微生物檢驗培養(yǎng)基質量控制技術ppt課件

1、微生物檢驗培育基質量控制技術.培育基質量的重要性 培育基是微生物實驗的根底，直接影響微生物實驗結果。適宜的培育基制備方法、貯藏條件和質量控制實驗是提供優(yōu)質培育基的保證。.主 要 內 容培育基制備、運用、儲存中的本卷須知培育基質量控制2021版藥典附錄實例培育基質量對實驗結果的影響CHP與USP的異同點同行的方法引見新技術部分菌種在培育基上的典型特征 .培育基制備過程中的本卷須知 培育基的水化 培育基水化時不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離 子混入培育基中,影響微生物的生長； 配制培育基最常用的溶劑是純化水 ,不能含 有任何能夠抑制或影響微生物生長的物質；.培育基制備過程中的本卷須知 培育基的溶解 在培

2、育基分裝滅菌前,各成分應溶解均勻, 運用電爐等設備煮沸培育基時,運用小火加熱,并邊加熱邊攪拌,防止培育基焦化或爆沸溢出。.培育基制備過程中的本卷須知 培育基的滅菌 已配制好的培育基必需立刻滅菌 濕熱滅菌必需嚴厲控制滅菌溫度和時間.培育基制備過程中的本卷須知 培育基的pH微生物必需在適宜的pH范圍內才干正常生長繁衍或表達其生物特性。調整培育基的pH,運用1 mol/LNaOH或1 mol/L HCl調整pH，普通滅菌前比最終pH高0.20.3。.培育基制備過程中的本卷須知 培育基的保溫 滅菌以后培育基應該迅速冷卻至所需溫度,防止長時間保管在滅菌鍋內,呵斥過度滅菌,影響培育基的營養(yǎng)成分或選擇性效果

3、。.培育基運用過程中的本卷須知 培育基的接種 平板在接種運用時,外表必需無明 顯潮濕水珠； 對于保管的培育基,需待溫度回復 至室溫后才可運用,并且運用前應 檢查；.培育基儲存過程中的本卷須知 枯燥培育基 應遵照先入先出的原那么； 儲存于陰涼枯燥處,防止強光直射；.培育基儲存過程中的本卷須知 已配制的培育基 建議平板傾注后立刻便用； 在平板上標上制備日期和/或有效期 和稱號； 固體培育基滅菌后的再融化只允許 一次 ；.實 例三糖鐵培育基TSI未校正pH時，不同廠家的TSI培育基產硫化氫強度不一；校正pH7.5后，各培育基硫化氫反響均有改善,不同廠家的TSI培育基產硫化氫強度仍不一樣；.實 例三糖

4、鐵培育基TSI由于培育基pH太低, 本身就是黃色,細菌生長后下層仍為黃色, 而斜面變?yōu)槌燃t色,易誤判別為下層“ 變?yōu)辄S色 。由此定為發(fā)酵菌，呵斥誤判；.培育基質量控制2021版藥典 培育基適用性檢查計數(shù)培育基 控制菌檢查用培育基 . 計數(shù)培育基適用性檢查對照培育基 系指按培育基處方特別制備、質量優(yōu)良的培育基，用于培育基適用性檢查。由中國藥品生物制品檢定所研制及分發(fā)。. 計數(shù)培育基適用性檢查 大腸埃希菌金黃色葡萄球菌 枯草芽孢桿菌 白色念珠菌 黑曲霉 白色念珠菌營養(yǎng)瓊脂培育基 玫瑰紅鈉瓊脂培育基 酵母浸出粉胨葡萄糖 瓊脂培育基 . 計數(shù)培育基適用性檢查 結果斷定 被檢培育基上的菌落平均數(shù) 對照培

