2022年農(nóng)業(yè)生物技術(shù)資料歸類考試題

1、一、名詞解釋1. 生物技術(shù)： 以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合先進的科學(xué)技術(shù)手段和其它自然學(xué)科原理，按照預(yù)先設(shè)計的改造生物體或加工生物原料，為人類產(chǎn)生出所需要產(chǎn)品或達到某種目的的技術(shù) 2. 植物組織培養(yǎng)： 在無菌和人為控制的條件下，培養(yǎng)、研究植物組織器官，進而從中分 化發(fā)育出整體植株的技術(shù)。3. 細胞全能性： 具有完整細胞核的細胞，在適宜的條件下能夠分化成完整植株的潛在能 力。4. 愈傷組織： 具有分裂能力的一團細胞 5. 脫分化： 回復(fù)分裂能力的過程。6. 再分化： 生長由無序重新進入有序。7. 培養(yǎng)基： 供微生物、動植物組織生長、產(chǎn)生代謝產(chǎn)物或維持用的人工配置的營養(yǎng)基質(zhì)。8. 植物離體快繁： 利

2、用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，在離體條件下，對植物進行營養(yǎng)繁殖，使其 在短期內(nèi)獲得遺傳性一致的大量再生植株的方法。9. 增殖系數(shù)： 接種一個芽或一塊增殖的培養(yǎng)物，經(jīng)過一個生產(chǎn)年的培養(yǎng)后得到的芽和苗 的數(shù)量10. 褐變： 在組織培養(yǎng)的過程中，由于培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì)導(dǎo)致培養(yǎng)基逐漸 變?yōu)楹稚囵B(yǎng)材料也隨之慢慢變褐而死亡的現(xiàn)象。11. 污染： 是指在培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基或培養(yǎng)材料上滋生真菌、細菌等微生物，使培養(yǎng)材 料不能正常生長和發(fā)育的現(xiàn)象。12. 玻璃化： 細胞分裂與體積增大的速度超過了干物質(zhì)產(chǎn)生和積累的速度，植物只能吸收 水分來充漲自己的體積。13. 莖尖培養(yǎng)脫毒 ：采取莖尖分生組織離體培養(yǎng)獲得

3、無毒幼苗的方法。14. 外植體： 植物組織培養(yǎng)中作為離體培養(yǎng)材料的器官或組織片段。15. 植物體細胞胚： 植物離體培養(yǎng)的細胞、組織、器官產(chǎn)生類似胚的結(jié)構(gòu)，其形成也經(jīng)歷 了一個類似合子胚胎發(fā)生和發(fā)育過程。16. 繼代培養(yǎng) ：愈傷組織培養(yǎng)一段時間后必須轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上以保持培養(yǎng)物質(zhì)的正 常生長，更換一次培養(yǎng)基的過程。17. 原生質(zhì)體： 除細胞壁以外細胞膜包被的物質(zhì)。18. 單倍體 ：體細胞數(shù)等于配子染色體數(shù)的個體。19. 花藥培養(yǎng) ：用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，把發(fā)育到一定階段的花藥，通過無菌操作技術(shù)，接 種在人工培養(yǎng)基上，形成愈傷組織或胚狀體，隨后使愈傷組織分化成完整的植株。（花藥 培養(yǎng)形成二倍體，

4、花粉培養(yǎng)形成單倍體和二倍體）20. 單倍體的鑒定： 莖尖或根尖細胞染色體計數(shù)、流式細胞儀分析細胞核 DNA含量、測量 葉片保衛(wèi)細胞長度21. 共培養(yǎng) ：植物細胞、 組織、器官與農(nóng)桿菌一起培養(yǎng)一段時間，獲得轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物的方法。22. 基因工程： 人們按照預(yù)先設(shè)計的生物施工藍圖，把需要的目的基因經(jīng)過體外切割、拼 接與重新組合，然后引入受體細胞，并使其在受體內(nèi)進行復(fù)制、表達，按要求改變受體細 胞的遺傳特性，然后由轉(zhuǎn)化細胞再分化成具有預(yù)期新性狀的工程植株 23. 質(zhì)粒：是一種廣泛存在于細菌細胞中染色體以外能夠自主復(fù)制的裸露的環(huán)狀 DNA分子。DNA分子中某種特定的核苷酸序列，并能精確特 24. 限制性內(nèi)

