藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查[1]

1、第三章 藥物的雜質(zhì)檢查基本要求第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法第三節(jié) 特殊雜質(zhì)的檢查方法返回主目錄第一節(jié) 概述練習(xí)與思考藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1基本要求 一、掌握一般雜質(zhì)檢查的原理、方法和計(jì)算。 二、熟悉特殊雜質(zhì)檢查的方法和原理。 三、了解熱分析在藥物分析中的應(yīng)用。返 回藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1一、藥物的純度要求1藥物純度的概念：藥物的純度是指藥物的純潔程度。2. 藥物純度的要求是不斷提高： 例如：度冷丁1948年收入BP，1970年經(jīng)GC分離鑒定出兩種 無(wú)效異構(gòu)體（）和（），有時(shí)高達(dá)20%30%。 再如：ASA中除了SA外，還存在乙酰水酸酐、乙酰水楊酰水 楊酸等SA的衍生物，具有致敏作用。 第一節(jié)

2、 概述藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 3藥物純度的評(píng)價(jià)： 應(yīng)把藥物的性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定等 作為一個(gè)有聯(lián)系的整體來(lái)評(píng)價(jià)藥物的純度。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1二、雜質(zhì)的來(lái)源與種類 了解藥物中的雜質(zhì)的來(lái)源和種類，可制定出檢查的項(xiàng)目和方法雜質(zhì)的概念 藥物中存在的無(wú)治療作用，影響藥物的療效和穩(wěn) 定性，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，稱為藥物的雜質(zhì)。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 （一）雜質(zhì)的來(lái)源 有兩個(gè)方面：一是在生產(chǎn)過(guò)程中引入；二是在貯藏過(guò)程中引入。 1. 生產(chǎn)過(guò)程中引入的雜質(zhì) 主要指藥物在合成過(guò)程中，未反應(yīng)的原料、中間體和副產(chǎn)物例如：藥用NaCl的Br-、I-、SO42-、K+、Ca2+、Mg2+、Fe

3、3+ ASA中的SA；地西泮中的去甲安定；嗎啡中的罌粟堿藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1再如制劑中生成的雜質(zhì)：ASA片、栓劑中SA的檢查；鹽酸普魯 卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸和二乙氨 基乙醇的檢查。 生產(chǎn)過(guò)程中殘留有機(jī)溶劑、酸性或堿性雜質(zhì)的檢查。 藥物中無(wú)效、低效異構(gòu)體或晶型的檢查 例如：無(wú)味氯霉素存在A、B晶型，其中B為有效，A為低效。 苯甲咪唑有A，B，C三種晶型；20%；40%60%；90% 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 2.貯藏過(guò)程引入的雜質(zhì) 主要指外界條件的變化或微生物的作用可能發(fā)生的水解、氧化、 異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)化、聚合等變化，而產(chǎn)生的有關(guān)雜質(zhì)。 如：ASA水解生成SA和醋酸；阿托品水解生成莨菪醇

4、和莨菪酸； 麻醉乙醚氧化為醛和有毒的過(guò)氧化物。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1（二）雜質(zhì)的種類與分類 按雜質(zhì)的來(lái)源分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)；按性質(zhì)可分為信 號(hào)雜質(zhì)和有害雜質(zhì)。一般雜質(zhì)是指在自然界中分布較廣泛，在 多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。特殊雜質(zhì)是指 在個(gè)別藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。信號(hào)雜質(zhì)一 般無(wú)害，但其含量的多少可以反映出藥物的純度水平，氯化物、 硫酸鹽等就屬于信號(hào)雜質(zhì)。有害雜質(zhì)，如重金屬、砷鹽、氰化 物等，對(duì)人體有害，在藥品標(biāo)準(zhǔn)中必須嚴(yán)格控制。 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1三、雜質(zhì)的限量檢查 1雜質(zhì)限量的概念 藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，叫做雜質(zhì)限量。通常 用百分之幾或百萬(wàn)