5、育基上的菌落平均數(shù) 菌落形狀大小應與對照培育基上的菌落一致 計數(shù)培育基 70%. 控制菌檢查用培育基適用性檢查 促生長才干 抑制才干 指示才干 檢查工程.控制菌檢查用培育基適用性檢查增菌培育基促生長才干檢查：分別接種不大于100cfu 的實驗菌于被檢培育基和對照培育基中，在相應控制菌檢查規(guī)定的培育溫度及最短培育時間下培育。與對照培育基管比較，被檢培育基管實驗菌應生長良好。 .控制菌檢查用培育基適用性檢查固體培育基促生長才干檢查：取實驗菌各0.1ml含菌數(shù)50100cfu分別涂布于被檢培育基和對照培育基平板上，在相應控制菌檢查規(guī)定的培育溫度及最短培育時間下培育。被檢培育基與對照培育基生長的菌落大

6、小形狀特征應一致。 .控制菌檢查用培育基適用性檢查培育基抑制才干檢查：接種不少于100cfu 的實驗菌于被檢培育基中，在相應控制菌檢查規(guī)定的培育溫度及最長時間下培育，實驗菌應不得生長。 .控制菌檢查用培育基適用性檢查固體培育基指示才干檢查：取實驗菌各0.1ml含菌數(shù)不大于100cfu分別涂布于被檢培育基和對照培育基平板上，在相應控制菌檢查規(guī)定的培育溫度及時間下培育。被檢培育基中實驗菌生長的菌落形狀、大小、指示劑反響情況等應與對照培育基一致。 .控制菌檢查用培育基適用性檢查液體培育基指示才干檢查：分別接種不大于100cfu 的實驗菌于被檢培育基和對照培育基中，在相應控制菌檢查規(guī)定的培育溫度及最短

7、培育時間下培育。與對照培育基管比較，被檢培育基管實驗菌生長情況、指示劑反響等應與對照培育基一致。 .培育基質量控制2021版藥典 實驗室配制的培育基的常規(guī)監(jiān)控工程pH 適用性檢查實驗 定期的穩(wěn)定性 檢查以確定有效期 .培育基質量控制 CHP與USP的異同點計數(shù)培育基的適用性檢查： CHP USP菌種的選擇 大腸埃希菌 銅綠假單胞菌結果斷定 比值大于70% 1/2 2 培育基 營養(yǎng)瓊脂培育基 大豆消化酪素培育基 玫瑰紅鈉瓊脂培育基 沙氏葡萄糖培育基 酵母浸出粉胨葡萄糖 瓊脂培育基(YPD) .培育基質量控制 CHP與USP的異同點控制菌檢查用培育基的適用性檢查：CHP與USP方法根本一致，檢查用

8、培育基不同。 . 同行的方法引見培育基質量控制 理化實驗方法 包括測定培育基的pH值和凝膠強度 微生物學方法 包括固體培育基和液體培育基. 同行的方法引見固體培育基 定量質控 采用傾注平板法、涂布法、 劃線法(半定量法) 、改良的MilesMisra 法等測定生長情況； 定性質控 評價目的微生物非目的微生 物接種以后的生長情況 ；.同行的方法引見液體培育基 采用定量稀釋法,用目的菌和雜菌的混合 菌株評價選擇性增菌培育基的選擇性； 利用OD 值評價液體培育基生長率；.同行的方法引見 分值計算 質量比較.新技術引見BioBall是一個很小的水溶性球狀物，包含了數(shù)量準確的微生物個體，它可以使微生物質控中的定量控制到達非常高的準確度。.新技術引見 BioBall目前可以提供超越25種菌株；可運用于培育基質控、方法驗證等需求定量質控的各個領域；.新技術引見BioBall SingleShot 提供1次準確接種量BioBall MultiShot-550 提供10次準確接種量.新技術引見BioBall SingleShot 每個BioBall SingleShot都含28至33cfu； 規(guī)范誤差小于或等于3cfu；.新技術引見BioBall與常規(guī)稀釋法相比的優(yōu)勢運用方便；準確的cfu數(shù)量；不同批次間cfu數(shù)量穩(wěn)定；減少了由于接種量的變化，呵斥的質控失 敗的風險；.BioBall