抑郁模型大鼠海馬內(nèi)環(huán)境的研究

1、煩悶?zāi)Ｗ哟笫蠛ｑR內(nèi)情況的研究【摘要】目的研究海馬內(nèi)情況穩(wěn)態(tài)在煩悶癥中的作用。要領(lǐng)20只雌性istar大鼠分為比較組、模子組。elisa法檢測血清皮質(zhì)醇、雌二醇，光鏡和電鏡不雅察海馬a3區(qū)形態(tài)學(xué)變革，免疫組化法檢測海馬腦源性神經(jīng)生長因子和血管內(nèi)皮生長因子表達。效果與比較組比力，模子組皮質(zhì)醇程度明顯升高，雌二醇程度顯著落落，海馬a3區(qū)神經(jīng)元損傷嚴(yán)峻，腦源性神經(jīng)生長因子和血管內(nèi)皮生長因子表達顯著低落。結(jié)論煩悶狀態(tài)下，海馬內(nèi)情況穩(wěn)態(tài)被粉碎。【關(guān)鍵詞】煩悶癥海馬內(nèi)情況穩(wěn)態(tài)腦源性神經(jīng)生長因子血管內(nèi)皮生長因子【keyrds】depressinhippapalinternalenvirenthestasisb

2、rain-derivedneurtrphtifatrvasularendthelialgrthfatr海馬內(nèi)情況指海馬神經(jīng)元的細胞外液，其理化性子和種種身分應(yīng)保持相對不變的狀態(tài)，即穩(wěn)態(tài)。海馬內(nèi)情況的理化特性包羅溫度、滲出壓、酸堿度等，身分有種種離子、激素、遞質(zhì)、細胞因子等。海馬內(nèi)情況穩(wěn)太粉碎均會損傷海馬成效和布局，進而影響舉動、感情和內(nèi)臟成效。當(dāng)代醫(yī)學(xué)以為海馬損傷在煩悶癥發(fā)病中起緊張作用1-2，但煩悶狀態(tài)下，海馬內(nèi)情況出現(xiàn)何種變革如今尚沒有體系研究，這就是本課題的研究目的，而本文重要對海馬內(nèi)情況中相干身分舉行開端不雅察。1質(zhì)料和要領(lǐng)1.1實行動物的拔取和分組康健istar雌性大鼠，干凈級，體重

3、22620g,中國醫(yī)科大學(xué)動物實行中央提供，及格證號：醫(yī)大動物及格證sxk(遼)2022-0005。順應(yīng)性豢養(yǎng)1周后，選擇舉動學(xué)得分相近的20只大鼠，隨機分為比較組、煩悶癥模子組模子組，每組10只。室溫2025，濕度40%50%。1.2煩悶癥模子的創(chuàng)立模子組大鼠創(chuàng)立慢性不成預(yù)見性應(yīng)激模子，即在21d內(nèi)隨機施加電擊足底36v交換電，5in、冰水游泳4,5in、搖擺1in、夾尾1in、禁水24h、禁食(24h)等刺激，每種刺激4次。1.3血清雌二醇和皮質(zhì)醇檢測在實行的d22，2組大鼠均腹腔注射20%氨基甲酸乙酯0.4l/100g麻醉后，腹自動脈取血，離心后取血清，低溫凍存。接納elisa要領(lǐng)檢測皮

4、質(zhì)醇和雌二醇(estradil，e2)，此項事情由沈陽軍區(qū)總病院內(nèi)排泄實行室完成。1.4海馬構(gòu)造學(xué)不雅察起首是he染色：取完成1.3后2只大鼠，立即斷頭取雙側(cè)海馬，置于10%甲醛中結(jié)實，白臘切片，he染色，不雅察海馬a3區(qū)神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)變革。其次電鏡不雅察：取完成1.3后的2只大鼠，升自動脈插管，150l生理鹽水快速沖去血液，快速灌入42.5%戊二醛結(jié)實液，取雙側(cè)海馬，修塊，再于戊二醛中結(jié)實2h，pbs重復(fù)洗濯后，再經(jīng)1%鋨酸結(jié)實2h，雙蒸水沖洗，梯度乙醇脫水，臨界點枯燥，離子濺射真空渡膜，掃描電鏡下不雅察超微布局。1.6數(shù)據(jù)處置懲罰數(shù)據(jù)以x-s表現(xiàn)，接納spss13.0中anva查驗舉行統(tǒng)計