5、分之幾（ppm）來(lái)表示。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 2雜質(zhì)限量的計(jì)算 雜質(zhì)限量的計(jì)算公式： 雜質(zhì)限量 = 雜質(zhì)的最大允許量供試品的量100% = 標(biāo)準(zhǔn)液濃度體積供試品的量100% L（%） = CV/S100% 例1對(duì)乙?；又械穆然锏臋z查： 已知：S = 2.0g25/100；C = 10g/ml；V = 5.0ml 求： L = ？ 解： L = CV/S100% = 105.0/2.010625/100100% = 0.01% 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 例2葡萄糖中重金屬的檢查： 已知：S = 4.0g；C = 10g/ml；L = 510-6 求： V = ？ 解：V = LS / C

6、 = 510-64.0/1010-6 = 2.0(ml) 例3葡萄糖中砷鹽的檢查： 已知：V = 2.0ml；C = 1g/ml；L = 0.0004% 求： S = ？ 解： S = CV / L = 110-62.0/410-6 = 0.5( g )藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 例4磷酸可待因中嗎啡的檢查： 已知：V = 5.0ml；C = 0.02 mg/ml；S = 0.1g 求： L = ？ 解： L = CV / S = 5.00.02/0.11000 100% = 0.1% 注意點(diǎn) 單位一致 稀釋倍數(shù) 表示方法（%，mmp）返 回藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法 一

7、、氯化物的檢查 1原理：是利用氯化物在硝酸性溶液中與硝酸銀試液作用， 生成氯化銀的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶 液在相同條件下生成的氯化銀混濁液比較，以判斷 供試品中氯化物是否超過(guò)限量。 Cl- + Ag+ AgCl藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 2條件： Cl- 0.05mg0.08mg/50ml, 即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn) 氯化鈉溶液5ml8ml。 酸度 稀硝酸10ml/50ml。 溫度 3040 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 3干擾的排除 （1）供試品液混濁：可用含硝酸的蒸餾水洗凈氯紙中氯化物 后過(guò)濾來(lái)消除混濁對(duì)氯化物檢查的干擾。 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 （2）供試品有色： 可采用內(nèi)消色法，按中國(guó)藥典附

8、錄規(guī)定的方法處理。供試品+ AgNO3放置10min澄清溶液+標(biāo)準(zhǔn)NaCl+水對(duì)照溶液供試品+ AgNO3+水供試品溶液暗處放置5min后比較藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1。二、硫酸鹽檢查法 1原理 是利用SO42-在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇試液作用， 生成硫酸鋇的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液 在相同條件下生成的硫酸鋇渾濁液比較，以判斷供試 品中硫酸鹽是否超過(guò)限量。 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 2條件： SO42- 0.1mg0.5mg/50ml, 即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn) 硫酸鉀溶液15ml。 酸 度 稀鹽酸2ml/50ml。 3干擾的排除 供試品有色：可采用內(nèi)消色法。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 三、鐵鹽檢查

9、法 （一）硫氰酸鹽法 1原理 Fe3+ + 6SCN- Fe(SCN)6-3- 紅色 2條件：Fe3+ 0.01mg0.05mg/50ml, 即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鐵 溶液15ml。 酸 度 稀鹽酸4ml/50ml。 HCl藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 3干擾的排除 （1） 當(dāng)有Fe2+存在時(shí)，加氧化劑過(guò)硫酸銨氧化Fe2+成Fe3+。 （2）當(dāng)供試液管與對(duì)照溶液管色調(diào)不一致，或所呈硫氰酸鐵的 顏色較淺不便比較時(shí)，可分別移入分液漏斗中，加正丁醇 或異戊醇提取，分別取提取液比色。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 (二）巰基醋酸法 1. 原理 巰基醋酸還原Fe3+為Fe2+，在氨堿性試液中與Fe 2 + 作用生成紅色配位

10、離子。 2Fe3+ + 2HSCH2COOH 2Fe2+ + SCH2COOH + 2H+ SCH2COOH Fe2+ + 2HSCH2COOH Fe(SCH2COOH)2 + H+ Fe(SCH2COOH)2 Fe(SCH2COOH)2 2- + 2H2O 2OH-藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 2. 說(shuō)明 在加巰基醋酸溶液前，先加枸櫞酸溶液，使其與鐵離 形成配位離子，以免在氨堿性溶液中產(chǎn)生氫氧化鐵沉 淀。（此法靈敏度比較高，但試劑較貴）藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1四、重金屬檢查法 重金屬是指在實(shí)驗(yàn)室條件下與S2-作用顯色的金屬雜 質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等，由于藥品 生產(chǎn)過(guò)程中遇到鉛的機(jī)

