大烏泡葉中總黃酮含量測(cè)定

1、大烏泡葉中總黃酮含量測(cè)定程偉,秦文杰,陳素紅,葉祖光【摘要】目的為大烏泡資源的公正開(kāi)拓和使用提供試驗(yàn)根據(jù)。要領(lǐng)接納60%甲醇提取大烏泡葉總黃酮,分光光度法測(cè)定其含量；并通過(guò)不變性、重復(fù)性、細(xì)密度和接納率試驗(yàn)查驗(yàn)了該要領(lǐng)的可靠性和重復(fù)性。效果尺度液和供試液均在510n處有最大汲取。重復(fù)性、細(xì)密度、加樣接納率試驗(yàn)的rsd值別離為2.11%、0.97%、2.34%,含量測(cè)定效果表白大烏泡葉中總黃酮含量為3.8%。結(jié)論以60%甲醇提娶硝酸鋁顯色、510n測(cè)定的分光光度法實(shí)用于大烏泡葉中總黃酮含量的測(cè)定?！娟P(guān)鍵詞】大烏泡；總黃酮；含量測(cè)定；分光光度法keyrds：rubusultibrateatusle

2、vl.etvant.；ttalflavnids；ntentdeterinatin；spetrphtetry大烏泡為薔薇科懸鉤子屬植物大烏泡(rubusultibrateatuslevl.etvant.),別名倒生根、黃水泡、無(wú)刺烏泡、糖泡葉、馬莓葉,以根及全株入藥。天下大部門地域均有漫衍,主產(chǎn)于四川、云南、貴州等地。其味苦、性涼,入脾、肝二經(jīng),具清熱解毒、祛風(fēng)除濕、涼血、止血、接骨的成果。大烏泡為苗藥的常用藥,但如今尚未見(jiàn)對(duì)大烏泡化學(xué)身分研究的報(bào)道,我們通過(guò)對(duì)大烏泡葉的化學(xué)身分的體系研究,創(chuàng)造此中含有很多黃酮類身分(另文報(bào)道),現(xiàn)就大烏泡葉中總黃酮的含量測(cè)定要領(lǐng)報(bào)道如下。1儀器與試藥uv-75

3、7rt紫外分光光度計(jì)(上海uni),ab135-s電子闡發(fā)天平(瑞士梅特勒-托利多公司),q-250超聲波洗濯器(上海超聲儀器廠),電熱恒溫水浴鍋(北京市永灼爍醫(yī)療儀器廠),索氏提取器。蘆丁比較品(中國(guó)藥品生物成品檢定所提供,批號(hào)10080-202206)。本研究所用大烏泡葉于2022年7月網(wǎng)羅于貴州省黔西南州普安縣,經(jīng)秦文杰副研究員斷定為薔薇科懸鉤子屬大烏泡(rubusultibrateatuslevl.etvant.),標(biāo)本存放于中藥復(fù)方新藥開(kāi)拓國(guó)度工程研究中央。甲醇為闡發(fā)純,5%亞硝酸鈉、10%硝酸鋁、4%氫氧化鈉等均接納闡發(fā)純自配。2要領(lǐng)與效果2.1供試品溶液的制備枯燥大烏泡葉粉末約2

4、.0g,細(xì)密稱定,置索氏提取器中,參加60%甲醇100l,于恒溫水浴鍋上90提取6h,過(guò)濾,減壓濃縮并定容至50l容量瓶中,得供試品溶液。2.2蘆丁比較品溶液的制備細(xì)密稱取枯燥至恒重的蘆丁比較品4.75g,用少量60%甲醇溶解,置50l容量瓶中,用60%甲醇定容至50l,搖勻,靜置,配成濃度為95g/l的蘆丁比較品儲(chǔ)藏液。2.3測(cè)定波長(zhǎng)的選擇以蘆丁為比較品測(cè)定大烏泡葉中總黃酮的含量。細(xì)密汲取比較品液、供試品液各適量別離參加到25l容量瓶中,按“2.4項(xiàng)下要領(lǐng)操縱,并在400600n范疇內(nèi)掃描,效果均在510n處有最大汲取波長(zhǎng),其他身分對(duì)測(cè)定無(wú)滋擾,應(yīng)選擇510n為測(cè)定波長(zhǎng)。2.4尺度曲線的繪制

