玉米中氨基酸的測(cè)定

1、第 PAGE 7 頁 共 NUMPAGES 7 頁玉米中脂肪酸值含量的測(cè)定 谷物制品脂肪酸值測(cè)定法摘 要用無水乙醇提取玉米中的脂肪酸，用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鉀溶液滴定，以ZDJ-5自動(dòng)滴定儀代替?zhèn)鹘y(tǒng)用酚酞作指示劑滴定法測(cè)定玉米脂肪酸含量：1.用毫伏滴定測(cè)得玉米中脂肪酸值為12.9（KOH mg/100 g干基）。2.預(yù)設(shè)PH值為7時(shí)測(cè)得玉米中脂肪酸值為12.4（KOH mg/100 g干基）。玉米中氨基酸的測(cè)定方法原理在室溫下用無水乙醇提取玉米粉中脂肪酸，用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鉀溶液滴定。2 儀器2.1 帶塞錐形瓶：150ml、200ml。2.2 移液管：50ml。2.3 比色管：25ml。2.4 微量滴定管：5

2、ml，最小刻度為0.02ml。2.5 天平：感量為0.01g。、2.6 震蕩器。2.7 樣品粉碎機(jī)。2.8 玻璃短頸漏斗。2.9 表面皿。2.10 定性濾紙：中速。1 .2 .11 ZDJ-5A自動(dòng)滴定儀3 試劑3.1 無水乙醇：A.R。3.2 1%酚酞-乙醇溶液：1.0酚酞溶于100ml 95%（V/V）乙醇。3.3 0.01mol/L氫氧化鉀-95%乙醇溶液：先配制約0.5mol/L氫氧化鉀水溶液，即稱取約28氫氧化鉀溶于100ml水中，再取20ml 0.5mol/L氫氧化鉀水溶液用95%（V/V）乙醇稀釋至1000ml。計(jì)算 c（KOH）=W（V1-V0）204.231000 式中： c

3、（KOH）氫氧化鉀-乙醇溶液的物質(zhì)的量濃度，mol/L； W 稱取鄰苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量，g ； V1 滴定用去的氫氧化鉀溶液體積，ml； V0 空白試驗(yàn)用去的氫氧化鉀溶液體積，ml； 204.23 鄰苯二甲酸氫鉀的摩爾質(zhì)量，g/ml； 1000 換算系數(shù)操作步驟試樣制備：取混合均勻樣品約80g，用粉碎機(jī)粉碎，細(xì)度要求95%通過CQ16篩，磨碎樣品充分混合后裝入磨口瓶中備用。提?。悍Q100.01g試樣于150ml磨口帶塞三角燒瓶中，并用移液管加入50.0ml無水乙醇，置于震蕩器上，振搖10min。過濾：振蕩后靜置數(shù)分鐘，在玻璃漏斗中放入折疊式的濾紙過濾。棄去最初幾滴濾液，用25ml比色管收集濾液

4、25ml以上，并立即準(zhǔn)確調(diào)節(jié)至25ml。滴定：將比色管的25ml濾液移入三角瓶中，并用50ml無二氧化碳蒸餾水分三次洗滌比色管（加蒸餾水，使提取液中的醇溶性酶蛋白遇水產(chǎn)生乳白色膠狀物，以消除提取液中醇溶性酶蛋白對(duì)脂肪酸滴定的影響），將洗滌的溶液一并倒入三角瓶中進(jìn)行滴定。結(jié)果計(jì)算脂肪酸值以中和100g干物質(zhì)試樣中游離脂肪酸所需氫氧化鉀毫克數(shù)表示。100m（ 100W ）脂肪酸值按式（2）計(jì)算：脂肪酸值（KOH mg/100g干基）=（V1-V0）c56.12 100式中：V1滴定試樣用去氫氧化鉀-乙醇溶液體積，ml； V2滴定空白用去氫氧化鉀-乙醇溶液體積，ml； 50提取試樣用去無水乙醇的體積

5、，ml； 25用去滴定的濾液體積，ml； c氫氧化鉀-乙醇溶液的物質(zhì)的量濃度，mol/L； 561氫氧化鉀摩爾質(zhì)量，g/mol； m試樣質(zhì)量，g； 100換算為100g試樣質(zhì)量，g； W試樣水分百分?jǐn)?shù)，即每100g試樣中含水分的質(zhì)量，g。計(jì)算結(jié)果取小數(shù)點(diǎn)后一位數(shù)。重復(fù)性由同一分析者對(duì)同一試樣同時(shí)或相繼進(jìn)行兩次測(cè)定，結(jié)果差值不超過2mg KOH/100g。試驗(yàn)數(shù)據(jù)及曲線繪制電位滴定玉米樣品中的氨基酸含量：樣品1終點(diǎn)：1.149ml mV:-130.6mV樣品2終點(diǎn)：1.182ml mV:-120.0mV樣品3終點(diǎn)：終點(diǎn)：1.170ml mV:-113.6mV樣品4終點(diǎn)：終點(diǎn)：1.151ml mV

6、:-134.6mV根據(jù)公式得出氨基酸的含量：樣品1樣品2樣品3樣品4V1 (ml)1.1491.1821.171.151m (g)10.006610.001910.004610.0032脂肪酸值（KOH mg/100g干基）12.913.313.112.9注：（空白V0和W忽略不計(jì)）PH滴定玉米樣品中的氨基酸含量：樣品5終點(diǎn)：體積1.114ml 樣品6終點(diǎn)：體積1.141ml 樣品7終點(diǎn)：體積1.102ml 根據(jù)公式得出氨基酸的含量：樣品5樣品6樣品7V1 (ml)1.141.1411.102m (g)10.005610.002510.0072脂肪酸值（KOH mg/100g干基）12.812.812.4注：（空白V0和W忽略不計(jì)）9. 討論用ZDJ-5A滴定儀測(cè)試的值與使用酚酞做指示劑滴定結(jié)果相差0.05ml，由于酚酞指示劑的顯色范圍在PH=