化學(xué)發(fā)光實驗步驟

1、羥自由基清除實驗(芬頓反應(yīng))溶液配制檢測儀器反應(yīng)過程注意事項1溶液配制Na2CO3-NaHCO3緩沖液(CBSS,0.1mol/L):Na2CO3 Mr = 105.99, 0.1mol/L 溶液為10.599 g/L;NaHCO3 Mr = 84.01, 0.1mol/L 溶液為8.401 g/L;pH10.2 Na2CO3 : NaHCO3 (6:4)Fe2+SO4-EDTA (3mM): 100ml H2O 加入 Fe2+SO47 H2O 0.08346 g, EDTA 0.0877 g0.1 M NaOH: 0.2g NaOH 加入到50 ml H2O.0.1 mM luminol 溶

2、液:10 mM luminol 儲液, 88.585 mg luminol 溶于少量DMSO中, 加0.1 M NaOH定溶至50 ml .0.1 mM luminol, 1 ml 10 mM luminol 加99 ml CBSS(pH10.2). 3% H2O2: 100 l 30% H2O2 加900 l H2O2檢測儀器檢測儀器: WDD-1型發(fā)光測試儀(北京第二光學(xué)儀器廠)檢測條件:電壓: 讀數(shù)調(diào)零后,該儀器電壓調(diào)至主針(內(nèi)圈)8, 副針(外圈)6.3反應(yīng)過程0.1 mM luminol 溶液880 l 100 l 樣品(對照為H2O) 10 l Fe2+SO4-EDTA (3mM)

3、 10 l H2O2(3% )4注意事項H2O2溶液 應(yīng)當(dāng)?shù)蜏乇芄獗４鏅z測過程中, 反應(yīng)溶液均在冰浴中保存更佳Fe2+SO4-EDTA和H2O2 溶液, 均分開貼在檢測管管壁, 開始記時時搖勻開啟反應(yīng).樣品混勻后,記錄30 S 后的讀數(shù).5超氧陰離子清除實驗(鄰苯三酚自氧化)溶液配制檢測儀器反應(yīng)過程注意事項6溶液配制0.1 mM luminol 溶液:10 mM luminol 儲液, 88.585 mg luminol 溶于少量DMSO中, 加0.1 M NaOH定溶至50 ml .0.1 mM luminol, 1 ml 10 mM luminol 加99 ml CBSS(pH10.2).

4、 4 M NaOH:1.6 g NaOH + 10 ml H2O3 mM鄰苯三酚:H2O, 用 HCl 調(diào) pH 值為3.5;0.3 M鄰苯三酚, 0.037833 g 鄰苯三酚,加入1 ml pH3.5 的H2O 中,3 mM鄰苯三酚, 10 l 0.3 M鄰苯三酚+ 990 l H2O(pH3.5).7反應(yīng)過程0.1 mM luminol 溶液810 l 100 l 樣品(對照為H2O) 80 l NaOH (4M) 10 l鄰苯三酚(3mM )8檢測儀器檢測儀器: WDD-1型發(fā)光測試儀(北京第二光學(xué)儀器廠)檢測條件:電壓: 讀數(shù)調(diào)零后,該儀器電壓調(diào)至主針(內(nèi)圈)10, 副針(外圈)0.9注意事項實驗過程中,鄰苯三酚溶液需冰浴中保存鄰苯三酚溶液堿性條件下容易氧化,若對照數(shù)值有較大變化,則需配制