11、會(huì)比較多，鉛在體內(nèi)友易積蓄中 毒，故檢查時(shí)以鉛作為代表。 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1中國(guó)藥典（2000年版）重金屬的檢查法一共收載了四種方法 第一法為硫代乙酰胺法；第二法是將供試品在500600在500熾灼破壞后，再按第一法檢查；第三法是檢查能溶入堿溶液，而不溶于酸溶液的藥物，在堿性條件下用硫化鈉作顯色劑；第四法為微孔濾膜法，比較供試溶液和對(duì)照溶液鉛斑的顏色，來(lái)判斷供試品種的重金屬是否超過(guò)限量。重點(diǎn)討論第一法。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 1原理 CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 + H2S 合格 H2S + Pb2+ PbS + 2H+ 2條件： Pb2+10g20g/27ml,相當(dāng)

12、于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液12ml。 酸 度 pH 3.03.5. 合格 pH3.5藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查13干擾的排除 (1) 供試品有色：可采用外消色法消除干擾。 (2) 供試品有微量Fe3+:在弱酸性溶液中氧化硫化氫析 出硫，產(chǎn)生混濁影響比色，可 加Vc或鹽酸羥胺使Fe3+氧化成 Fe2+離子再檢查。 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1五、砷鹽檢查法 中國(guó)藥典采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC）檢查藥物中的微量的砷鹽。 （一）古蔡法Gutzeit) (BP也采用此法） 1. 原理 As3+ + 3Zn + 3H+ 3Zn+ +AsH3 AsO33- + 3Zn + 9H+ 3Zn+ + 3H2O

13、 + AsH3 AsO43- + 4Zn + 11H+ 4Zn+ + 4H2O + AsH3 AsH3 + 3HgBr2 3HBr + As(HgBr)3 (棕色) 2As(HgBr)3 + AsH3 3 AsH(HgBr)2 (黃色) As(HgBr)3 + AsH3 3HBr + As2Hg3 (棕黑色)藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 2. 裝置與試劑作用 (1) 驗(yàn)砷儀 砷化氫發(fā)生瓶;中空磨口塞;導(dǎo)氣管 (2) 試劑的作用 合格 KI-SnCl2的作用：交替還原作用；首先將AsO43-還 原成AsO33-，生成的碘再被還原成碘離子。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 AsO43- + 2I- +2H+

14、AsO33- + I2 + H2O AsO43- + Sn2+ + 2H+ AsO33- + Sn4+ H2O I2 + Sn2+ 2I- + Sn4+ 4I- + Zn2+ ZnI42-藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 Zn粒與氯化亞錫作用，在其面上形成Zn-Sn齊，起 去極化作用。 Pb(AC)2棉的作用是消除供試品可能含有的少量的硫 化物。 S2- + 2H+ H2S H2S + HgBr2 2HBr + HgS （汞斑） H2S + Pb(AC)2 PbS + 2HAC 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 3. 干擾的排除 （1）供試品為S2-,SO32-, S2O32-等: 因在酸中生成H2S,SO2

15、,與 HgBr作用生成HgS或Hg，干擾砷斑檢查。用硝酸氧化成硫 酸鹽可消除。 （2）供試品為Fe3+ 能消耗KI，SnCl2 應(yīng)測(cè)定條件，先可加足 量KI。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 （3）含銻藥物 銻鹽被還原為SbH3與HgBr2試紙作用，產(chǎn)生灰色 銻斑，干擾砷斑的檢查，可改用Betterdorff法。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1（二）Ag-DDC法(二乙基二硫代氨基甲酸銀，USP采用此法) 1.原理：是利用砷化氫與Ag-DDC吡啶溶液作用，使Ag-DDC中的 銀還原為紅色膠態(tài)銀，以Ag-DDC溶液為空白，于510nm 的波長(zhǎng)處，測(cè)定吸收度，供試品溶液的吸收度不得大 于標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的吸收度。 2.

