HPLC法同時(shí)測(cè)定八號(hào)燒傷膏中大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的含量

1、HPLC法同時(shí)測(cè)定八號(hào)燒傷膏中大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的含量【摘要】目的創(chuàng)立高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定八號(hào)燒傷膏中大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的含量。要領(lǐng)接納高效液相色譜法，以agilentt-182504.6，5為結(jié)實(shí)相；以甲醇-0.1%磷酸8515,vv為活動(dòng)相；流速為1.0lin-1；柱溫為25；檢測(cè)波長(zhǎng)為254n。結(jié)果大黃素在16.482.0gl-1(r=0.9999)，大黃酚在17.6090.00gl-1(r=0.9999)，大黃素甲醚在16.1680.80gl-1(r=0.9999)范疇內(nèi)線性干系精良；均勻加樣接納率別離為101.40%、99.88%和99.74%；相對(duì)尺度缺點(diǎn)別離為2

2、.48%、2.28%和1.93%。結(jié)論該要領(lǐng)輕便、可靠、正確，可作為八號(hào)燒傷膏的質(zhì)量操縱要領(lǐng)?！娟P(guān)鍵詞】高效液相色譜法大黃素大黃酚大黃素甲醚八號(hào)燒傷膏siultaneusdeterinatinfthententsfedin，hrysphanlandphysineinbahaburnslurryviahplgngpeng，henzhen，xudujuandepartentfpharay,thefirstaffiliatedhspitalfanhuiedialuniversity,hefei230022，hinakeyrdshpl;edin;hrysphanl;physine;bahaburnsl

3、urry八號(hào)燒傷膏是我院特色中藥制劑，組方中有大黃、地榆炭、五倍子等中藥，具有清熱燥濕、解毒療瘡、收斂生肌等成果，臨床重要用于治療-度燒傷、燙傷等，結(jié)果明顯1，但是對(duì)付該制劑的質(zhì)量操縱方面的研究至今仍處于空缺。為范例本品的消費(fèi),有用地操縱該產(chǎn)物的質(zhì)量及包管藥效,本課題組對(duì)該制劑舉行了質(zhì)量操縱方面的開(kāi)端研究。本實(shí)行在文獻(xiàn)報(bào)道的底子上，接納高效液相色譜法，別離對(duì)方中主藥大黃的三種指標(biāo)身分大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的含量同時(shí)舉行了測(cè)定，為公正訂定該制劑的質(zhì)量尺度和申報(bào)病院制劑容許文號(hào)提供了實(shí)行根據(jù)。1儀器與試藥1.1儀器aters高效液相色譜儀600泵，2487檢測(cè)器，illenniu32事情站，b

4、p211d電子天平(德國(guó)塞多利斯公司)，syz-b石英亞沸高純水蒸餾器江蘇環(huán)宇科學(xué)儀器廠，hh-s型水浴鍋(鞏義市英峪予華儀器廠)，kq3200db型超聲洗濯器(江蘇昆山超聲儀器)。1.2試藥八號(hào)燒傷膏安徽醫(yī)科大學(xué)第一隸屬病院制劑中央消費(fèi)，批號(hào)：081019、090323、090714；含量測(cè)定用比較品均購(gòu)自中國(guó)藥品生物成品檢定所，批號(hào)別離為：大黃素110756-200110、大黃酚0796-200208、大黃素甲醚0758-202210；甲醇為色譜純；水為二次重蒸水；磷酸、鹽酸、三氯甲烷等試劑均為闡發(fā)純。2要領(lǐng)與結(jié)果2.1色譜條件及體系實(shí)用性試驗(yàn)色譜柱：agilentt-182504.6，5

5、；柱溫：25；檢測(cè)波長(zhǎng)：254n；活動(dòng)相：甲醇-0.1磷酸8515，vv；流速：1.0lin-1；進(jìn)樣量20l。理論板數(shù)以大黃素、大黃酚、大黃素甲醚盤(pán)算均不低于5000，3個(gè)活性身分與相鄰峰之間分散度均大于1.5，對(duì)稱因子在0.951.05之間。2.2比較品溶液的制備細(xì)密稱取五氧化二磷減壓枯燥的大黃素比較品、大黃酚比較品、大黃素甲醚比較品適量，加甲醇別離制成1l含大黃素、大黃酚、大黃素甲醚各0.2g擺布的溶液；別離細(xì)密量取上述比較品溶液1.0l至50l量瓶中，混勻，即得。2.3供試品溶液的制備細(xì)密稱取八號(hào)燒傷膏劑約0.5g，置具塞錐形瓶中，參加甲醇25l，稱定重量，超聲，放冷，再稱定重量，用甲

