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文檔簡介

1、人體解剖與生理學實驗實驗一四種基本組織的自制臨時裝片及觀察(必做)目的及內容1學習上皮組織和結締組織及骨骼肌新鮮材料的平鋪片的制作方法。2學習神經組織涂片的制作方法。3觀察自制臨時裝片,了解四種基本組織的結構特征。材料與用具材料:青蛙或蟾蜍、豬膈肌、新鮮牛脊髓(以腰段粗大最好)用具:常用解剖器械一套、載玻片、蓋玻片、光學顯微鏡染液:甲基藍、醋酸溶液1、單層扁平上皮組織的平鋪片制作 用尼龍網袋裝好青蛙或蟾蜍放入桶中加水,在水中浸泡 . 小時,表皮自 然脫落。用鑷子將黏附在尼龍網袋格子上的表皮夾入培育皿中存放備用。取一小塊表皮放置載玻片上,用解剖針將其展平,待鋪片干后, 用的甲基藍染色分鐘,將多余

2、的染液用吸水紙從邊緣吸干即可鏡檢。特點:上皮細胞為多邊形,細胞與細胞之間邊界清晰,細胞核扁圓形,位于 細胞中央。2、疏松結締組織的平鋪片制作 將蟾蜍處死, 剪開皮膚剪取一小塊皮下結締組織置一載玻片上,然后左右各持一解剖針,將組織撕開平鋪載玻片上,可觀察。用甲基藍染色分鐘, 蓋上蓋玻片即特點 :成纖維細胞數(shù)目最多,胞質染色淡,輪廓不甚明顯,仔細觀察細胞呈梭形或扁的星狀,胞核大, 多為橢圓形,染成藍紫色。巨噬細胞數(shù)量多分布廣, 細胞不規(guī)則, 胞體圓形或卵圓形; 胞核小,為圓形、橢圓形或腎形,核染色為深藍色。膠原纖維排列成束彼此交織吻合, 纖維束常有分支。彈性纖維在疏松結締組織中略呈黃色,折光性強,

3、富有彈性,一般較膠原纖維細 , 纖維有分支,排列散亂。3、神經組織涂片制作將解剖針在脊髓灰質前角挑取半米粒大小的組織,置于潔凈的載玻片上 , 涂成均勻而薄的一層, 晾干后加 - 滴甲基藍,約 - 分鐘,用清水清洗后鏡檢。特點: 神經組織由神經元細胞和神經膠質細胞組成。神經元由胞體和突起組成。胞體有圓形、梨形、梭形、錐體形及星形等。神經元 樹突:多個,呈樹枝狀突起,內含尼氏體。突起(胞質內許多被染成深藍色的小塊)軸突:每個神經元只有1 個軸突,軸突從胞體發(fā)出的部位呈圓錐形隆起,著色較淺,稱軸丘,沒有尼氏體。4、骨骼肌平鋪片制作取豬橫隔肌剪成小塊 , 用純甘油浸泡 3-4 天,待用。取豬橫隔肌一小

4、塊 , 用解剖針將肌纖維分離 顯微鏡下觀查。特點: 肌原纖維表面有肌膜,是多核細胞, 放到載玻片上 , 滴上一滴醋酸 , 在, 呈細絲狀。每條肌原纖維有明暗相間的橫紋, 而且明暗橫紋皆整齊地排列在同一水平上,所以整個肌纖維顯示出明暗相間的帶?!緦嶒炓?】作業(yè):1繪圖說明蟾蜍單層扁平上皮細胞在平鋪片上的形態(tài)。2繪圖說明蟾蜍疏松結締組織的纖維在平鋪片上的形態(tài)特征及其細胞形態(tài)。3繪圖說明骨骼肌的結構特點。4繪圖說明多極神經元的形態(tài)特征。補充知識:單毀髓 、雙毀髓 蛙的制備單毀髓只刺毀蛙的腦,保留完好的脊髓,就是脊蛙。雙毀髓刺毀蛙的腦和脊髓。 1左手握蛙,背部向上,用食指下壓其頭部前端,使頭前俯,中指

5、抵住其胸部,拇指按其背部, 使頭與脊柱相連處凸起。 右手持毀髓針自兩眼之間沿中線向后端觸劃,當觸到一凹陷處即枕骨后凹。2將毀髓針由凹陷處垂直刺入,再將針尖從枕骨大孔向前刺入顱腔,并在顱腔內攪動,搗毀腦組織。如針確在顱腔內,則可感到針觸及顱骨(圖 161)。3將針退回至枕骨大孔,然后針尖轉向后方與脊柱平行插入椎管,一邊伸入,一邊旋轉毀髓針以毀髓。 當蛙四肢僵直而后又松軟下垂時,即表明腦和脊髓完全破壞。如動物仍表現(xiàn)四肢肌肉緊張或活動自如,則必須重新毀髓。4拔出毀髓針,用一小干棉球將針孔堵住,以止其出血。蛙眼枕骨大孔圖:枕骨大孔的位置實驗二 坐骨神經腓腸肌標本的制備(必做)一、目的要求1學習搗毀蛙腦