16、試劑的作用：同古蔡法。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1六、溶液顏色檢查法 溶液顏色檢查法是控制藥物中有色雜質(zhì)量的方法。中國(guó)藥典 （2000年版）收載有三種方法： K2Cr2O7 黃、綠 1. 標(biāo)準(zhǔn)比色液進(jìn)行比較的方法 標(biāo)準(zhǔn)比色液 CoCl2 橙黃,橙紅 2. 分光光度法 CuSO4 棕紅 3. 色差計(jì)法 通過(guò)測(cè)定供試品與標(biāo)準(zhǔn)比色液或水之間的色差值藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1七、易炭化物檢查法 是檢查藥物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微 量有機(jī)雜質(zhì)。這類雜質(zhì)多數(shù)結(jié)構(gòu)未知，常采用與標(biāo)準(zhǔn) 比色液比色的方法進(jìn)行檢查。(標(biāo)準(zhǔn)比色液為CoCl2, K2Cr2O7, CuSO4) 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 是檢查藥物中

17、的微量不溶性雜質(zhì)。常采用與濁 度標(biāo)準(zhǔn)液比濁的方法進(jìn)行檢查。濁 度標(biāo)準(zhǔn)液制備原理： (CH2)6N4 + 6H2O 6HCHO + 4NH3 HCHO + H2N-NH2 H2C=N-NH2 + H2O 甲醛腙白色混濁 不同級(jí)號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液 級(jí) 號(hào) 0.5 1 2 3 4濁度標(biāo)準(zhǔn)原液（ml） 2.5 5.0 10.0 30.0 50.0水 （ml） 97.5 95.0 90.0 70.0 50.0八、溶液澄清度檢查法藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1九、熾灼殘?jiān)鼨z查法(residue on ignition) BP稱硫酸灰分（sulphated ash) 是檢查有機(jī)藥物中混入的各種無(wú)機(jī)雜質(zhì)。常采用 重量方法

18、進(jìn)行檢查。 殘?jiān)佰釄逯?坩堝重 殘?jiān)? = 100% 供試品重藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1十、干燥失重檢查法 主要檢查藥物中的水分及其他揮發(fā)性的物質(zhì)。常采用重量方法進(jìn)行檢查。常用的方法有四種：（一）常壓恒溫干燥法（二）干燥劑干燥法（三）減壓干燥法藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 熱重分析法（四） 熱分析法（thermo analysis) 差示熱分析 差示掃描量熱法 1.熱重分析法（thermogravimetric analysis, TGA) 在程序升溫下，測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度的關(guān)系，研究物質(zhì)在 加熱同時(shí)失重的情況下，所發(fā)生的質(zhì)的變化，常用于藥物穩(wěn)定 性的研究；貴重和易氧化藥物的干燥失重測(cè)定。(長(zhǎng)春

19、堿)藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 2.差示熱分析（differentialtherml analysis , DTA) 是在程序升溫下，測(cè)量被測(cè)物質(zhì)和參比物之間的溫差與溫 度關(guān)系的一種技術(shù)。參比物是一種惰性物質(zhì)，在加熱過(guò)程中 不發(fā)生相變和化學(xué)變化。因此溫差(T)只與被測(cè)物質(zhì)的量質(zhì) 變化有關(guān)。T=0 被測(cè)物未發(fā)生吸熱或放熱反應(yīng);T= - 為 吸熱峰;T = + 為放熱峰.藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 測(cè)藥的溶點(diǎn) DTA在藥物分析中應(yīng)用 尖峰為物理變化 藥物定性分析 寬峰為化學(xué)變化 估測(cè)藥物的純度藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 3.差示掃描量熱法(differential scanning calorimetr

20、y, DSC) 是在程序升溫下，測(cè)量維持樣品和參比物的溫度相同，系統(tǒng) 所需供給樣品隨溫差變化的能量的一種技術(shù)。DSC與DTA的不同之 處是記錄方式不同，是記錄系統(tǒng)供給的能量，吸熱供給能量；放 熱減少供給的能量。在藥物分析中應(yīng)用與DTA相同。DSC-TG常聯(lián)合 用。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1十一、有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法ChP(1995) 主要檢查藥物在生產(chǎn)過(guò)程中引入的有害的有機(jī)溶劑(如苯、氯 仿、二氯甲烷、吡啶、甲苯、環(huán)氧乙烷、二氧六環(huán)等）。常采用 氣相色譜法方法進(jìn)行檢查。常用的方法有二種： 直接進(jìn)樣法和 頂空進(jìn)樣法（試用于揮發(fā)性大的樣品測(cè)定）。 色譜系統(tǒng)性試驗(yàn)的要求： (1) N1000;(2)