5、切酶： 是一類能夠識別雙鏈 異的切割雙鏈 DNA分子的核酸內(nèi)切酶。（DNA純度、甲基化程度、甘油的含量、反應(yīng)體系 PH值、反應(yīng)溫度、酶切時間等影響酶的活性）25. DNA聚合酶 ：以 DNA為復(fù)制模板，從將DNA由 5 端點開始復(fù)制到3 端的酶。（具有耐高溫的特點）26. 感受態(tài)細胞 ：經(jīng)過氯化鈣溶液處理過的細胞處于容易接受外源 DNA狀態(tài)。27. 基因組文庫 ：將某一生物的基因組 因組文庫包括 cDNA文庫）DNA酶切后插入特定載體中而形成的克隆集合。 （基28. cDNA文庫 ：將某一生物特定發(fā)育時期或環(huán)境條件下轉(zhuǎn)錄的全部 段后插入特定載體中而形成的克隆集合。mRNA反轉(zhuǎn)錄成 cDNA片2

6、9. . 轉(zhuǎn)座子： 是一類在基因組中能夠發(fā)生跳躍的DNA序列。30. 圖位克隆： 也稱定位克隆，依據(jù)目的基因在染色體上的位置，通過分子標記、基因組文庫篩選，克隆得到目的基因然后進行最終鑒定。31. 分子標記： 在分子水平上可標識的遺傳多樣性。32. 葉圓法 ：用打孔器取得葉圓片，在過夜培養(yǎng)的龍桿菌菌液中侵染數(shù)分鐘，接種于一定 培養(yǎng)基上共培養(yǎng) 2-3 天，再轉(zhuǎn)移到含有抑菌劑或抗生素和選擇劑的培養(yǎng)基上，除菌和使轉(zhuǎn) 化細胞生長并再生植株。二、填空題1. 植物組織培養(yǎng)的類型：按培養(yǎng)材料不同可劃分為：完整植株培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、器官培 養(yǎng)、組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)。按培養(yǎng)基類型分為：固體培養(yǎng)、液體培

7、養(yǎng)、半夜半固體培養(yǎng)。2. 植物組織培養(yǎng)的原理：細胞全能性 3. 全能性體現(xiàn)的兩個條件： （1）離體狀態(tài)（ 2）一定的外界條件（生長素和細胞分裂素比值高利于生根，比值低利于長芽） 。4. 組織培養(yǎng)流程外植體脫分化愈傷組織再分化組織器官植株5. 標準的植物培養(yǎng)實驗室應(yīng)包括：洗滌室、培養(yǎng)基室、接種室、培養(yǎng)室、細胞學(xué)實驗室。6. 滅菌種類： 物理滅菌 （高溫高壓滅菌、 干熱滅菌、 射線滅菌、 過濾滅菌）、化學(xué)滅菌 （熏 蒸滅菌、消毒液滅菌）7. 高溫高壓滅菌： 121高壓和每平方厘米1 個大氣壓下持續(xù) 15-20 分鐘。8. 過濾滅菌：孔徑小于 0.45 微米微孔濾器裝置。9. 射線滅菌：波長為 20

8、0 納米-300 納米的紫外線，其中以 260nm最強。10. 培養(yǎng)基的主要成分（1）無機鹽：大量元素（ C H O N P K Mg S Ca ）：濃度大于 0.5mol/L 微量元素（ Fe Mn Cu Mo Co Zn）（2）有機化合物：碳水化合物（蔗糖、葡萄糖、果糖）植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)、瓊脂。、維生素（ VB1）、肌醇、氨基酸、11. 培養(yǎng)基配置的四個原則：目的明確、營養(yǎng)協(xié)調(diào)、理化適宜、經(jīng)濟節(jié)約95%酒精、12. 培養(yǎng)基的配置過程：配料溶解調(diào)節(jié)PH過濾分裝包扎滅菌13. 母液配置的方法：單配法、混配法（激素一般不溶于水，需要添加助溶劑（酸、堿均可）14. 植物快繁的四個程序包括：無菌（初