6、和脊髓的方法。2熟悉制備蛙類坐骨神經腓腸肌標本的方法,二、實驗原理為后面的實驗打下基礎。蛙或兩棲類的一些基本生命活動及生理功能與溫血動物近似,而且其離體組織需要的生活條件非常簡單,易于控制和掌握。因此在生理學實驗中, 坐骨神經腓腸肌標本是研究神經肌肉生理最常用的對象,經常用來研究神經肌肉的興奮性、刺激與反應的規(guī)律、肌肉收縮的特點、興奮性的周期性變化等。三、實驗器材和藥品實驗對象:蟾蜍或蛙實驗器材:蛙類手術器械一套(金屬探針1 根,粗剪刀,尖頭鑷子、眼科鑷子各 1 把,玻璃分針 2 根),蛙板 1 塊,培養(yǎng)皿,滴管,廢物缸、鋅銅弓,絲線,棉花;任氏液。四、實驗步驟 (見課本)五、實驗要求與注意事

7、項 1熟悉蟾蜍手術器械的使用, 了解蟾蜍腿部的局部解剖及坐骨神經的走行。2避免損傷蟾蜍背部的腺體(尤其是眼后的大腺體),防止其分泌物濺入眼 內或污染標本。3勿剪破蟾蜍內臟,并及時清洗手及用過的器械;已剝去皮膚的組織應避 免接觸蟾蜍皮膚或其他不潔物;以防標本被污染。4游離神經、肌肉時不可過度牽拉,應避免用手指、金屬器械接觸或夾持 標本的神經肌肉部分,更不能用自來水沖洗標本。5制備過程中應經常向標本上滴任氏液,防止神經因干燥而失去正常興奮 性。標本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘,使標本興奮性穩(wěn)定。6移動制備好的標本時,先將游離的神經搭在腓腸肌上,再用雙手分別提 拿跟鍵和股骨斷端,防止神經受力過重。

8、7檢查標本的興奮性:用被任氏液浸濕的鋅銅弓接觸坐骨神經,如腓腸肌 迅速收縮,則表示標本的興奮性良好,可供有關神經肌肉生理實驗用。六、分析與思考 1通過制備坐骨神經 - 腓腸肌標本,你對生理學實驗有何感想?2損毀腦和脊髓后的蟾蜍有何表現(xiàn)?若破壞脊髓不徹底,蟾蜍的四肢會有 什么表現(xiàn)?為什么?3為什么在本實驗中應經常給標本滴加任氏液?4鋅銅弓為何能用來檢查標本的興奮性?若無鋅銅弓,能否用其他方法來 檢查標本的興奮性?七、注意事項 1制備標本過程中, 要不斷滴加任氏液, 以防標本干燥, 喪失正常生理活性。2已剝離皮膚的組織避免接觸皮膚毒液或其他不潔物,也不要用水沖洗,以 免影響組織機能。3分離神經時,

9、一定要用玻璃分針。不得用手指或金屬器械接觸或夾持標本 的神經肌肉部分,以免造成損傷。4分離神經時,一定要把周圍結締組織剝離于凈。5實驗要迅速,以免時間過長影響標本活性 ( 興奮性 ) 。八、作業(yè): 1. 制備蛙坐骨神經腓腸肌標本時,如何保持標本的機能正常?2. 鋅銅弓刺激檢測標本活性的原理是什么 ? 實驗三 反射弧的分析與反射時的測定(必做)一、實驗目的觀察某些脊髓反射, 學習測定反射時的方法, 分析反射弧組成部分的功能及其完整性與反射活動之間的關系。二、實驗原理在中樞神經系統(tǒng)參與下, 機體對刺激產生的規(guī)律性反應稱為反射。反射過程中生物信號經反射弧傳遞需要一定時間,從刺激開始至反射出現(xiàn)所需的時

10、間為反射時,即興奮通過反射弧而引起外周效應所需要的時間。反射時可通過簡單的方 法初步測定。同時, 反射只有在反射弧結構和功能完整的基礎上才能進行,若組 成反射弧的感受器、傳入神經、 神經中樞、 傳出神經和效應器五部分中的任何一 部分受到破壞,反射均不會發(fā)生。三、實驗器材和藥品 實驗對象:蟾蜍或蛙實驗器材: BL410 生物機能實驗系統(tǒng),蛙類手術器械一套,蛙板,玻璃 板,鐵支架,肌夾,雙凹夾,刺激電極,培養(yǎng)皿,滴管,線,干棉球,秒表;藥品:任氏液, 0.3 、 0.5 稀硫酸,食鹽結晶顆粒紙,普魯卡因四、實驗方法和步驟 1制備脊蟾蜍取蟾蜍一只,用紗布裹緊蟾蜍的上下肢和軀干,露出頭部。用剪刀開口的