5、細(xì)密汲取濃度為95g/l的蘆丁比較品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0l,別離置于25l量瓶中,別離參加5%亞硝酸鈉溶液1.0l,搖勻,安排6in后各參加10%硝酸鋁溶液1.0l,搖勻后安排6in,別離參加4%氫氧化鈉溶液10l,用60%甲醇稀釋至刻度,搖勻,安排10in,在510n處測(cè)定吸光度?；貧w方程為：y0.0012x0.001,r0.9996。效果表白,蘆丁比較品溶液濃度在95570g/l之間呈精良的線性干系。2.5要領(lǐng)學(xué)觀察細(xì)密汲取95g/l蘆丁比較品溶液5.0l,置于25l量瓶中,按“2.4項(xiàng)下要領(lǐng)舉行顯色和測(cè)定,重復(fù)6次實(shí)行,記載吸光度。吸光度的rsd0.97

6、%(n6),說(shuō)明儀器細(xì)密度精良。細(xì)密稱取樣品6份,每份約2.0g,細(xì)密稱定,按“2.1項(xiàng)下要領(lǐng)制備供試品溶液,每份細(xì)密汲取1.0l,別離置于10l容量瓶中,按“2.4項(xiàng)下要領(lǐng)舉行顯色和測(cè)定,記載吸光度值,盤算每份樣品的含量。6份樣品黃酮含量的rsd2.11%(n6)。細(xì)密稱取樣品6份,每份約2.0g,按“2.1項(xiàng)下要領(lǐng)制備供試品溶液。細(xì)密汲取供試品溶液1.0l,共6份,別離置于10l量瓶中,按“2.4項(xiàng)下要領(lǐng)舉行顯色和測(cè)定,別離在15、20、30、45、60、100in測(cè)定,rsd1.38%(n6)。效果表白樣品在15100in之間不變。細(xì)密稱取蘆丁比較品適量,參加含量的比較品,稱取樣品6份,

7、每份約1.0g,細(xì)密稱定,按供試品溶液制備要領(lǐng)制成溶液6份,各取1.0l,置于10l量瓶中,按“2.4項(xiàng)下要領(lǐng)舉行測(cè)定,效果見(jiàn)表1。表1加樣接納率試驗(yàn)效果略2.6樣品含量測(cè)定細(xì)密稱取樣品6份,每份約2.0g,按“2.1項(xiàng)下要領(lǐng)制備供試品溶液。每份細(xì)密汲取1.0l,別離置于10l量瓶中,按“2.4項(xiàng)下要領(lǐng)舉行顯色和測(cè)定,由尺度曲線盤算得大烏泡中總黃酮均勻含量為3.8%,rsd2.4%,說(shuō)明該要領(lǐng)測(cè)得的含量是可靠的。表2大烏泡葉中總黃酮含量測(cè)定效果略3討論本試驗(yàn)用硝酸鋁作為黃酮類比色測(cè)定的顯色劑,重要是黃酮母核中含有堿性氧原子,一樣平常又多帶酚羥基,能和鋁離子產(chǎn)生黃色絡(luò)合物,又參加亞硝酸鈉和氫氧化鈉,使在堿性溶液中顯赤色,顯色反響在100in內(nèi)不變1。對(duì)樣品的提取要領(lǐng)舉行觀察,超聲、加熱回流和索氏提取3種提取要領(lǐng)中,接納索氏提取總黃酮,測(cè)得吸光度值最大2。對(duì)顯色體系和顯色體系濃度別離舉行觀察,效果表白5%亞硝酸鈉、10%硝酸鋁、4%氫氧化鈉溶液顯色,吸光度值最大。接納紫外分光光度法對(duì)大烏泡葉中總黃酮的含量舉行測(cè)定,是一種便利有用