5、學(xué)處置懲罰。2實行效果實行歷程中沒有實行動物殞命及脫失征象。2.1海馬形態(tài)學(xué)變革光鏡下，比較組a3區(qū)有大量致密錐體細胞，擺列整潔，細胞完備，邊沿清楚；模子組細胞條理淘汰、希罕、擺列紊亂，大量細胞壞死。電鏡下，比較組細胞器富厚，外表清楚，細胞核呈圓形，核膜清楚平滑完備，核染色質(zhì)漫衍勻稱；模子組細胞器淘汰，線粒體空泡化，細胞核變小，不規(guī)矩，且核膜增厚，核周電子密度低落。2.2海馬內(nèi)情況相干身分變革與比較組比力，模子組皮質(zhì)醇明顯升高，e2顯著落落。bdnf和vegf免疫陽性反響產(chǎn)物呈棕黃色，前者漫衍神經(jīng)元胞漿內(nèi)，后者重要漫衍于血管內(nèi)皮細胞內(nèi)。比較組bdnf和vegf表達較多，模子組較少，二者灰度值均

6、升高。詳細數(shù)據(jù)見表1。表1各組海馬內(nèi)情況相干身分的變革注：與比較組比力：ap0.05,bp0.013討論海馬作為邊沿體系的緊張布局，具有形成學(xué)習(xí)影象和和諧舉動、感情和內(nèi)臟運動等的緊張成效。比年來，海馬在煩悶癥的作用備受存眷。影像學(xué)研究不雅察到煩悶癥患者的海馬布局出現(xiàn)萎縮，且與病程有關(guān)3。浩繁動物實行也證明，海馬損傷是煩悶?zāi)Ｗ觿游锏呐浜媳憩F(xiàn)，這在本實行中也得到了驗證，如海馬a3區(qū)出現(xiàn)細胞條理淘汰、細胞損傷、細胞器粉碎等。海馬神經(jīng)元所處的細胞外液屬于機體內(nèi)情況，其身分和理化特性相對不變是神經(jīng)元發(fā)揮成效的條件。在海馬內(nèi)情況身分中，有些可以或許庇護神經(jīng)元，有些那么起粉碎作用。生理程度的皮質(zhì)醇不會損傷海

7、馬，但高濃度皮質(zhì)醇那么有顯著損傷作用。雌激素與皮質(zhì)醇相反，具有神經(jīng)元庇護作用。本實行沒有通過微透析技能檢測腦灌流液中的皮質(zhì)醇和e2程度，其緣故原由是二者均為類固醇激素，可以或許自由通過血腦屏蔽，血凈程度與腦內(nèi)濃度根本同等。實行不雅察到，模子組血清中皮質(zhì)醇程度明顯升高、e2那么顯著落落，這些變革表白煩悶狀態(tài)下，皮質(zhì)醇過分排泄，e2那么排泄淘汰，提示在激素方面海馬神經(jīng)元失去了庇護。bdnf和vegf均為庇護海馬的細胞因子，對神經(jīng)元具有營養(yǎng)和支持作用。本實行接納免疫組化技能檢測到，模子組二者表達均落落，提示煩悶狀態(tài)下，海馬神經(jīng)元失去了營養(yǎng)性細胞因子的營養(yǎng)和支持作用。上述實行效果提示，煩悶狀態(tài)下，海馬神經(jīng)元的庇護身分淘汰，粉碎因素增長，即海馬內(nèi)情況穩(wěn)態(tài)被粉碎，從而導(dǎo)致海馬損傷，因此規(guī)復(fù)海馬內(nèi)情況穩(wěn)態(tài)是防治煩悶癥的緊張環(huán)節(jié)。參考文獻2tariqued.perera,sungshipark,yelenaneirvskaya.gnitiverlefneurgenesisindepressin