11、一側伸入蟾蜍口裂根部,另一側置于背部, 齊鼓膜后緣剪去動物的頭部,保留下頜和脊髓,即成脊蟾蜍。用棉球作創(chuàng)口止血。2固定用肌夾固定蟾蜍下領,將其懸掛在鐵支架上。3儀器調試打開計算機,進入BL410 生物機能實驗系統(tǒng)操作界面,選擇輸入信號1 通道肌電信號。調整刺激參數(shù)為:波寬 1ms,強度 36V,頻率5070Hz,連續(xù)單刺激。4觀察項目 (1) 反射時測定: 將蟾蜍右下肢的趾尖浸入稀硫酸液中,同時開動秒表記錄 從浸入至肢體反射的時間。 反射發(fā)生后用清水反復洗去皮膚上的稀硫酸,用棉球 擦去清水。重復測定三次,求時間平均值,此值即為反射時。(2) 反射弧的分析:在右下踝關節(jié)上方作一環(huán)行皮膚切口,激左

12、右兩側趾尖,觀察兩側肢體各有何反應。將趾部皮膚剝去, 再用硫酸分別刺剪開左側大腿內側皮膚,在股二頭肌和半膜肌之間找出坐骨神經,游離 1cm后做雙結扎,并在兩結扎線中間剪斷神經,再用稀硫酸刺激該側腳趾,觀察 反應如何。啟動 BL410 生物機能實驗系統(tǒng)的電刺激器, 以重復電刺激坐骨神經中樞 端觀察同側和對側肢體的反應有何不同。用金屬探針破壞脊髓后,重復步驟,觀察反應。重復電刺激坐骨神經外周端,觀察同側反應。直接電刺激左側腓腸肌,觀察反應如何。五、實驗要求與注意事項 1制備脊蛙時,顱腦離斷的部位要適當,太高因保留部分腦組織而可能出 現(xiàn)自主活動,太低又可能影響反射的產生。2剝掉趾部皮膚時,一定注意趾

13、尖不要殘留皮膚,否則刺激仍能引起反射。3每次用稀硫酸刺激時,浸入部位應限于趾尖,浸泡范圍也應一致,切勿 浸入太多;而且浸入時間最長不超過 10 秒。4每次用硫酸刺激后,均應迅速用水洗去蛙趾皮膚上的硫酸,以免皮膚受 傷。洗后應沾干水漬,防止再刺激時硫酸被稀釋。六、分析與思考 1記錄:脊蛙的反射時序刺激刺激項目1 結果( s)3 平均值1 0.3%硫酸部位屈反射2 (s)右后肢最長趾2 0.5%硫酸右后肢最長趾屈反射3 0.5%硫酸蛙背部搔趴反射4 0.5%硫酸蛙腹部搔趴反射5 1%硫酸蛙背部搔趴反射2. 剝凈長趾上的皮膚后用硫酸刺激去皮的長趾反射現(xiàn)象?(有沒有)3. 分離出坐骨神經后, 在細棉條

14、上滴普魯卡因溶液后用硫酸刺激有皮膚的趾( 有沒有 ) 反射現(xiàn)象?4取浸有硫酸溶液的濾紙片貼于蛙的腹部(有沒有)擦或抓反射的現(xiàn)象?結論:6思考題:1反射弧由哪幾部分組成?分別起什么作用?2反射的生理意義及種類有哪些?3反射時的長短與哪些體內外因素有關?4右側坐骨神經被剪斷后, 動物的反射活動發(fā)生了什么變化 ? 這是損傷了反 射弧的哪一部分 ? ? 5剝去趾關節(jié)以下皮膚后,不再出現(xiàn)原有的反射活動,為什么實驗四 蛙心起搏點的觀察與分析(選做)一、目的要求 1學習暴露蛙心臟的方法,熟悉蛙心臟結構。2觀察心臟各部分活動情況及搏動的先后次序。3通過結扎阻斷靜脈竇與心房之間、心房與心室之間興奮的傳導,觀察分

15、析 蛙心節(jié)律性活動的起源,以及正常心臟的傳導系統(tǒng)在心搏活動中的作用。二、實驗原理 心臟活動具有自律性,但各部分的自律性高低不同。竇房結的自律性最高。其每次興奮依次激動心房、心室,引起心臟各部分的順序活動。正常生理情況下竇房結為心臟的正常起搏點,其他部位的自律細胞稱為潛在起搏點,當竇房結的興奮傳導受阻時, 潛在起搏點可取代竇房結引發(fā)心房或心室 活動。兩棲類動物的心臟起搏點稱靜脈竇。三、實驗器材和藥品 實驗對象:蟾蜍或蛙實驗器材: 蛙類手術器械一套,蛙板, 玻璃板,蛙腿夾,滴管, 細線,秒表;任氏液。還需盛有約 40溫水的小試管,盛0冰水的小試管。四、實驗方法和步驟 1暴露心臟 (1) 將雙毀髓蛙