9、代）培養(yǎng)的建立、繁殖體增殖、芽苗生根、小植 株的移栽馴化。15. 培養(yǎng)材料的增殖方式： 頂芽和腋芽增殖、 不定芽增殖、 體細胞胚增殖、 原球莖發(fā)生型。16. 試管馴化的目的：培養(yǎng)壯苗、提高成活力。17. 移栽的目的：防止菌類滋生、保持小苗水分供給平衡、移栽時選擇合理的種植基質(zhì)，為小苗提供充足的養(yǎng)分。18. 細菌污染的特點：粘液狀菌斑，一般接種 19. 真菌污染的特點：出現(xiàn)菌絲、菌霉，一般1-2 天發(fā)現(xiàn)。3 天后出現(xiàn)。20. 玻璃化的原因：激素、瓊脂、PH、營養(yǎng)、光照、溫度21. 病毒的侵染途徑：（1）農(nóng)業(yè)操作時的機械損傷（2）通過微傷口進行侵染（ 3）通過嫁 接、寄主性植物傳播。22. 病毒在

10、植物體內(nèi)的運輸方式：細胞間短距離通過胞間連絲、長距離則通過韌皮部的輸 導(dǎo)組織。23. 植物脫毒的方法：莖尖培養(yǎng)脫毒、愈傷組織培養(yǎng)法、溫?zé)岑煼ā⒗鋬霪煼摱?24. 檢測脫毒是否成功的方法：直接觀察、嫁接指示植物、電鏡觀察、PCR。25. 愈傷組織的形成經(jīng)歷：誘導(dǎo)、細胞分裂、細胞分化三個時期。26. 器官發(fā)生的兩種模式：不經(jīng)過愈傷組織、經(jīng)過愈傷組織形成。27. 影響器官分化的因素： （1）起始材料（ 2）外植體類型（ 3）培養(yǎng)條件 28. 植物體細胞胚發(fā)生的途徑： （1）直接途徑（直接由外植體發(fā)育而來） （2）間接途徑（不 從外植體發(fā)育而來）29. 影響體細胞胚發(fā)生的因素：激素、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件

11、 30. 體細胞胚發(fā)生的過程：胚性細胞時期、球形胚時期、心形胚時期、魚雷形胚時期，子 葉形胚時期、胚胎成熟期。31. 再生植株的途徑有：器官發(fā)生途徑（培養(yǎng)的是細胞）和體細胞胚發(fā)生途徑（培養(yǎng)的是 體細胞胚）32. 原生質(zhì)體分離的方法：機械分離法（獲得原生質(zhì)體的量少，局限性強）（果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶）、酶解分離法33. 原生質(zhì)體純化的方法為：漂浮法、界面法 34. 原生質(zhì)體融合的方法： NaNO 3 處理、高 PH/高濃度鈣處理、 PEG處理、電融合 35. 原生質(zhì)體融合的類型：自發(fā)融合、誘發(fā)融合、化學(xué)誘導(dǎo)融合。36. 原生質(zhì)體活力檢測的方法：觀察細胞質(zhì)環(huán)流、氧氣攝入法、光合作用活性和活體

12、染色 法。37. 原生質(zhì)體培養(yǎng)的方法：液體培養(yǎng)法、固體包埋培養(yǎng)、固液雙層培養(yǎng)。38. 體細胞雜交的應(yīng)用：培育新品種、合成新材料。39. 單倍體產(chǎn)生的途徑：誘發(fā)單倍體途徑（雄核不育、雌核不育）、自發(fā)單倍體途徑（半 受精、多胚、染色體消除、雄核發(fā)育、雌核發(fā)育）40. 白化苗形成的原因：核基因變異、質(zhì)體 粉預(yù)處理可以適當(dāng)降低白化苗）41. 染色體加倍的方法：秋水仙素處理DNA缺失、小孢子發(fā)育過程中質(zhì)體變態(tài)（對花42. 外源基因?qū)氲姆椒ǎ荷锝閷?dǎo)（農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化）乙二醇）、物理方法（基因槍） 、化學(xué)方法（聚43. 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移方法：葉圓法、共培養(yǎng)法、直接接種法 44. 基因直接轉(zhuǎn)移方法：化學(xué)方法