6、醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)。細(xì)密量取續(xù)濾液5l，置燒瓶中，揮去溶劑，加8%鹽酸溶液10l，超聲處置懲罰2in，再加三氯甲烷10l，加熱回流1h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液用三氯甲烷提取3次，每次10l，歸并三氯甲烷液，減壓接納溶劑至干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓D(zhuǎn)移至10l量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。2.4專屬性試驗(yàn)按處方比例制成缺大黃陰性八號(hào)燒傷膏制劑，按“2.3項(xiàng)下要領(lǐng)制備缺大黃陰性樣品溶液，細(xì)密汲取上述比較品、供試品、陰性樣品溶液各20l，照“2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，結(jié)果陰性比較液在各個(gè)比較品保存時(shí)間位置上均未見(jiàn)滋擾。

7、比較品溶液、缺大黃的陰性樣品溶液、樣品溶液hpl見(jiàn)圖1。2.5線性干系觀察細(xì)密量取含大黃素0.205gl-1、大黃酚0.220gl-1、大黃素甲醚0.202gl-1的混淆比較品溶液1.0l,別離置50l量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勺，0.45微孔濾膜濾過(guò)，別離細(xì)密汲取上述比較品液4,8,12,16,20l,注入液相色譜儀，按“2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，以進(jìn)樣濃度gl-1為橫坐標(biāo)，對(duì)峰面積為縱坐標(biāo)舉行線性回歸，其回歸方程及線性范疇如下：大黃素：a=35379.8-7058.8，r=0.9999，16.4-82.0gl-1；大黃酚：a=97283.9-19843.7，r=0.9999，17.60-

8、90.00gl-1；大黃素甲醚：a=21703.0-3862.8，r=0.9999，16.16-80.80gl-1。2.6細(xì)密度試驗(yàn)細(xì)密量取尺度品溶液20l，一連進(jìn)樣5次，測(cè)定大黃素、大黃酚和大黃素甲醚峰面積，盤(pán)算其相對(duì)尺度缺點(diǎn)(rsd)。大黃素、大黃酚和大黃素甲醚rsd值別離為1.20%、1.09%和1.01%。2.7不變性試驗(yàn)取尺度品溶液別離在第0、2、4、8、16、24h按“2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，測(cè)定樣品中大黃素、大黃酚和大黃素甲醚峰面積，盤(pán)算其相對(duì)尺度差值。大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的rsd值別離為1.54%、1.07%和1.49%，試驗(yàn)結(jié)果表白供試品溶液在24h內(nèi)不變。2.8重復(fù)性

9、試驗(yàn)取同一批號(hào)八號(hào)燒傷膏樣品，平行制備5份供試品溶液，按上述色譜條件測(cè)定大黃素、大黃酚及大黃素甲醚的峰面積并盤(pán)算其相對(duì)尺度缺點(diǎn)。大黃素、大黃酚和大黃素甲醚峰面積rsd值別離為2.09%、1.87%和1.75%。2.9接納率試驗(yàn)細(xì)密稱取含量的樣品含大黃素0.228gg-1、大黃酚0.288gg-1和大黃素甲醚205gg-16份,每份約0.3g，別離細(xì)密參加必然量的大黃素、大黃酚和大黃素甲醚比較品，按“2.3項(xiàng)下要領(lǐng)制成溶液，按上述色譜條件測(cè)定，盤(pán)算接納率。均勻接納率別離為101.40%、99.88%和99.74%；rsd值別離為2.48%、2.28%和1.93%；詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表1。表1加樣接納率試

10、驗(yàn)結(jié)果略2.10樣品測(cè)定取3批八號(hào)燒傷膏按“2.3項(xiàng)下要領(lǐng)制備，每批樣品2份，細(xì)密汲取供試品溶液20l，根據(jù)上述色譜條件測(cè)定并盤(pán)算含量，詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表2。表23批八號(hào)燒傷膏樣品含量略3討論八號(hào)燒傷膏由大黃、地榆炭、五倍子等中藥構(gòu)成，此中大黃為主藥之一。大黃含有游離的蒽醌類衍生物如大黃素、大黃酚、大黃酸等,它們對(duì)多種病毒和細(xì)菌具有按捺和殺滅作用2，以是，制劑中大黃有用身分含量的凹凸是其質(zhì)量?jī)?yōu)劣的緊張標(biāo)記之一。大黃中蒽醌類身分含量測(cè)定要領(lǐng)文獻(xiàn)報(bào)道較多，色譜條件及制備要領(lǐng)也有多種多樣，但是多接納單一身分含量測(cè)定。中藥是典范的龐大體系，對(duì)其的質(zhì)量操縱也是中藥當(dāng)代化的瓶頸之一，中藥質(zhì)量操縱要表現(xiàn)中藥團(tuán)體、辨證的特點(diǎn)。隨著中藥質(zhì)量操縱技能的希望，測(cè)定中藥或復(fù)方中的單一身分已不克不及滿意全面操縱中藥制劑的質(zhì)量要求，多身分含量測(cè)定那么可以或許更進(jìn)一步的操縱中藥質(zhì)量。由于大黃中大黃素、大黃酚和大黃素甲醚3種蒽醌類身分含量均較高，故本實(shí)行選擇以上3種蒽醌類身分作為含量測(cè)定的指標(biāo)身分，對(duì)八號(hào)燒傷膏的質(zhì)量舉