16、背位置蠟盤中,展開四肢,用大頭針于腕部釘入,以將蛙 固定在蠟盤中。 為什么用雙毀髓蛙進行心搏起源的分析?(2) 左手持鑷提起胸骨后方腹部皮膚,右手持剪剪開一小口,然后將剪刀 由切口處伸入皮下,向左右兩側鎖骨的外側方向剪開皮膚,并向頭端掀開皮膚。(3) 再用鑷子提起胸骨后方的腹肌,用金冠剪在腹肌上剪一小口后,沿皮 膚切口方向剪開胸壁,剪時剪刀尖緊貼胸壁,以免損傷內臟和血管,剪斷左 右烏喙骨和鎖骨,剪去胸壁, 使創(chuàng)口成 1 個倒三角形, 此時可見到心臟在心腔內 搏動。 (4) 左手持眼科鑷提起半透明圍心膜, 右手用眼科剪剪開圍心膜, 暴露心臟。實驗中應不時用任氏液保持心臟濕潤。為什么?2觀察心蛙心

17、結構 如圖 162,從心臟腹面識別靜脈竇、心房、心室,然后用玻璃分針將心尖翻向頭端,再從背面辨認。 可見心房與靜脈竇之間有一半月形白線,即竇房溝。用眼科鑷子在主動脈干下穿線備用。3觀察心搏過程觀察靜脈竇、心房和心室收縮的順序,并用秒表記錄心搏頻率。 注意心室收縮時容積和顏色的變化。4不同溫度刺激蛙心各部位用盛有約 40溫水的小試管底部分別接觸心房、心室和靜脈竇 1 min,重復3 次并記錄每次溫度刺激時心臟各部位的搏動頻率。換用盛冰水的小試管,重復上述試驗并記錄。小試管底部接觸所刺激部位時,不能接觸到心臟其他部位, 以免影響實驗結果。根據(jù)實驗結果,分析心臟何部位的搏動為心搏的起源。5斯氏第一結

18、扎:用玻璃分針將心尖翻向頭端, 將預先穿入的線沿竇房溝進行結扎,阻斷靜脈竇和心房之間的興奮傳導(斯氏第一結扎),觀察心房、靜脈竇活動情況。待心房、心室恢復跳動后,分別計數(shù)靜脈竇、心房、心室跳動頻率。6斯氏第二結扎:在心房、心室的交界處(房室溝)做斯氏第二結扎,觀察心房、心室活動變 化情況。待心室恢復跳動后, 分別計數(shù)靜脈竇、 心房、心室跳動的頻率, 填入表格。實驗條件表心臟各部分活動頻率的觀察心室(次 /min )靜脈竇(次 /min )心房(次 /min )結扎前狀態(tài) 斯氏第一結扎 斯氏第二結扎五、實驗要求和注意事項 1剪胸骨和胸壁時,伸入胸腔的剪刀要緊貼胸壁,以免損傷心臟和血管。2倒三角形

19、創(chuàng)口不要太大,盡量不要暴露肺和肝臟。3提起和剪開心包膜時要細心,避免損傷心臟。4斯氏第一結扎后,若心房和心室遲遲不能恢復搏動,可做斯氏第二結扎 加速其恢復。而每次結扎不宜扎得過緊過死,以能阻斷興奮傳導為宜。 5 實驗中經常滴加任氏液,使心臟保持濕潤。六、分析與思考 1為什么用雙毀髓蛙進行心搏起源的分析? 2 正常情況下,靜脈竇、心房、心室的節(jié)律性有何不同 ?為什么 ? 3比較第一、第二斯氏結扎后心房、 心室停搏時間的長短, 并分析其原因。 4 第一斯氏結扎后和第二斯氏結扎后的心室搏動頻率是否相同?為什么?實驗五 蛙類腸系膜微循環(huán)的觀察(必做)一、實驗目的通過觀察蟾蜍腸系膜中不同血管內的血流狀況

20、,構和血流的特點。二、實驗原理了解微循環(huán)各組成部分的結微循環(huán)是指微動脈經毛細血管網到微靜脈之間的血液循環(huán),是血液與組織液直接進行物質交換的場所。微循環(huán)由微動脈、后微動脈、毛細血管前括約肌、真毛細血管網、通血毛細血管、動- 靜脈吻合支和微靜脈等七部分組成。在組織較薄的部位,借助于顯微鏡很容易觀察到其中血液的流動情況:小動脈、微動脈管壁厚,內徑小,血流速度快,有軸流現(xiàn)象(血細胞在血管中 央流動),血流方向是從主干向分支;小靜脈、微靜脈管壁薄,內徑大,血流速度慢,無軸流現(xiàn)象,血流方向是從分 支向主干匯合;毛細血管因受管徑限制,三、實驗器材和藥品僅允許血細胞單個通過,故在顯微鏡下能清晰地看到 血細胞流