21、用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，要求R1.5; (3)外標(biāo)法測(cè) 定時(shí)，待測(cè)物的峰面積的RSD10%。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1殘留有機(jī)溶劑測(cè)定的方法和限量有機(jī)溶劑 柱溫（） 內(nèi)標(biāo) 物 測(cè)定方法 限量（%） 二氧六環(huán) 170 吡啶 1 法 0.038吡啶 170 二氧六環(huán) 1 法 0.02苯 170 甲苯 1 法或2 法 0.0002甲苯 170 苯 1法或2 法 0.089氯方 140 二氯甲烷 1 法或2 法 0.006二氯甲烷 140 1法或2 法 0.06環(huán)氧乙烷 80 2 法 0.001返 回藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1第三節(jié) 特殊雜質(zhì)的檢查方法 一、利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異 （一）臭味及揮發(fā)性質(zhì)的

22、差異 例如：黃凡士林中異性有機(jī)物檢查：本品2.0g,直火加熱無(wú) 辛味。濃過(guò)氧化氫中不揮發(fā)性雜質(zhì)檢查：10ml水浴蒸 干殘?jiān)?5mg （二）顏色差異 例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的檢查：取本品2.0g， 加NaOH試液10ml，加水25ml，與黃色3號(hào)比色液比， 不得更深。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 （三）溶解行為的差異 例如：吡哌酸中堿中不溶物吡哌酸甲酯（I）和（II）檢查 （四）旋光性質(zhì)的差異 例如：硫酸阿托品中莨菪堿的檢查：本品溶液(50mg/ml)- 0.4 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 （五）對(duì)光吸收性質(zhì)的差異 1. 紫外分光光度法： 例如: 地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查 再如：苯丙醇中苯丙

23、酮的檢查：可利用供試液的吸收度 比來(lái)控制雜質(zhì);純品苯丙醇A247nm/A258nm= 0.59; 99.5% 時(shí)A247nm/A258nm= 0.79; 因此規(guī)定供試品A247nm/A258nm 0.79; 即所含苯丙酮 0.5%.藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 2. 原子吸收分光光度法： 是通過(guò)測(cè)定藥物中所含待測(cè)元素原子蒸氣，吸收發(fā)自光源的該元素特定波長(zhǎng)的程度，以求出藥物中待測(cè)元素的 含量。 限量檢查時(shí)：對(duì)照品液 = 供試品 + 限量- a 供試品液 = - b 符合規(guī)定時(shí) b (a-b); b (a-b)不合格。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 3。紅外分光光度法： 主要用于藥物中無(wú)效或低效晶型檢查，如

24、甲苯咪唑中 A晶型檢查藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 A 晶型 C 晶型 在640cm-1 有強(qiáng)吸收 吸收很弱 在662cm-1 吸收很弱 有強(qiáng)吸收 662cm-1 640cm-1 662cm-1 640cm-1 供試品+10%A晶型 D2 D1 供試品 D2 D1 10% R = D1/D2 R = D1/D2藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 4.熒光分析法 3,4-二去氫利血平 利血平中氧化產(chǎn)物檢查：利血平(無(wú)熒光) (I)(黃綠色熒光) 3,4,5,6-四去氫利血平 (II)(藍(lán)色熒光) 藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1(六)吸附或分配性的差異 1.薄層色譜法(TLC) (1)雜質(zhì)對(duì)照品法 例如:鹽酸左旋咪唑

25、中檢查 硅膠G 2,3-二氫-6-苯基咪唑2,1-b噻唑鹽 苯:甲醇:冰HAC 樣品 對(duì)招品。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 (2)高低濃度對(duì)比品法 例如:鹽酸異丙嗪中有關(guān)物質(zhì)的檢查 硅膠G 有多個(gè)雜質(zhì)而且結(jié)構(gòu)不清 樣品10mg/ml;對(duì)照品(1)0.15mg/ml 己烷:丙酮:乙胺 (2)0.05mg/ml 樣品液 對(duì)(1) (2) 供試液雜質(zhì)斑點(diǎn)不多于3個(gè);雜質(zhì)斑點(diǎn)與對(duì)照(2)的主斑點(diǎn)比 較,不得更深;如有一點(diǎn)超過(guò),應(yīng)不深于對(duì)照液(2)的主斑點(diǎn). . . . . .藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 2.紙層析法(PC) 常用于極性大的藥物的分離、分析，如地高辛中的有關(guān)雜質(zhì)的檢查。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1

