玉米中氨基酸的測定

1、第 PAGE 7 頁 共 NUMPAGES 7 頁玉米中脂肪酸值含量的測定 谷物制品脂肪酸值測定法摘 要用無水乙醇提取玉米中的脂肪酸，用標準氫氧化鉀溶液滴定，以ZDJ-5自動滴定儀代替?zhèn)鹘y(tǒng)用酚酞作指示劑滴定法測定玉米脂肪酸含量：1.用毫伏滴定測得玉米中脂肪酸值為12.9（KOH mg/100 g干基）。2.預設PH值為7時測得玉米中脂肪酸值為12.4（KOH mg/100 g干基）。玉米中氨基酸的測定方法原理在室溫下用無水乙醇提取玉米粉中脂肪酸，用標準氫氧化鉀溶液滴定。2 儀器2.1 帶塞錐形瓶：150ml、200ml。2.2 移液管：50ml。2.3 比色管：25ml。2.4 微量滴定管：5

2、ml，最小刻度為0.02ml。2.5 天平：感量為0.01g。、2.6 震蕩器。2.7 樣品粉碎機。2.8 玻璃短頸漏斗。2.9 表面皿。2.10 定性濾紙：中速。1 .2 .11 ZDJ-5A自動滴定儀3 試劑3.1 無水乙醇：A.R。3.2 1%酚酞-乙醇溶液：1.0酚酞溶于100ml 95%（V/V）乙醇。3.3 0.01mol/L氫氧化鉀-95%乙醇溶液：先配制約0.5mol/L氫氧化鉀水溶液，即稱取約28氫氧化鉀溶于100ml水中，再取20ml 0.5mol/L氫氧化鉀水溶液用95%（V/V）乙醇稀釋至1000ml。計算 c（KOH）=W（V1-V0）204.231000 式中： c

3、（KOH）氫氧化鉀-乙醇溶液的物質(zhì)的量濃度，mol/L； W 稱取鄰苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量，g ； V1 滴定用去的氫氧化鉀溶液體積，ml； V0 空白試驗用去的氫氧化鉀溶液體積，ml； 204.23 鄰苯二甲酸氫鉀的摩爾質(zhì)量，g/ml； 1000 換算系數(shù)操作步驟試樣制備：取混合均勻樣品約80g，用粉碎機粉碎，細度要求95%通過CQ16篩，磨碎樣品充分混合后裝入磨口瓶中備用。提?。悍Q100.01g試樣于150ml磨口帶塞三角燒瓶中，并用移液管加入50.0ml無水乙醇，置于震蕩器上，振搖10min。過濾：振蕩后靜置數(shù)分鐘，在玻璃漏斗中放入折疊式的濾紙過濾。棄去最初幾滴濾液，用25ml比色管收集濾液

4、25ml以上，并立即準確調(diào)節(jié)至25ml。滴定：將比色管的25ml濾液移入三角瓶中，并用50ml無二氧化碳蒸餾水分三次洗滌比色管（加蒸餾水，使提取液中的醇溶性酶蛋白遇水產(chǎn)生乳白色膠狀物，以消除提取液中醇溶性酶蛋白對脂肪酸滴定的影響），將洗滌的溶液一并倒入三角瓶中進行滴定。結(jié)果計算脂肪酸值以中和100g干物質(zhì)試樣中游離脂肪酸所需氫氧化鉀毫克數(shù)表示。100m（ 100W ）脂肪酸值按式（2）計算：脂肪酸值（KOH mg/100g干基）=（V1-V0）c56.12 100式中：V1滴定試樣用去氫氧化鉀-乙醇溶液體積，ml； V2滴定空白用去氫氧化鉀-乙醇溶液體積，ml； 50提取試樣用去無水乙醇的體積

5、，ml； 25用去滴定的濾液體積，ml； c氫氧化鉀-乙醇溶液的物質(zhì)的量濃度，mol/L； 561氫氧化鉀摩爾質(zhì)量，g/mol； m試樣質(zhì)量，g； 100換算為100g試樣質(zhì)量，g； W試樣水分百分數(shù)，即每100g試樣中含水分的質(zhì)量，g。計算結(jié)果取小數(shù)點后一位數(shù)。重復性由同一分析者對同一試樣同時或相繼進行兩次測定，結(jié)果差值不超過2mg KOH/100g。試驗數(shù)據(jù)及曲線繪制電位滴定玉米樣品中的氨基酸含量：樣品1終點：1.149ml mV:-130.6mV樣品2終點：1.182ml mV:-120.0mV樣品3終點：終點：1.170ml mV:-113.6mV樣品4終點：終點：1.151ml mV

6、:-134.6mV根據(jù)公式得出氨基酸的含量：樣品1樣品2樣品3樣品4V1 (ml)1.1491.1821.171.151m (g)10.006610.001910.004610.0032脂肪酸值（KOH mg/100g干基）12.913.313.112.9注：（空白V0和W忽略不計）PH滴定玉米樣品中的氨基酸含量：樣品5終點：體積1.114ml 樣品6終點：體積1.141ml 樣品7終點：體積1.102ml 根據(jù)公式得出氨基酸的含量：樣品5樣品6樣品7V1 (ml)1.141.1411.102m (g)10.005610.002510.0072脂肪酸值（KOH mg/100g干基）12.812.812.4注：（空白V0和W忽略不計）9. 討論用ZDJ-5A滴定儀測試的值與使用酚酞做指示劑滴定結(jié)果相差0.05ml，由于酚酞指示劑的顯色范圍在PH=