21、動的情況。實驗對象:蟾蜍或蛙(腸系膜、舌及后肢足蹼等部位的組織較薄,適于用來 制備微循環(huán)觀察標本)實驗器材:蛙類手術器械一套,蛙板,玻璃板,橡皮泥,大頭針,顯微鏡,1ml 注射器,滴管; 20 氨基甲酸乙酯,任氏液。四、實驗方法和步驟 1蛙腸系膜標本的制備 (1) 取蛙 1 只,稱重后于其皮下淋巴竇注人20%氨基甲酸乙酯 (2 3mg/g 體重) ,約 1015min,動物即進入麻醉狀態(tài)。(2) 將已麻醉的蛙背位固定于蛙板上,使其身體左側緊靠蛙板上的小孔。用鑷子輕輕提起左側腹壁,不要將內臟也夾起。再用剪刀在腹壁上剪一長約1cm的縱向切口。輕輕拉出小腸拌,將腸系膜展開過蛙板上的小孔,并用大頭針固

22、定在蛙板上。 小腸拌不能繃得太緊,以免拉破腸系膜或阻斷血流,另需要適量任氏液 潤濕腸系膜,以免干燥,影響血液循環(huán)。2若用蛙舌或足蹼作觀察標本,則用大頭針將麻醉的蛙固定在蛙板上,使其鼻端離板孔 0.5 cm ,拖出舌頭,拉緊過孔,并用大頭針將舌緣固定在蛙板孔 的周緣;或將蛙兩足趾展開,使趾蹼過孔,用大頭針固定。3觀察 將標本置低倍鏡下觀察??梢娪性S多縱橫交錯粗細不等的血管。根據(jù)血管 的粗細和分支情況、血流方向和血流特征,可區(qū)別小動脈、小靜脈和毛細血管。(1) 動脈血流的觀察在鏡下移動標本直到發(fā)現(xiàn)一段較粗血管內的血液流向 2 分支血管,這段血管就是小動脈。注意觀察管中血流速度快,不均勻,有搏動,有

23、軸流現(xiàn)象(血細胞在血管中央流動)。(2) 靜脈血流的觀察 移動標本真到發(fā)現(xiàn)血流由 2支血管匯人 1 支血管,這 2 個分支血管就是小靜脈, 觀察管內血流有無搏動和軸流現(xiàn)象,比較動脈和靜脈內血流的速度。(3) 毛細血管血流的觀察尋找管徑最小、透明、近乎無色的血管即毛細血管。在高倍鏡下可見一串串紅細胞以單個排列形式在管內移動,或紅細胞斷斷續(xù)續(xù)地單個移動。 血流速度如何?有無搏動? 三類血管的形態(tài)和血流特點與其生理功能有何聯(lián)系?4血管對藥物的反應(1) 滴加幾滴 0.01%去甲腎上腺素于腸系膜上,持續(xù)觀察各血管管徑及血流 的變化。出現(xiàn)變化后立即用任氏液沖洗。(2) 待血流恢復正常后, 再滴加幾滴 0

24、.01 組織胺于腸系膜上, 觀察血管及 血流的變化。若用蛙蹼作為觀察標本,則難以觀蔡血管對藥物的反應。五、作業(yè):比較動脈、靜脈、毛細血管壁的結構特點有哪些不同?血管名稱動脈靜脈毛細血管血管簡圖管壁特點血流速度分布部位生理功能六、實驗要求和注意事項 1掌握小動脈、小靜脈和毛細血管內的血流特點。2手術過程中應盡量避免出血。3用大頭針固定時,不能將腸系膜繃得太緊,以免損傷腸系膜或妨礙血流。4為防止腸系膜干燥,應經常滴加任氏液保持濕潤。七、分析與思考 1何謂微循環(huán)?2微循環(huán)是由哪些部分組成的?其功能如何?3小動脈和小靜脈的血流方式有何區(qū)別?實驗六血涂片的觀察和ABO血型的鑒定(必做)一、實驗目的1學習

25、人血涂片的制備,觀察紅細胞、白細胞和血小板的形態(tài)結構。2學習 ABO血型的鑒定方法,觀察紅細胞的凝集現(xiàn)象。3掌握 ABO血型鑒定的原理,認識血型鑒定在臨床輸血中的重要性。二、實驗原理血型是血細胞膜上特異凝集原的類型。在ABO血型系統(tǒng)中,根據(jù)紅細胞膜上所含凝集原( A、B凝集原)的種類和有無,將血型分為 A 型、B 型、 AB型、 O型四種類型。在人類血清中含有與上述凝集原相對應的天然凝集素(抗 A、抗 B凝集素)。當凝集原與其相對應的凝集素相遇時將發(fā)生紅細胞凝集反應,即紅細胞彼此聚集在一起,成為肉眼可見的細胞團。因此,將受試者的紅細胞分別加入已知的標準 A型血清(含抗 B凝集素)與標準 B 型

