)24小時，陰性對照應(yīng)無菌生長。b分離培養(yǎng)：將上述增菌培養(yǎng)液，以接種環(huán)沾取1-2環(huán)培養(yǎng)液，劃線接種于血瓊脂平板上，置35C±2C培養(yǎng)24小時觀察菌落特征。溶血性鏈球菌在血平板上為灰白色，半透明或不透明，針尖狀突起，表面光滑，邊緣整齊，周圍有無色透明溶血圈。若平板上無菌落生長或生長的菌落不同于表所列特征，可報告未檢出金黃色葡萄球菌。若平板上生長