26、 3.高效液相色譜法(HPLC) （1）峰面積歸一化法：L% = Ai /(Ai + A主）100% 例如：利巴韋林中有關(guān)雜質(zhì)的檢查： 對(duì)照品液(5g/ml)進(jìn)樣10l,調(diào)靈敏度，使主峰達(dá)滿 量程的20%25% 樣品液(0.4mg/ml)進(jìn)樣10l, 雜質(zhì)Ai(Ai+A主） 的1.0%藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 （2）不加校正因子主成分對(duì)照法 對(duì)照品液為供試品的稀釋液進(jìn)樣測(cè)得A主 供試品液進(jìn)樣測(cè)得Ai 其Ai A主即為合格. 例如:甲硝唑中2-甲基-5-硝基咪唑: 對(duì)照品液(0.01mg/ml)進(jìn)樣20l,調(diào)靈敏度，使主峰達(dá)10%30% 樣品液(0.14mg/ml)進(jìn)樣20l,雜質(zhì)AiA主的1.

27、0%.藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 （3）內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定供試品中雜質(zhì)的含量 對(duì)照品+內(nèi)標(biāo) 進(jìn)樣求校正因子（f)=(As/Cs)/(AR/CR) 供試品+內(nèi)標(biāo) 進(jìn)樣求AX.AS,則雜質(zhì)濃度CX = f AX/(AS/CS)藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1 4.氣相色譜法(GC) 主要用于藥物中揮發(fā)性的雜質(zhì)檢查，其檢查方 法與HPLC法相同。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1二、利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性上的差異（一）酸堿性的差異 1.規(guī)定消耗滴定液體積 例如己酸羥孕酮中正己酐、對(duì)甲苯磺酸檢查：(NaOH 0.02mol/L) 取本品0.20g + 中性乙醇 + 溴麝香草酚藍(lán) 微藍(lán)色0.50ml 2.pH法 例如乙琥

28、胺中2-甲基-2-乙基丁二酸檢查：0.01g/ml pH3.04.5. 3.指示劑法 例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲檢查：其水溶液不得使甲基橙顯紅 色。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1（二）氧化還原性的差異 例如：NaCl中I-和Br-檢查EOCl/2Cl- =+1.3595V EOBr/2Br- =+1.065V EOI/2I- =+0.5345V ,因此+NaNO2+H2SO4+淀粉顯藍(lán)色 再例如：鹽酸嗎啡中阿樸嗎啡的檢查：后者可被碘氧化生成水溶性 綠色化 合物。因此ChP規(guī)定：本品50mg +4mlH2O+1dI2 + 5ml乙醚 乙醚層不得顯紅色；水層不得顯綠色。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1（三）雜質(zhì)

29、與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀 例一、間苯二酚中鄰苯二酚檢查：后者+Pb(Ac)2 白色 ChP規(guī)定：本品0.5g+10mlH2O+2d稀醋酸+0.5ml Pb(Ac)2 不得發(fā)生混濁，即為合格。 例二、硝酸毛果蕓香堿中其他生物的檢查：后者+氨水+K2Cr2O7 ChP規(guī)定：本品0.2g+20mlH2O兩份；I份+數(shù)滴氨試液；另 1份+數(shù)滴K2Cr2O7試液 ，均不得發(fā)生混濁。藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1（四）雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色 例一、鹽酸普萘洛爾中游離-萘酚檢查：利用后者可與重氮鹽 發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)，生成偶氮染料。 ChP規(guī)定：供試品20mg+乙醇與10%NaOH液各2ml+重氮苯 磺酸試液1ml,放置3min；如顯色，與0.3ml -萘 酚對(duì)照液（20g/ml)比較不得更深。 例二、碘他拉酸中氨基化合物的檢查：利用重氮化-偶合反應(yīng) ChP規(guī)定：供試品2.5mg/ml經(jīng)重氮化-偶合反應(yīng)后，在波長(zhǎng) 485nm測(cè)得A 0.25藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查1（五）雜質(zhì)與