26、血清(含抗 A 凝集素)中,觀察有無凝集現(xiàn)象,即可判定紅細胞膜上有無 者的血型。三、實驗器材和藥品 實驗對象:人A 或(和) B凝集原,從而鑒定受試實驗器材:消毒注射器,一次性采血針,玻棒,雙凹玻片,試管,顯微鏡,離心機,棉球;標準 A型和 B型血清, 75 酒精, 2 碘酒,生理鹽水。四、實驗方法和步驟 1血細胞自制涂片(1)采血:用酒精棉球將手指消毒、采血。(2)涂片:沾 1 滴血于一干凈載玻片的右端,另用一載玻片作為推片之用,將此推片的末端斜置于第一塊載玻片上的血滴的左緣,成30 -40 角度。將推片稍向后退,使之與血滴接觸,這樣,血液即向推片末端的兩邊伸展,并在兩載 玻片之間的斜角中充

27、滿。 此時把推片向前推動, 血液隨推片而行, 就成了血涂片。(3)染色:用瑞氏姬姆薩混合染色液染色 續(xù)染 3 分鐘,沖洗待干,觀察。5 分鐘后,滴加蒸餾水稀釋,繼(4)觀察內容 紅細胞: 數(shù)量多,小而圓 ,無胞核,圓盤狀 , 淺紅色,中央部分著色比周圍淺。白細胞: 中性粒細胞:數(shù)目多,細胞球形,胞質內含細小而且分布均勻的淺紫 紅色的中性顆粒,胞核紫色,一般胞核分 2-5 葉,多為 3 葉。嗜酸性粒細胞:數(shù)目較少,胞質中嗜酸性顆粒被染成紅色,核紫色。嗜堿性粒細胞: 數(shù)目較少,胞質和核均被染成紫色, 胞核 S 形或不規(guī)則形。淋巴細胞:數(shù)目多,和紅細胞差不多大,或稍大,胞核圓形占細胞體積的 大部分,

28、胞質少,被染成天藍色。單核細胞:形體最大,胞核呈腎形或馬蹄形,胞質淺灰藍色。血小板: 不規(guī)則小體,分布在紅細胞之間,血小板周圍部分為淺藍色。2ABO血型鑒定 (玻片法)1)取一干凈載玻片,用玻璃鉛筆在玻片左上角寫A,右上角寫 B,中間寫受檢者姓名;在 A 側加一滴 A 型標準血清, B 側加一滴 B 型標準血清。(注明 A、B)2)用 2 碘酒、 75 酒精棉球依次消毒耳垂或指端皮膚,以消毒采血針刺 破皮膚。 棄去第一滴血, 然后用潔凈玻棒的一端蘸血并與 A型血清相混勻, 再用 玻棒另一端蘸血與 B型血清相混勻。3)室溫放置 5-10 分鐘,觀察是否有凝集現(xiàn)象。(根據(jù)凝集現(xiàn)象謹慎判定血型)五、

29、實驗要求和注意事項1用牙簽將血液與標準血清混勻時,謹防兩種血清接觸。2最好使用一次性采血針,一人一針,不能混用。3肉眼看不清凝集現(xiàn)象時,應在顯微鏡下觀察。4制備紅細胞懸液不宜太濃,否則易發(fā)生紅細胞疊連而聚集。六、分析與思考 1根據(jù)血涂片觀察結果,分別描述紅細胞、白細胞和血小板的形態(tài)結構。2試述 ABO血型分型的依據(jù)及其與輸血的關系。3你的血型是何型,可給哪些血型的人輸血?你可接受哪些血型的血,是 大量還是少量?為什么?4交叉配血試驗有什么重要意義?5紅細胞凝集現(xiàn)象與紅細胞疊連、血液凝固有何本質的區(qū)別?6哪些方面可影響本實驗的準確性?7某同學的血液跟A 型標準血清發(fā)生凝集反應,但其血清遇A 型血

30、卻不發(fā)生凝集反應。問:該同學的血型是哪一種?8已知甲、乙、丙、丁四人中,只有甲、乙的血與 B型標準血清發(fā)生凝集反應,又知在緊急情況下,甲只能接受丁的血。問:甲、乙、丙、丁各是什么血型?9有一對夫婦,父親的血型為A 型,母親的血型為B 型,其兒子卻是 O型,請問這個兒子是不是這對夫婦所生的?說明理由。實驗七 視野測定(必做)一、實驗目的學習利用視野計測定視野的方法,測定正常人的白、紅、黃、綠各色視野。二、實驗原理單眼固定地注視前方一點時,該眼所能看到的范圍,稱為 視野 。由于受面部結構和各類感光細胞在視網膜中的分布情況的影響,在同一光照條件下, 正常人 的視野鼻側和上方視野較小,顳側與下方視野較