13、（PEG誘導(dǎo)、脂質(zhì)體導(dǎo)入法）、物理方法（基因槍、點擊 法、顯微注射法）、農(nóng)桿菌微彈法（基因槍與龍桿菌轉(zhuǎn)化結(jié)合）45. 常見的選擇標記基因：卡那霉素、鏈霉素、青霉素46. 植物基因的結(jié)構(gòu)分為：轉(zhuǎn)錄區(qū)（起始密碼子、外顯子、內(nèi)含子、終止密碼子、3端+非編碼區(qū)、 5端非翻譯區(qū)）和非轉(zhuǎn)錄區(qū)（啟動子、終止子、增強子）47. 載體分為：質(zhì)粒載體、噬菌體載體、黏粒載體、人工染色體載體四種。48. 限制性內(nèi)切酶的命名：EcoR I 屬名（第一個字母大寫）+種名（前兩個字母小寫）菌株類型（大寫） +（羅馬字母表示發(fā)現(xiàn)的順序）49. II 型限制酶的基本特性：識別位點具有特異性、識別序列具有特異性、切割位點具有 規(guī)

14、范性（回文結(jié)構(gòu)）50. DNA 連接酶： E coliDNA 連接酶，來源于大腸桿菌，可用于連接粘性末端；T4DNA連接酶，來源于 T4 噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率低。51. DNA 連接反應(yīng)條件：溫度（通常為 的時間、連接片段的長度。16 攝氏度）、ATP濃度、連接酶的濃度、連接反應(yīng)52. 目標 DNA片段獲得的方法：（1）化學(xué)直接合成（ 2）從基因文庫中獲?。?3）通過 PCR 擴增53. 目的 DNA片段和載體的連接：（1）互補黏性末端連接，該連接方法簡單（黏性末端連接（ 3）平末端連接2）非互補54. 重組載體轉(zhuǎn)化宿主細胞的方法：氯化鈣處理、電穿孔法、熱激法 55.

15、 重組克隆的篩選：（1）表型篩選法（ 2）酶切鑒定篩選（ 3）PCR篩選法（ 4）分子雜交 篩選法。56. 基因文庫分為：基因組文庫和 cDNA文庫 57. 從基因文庫中篩選目的基因的方法：核酸雜交法、免疫學(xué)檢測法、PCR篩選法。58. 分子標記的分類：（1）基于 DNA-DNA雜交：RFLP（2）基于 PCR：ISSR SSR STS SCAR ARAP （3）基于 PCR和 RE酶切：AFLP（4）基于 DNA測序：SNP ES。應(yīng)用最普遍的是 RFLP、 RAPD、SSR（共顯性）和 AFLR 59. PCR 反應(yīng)組分： DNA模板、一對引物、 dNTP、Taq 酶、 Mg 2+ 、緩沖

16、液、 ddH2O 60. 常用的顯色劑：瓊脂糖凝膠EB染色；聚丙烯酰胺凝膠硝酸銀染色；帶熒光分子的 引物熒光捕獲61. PCR技術(shù)的原理：（1）高溫變性 95；（2）引物與模板退火 Tm=4（G+C）+2（A+T）Tm；（3）冷卻延伸 72三、簡答論述題1. 植物組織培養(yǎng)的主要特征？（1）在培養(yǎng)容器中進行（ 2）無菌環(huán)境，排除了微生物及害蟲等的侵入（3）各種環(huán)境因 子如營養(yǎng)因子、激素因子以及光照溫度等物理因子處于人工控制條件下，達到最適條件。（4）通常打破了正常植株的發(fā)育過程和格局。2. 植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用？（1）脫毒快繁（ 2）用于植物遺傳育種：種質(zhì)資源離題保存、花粉花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體、胚乳

17、培養(yǎng)產(chǎn)生三倍體、體細胞雜交、克服遠緣雜交困難（3）大規(guī)模植物細胞、組織和器官培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物（4）用于植物研究：生理學(xué)、病理學(xué)、胚胎學(xué)等。3. 凝固劑必須具有的特點？（1）在微生物生長范圍內(nèi)保持凝固（2）不被微生物分解利用（ 3）不因消毒高溫處理而破壞（ 4）對微生物無害（ 5）配置方便（ 6）透明度好，粘著力強。4. 外植體的選擇的要求？（1）選擇優(yōu)良的種質(zhì)及母株（母株性狀穩(wěn)定、健壯、無病蟲害）。（2）選擇適當(dāng)?shù)臅r期，春季和夏季采樣比較適合（3）取材的大小適宜（ 4）來源要豐富（ 5）易于消毒（ 6）選擇 合適的取材部位（莖尖、花粉、花藥、葉片均可）5. 無菌（初代）培養(yǎng)的消毒？（1）消

18、毒流程： 材料預(yù)處理 75%酒精消毒 20s無菌水沖洗 2-3 次 0.1%升汞處理 15 分 鐘左右無菌水沖洗 6 次瀝干接種（2）常用消毒劑：升汞、次氯酸鈉、酒精（3）消毒過程中的注意事項：植物材料、消毒藥劑及其濃度、消毒時間（三者需實際考慮）。6. 外植體的接種步驟？（1）無菌操作：接種室的滅菌、超凈工作臺滅菌、接種器皿用具滅菌、試驗人員滅菌（2）材料的分離、切取和接種（接種時防治空氣、操作、器皿帶來的污染）7. 影響褐變的因素及克服辦法？（1）植物基因型（ 2）材料的生理狀態(tài)（ 3）取材的時間和部位（ 4）培養(yǎng)基（ 5）光照（ 6）溫度（ 7）培養(yǎng)時間克服褐變的方法： （1）選擇適宜的

19、外植體（2）改善營養(yǎng)條件（ 3）在培養(yǎng)基中加入一些附加物，如活性炭、 PVP（4）加強生長素含量，降低細胞分裂素含量 8. 植物離體快速繁殖造成污染的原因？（1）外植體滅菌不徹底（ 2）實驗器皿及培養(yǎng)基滅菌不徹底（3）超凈工作臺被污染（ 4）環(huán)境不清潔（ 5）人為因素 9. 離體快繁的利用？（1）用于無菌苗快繁（ 2）用于無法用種子繁殖或難以保持后代一致性材料的繁殖（3）瀕危植物的拯救（ 4）用于種質(zhì)資源的拯救和保存 10. 植物患病后的主要癥狀有哪些？（1）因葉綠素遭到破壞引起花葉、黃葉；壞死。（2）植物發(fā)生矮化然后畸形； （3）形成枯斑或11. 病毒的特征？（1）結(jié)構(gòu)簡單，僅由蛋白質(zhì)和核酸

20、組成，無細胞結(jié)構(gòu)（2）不能進行獨立的代謝活動，需 要依靠寄主才能存活（ 3）病毒有核酸，依靠寄主細胞進行復(fù)制（4）具有侵染力，能夠從一種寄主細胞轉(zhuǎn)移到其它細胞。12. 植物脫毒的意義？（1）防止品種的退化，保持優(yōu)良的種性（2）提高產(chǎn)量，改善品質(zhì)（3）降低成本，保護環(huán)境。13. 原生質(zhì)體的特性？（1）去壁的原生質(zhì)體容易實現(xiàn)外源遺傳物質(zhì)的導(dǎo)入和吸收（2）不同來源的原生質(zhì)體具有 彼此融合的能力（ 3）原生質(zhì)體具有細胞全能性。14. 花藥培養(yǎng)的流程？（1）確定取樣時期（ 2）預(yù)處理（熱處理、秋水仙素處理） （3）花藥表面消毒和接種培養(yǎng)（常用 MS、N6 FHC培養(yǎng)基）（4）白化苗 15. 影響花粉、花

21、藥培養(yǎng)的因素有哪些？供體植株的基因型、花藥壁因子、培養(yǎng)基與培養(yǎng)密度、小孢子或花粉的發(fā)育階段、溫度與光照影響、供體植株的生理狀態(tài)。16. 質(zhì)粒載體的特征？（1）能在宿主細胞中獨立復(fù)制和表達（2）具有 1-2 個選擇標記（ 3）具備多克隆位點（ 4）自身相對分子量小、拷貝數(shù)高（5）易于操作和 DNA的制備。17. DNA 聚合酶的種類及功能？5 到 3 聚合酶活性、 5 到 3 外切（1）大腸桿菌 DNA聚合酶 I ，是一種多功能酶，具有由 酶活性、 3 到 5 外切酶活性等功能（ 2）Klenow 片段，填補或者標記 DNA分子的 3 隱縮 末端，具有由 5 到 3 聚合酶活性、 3 到 5 外切酶活性等功能（ 3）T4DNA聚合酶，外切酶 活性高于大腸桿菌 DNA聚合酶 I ，具有由 5 到 3 聚合酶活性、 3 到 5 外切酶活性等功能（4）反轉(zhuǎn)錄酶，用于 cDNA片段合成。18. 修飾性工具酶的種類？（1）末端轉(zhuǎn)移酶：不依賴于DNA模板的 DNA聚合酶，可以在沒有模板的情況下，將核