31、大。在相同亮度下,各種顏色的 視野也不一致。白色視野最大,黃色、藍色次之,紅色再次之、綠色視野最小。三、實驗器材和藥品 實驗對象:人 實驗器材:視野計,各色(白紅黃綠)視標,視野圖紙,彩色鉛筆。四、實驗方法和步驟 1熟悉視野計的構造:視野計是一個安裝在支架上的半圓形的金屬弧,可 繞水平軸做 360o 旋轉。在弧上標有角度(即半圓弧形各點與圓心連線同半圓弧 中心點與圓心連線的夾角) ,半圓弧中心的后部有標志半圓弧旋轉角度的指針和 分度盤,在半圓弧的對面支架上設有下頜托,圓心處有眼眶托。2測試準備將視野計放在光線充足的桌臺上,受試者背光而坐,把下頜放 在托頜架上,眼眶下緣靠在眼眶托上。調整托頜架高

32、度,使眼的位置處于圓心,并恰好與弧架的中心點位于同一水平面上。住,光線從受試者后上方均勻射到視野計。3測試步驟單眼凝視圓弧中心的小鏡, 另一眼遮(1) 先將弧架擺在水平位置。 用手或遮眼板遮住一眼, 而另一眼注視弧架的 中心點。 檢查者持白色視標, 沿弧架內面從外周邊向中央慢慢移動,隨時詢問受 檢者是否看見了白色視標。 當回答看到時記下度數(shù); 再將白色視標從中央向外周 邊移動, 當看不到時再記下度數(shù)。 求兩次度數(shù)的平均值, 并在視野圖紙相應的方 位和度數(shù)上點出。用同法,測對側白色視標視野界限,記在視野圖紙相應點上。(2) 將弧架轉動 45o,重復上述操作,共4 次,得出 8 個點。將視野圖紙上

33、的這 8 個點依次連接起來,就得出大致的白色視野圖。(3) 按同法,測出紅、綠、藍各色視野,并用色筆繪出輪廓。(4) 依同法,測定另一眼的視野。五、實驗要求與注意事項 1 檢查時一般不戴眼鏡,否則會因鏡框的遮擋而影響視野。2在測定過程中,受試者的被測眼始終凝視弧架的中心點,眼球不能任意 移動,只能用“ 余光” 觀察視標。3測試眼必須與弧架中心點保持同一水平。4在實驗過程中受試者可略作休息,避免眼睛疲勞而影響實驗結果。5測試時,視標移動速度要慢,如有時間可多測幾個點,這樣所得的視野 圖就更精確。實驗八 盲點測定(必做)一、實驗目的: 1學習盲點測定的方法 2理解盲點形成的原因。二、實驗原理: 盲

34、點是視 N離開視網膜的部位,此處無感光 Cell 不能感光。三、實驗器材: 白紙,鉛筆,黑色視標,尺子,遮眼板。四、實驗步驟1將白紙貼在墻上,受試者立于紙前50cm處,用遮眼板遮住一眼,在白紙上與另一眼相平的地方用鉛筆劃一“+” 字記號。令受試者注視“+” 字。實驗者將視標由“+” 字中心向被測眼顳側緩緩移動。此時,受試者被測眼直視前方,不能隨視標的移動而移動。 當受試者恰好看不見視標時, 在白紙上標記視標位置。然后將視標繼續(xù)向顳側緩緩移動,直至又看見視標時記下其位置。由所記兩點連線之中心點起, 沿著各個方向向外移動視標, 找出并記錄各方向視標剛能被看到的各點,將其依次相連,即得一個橢圓形的盲

35、點投射區(qū)。2根據(jù)相似三角形各對應邊成正比定理,盲點直徑。六、分析與思考可計算出盲點與中央凹的距離及 1 何謂視野?為什么單眼視野的形狀是不規(guī)則的圓形?2為什么不同顏色的視標測出的視野范圍不同?3人雙眼同色視野是否對稱?4試分析視網膜、視神經傳導通路、視覺中功能發(fā)生障礙時對視野的影響?5在我們日常注視物體時,為什么沒有感覺到生理性盲點存在?6當盲點范圍發(fā)生變化時,我們應注意什么問題?實驗九 破壞動物一側迷路的效應(選做)一、實驗目的: 觀察迷路在調節(jié)肌張力,維持機體姿勢中的作用 二、實驗原理 內耳迷路由三部分組成:耳蝸、前庭(橢圓囊、球囊)和三個半規(guī)管,后兩 部分合稱為前庭器官,前庭器官是人體對

36、自身運動狀態(tài)和頭在空間位置的感受 器,興奮時能反射性調節(jié)肌緊張,維持機體的平衡與姿勢。一側迷路功能喪失, 可使肌緊張協(xié)調發(fā)生障礙, 失去維持正常姿勢與平衡能 力,由于迷路功能消失所引起的眼外肌肌緊張障礙還會發(fā)生眼球震顫。三、實驗器材和藥品 實驗對象:豚鼠、蟾蜍或蛙 實驗器材:外科手術器械一套、滴管、棉球、氯仿、硼酸海棉、乙醚、探針、水盆、紗布。四、實驗步驟1. 消除豚鼠一側迷路功能:先觀察豚鼠活動情況,然后將豚鼠側臥,拽住上側耳廓,用滴管向外耳道深入滴入氯仿 2-3 滴,握住豚鼠片刻,防止亂動,以使氯仿通過滲透作用于半規(guī)管,消除其感受功能。約10 分鐘后,用手握住動物后肢,觀察動物頭部位置,

37、頸部、軀干兩側及四肢的肌緊張度, 眼球震顫等變化,注意變化是發(fā)生在迷路功能健側還是功能消失一側。向消除迷路功能一側作旋轉運動或滾動。2. 破壞蟾蜍一側迷路并觀察其效應:選用水中游泳姿勢正常的蟾蜍,乙醚麻醉后,用紗布包住蟾蜍的軀干及四肢,腹部部向上,令其張口,用手術刀在顱衣口膜粘膜橫切一 刀,分開粘膜,可見“ 十” 字形的副蝶骨。副蝶骨左右兩側的橫突,即迷路所在部位。將一側橫突骨質削去一部分,可見粟 米大小的小白丘,此即為 迷路 ,用探針刺入 小白丘深約 2mm,轉動針尖,破壞迷路。任其自由活動時, 可見動物(后來,我改進了實驗操作 ,不再用手術刀在顱衣口膜粘膜上切一刀 ,將一側橫突骨質削去刮干

38、凈 , 等見到粟米大小的小白丘 (即迷路 )時才用探針刺入 , 破壞迷路。那樣做,蛙血流得很多,很可怕,放入玻璃缸中觀察蛙的游泳姿勢時效果也不理想。現(xiàn)在我只憑經驗知道迷路的準確位置,直接用探針刺入,深約 2mm ,轉動針尖,破壞迷路。這樣做,幾乎不怎么見流血,操作簡便,效果也好?。┢茐拿月窋?shù)分鐘后, 觀察蟾蜍靜止和爬行的姿勢以及游泳的姿勢??梢婓蛤茴^部、軀干均歪向損壞迷路的這一側。做完迷路一側損壞實驗之后, 若要觀察另一側迷路的位置和形態(tài),可用手術刀在顱衣口膜粘膜一刀 ,將那一側的橫突骨質削去刮干凈 ,見到粟米大小的小白丘,就是迷路。)五、注意事項1選擇健康,對稱運動好,兩眼無殘疾的動物。2破

39、壞或麻醉迷路前應認真觀察動物的姿勢、狀態(tài)及運動情況。3氯仿是一種高脂溶性全身麻醉劑,不可滴入過多,以免造成動物死亡。4蟾蜍顱骨板薄,損傷迷路時部位要準確,用力適度,勿損傷腦組織。六、思考 1. 何為前庭器官,由幾部分組成?它們的生理功能是什么?2. 破壞動物一側迷路后,頭及軀干狀態(tài)有那些變化?為什么?實驗十 心音聽診(必做)一、實驗目的 初步掌握心音聽診方法。正常心音的特點及其產生原理,為臨床心音聽診 奠定基礎。二、實驗原理 心臟泵血過程中, 由于瓣膜關閉和血流沖擊等因素而產生心音。將聽診器置于胸前壁可聽到兩次音調不同的心音,分別稱為第一心音 (S1)和第二心音(S2)S1 標志著心縮期開始,

40、 S2 標志著心舒期開始。 4 套瓣膜各有特定的聽診部位,當某心瓣膜病變而產生雜音時,則在該瓣膜聽診區(qū)聽得雜音最清楚。三、實驗器材: 聽診器實驗對象:人四、實驗步驟1受試者解開上衣,裸露前胸。靜坐或臥坐。檢查者坐其對面或站在受試者 臥床的右側。2以右子拇、食、中指輕持聽診器頭,觀察(或用手觸診)受試者心尖搏動 處將聽診器頭緊貼此都位,聽取心音,并仔細區(qū)分 S1 或 S2。3在左房室瓣聽診區(qū)聽取心音后,再按主動脈瓣、肺動脈瓣主及右房室瓣聽 診區(qū)的順序聽心音。4套瓣膜聽診區(qū)如下: 左房室瓣聽診區(qū): 左鎖骨中線第五肋間稍內側部 (心 尖部);右房室瓣聽診區(qū):第四肋間胸骨上或右緣處;主動脈瓣聽診區(qū):第二肋間胸骨右緣處;肺動脈瓣聽診區(qū)5S1 和 S2的鑒別法:第二肋間胸骨左緣處。(l)按心音的性質: S1 音調低,持續(xù)時間長; S2 音調高,持續(xù)時間較短。(2)按兩次心音的間隔時間:間隔時間較長。S1 與 S2 間隔時間較短, S2 與下一次 S1

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